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瓜实蝇黏连蛋白复合体亚基基因Zcsolo和Zcsunn的克隆、表达谱和功能分析
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作者 金倩倩 马卢杰 +1 位作者 林先武 颜日辉 《昆虫学报》 北大核心 2026年第2期168-177,共10页
【目的】鉴定并探究黏连蛋白复合体(cohesin complex)亚基ZcSOLO和ZcSUNN在瓜实蝇Zeugodacus cucurbitae两性生殖中的功能,为深入揭示黏连蛋白复合体在瓜实蝇减数分裂和生殖调控中的功能奠定基础。【方法】通过比对NCBI数据库获得瓜实蝇... 【目的】鉴定并探究黏连蛋白复合体(cohesin complex)亚基ZcSOLO和ZcSUNN在瓜实蝇Zeugodacus cucurbitae两性生殖中的功能,为深入揭示黏连蛋白复合体在瓜实蝇减数分裂和生殖调控中的功能奠定基础。【方法】通过比对NCBI数据库获得瓜实蝇ZcSOLO和ZcSUNN的氨基酸和核苷酸序列,以性成熟瓜实蝇卵巢提取的RNA合成的cDNA为模板克隆Zcsolo和Zcsunn的编码序列(coding sequence,CDS)并测序和生物信息学分析。利用qPCR检测Zcsolo和Zcsunn在瓜实蝇不同发育阶段[胚胎(产卵后15 s及1,2,3,6,12,18和24 h)、幼虫(1,3和7日龄)、蛹(1,5和9日龄)和成虫(1,5,7,10和15日龄)]以及10日龄成虫组织(头、胸、腹、足、精巢和卵巢)中的表达量。通过注射dsRNA利用RNAi介导敲降瓜实蝇3日龄成虫Zcsolo和Zcsunn,在显微镜下观察雌成虫卵巢发育,测量卵巢面积、生殖腺形态大小以及交配后的10 d产卵量和卵孵化率。【结果】克隆得到瓜实蝇Zcsolo和Zcsunn正确的CDS。Zcsolo的CDS由5个外显子组成,长度为2493 bp,Zcsunn的CDS由15个外显子组成,长度为2736 bp;瓜实蝇和黑腹果蝇Drosophila melanogaster SOLO和SUNN的蛋白的三维结构非常相似且同源性较高。Zcsolo和Zcsunn在成虫生殖腺中特异性高表达,暗示这两个基因可能与成虫生殖力有关。RNAi介导的Zcsolo和Zcsunn下调导致卵巢发育迟缓、成熟卵泡减少;Zcsolo和Zcsunn RNAi后的雌成虫与野生型雄成虫交配后雌成虫10 d产卵量以及卵孵化率显著降低;Zcsolo和Zcsunn RNAi后的雄成虫与野生型雌成虫交配后野生型雌成虫10 d产卵量未受显著影响但受精后的卵孵化率显著下降,说明Zcsolo和Zcsunn RNAi后雄成虫生殖力减弱。【结论】本研究证实了Zcsolo和Zcsunn对瓜实蝇两性生殖力的必需性,为基于生殖干扰的害虫防控策略提供理论基础。 展开更多
关键词 瓜实蝇 黏连蛋白 zcsolo Zcsunn 生殖力 RNA干扰
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