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ZNF326通过Wnt通路促进结直肠癌细胞的增殖
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作者 杨悦 谭琦 +3 位作者 李敬岩 李伦 谷泽慧 陈素贤 《解剖科学进展》 2025年第3期318-321,326,共5页
目的 探讨ZNF326通过激活和增强Wnt通路的活性作用促进结直肠癌细胞的增殖能力。方法 使用癌症基因组图谱(TCGA)数据库,由单因素与多因素Cox回归模型分析ZNF326表达量及结直肠癌病人临床特征(包括肿瘤分期、淋巴结转移、远处转移、病理... 目的 探讨ZNF326通过激活和增强Wnt通路的活性作用促进结直肠癌细胞的增殖能力。方法 使用癌症基因组图谱(TCGA)数据库,由单因素与多因素Cox回归模型分析ZNF326表达量及结直肠癌病人临床特征(包括肿瘤分期、淋巴结转移、远处转移、病理分期、性别、年龄等)对预后的影响;应用克隆形成实验、MTS实验检测ZNF326对结直肠癌细胞增殖能力的影响;通过Western blot实验检测Wnt通路靶基因c-myc, cyclin D1,MMP7的蛋白表达情况。结果 经单因素与多因素Cox回归分析可知,对于结直肠癌病人的总生存期(OS),ZNF326具备独立预测价值(P=0.002)。过表达ZNF326可明显增强结直肠癌细胞的增殖能力,敲除ZNF326可明显抑制结直肠癌细胞的增殖能力。过表达ZNF326能明显上调Wnt通路靶基因c-myc, cyclin D1,MMP7的蛋白水平,而干扰ZNF326后Wnt通路靶基因的表达下调。结论 ZNF326通过调节Wnt通路促进结直肠癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 结直肠癌 znf326 增殖 WNT通路
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蛋鸭circ-ZNF326的特征分析、过表达载体的构建及对小肠上皮细胞增殖的影响
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作者 魏文焯 郑超 +5 位作者 吴艳 梁振华 皮劲松 杜金平 李成凤 张昊 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第3期837-844,共8页
【目的】明确circ-ZNF326的基本特征及对蛋鸭小肠上皮细胞增殖的影响。【方法】以绿头鸭为研究对象,采集鸭胚肠道并培养小肠上皮细胞,提取RNA并反转录为cDNA,参考circ-ZNF326的全长序列设计引物,通过PCR反应扩增获得circ-ZNF326的部分序... 【目的】明确circ-ZNF326的基本特征及对蛋鸭小肠上皮细胞增殖的影响。【方法】以绿头鸭为研究对象,采集鸭胚肠道并培养小肠上皮细胞,提取RNA并反转录为cDNA,参考circ-ZNF326的全长序列设计引物,通过PCR反应扩增获得circ-ZNF326的部分序列,测序后利用反向剪接位点验证其成环方式。利用PARISTM Kit提取细胞核与细胞质RNA检测其在细胞中的核质分布情况。合成circ-ZNF326全长序列并利用双酶切及T4连接酶将circ-ZNF326全长序列连接在PLCDH-ciR真核表达载体上,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞扩大培养,提取重组质粒进行双酶切及琼脂糖凝胶电泳检测,将circ-ZNF326过表达载体转染小肠上皮细胞,利用实时荧光定量PCR技术检测circ-ZNF326过表达后的表达效率,利用CCK-8检测过表达circ-ZNF326对蛋鸭小肠上皮细胞增殖的影响。【结果】circ-ZNF326是由ZNF326基因第10、11和12号外显子反向剪接而成,且主要分布在细胞质中。circ-ZNF326过表达载体构建成功,表达效率极显著高于空载组(P<0.01)。将circ-ZNF326过表达载体转染小肠上皮细胞,结果发现,circ-ZNF326过载组在24~72 h细胞活力极显著或显著高于空载组(P<0.01;P<0.05)。【结论】本试验成功验证了circ-ZNF326的反向剪接与环状结构,证明了circ-ZNF326主要富集在细胞质中,并构建了circ-ZNF326过表达载体,证实了过表达circ-ZNF326可提高蛋鸭小肠上皮细胞的活力,为深入研究circ-ZNF326的生物学功能及其对蛋鸭小肠上皮细胞增殖的调控机制奠定了理论基础。 展开更多
关键词 环状RNA 蛋鸭 circ-znf326 核质分布 过表达载体
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miR-21通过靶基因ZNF326调控乳腺癌细胞侵袭、迁移的分子机制研究 被引量：5
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作者 薛金慧 和莹莹 +3 位作者 刘芮菡 肖艳景 赵娜 张全武 《现代肿瘤医学》 CAS 2020年第6期906-912,共7页
目的:探讨微小RNA-21(miR-21)靶向锌指蛋白326(ZNF326)对乳腺癌细胞侵袭、迁移的影响及其分子机制。方法:采用qRT-PCR与Western blot法检测乳腺癌细胞株HCC70、MDA-MB-231、BT549、MDA-MB-468与正常细胞株HBL-100中miR-21与ZNF326的表... 目的:探讨微小RNA-21(miR-21)靶向锌指蛋白326(ZNF326)对乳腺癌细胞侵袭、迁移的影响及其分子机制。方法:采用qRT-PCR与Western blot法检测乳腺癌细胞株HCC70、MDA-MB-231、BT549、MDA-MB-468与正常细胞株HBL-100中miR-21与ZNF326的表达。以miR-21表达量最高的乳腺癌HCC70细胞为研究对象,分为NC组、anti-miR-con组、anti-miR-21组、pcDNA-control组、pcDNA-ZNF326组;共转染分组为anti-miR-21+si-con组、anti-miR-21+si-ZNF326组。MTT法检测细胞增殖能力,Transwell迁移及侵袭实验检测细胞迁移及侵袭能力。双荧光素酶报告基因系统验证miR-21与ZNF326的靶向调控关系。Western blot法检测CDK1、MMP-2蛋白的表达。结果:与正常细胞株HBL-100相比,乳腺癌细胞株HCC70、MDA-MB-231、BT549、MDA-MB-468中miR-21高表达,ZNF326 mRNA及蛋白表达水平均显著下降;分别与anti-miR-con组、pcDNA-control组比较,anti-miR-21组与pcDNA-ZNF326组HCC70细胞增殖能力显著下降,细胞迁移及侵袭能力明显降低,CDK1、MMP-2的表达水平明显降低;双荧光素酶实验结果表明miR-21能靶向结合ZNF326的3'UTR并调控其表达;与anti-miR-21+si-con组相比,anti-miR-21+si-ZNF326组HCC70细胞增殖、迁移及侵袭能力均明显增强,促进CDK1、MMP-2表达。结论:miR-21可靶向抑制ZNF326基因的表达,进而促进乳腺癌细胞增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 MIR-21 znf326 乳腺癌 增殖 迁移 侵袭
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