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pLKO.1-ZNF703 shRNA质粒的构建与鉴定 被引量:1
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作者 卢晓晴 李蕊 +3 位作者 陈浩明 黎锡贤 王艺 石现丽 《广东医科大学学报》 2024年第2期152-156,共5页
目的构建pLKO.1-ZNF703 shRNA质粒靶向敲低ZNF703。方法根据人和鼠ZNF703基因序列中的外显子区在RNA干扰平台上(broadinstitute.org)设计shRNA的靶向序列,并根据pLKO.1中Age I和EcoR I酶切位点序列设计并合成ZNF703 shRNA的引物;对引物... 目的构建pLKO.1-ZNF703 shRNA质粒靶向敲低ZNF703。方法根据人和鼠ZNF703基因序列中的外显子区在RNA干扰平台上(broadinstitute.org)设计shRNA的靶向序列,并根据pLKO.1中Age I和EcoR I酶切位点序列设计并合成ZNF703 shRNA的引物;对引物进行退火;将pLKO.1质粒进行酶切、胶回收;用T4酶进行连接、转化、涂板,对阳性克隆菌落PCR鉴定和测序鉴定;将构建好的质粒利用慢病毒包装并转染HCT-116细胞系,Q-PCR检测ZNF703的敲低效率。结果成功构建pLKO.1-ZNF703 shRNA质粒,并且利用病毒包装体系构建ZNF703 shRNAHCT-116细胞系,RT-PCR结果显示设计并构建的pLKO.1-ZNF703 shRNA质粒可用于有效敲低ZNF703。结论成功构建可用于有效敲低人或鼠源细胞系中ZNF703的pLKO.1-ZNF703 shRNA质粒。 展开更多
关键词 znf703 pLKO.1质粒 SHRNA HCT-116细胞
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ZNF703和CD44v6在甲状腺乳头状癌中的表达和意义 被引量:4
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作者 孙莎莎 邱杰 +3 位作者 赵涵 张文伟 臧传善 楚庆刚 《肿瘤学杂志》 CAS 2018年第4期303-307,共5页
[目的]探讨ZNF703和CD44v6在甲状腺乳头状癌中的表达和临床意义。[方法]应用免疫组化方法(SP法)检测ZNF703和CD44v6蛋白在甲状腺乳头状癌组织(40例)、配对癌旁正常甲状腺组织(40例)和结节性甲状腺肿组织(30例)中的表达,并探讨... [目的]探讨ZNF703和CD44v6在甲状腺乳头状癌中的表达和临床意义。[方法]应用免疫组化方法(SP法)检测ZNF703和CD44v6蛋白在甲状腺乳头状癌组织(40例)、配对癌旁正常甲状腺组织(40例)和结节性甲状腺肿组织(30例)中的表达,并探讨其与甲状腺乳头状癌临床病理特征的关系。[结果](1)ZNF703和CD44v6在甲癌组(67.5%、75.0%)的表达均高于癌旁组(7.5%、10.0%)和结甲组(30.0%、13.3%),差异均有统计学意义(P均〈0.05)。(2)甲状腺癌组织中ZNF703和CD44v6的表达与肿瘤分期(TNM分期)和淋巴结转移有关(P〈0.05);ZNF703和CD44v6的表达与患者的年龄和性别无关(P〉0.05);ZNF703表达与肿瘤直径有关(P〈0.05),直径〉1cm组较直径≤1cm组的表达阳性率高;CD44v6表达与肿瘤直径无关(P〉0.05)。(3)ZNF703和CD44v6蛋白在甲状腺癌组织中的表达呈正相关(r=0.462,P〈0.05)。[结论]ZNF703和CD44v6的表达与甲状腺乳头状癌的癌变、肿瘤分期和淋巴转移具有相关性,联合检测可能对甲状腺癌的诊疗和预后评估具有指导意义。 展开更多
关键词 znf703 CD44V6 甲状腺乳头状癌 免疫组化
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甲状腺乳头状癌组织中ZNF703、CD44v6的表达及与临床病理参数的相关性 被引量:4
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作者 徐振宇 白文忠 李广平 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第1期69-72,共4页
目的检测ZNF703和CD44v6蛋白在甲状腺乳头状癌组织中的表达水平及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测73例甲状腺乳头状癌和配对癌旁组织、50例结节性甲状腺瘤组织中ZNF703、CD44v6蛋白的表达,并分析ZNF703和CD44v6)与癌组织临床病... 目的检测ZNF703和CD44v6蛋白在甲状腺乳头状癌组织中的表达水平及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测73例甲状腺乳头状癌和配对癌旁组织、50例结节性甲状腺瘤组织中ZNF703、CD44v6蛋白的表达,并分析ZNF703和CD44v6)与癌组织临床病理参数的关系,采用Spearman等级相关分析两指标的相关性。结果甲状腺乳头状组织中,ZNF703和CD44v6蛋白的阳性表达率(69. 86%、78. 08%)均分别高于癌旁组组织(12. 32%、21. 92%)和结节性甲状腺癌组织(24. 00%、36. 00%),差异均有统计学意义(P<0. 05)。ZNF703和CD44v6在甲状腺乳头状癌组织的表达阳性率均与年龄、性别无关(P>0. 05),与肿瘤直径、临床分期、淋巴结转移有关(P<0. 05); ZNF703和CD44v6在甲状腺乳头状癌组织中的表达水平呈正相关(r=0. 722,P=0. 00)。结论 ZNF703和CD44v6蛋白在甲状腺乳头状癌组织中高表达,且其表达均与肿瘤大小、临床分期及淋巴结转移有关,ZNF703和CD44v6可能协同参与了甲状腺乳头状癌的发生、发展,联合检测可为甲状腺肿瘤良、恶性鉴别及预后评估提供参考。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 znf703 CD44V6
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plenti-Crispr V2 ZNF703 sgRNA质粒的构建与鉴定 被引量:2
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作者 方梓鹏 卢晓晴 +2 位作者 李志豪 罗伟浩 石现丽 《广东药科大学学报》 CAS 2023年第1期115-121,共7页
目的 构建plenti-Crispr V2 ZNF703 sgRNA质粒。方法 根据人和鼠ZNF703基因序列中的外显子区设计sgRNA的靶向序列,并在靶序列的两端加上plenti-Crispr V2质粒构建所要求的黏性末端,得到并合成ZNF703sgRNA的引物;对合成的引物进行退火得... 目的 构建plenti-Crispr V2 ZNF703 sgRNA质粒。方法 根据人和鼠ZNF703基因序列中的外显子区设计sgRNA的靶向序列,并在靶序列的两端加上plenti-Crispr V2质粒构建所要求的黏性末端,得到并合成ZNF703sgRNA的引物;对合成的引物进行退火得到ZNF703 sgRNA双链寡核苷酸片段;将plenti-V2质粒进行BsmB I酶切、胶回收;将ZNF703 sgRNA双链寡核苷酸片段和酶切后胶回收的plenti-Crispr V2骨架片段(12 988 bp)进行连接、转化感受态细胞、挑取阳性克隆、菌落PCR鉴定和酶切鉴定,并进行测序验证。结果 成功构建plenti-Crispr V2ZNF703 sgRNA质粒,并利用plenti-Crispr V2 ZNF703 sgRNA成功构建了ZNF703敲除的结肠癌细胞系HCT-116。结论 构建了plenti-Crispr V2 ZNF703 sgRNA质粒,并在HCT-116细胞系中验证其敲除效果,为在人源肿瘤细胞中、鼠源细胞系中敲除ZNF703,以及为深入研究ZNF703的生物功能打下基础。 展开更多
关键词 znf703 plenti-Crispr V2质粒 肿瘤
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锌指蛋白703的研究进展 被引量:1
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作者 毕丽红 马锋 +4 位作者 杨公利 刘翠平 张春忙 彭凡洲 白杨 《现代消化及介入诊疗》 2014年第2期97-100,共4页
本文简介了锌指蛋白的结构、分类和功能,及其新成员ZNF703的背景及与肿瘤的关系,论述了ZNF703的作用机制及在肿瘤发生发展中的重要作用,对研究和临床均有指导意义。
关键词 锌指蛋白 znf703 肿瘤
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锌指蛋白703在子宫内膜腺癌中的表达及与其临床病理的关系 被引量:4
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作者 袁莉敏 王平 +2 位作者 林琳 赵晓兰 王琪琳 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1056-1059,共4页
目的:研究锌指蛋白703(ZNF703)与子宫内膜腺癌临床病理的关系。方法:应用免疫组织化学法(SP法),检测20例正常内膜、16例不典型增生内膜及50例子宫内膜腺癌组织中ZNF703的表达。结果:ZNF703在子宫内膜腺癌中的表达水平高于不典型增生及... 目的:研究锌指蛋白703(ZNF703)与子宫内膜腺癌临床病理的关系。方法:应用免疫组织化学法(SP法),检测20例正常内膜、16例不典型增生内膜及50例子宫内膜腺癌组织中ZNF703的表达。结果:ZNF703在子宫内膜腺癌中的表达水平高于不典型增生及正常内膜,差异有高度统计学意义(P=0.000,P=0.000)。在正常内膜与不典型增生内膜的表达水平差异无统计学意义(P=0.103)。ZNF703表达水平与手术病理分期、盆腔转移及雌、孕激素受体情况有关(P<0.05),与年龄、绝经与否、宫颈浸润、肌层浸润深度、病理分化程度、腹腔冲洗液情况及淋巴结转移无关(P>0.05)。ZNF703表达水平与雌、孕激素受体表达有负相关关系(r=-0.386,r=-0.374,P<0.05)。结论:ZNF703可能与子宫内膜腺癌的手术病理分期、盆腔转移及雌、孕激素受体情况有关,并且可能与雌、孕激素受体在子宫内膜腺癌发生中发挥独立又协同的作用。 展开更多
关键词 子宫内膜腺癌 锌指蛋白703 免疫组织化学 雌激素受体 孕激素受体
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锌指蛋白703的结构和功能
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作者 李丁 刘阁玲 《海南医学》 CAS 2017年第10期1665-1668,共4页
本文简述了锌指蛋白703(ZNF703)的结构域及其功能,初步探讨了ZNF703在肿瘤中的关系及作用机制,为临床诊断、预后及药物治疗提供一定的研究价值。
关键词 znf703 蛋白结构域 雌激素 肿瘤
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锌指蛋白703在甲状腺乳头状癌中的表达及意义
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作者 李丁 刘阁玲 杨晓琳 《海南医学》 CAS 2017年第7期1104-1107,共4页
目的研究锌指蛋白703(ZNF703)在甲状腺乳头状癌中的表达(包括阳性率及相对表达量)及阳性率与临床特征的关系。方法应用免疫组织化学法(pv9000法)检测组织芯片(包括36例甲状腺乳头状癌及14例癌旁正常组织)中ZNF703的阳性表达率,并分析癌... 目的研究锌指蛋白703(ZNF703)在甲状腺乳头状癌中的表达(包括阳性率及相对表达量)及阳性率与临床特征的关系。方法应用免疫组织化学法(pv9000法)检测组织芯片(包括36例甲状腺乳头状癌及14例癌旁正常组织)中ZNF703的阳性表达率,并分析癌组织中的阳性表达率与芯片包含的相关临床资料(年龄、性别、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期)之间的关系。另收集20例临床新鲜甲状腺乳头状癌及匹配癌旁组织样本,应用Western blot及RT-PCR技术检测ZNF703在20对组织样本的蛋白和m RNA相对表达量。结果免疫组化提示ZNF703在甲状腺乳头状癌的阳性表达率为66.7%,较癌旁组织的21.4%明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05);癌组织阳性表达率与年龄、性别无关,与肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。Western blot及RT-PCR提示ZNF703在20例甲状腺乳头状癌组织的蛋白相对表达量[(0.893±0.113)vs(0.510±0.072)]及m RNA相对表达量[(6.399±2.096)vs(1.285±0.354)]均高于匹配癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 ZNF703在甲状腺乳头状癌中的表达高于癌旁组织,并且在癌组织中ZNF703阳性率高低与患者临床分期、淋巴结转移及肿瘤大小有关,可见ZNF703在甲状腺乳头状癌的发生及进展中可能发挥促进作用。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 锌指蛋白703 癌旁组织
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