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日本结缕草ZjERF2基因的克隆、转录激活活性、亚细胞定位和表达分析 被引量:1
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作者 张蕊 姜红岩 +4 位作者 滕珂 檀鹏辉 汪呈 刘凌云 常智慧 《草业科学》 CAS CSCD 2019年第5期1255-1265,共11页
采用RACE的方法,克隆了日本结缕草(Zoysia japonica)ZjERF2基因(GenBank登录号为MH479420)。其开放阅读框为825 bp,编码274个氨基酸,含有一个高度保守的AP2结构域,具有典型的ERF转录因子特征。遗传进化分析表明其与黍(Panicum hallii)ER... 采用RACE的方法,克隆了日本结缕草(Zoysia japonica)ZjERF2基因(GenBank登录号为MH479420)。其开放阅读框为825 bp,编码274个氨基酸,含有一个高度保守的AP2结构域,具有典型的ERF转录因子特征。遗传进化分析表明其与黍(Panicum hallii)ERF亲缘关系最近。利用染色体步移的方法克隆ATG上游1 549 bp的启动子序列,PLACE预测其含有多个响应激素和胁迫处理的作用元件。构建了pGBKT7-ZjERF2载体,转化Y2HGold酵母感受态细胞,结果表明其具有较强的转录激活活性。为探析其亚细胞定位情况,成功构建35S??ZjERF2?YFP载体,本生烟草(Nicotiana tabacum)瞬时表达结果证明ZjERF2定位于细胞核。利用实时荧光定量的方法分析了ZjERF2的表达特征,结果表明ZjERF2基因在日本结缕草不同部位及不同发育时期表达量均有差异,在成熟叶片表达量最高。此外ZjERF2表达受ET、MeJA的诱导,但受ABA、PEG和NaCl的抑制。本研究表明ZjERF2是一个参与多种信号转导途径的转录因子。 展开更多
关键词 日本结缕草 zjerf2转录因子 转录激活活性 亚细胞定位 表达分析
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日本结缕草ZjERF2转录激活验证及互作蛋白的初步筛选
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作者 张蕊 刘凌云 +3 位作者 范希峰 滕珂 常智慧 武菊英 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期3937-3943,共7页
为了研究ZjERF2转录因子在日本结缕草(Zoysia japonica)生长发育和环境胁迫中的调控通路,筛选与ZjERF2转录调控过程中互作的蛋白。本研究采用酵母双杂的方法,通过构建“诱饵”载体pGBKT7-ZjERF2,并转化酵母感受态细胞,表明“诱饵”载体... 为了研究ZjERF2转录因子在日本结缕草(Zoysia japonica)生长发育和环境胁迫中的调控通路,筛选与ZjERF2转录调控过程中互作的蛋白。本研究采用酵母双杂的方法,通过构建“诱饵”载体pGBKT7-ZjERF2,并转化酵母感受态细胞,表明“诱饵”载体在酵母细胞中无毒且不能自激活。将pGBKT7-ZjERF2和日本结缕草全长cDNA文库共转化酵母感受态细胞,经SD/-Leu-Trp-His-Ade/X-α-Gal培养基筛选获得29个菌落,通过PCR扩增获得23个条带,进一步筛选到18个与ZjERF2互作的候选蛋白。对候选蛋白进行生物信息学分析,初步筛选到5个参与植物的生长发育、抗病原菌及环境胁迫调节的互作蛋白。本研究为探索ZjERF2在植物生长发育和环境胁迫应答的调控机制提供帮助。 展开更多
关键词 日本结缕草 zjerf2 转录因子 转录激活 酵母双杂 互作蛋白
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