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玉米生物钟基因ZmPRR37-1互作蛋白的筛选及分析
1
作者 洪双双 李安然 +3 位作者 张严玲 刘青青 赵高鹏 王翠玲 《草业科学》 北大核心 2025年第8期2021-2031,共11页
为探究玉米(Zea may)生物钟核心元件ZmPRR37-1参与的多个信号转导和代谢途径,寻找玉米PRRs家族成员ZmPRR37-1的互作蛋白,预测互作蛋白的潜在功能,利用同源重组法成功构建对酵母菌株无毒性、对报告基因无自激活活性的诱饵载体pGBKT7-ZmPR... 为探究玉米(Zea may)生物钟核心元件ZmPRR37-1参与的多个信号转导和代谢途径,寻找玉米PRRs家族成员ZmPRR37-1的互作蛋白,预测互作蛋白的潜在功能,利用同源重组法成功构建对酵母菌株无毒性、对报告基因无自激活活性的诱饵载体pGBKT7-ZmPRR37-1;利用酵母双杂交系统对玉米cDNA质粒文库进行互作蛋白的筛选,共获得41个阳性克隆,经转化后对插入片段进行PCR扩增检测,筛选得到18个候选互作蛋白,功能分析显示互作蛋白主要在调控植物生长发育、响应环境胁迫、提升代谢能力、诱导植物激素信号转导等多个调控网络中发挥重要作用。挑选部分蛋白与ZmPRR37-1进行一对一互作验证试验,再次确认了候选互作蛋白与ZmPRR37-1之间的互作关系。其中ZmLRP主要在昼夜节律、光刺激的响应中发挥作用;ZmTLP1主要参与植物逆境防御响应。推测ZmPRR37-1通过与ZmLRP等互作蛋白互作,在植物生长与逆境防御响应中发挥作用,为解析ZmPRR37-1在生物钟调控和光周期调控途径中发挥的重要作用提供依据。 展开更多
关键词 玉米 zmprr37-1 酵母双杂交 生物钟基因 互作蛋白 调控途径
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玉米生物钟基因ZmPRR1-2互作蛋白质的筛选
2
作者 王闻琦 王盼盼 +5 位作者 张严玲 刘青青 洪双双 赵高鹏 刘泓畅 王翠玲 《浙江农业学报》 北大核心 2025年第5期977-986,共10页
伪应答调节蛋白TOC1是伪应答调节因子(pseudo-response regulator, PRR)家族5个成员之一,作为生物钟中央振荡器的核心组成部分,与MYB类转录因子LHY和CCA1构成了中央振荡器的中心负反馈调控环,在生物钟系统中起着重要作用。ZmPRR1-2基因... 伪应答调节蛋白TOC1是伪应答调节因子(pseudo-response regulator, PRR)家族5个成员之一,作为生物钟中央振荡器的核心组成部分,与MYB类转录因子LHY和CCA1构成了中央振荡器的中心负反馈调控环,在生物钟系统中起着重要作用。ZmPRR1-2基因是拟南芥TOC1的同源基因,为了深入挖掘ZmPRR1-2的生物学功能,本研究利用酵母双杂交筛库技术,从前期构建的长日照诱导的热带玉米自交系的cDNA文库中筛选与ZmPRR1-2互作的蛋白质。结果表明,构建的诱饵载体pGBKT7-ZmPRR1-2对酵母菌株无毒性,且对报告基因无自激活活性。筛选鉴定出12个与ZmPRR1-2互作的蛋白质。这些候选互作蛋白质的功能涉及抗氧化反应、水缺乏响应、铝离子响应、光合作用、电子传递链、光收集、生长素激活信号通路、DNA模板转录的调控、色氨酸生物合成过程、翻译、免疫反应、凋亡信号通路的正向调节、参与蛋白质分解代谢过程的蛋白质水解等多个方面。推测ZmPRR1-2蛋白与以上蛋白质互作参与多个信号转导和代谢途径,该结果为进一步探索ZmPRR1-2基因的分子功能与调控网络奠定了基础。 展开更多
关键词 玉米 生物钟 zmprr1-2 酵母双杂交 互作蛋白质
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玉米生物钟基因ZmPRR 1-2的克隆及表达分析 被引量：2
3
作者 董柯清 王雷立 +2 位作者 刘青青 张严玲 王翠玲 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期21-28,共8页
为探究玉米生物钟基因ZmPRR 1-2的功能及表达特性,解析玉米光周期途径调控开花的机理,该研究以玉米骨干自交系‘黄早4’为材料,克隆ZmPRR 1-2基因的cDNA序列并进行生物信息学分析;利用qRT-PCR技术对该基因进行组织特异性表达分析和48 h... 为探究玉米生物钟基因ZmPRR 1-2的功能及表达特性,解析玉米光周期途径调控开花的机理,该研究以玉米骨干自交系‘黄早4’为材料,克隆ZmPRR 1-2基因的cDNA序列并进行生物信息学分析;利用qRT-PCR技术对该基因进行组织特异性表达分析和48 h的昼夜节律表达分析。结果表明:(1)成功克隆获得ZmPRR 1-2基因的编码区全长1554 bp,编码517个氨基酸,编码的蛋白属于PRR基因家族,含有1个REC结构域和1个CCT结构域,多序列比对和系统进化分析显示ZmPRR 1-2基因在禾本科植物中高度保守;ZmPRR1-2蛋白属亲水性蛋白,不包含跨膜结构域和信号肽。(2)ZmPRR 1-2基因在玉米叶片中的表达量最高,显著高于其他7个组织,表明该基因主要在叶片中发挥功能,而在果穗和花丝中表达量相对较低,且显著低于雄穗中的表达量。(3)昼夜节律表达分析显示,在短日照条件下,ZmPRR 1-2基因的表达量于光照3 h后开始逐渐上升,在光照结束后3 h时达到表达高峰;在长日照条件下,于光照6 h后ZmPRR 1-2基因的表达量才开始逐渐上升,且在光照结束时达到表达高峰。研究认为,ZmPRR 1-2基因在玉米开花转化过程中对雄穗发育和雌穗发育的调控功能存在差异,推测ZmPRR 1-2基因可能在玉米生物钟调控中发挥重要作用。 展开更多
关键词 玉米 生物钟 zmprr 1-2 基因克隆 表达分析
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利用酵母双杂交系统筛选玉米ZmPRR73的互作蛋白 被引量：2
4
作者 王盼盼 王雷立 +4 位作者 张严玲 刘青青 董柯清 李安然 王翠玲 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期416-425,共10页
为了阐明 ZmPRR73基因的生物学功能,构建诱饵表达载体pGBKT7-ZmPRR73,利用酵母双杂交技术,从长日照光照环境诱导的热带玉米自交系的cDNA文库中筛选与ZmPRR73互作的蛋白。结果显示:构建的诱饵载体pGBKT7-ZmPRR73对酵母菌株无毒性,且对报... 为了阐明 ZmPRR73基因的生物学功能,构建诱饵表达载体pGBKT7-ZmPRR73,利用酵母双杂交技术,从长日照光照环境诱导的热带玉米自交系的cDNA文库中筛选与ZmPRR73互作的蛋白。结果显示:构建的诱饵载体pGBKT7-ZmPRR73对酵母菌株无毒性,且对报告基因无自激活活性,共鉴定出12个与ZmPRR73互作的候选蛋白。生物信息学分析表明,这些候选互作蛋白的功能涉及植物的转录调控、离子跨膜转运的调节、信号转导、电子传递链等多个方面,推测ZmPRR73蛋白与以上蛋白互作参与多个信号转导和代谢途径,研究结果补充和完善了ZmPRR73蛋白参与的调控途径,为进一步研究生物钟核心元件ZmPRR73的分子功能提供了新的分子证据。 展开更多
关键词 玉米 酵母双杂交 zmprr73 生物钟 互作蛋白
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