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pEGFP-N1-ZIP2真核表达载体的构建及对人T淋巴和单核细胞系锌转运体基因表达的影响 被引量:1
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作者 蒋雅丽 陶艳婷 +2 位作者 胡晓燕 徐春晓 张莲英 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2012年第4期24-28,共5页
目的构建pEGFP-N1-ZIP2真核表达载体,观察其在人T淋巴细胞系Jurkat-E6-1和人单核细胞细胞系THP-1中的表达,并检测ZIP2在两种细胞系中过表达及其对其他锌转运体的影响。方法利用外周血经RT-PCR扩增获得人ZIP2 cDNA序列,将其与pEGFP-N1定... 目的构建pEGFP-N1-ZIP2真核表达载体,观察其在人T淋巴细胞系Jurkat-E6-1和人单核细胞细胞系THP-1中的表达,并检测ZIP2在两种细胞系中过表达及其对其他锌转运体的影响。方法利用外周血经RT-PCR扩增获得人ZIP2 cDNA序列,将其与pEGFP-N1定向连接,构建完成转染细胞48 h后,通过RT-PCR检测ZIP2过表达情况,并检测ZIP1、ZIP6、ZIP8、ZIP10、ZnT1、ZnT5等锌转运体表达变化。结果经过双酶切鉴定以及测序结果显示目的基因大小、插入方向均正确。在Jurkat-E6-1细胞中,ZIP2过表达使ZnT-1表达显著降低(P<0.05),但在THP-1细胞中,ZIP2过表达对其他锌转运体表达没有显著影响。结论成功构建pEGFP-N1-ZIP2真核表达载体,瞬时转染Jurkat-E6-1细胞和THP-1细胞,Jurkat-E6-1细胞中ZIP2过表达使ZnT1表达下调,而THP-1细胞中ZIP2过表达并未对选定的其他锌转运体产生显著影响,两种不同的免疫细胞系中ZIP2过表达对锌转运体家族其他成员影响表现出差异。 展开更多
关键词 zip2真核表达载体 锌转运体 过表达 聚合酶链反应
原文传递
锌转运体Zip2对心肌缺血再灌注小鼠心肌线粒体呼吸的调控作用 被引量:3
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作者 王丽艳 程欣欣 徐哲龙 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期433-440,共8页
本研究旨在探讨锌转运体Zip2 (SLC39A2)在心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion, I/R)过程中对线粒体呼吸的调控作用及其机制。通过冠状动脉左前降支结扎建立小鼠在体心肌I/R损伤模型,用电感耦合离子发射光谱仪(inductively coupled pla... 本研究旨在探讨锌转运体Zip2 (SLC39A2)在心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion, I/R)过程中对线粒体呼吸的调控作用及其机制。通过冠状动脉左前降支结扎建立小鼠在体心肌I/R损伤模型,用电感耦合离子发射光谱仪(inductively coupled plasma-optical emission spectrometer, ICP-OES)测量心肌组织的锌含量,用高分辨呼吸测定系统(Oxygraph-2K)检测小鼠心肌线粒体呼吸功能和氧化磷酸化水平,采用Western blot技术检测小鼠心肌组织STAT3和ERK的磷酸化水平。结果显示:(1)与假手术组相比,野生型小鼠I/R心肌组织的锌含量明显降低,Zip2基因敲除小鼠I/R心肌组织的锌含量进一步降低;(2)与野生对照组相比,Zip2基因敲除组小鼠心肌线粒体呼吸控制率(respiratory control ratio, RCR)和氧化磷酸化水平降低,I/R后上述指标进一步降低;(3)与野生对照组相比,I/R后Zip2基因敲除组小鼠心肌组织STAT3 (Ser727)和ERK的蛋白磷酸化水平均明显降低;(4)与空载体感染组相比,I/R后STAT3感染组心肌线粒体呼吸功能明显提高,而STAT3负突变体感染组心肌线粒体呼吸功能则降低。STAT3过表达可逆转Zip2基因敲除对线粒体呼吸的抑制作用。以上结果提示,心肌I/R时Zip2通过STAT3来调控线粒体呼吸,其机制可能与STAT3 (Ser727)的磷酸化有关,这可能是Zip2保护心肌的分子机制之一。 展开更多
关键词 锌转运蛋白zip2 缺血再灌注损伤 STAT3 线粒体呼吸
原文传递
Calcium signaling-mediated phosphorylation controls zinc allocation in Arabidopsis
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作者 Yanjun Fang Fangru Liu +4 位作者 Chenyue Yang Xuening Ma Cun Wang Zhenqian Zhang Chuanfeng Ju 《Stress Biology》 2025年第1期1-14,共14页
Zinc(Zn)deficiency in soil can directly result in Zn deficiency in crops,subsequently causing Zn deficiency in humans.Currently,the physiological adaptation mechanisms by which plants respond to Zn deficiency have bee... Zinc(Zn)deficiency in soil can directly result in Zn deficiency in crops,subsequently causing Zn deficiency in humans.Currently,the physiological adaptation mechanisms by which plants respond to Zn deficiency have been fairly well characterized.However,the regulatory mechanisms governing Zn transport in plants remain poorly understood.In this study,we found that CBL1/4/5/8/9-CIPK3/9/23/26 complexes interact with the Zn transporter ZIP2 and phosphorylate its Ser190 residue.Biochemical analyses and complementation experiments in yeast and plants demonstrated that the Ser190 site is essential for the transport activity of ZIP2,and that the Zn transporter ZIP2 is involved in the transport of Zn between the columnar sheath cells in the roots.Notably,the hybrid complementation lines carrying CBL-CIPK-mediated phosphorylation sites of ZIP2 and ZIP12 exhibited enhanced tolerance to Zn deficiency.Overall,these findings suggest that CBL-CIPK-ZIP2/ZIP12 phosphorylation network coordinates Zn allocation in Arabidopsis,providing a potential target for improving Zn deficiency and developing Zn-enriched crop varieties. 展开更多
关键词 Calcium signaling PHOSPHORYLATION CBL-CIPK zip2 ARABIDOPSIS
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