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真核表达载体pEGFP-N1-ZIP10的构建及其对人乳腺癌细胞中其他锌转运体基因表达的影响 被引量:2
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作者 郭鲁 胡晓燕 +4 位作者 蒋雅丽 徐同福 王品 李铭 张莲英 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2010年第11期29-32,共4页
目的构建pEGFP-N1-ZIP10表达载体,观察其在乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞中的表达,并检测ZIP10过表达对其他锌转运体的影响。方法从外周血经RT-PCR扩增ZIP10cDNA序列,并将其定向克隆至真核表达质粒pEGFP-N1中,pEGFP-N1-ZIP10经酶切及测... 目的构建pEGFP-N1-ZIP10表达载体,观察其在乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞中的表达,并检测ZIP10过表达对其他锌转运体的影响。方法从外周血经RT-PCR扩增ZIP10cDNA序列,并将其定向克隆至真核表达质粒pEGFP-N1中,pEGFP-N1-ZIP10经酶切及测序鉴定后,转染乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞,RT-PCR检测ZIP10的表达及其他锌转运体ZnT1、ZIP1、ZIP6等表达的变化。结果酶切和测序证实目的基因片段大小、方向均正确,转染MCF-7和MDA-MB-231细胞,RT-PCR检测到ZIP10在mRNA水平过表达,并发现使ZIP1的表达显著降低。结论成功构建真核表达载体pEGFP-N1-ZIP10,并在乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞瞬时表达成功,转染后使细胞中ZIP1的表达明显降低,为进一步研究ZIP10在乳腺癌发生发展中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 乳腺癌细胞 zip10 ZIP1 表达载体
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