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地衣芽孢杆菌YP1A耐有机溶剂蛋白酶基因的克隆与功能表达 被引量:4
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作者 何小丹 李霜 +1 位作者 孙蓓蓓 何冰芳 《生物加工过程》 CAS CSCD 2009年第6期67-73,共7页
根据B.licheniformisYP1A来源的碱性蛋白酶具有的高强度耐有机溶剂性能及相关数据库分析,采用PCR克隆B.licheniformisYP1A耐有机溶剂碱性蛋白酶基因,序列分析显示该基因(1 264 bp)包含启动子与编码380个氨基酸的开放阅读框(ORF),ORF包... 根据B.licheniformisYP1A来源的碱性蛋白酶具有的高强度耐有机溶剂性能及相关数据库分析,采用PCR克隆B.licheniformisYP1A耐有机溶剂碱性蛋白酶基因,序列分析显示该基因(1 264 bp)包含启动子与编码380个氨基酸的开放阅读框(ORF),ORF包括信号肽、前肽及编码254个氨基酸的成熟肽序列。相关基因分析表明,YP1A耐有机溶剂碱性蛋白酶基因与地衣芽孢杆菌ATCC14580的碱性蛋白酶基因仅有6个氨基酸残基差异。构建2种含YP1A碱性蛋白酶CDS的组成型穿梭表达载体pHY/aprYP与pHY/aprP43,前者采用YP1A蛋白酶自带的启动子,后者则采用来自于质粒pP43NMK的P43强启动子。利用这2种表达载体在枯草芽孢杆菌WB800中成功进行蛋白酶的功能表达,其中P43强启动子的表达能力明显优于碱性蛋白酶自带的启动子,表达的蛋白酶比酶活为395 U/mL。重组菌表达的碱性蛋白酶在体积分数50%的亲水及疏水有机溶剂中表现出了很好的耐受性,验证了克隆基因为地衣芽孢杆菌YP1A的高强度耐有机溶剂碱性蛋白酶基因。 展开更多
关键词 地衣芽孢杆菌yp1A 耐有机溶剂蛋白酶 克隆 表达
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溶剂稳定性蛋白酶产生菌Bacillus licheniformis YP1的发酵优化
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作者 李霜 陈加罡 +1 位作者 何小丹 何冰芳 《生物加工过程》 CAS CSCD 2008年第5期40-43,共4页
溶剂稳定性蛋白酶产生菌Bacillus licheniformisYP1分离自油田土样。考察了碳源、氮源、金属离子等营养因素对YP1菌株发酵产溶剂稳定性蛋白酶的影响。YP1菌株发酵产胞外蛋白酶的最佳碳源为淀粉,果糖、甘露糖和乳糖显著抑制产酶;最佳氮... 溶剂稳定性蛋白酶产生菌Bacillus licheniformisYP1分离自油田土样。考察了碳源、氮源、金属离子等营养因素对YP1菌株发酵产溶剂稳定性蛋白酶的影响。YP1菌株发酵产胞外蛋白酶的最佳碳源为淀粉,果糖、甘露糖和乳糖显著抑制产酶;最佳氮源为酵母膏,干酪素、酵母粉和牛肉膏促进产酶,玉米浆和尿素显著抑制产酶。Mn2+可以显著促进酶活,Mg2+可以促进产酶,在初步优化的培养条件下,YP1菌株的胞外蛋白酶产量达980 U。 展开更多
关键词 BACILLUS LICHENIFORMIS yp1 耐有机溶剂 优化
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YP1区块水平井组资料综合评价
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作者 夏仲诗 郝英芝 +1 位作者 穆双玲 吴华 《中国石油和化工》 2015年第8期55-57,共3页
YP1区块扶余油层共钻9口水平井,均采用多裂缝体积压裂工艺后投产,其中5口井进行了试油求产初期产能,其它4口井在压后放喷结束后直接抽油投产。资料评价方面包括水平井压后放喷工作制度的制定、压后产能的计算评价,因为水平井资料评价是... YP1区块扶余油层共钻9口水平井,均采用多裂缝体积压裂工艺后投产,其中5口井进行了试油求产初期产能,其它4口井在压后放喷结束后直接抽油投产。资料评价方面包括水平井压后放喷工作制度的制定、压后产能的计算评价,因为水平井资料评价是一个新的领域,需要逐步的总结,这里对YP1区块的试油资料、生产资料进行了总结分析,对试油阶段压后放喷工作制度进行了对比分析,总结出YP1区块合理的放喷工作制度,此外,还总结了投产后的水平井单井可采储量的计算方法。 展开更多
关键词 yp1区块 水平井组 油嘴选择 井口压力 可采储量
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YP1A1E对开单色胶印机的设计
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作者 郝心方 朱长生 +2 位作者 王仪明 孙建新 马学东 《印刷杂志》 1997年第2期35-37,共3页
一、前言 目前单张纸胶印机正向高速、自动化、提高印刷品的质量方向发展,这依赖于胶印机的主要部件——给纸机、规矩部件、递纸机构、印刷、水墨及收纸部件的完善。但国产对开单色胶印机(以下简称国产机)问世已经二十多年,由于技术、... 一、前言 目前单张纸胶印机正向高速、自动化、提高印刷品的质量方向发展,这依赖于胶印机的主要部件——给纸机、规矩部件、递纸机构、印刷、水墨及收纸部件的完善。但国产对开单色胶印机(以下简称国产机)问世已经二十多年,由于技术、工艺等原因,现存在很多问题,主要有以下几点: 展开更多
关键词 平版印刷机 对开单色胶印机 设计 yp1A1E机
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Dy^(3+)/Tm^(3+)共掺杂钒磷酸钇的共沉淀法合成及光谱性质 被引量:11
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作者 赖华生 陈宝玖 +4 位作者 许武 王晓君 谢宜华 关中素 狄卫华 《发光学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第3期354-358,共5页
以Y2O3、Dy2O3、Tm2O3、V2O5、(NH4)2HPO4为原料,采用共沉淀化学法合成了体色纯白的Dy3+、Tm3+共掺杂YP1-xVxO4荧光粉。对合成荧光粉的V5+/P5+、Dy3+/Tm3+摩尔比等条件进行了研究。利用SEM、变温紫外激光激发下的发射光谱及紫外激发下... 以Y2O3、Dy2O3、Tm2O3、V2O5、(NH4)2HPO4为原料,采用共沉淀化学法合成了体色纯白的Dy3+、Tm3+共掺杂YP1-xVxO4荧光粉。对合成荧光粉的V5+/P5+、Dy3+/Tm3+摩尔比等条件进行了研究。利用SEM、变温紫外激光激发下的发射光谱及紫外激发下的发射光谱,对所合成的粉体的表面形貌及发光性能进行了表征。YP1-xVxO4∶Dy3+,Tm3+荧光粉在325nm紫外激光激发下,低温时存在基质VO3-4的蓝色宽带发射,随着温度升高,VO3-4吸收的激发能量更有效地传递给Dy3+、Tm3+,使其发光逐渐增强;在254nm的紫外光激发下,YP1-xVxO4∶Dy3+,Tm3+荧光粉发白光,是一种潜在的二基色高压汞灯用荧光粉。 展开更多
关键词 yp1-xVxO4:Dy^3+ Tm^3+ 高压汞灯 荧光粉 光谱
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YP_(1-x)V_xO_4∶Eu^(3+)在真空紫外区发光的优化 被引量:19
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作者 曾小青 洪广言 +7 位作者 尤洪鹏 吴雪艳 金昌弘 卞钟洪 庾炳容 裴贤淑 朴哲熙 权一亿 《发光学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第1期55-58,共4页
系统地考查了Eu3 + 在YPO4 YVO4 固溶体中的发光。当V5+ 的浓度低于 0 3 ,出现VO4 3 -离子团的蓝色发射 ;直到V5+ 的浓度等于或大于 0 3时 ,VO4 3 -离子团的蓝色发射才被Eu3 + 离子的红色发射所猝灭 ,发射主波长在 61 9nm。在真空紫... 系统地考查了Eu3 + 在YPO4 YVO4 固溶体中的发光。当V5+ 的浓度低于 0 3 ,出现VO4 3 -离子团的蓝色发射 ;直到V5+ 的浓度等于或大于 0 3时 ,VO4 3 -离子团的蓝色发射才被Eu3 + 离子的红色发射所猝灭 ,发射主波长在 61 9nm。在真空紫外线的激发下 ,Eu3 + 在YPO4 YVO4 固溶体有较强发光 ,并随着P5+ 浓度的增加 ,Eu3 + 离子的发光增强。经过优化的组成为YP0 7V0 3 O4 ∶Eu3 + 的荧光粉在真空紫外激发下既具有较强的发光 ,又具有优良的色纯度 ,将是一种新型的良好的等离子体平板显示用荧光粉。 展开更多
关键词 yp1-xVxO4:Eu^3+ 真空紫外光谱 PDP荧光粉 等离子体平板显示 彩电显示器
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大庆长垣YP 1超长水平井分段压裂优化设计 被引量:5
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作者 尹洪军 杨春城 +2 位作者 唐鹏飞 顾明勇 付京 《特种油气藏》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期68-71,154,共4页
大庆长垣扶余油层薄互层特低孔渗储层非均质性严重,采用直井压裂无法满足经济开发需要,需开展水平井分段压裂改造。建立并求解了非均质储层超长水平井分段压裂数值模型,给出了非均质储层的裂缝参数优化曲线,并对YP1超长水平井进行了裂... 大庆长垣扶余油层薄互层特低孔渗储层非均质性严重,采用直井压裂无法满足经济开发需要,需开展水平井分段压裂改造。建立并求解了非均质储层超长水平井分段压裂数值模型,给出了非均质储层的裂缝参数优化曲线,并对YP1超长水平井进行了裂缝参数优化设计,形成了非均质储层超长水平井分段压裂优化设计技术。YP1井经压裂改造,生产360 d后日产油仍稳定在16.8 m3/d,流压下降缓慢,增油效果明显。现场应用表明,超长水平井分段压裂技术可以显著提高大庆长垣扶余油层薄互层特低孔渗储层的开发效果。 展开更多
关键词 yp1超长水平井 分段压裂 非均质 优化设计 大庆长垣
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Inhibition mechanism of quorum sensing and biofilm formation of Pseudomonas fluorescens by a novel quorum quenching bacteria Lactiplantibacillus plantarum YP4-1-2
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作者 Xinran Lü Yangrui Wang +9 位作者 Dongyu Chang Fengling Bai Xin Wen Mengmin Lü Xueqing Liu Jianrong Li Xuepeng Li Defu Zhang Yuqiong Meng Rui Ma 《Food Science and Human Wellness》 2025年第12期5079-5090,共12页
Pseudomonas fluorescens is a widespread spoilage bacterium in food,and its spoilage characteristics and biofilm formation are regulated by N-acyl-homoserine lactone(AHLs)quorum sensing(QS)system.Quorum quenching(QQ)is... Pseudomonas fluorescens is a widespread spoilage bacterium in food,and its spoilage characteristics and biofilm formation are regulated by N-acyl-homoserine lactone(AHLs)quorum sensing(QS)system.Quorum quenching(QQ)is considered as an effective strategy to control the spoilage bacteria.Therefore,this study revealed a new QQ bacteria Lactiplantibacillus plantarumYP4-1-2.Notably,the crude cell extract(CCE)from L.plantarum YP4-1-2 showed strongly QQ activity against the AHLs of P.fluorescens.The degradation rate of AHLs(N-octanoyl-L-homoserine lactone)reached 25.90%,78.57%and 100%at theCCE protein concentrations of 57,86 and 114 g/mL,respectively.In addition,the CCE could drastically reduce the formation of biofilm,bacterial motility(swimming and swarming),and the release of extracellular protease and biogenic amines of P.fluorescens.Real-time polymerase chain reaction(PCR)results revealed that the CCE downregulated QS-related genes(rhlI,rhlR,aprX,algA,orm,flgA,and ldcA).Finally,using whole-genome sequencing analysis,the active substance in the CCE was identified to be penicillin V acylase(PVA)and named LpPVA.Meanwhile,homologous modeling and molecular docking analysis showed that the binding effect of LpPVA on long-chain AHLs was better than that on short-chain AHLs.This study demonstrated that L.plantarum YP4-1-2 could be considered as a promising QS inhibitor and antibiofilm agent against foodborne spoilage bacteria. 展开更多
关键词 Quorum sensing Quorum quenching Pseudomonas fluorescens Lactiplantibacillus plantarum YP4-1-2 Penicillin V acylase
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宁夏小麦黄色素含量相关基因的组成与分布 被引量:7
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作者 王宪国 张钰玉 +5 位作者 白升升 王晓龙 刘芳军 张晓科 陈东升 朱建楚 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期8-12,共5页
选育低黄色素含量品种是宁夏小麦品质改良的重要目标之一。为阐明宁夏小麦中控制籽粒黄色素含量基因TaZds-A1和TaZds-D1的组成及分布特点,利用其功能标记YP2A-1和YP2D-1对91份小麦品种进行检测与分析。结果表明,在TaZds-A1位点,等位变异... 选育低黄色素含量品种是宁夏小麦品质改良的重要目标之一。为阐明宁夏小麦中控制籽粒黄色素含量基因TaZds-A1和TaZds-D1的组成及分布特点,利用其功能标记YP2A-1和YP2D-1对91份小麦品种进行检测与分析。结果表明,在TaZds-A1位点,等位变异TaZds-A1a(与低黄色素含量相关)和TaZdsA1b(与高黄色素含量相关)分别占59.3%和40.7%;在TaZds-D1位点,等位变异TaZds-D1a(与高黄色素含量相关)占95.6%,TaZds-D1b(与低黄色素含量相关)仅占4.4%。宁夏小麦黄色素含量基因位点存在4种等位变异组合类型:以TaZds-A1a/TaZds-D1a(57.1%)组合类型为主,TaZds-A1b/TaZds-D1a(38.5%)组合类型次之,TaZds-A1a/TaZds-D1b和TaZds-A1b/TaZds-D1b组合类型最低(2.2%);不同等位变异组合类型在不同地区间的分布比例也不同。 展开更多
关键词 小麦 黄色素含量 YP2A-1 YP2D-1 基因型
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高强度耐有机溶剂蛋白酶的纯化及性质 被引量:1
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作者 姚忠 孙蓓蓓 +1 位作者 李霜 何冰芳 《过程工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1195-1199,共5页
分离纯化了自行筛选的耐有机溶剂的地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis YP1所产的溶剂稳定性蛋白酶.发酵液经硫酸铵沉淀、疏水层析及强阳离子交换层析纯化,得到电泳纯的蛋白酶;分子量约为28kDa,纯化蛋白酶的比酶活达到1.18×105U/... 分离纯化了自行筛选的耐有机溶剂的地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis YP1所产的溶剂稳定性蛋白酶.发酵液经硫酸铵沉淀、疏水层析及强阳离子交换层析纯化,得到电泳纯的蛋白酶;分子量约为28kDa,纯化蛋白酶的比酶活达到1.18×105U/mg,纯化倍数为37.2,酶活回收率为20.8%.纯化的YP1蛋白酶对50%(φ)的多种亲水或疏水有机溶剂具有很高的耐受性,其中50%(φ)的DMF和DMSO能显著促进YP1蛋白酶活力.YP1蛋白酶为Zn2+蛋白酶,最适反应温度为55℃,最适反应pH为10.0,pH8.0~13.0范围内具有高活力.以酪蛋白为底物,YP1蛋白酶的米氏常数Km为0.048g/L. 展开更多
关键词 碱性蛋白酶 耐有机溶剂 地衣芽孢杆菌 纯化 表征
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磷化工副产混酸YP5-1替代磷矿反浮选用酸工程化应用实践 被引量:2
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作者 张朝旺 宋惠林 +2 位作者 李若兰 刘丽芬 冯晓军 《化工矿物与加工》 CAS 北大核心 2017年第1期59-62,共4页
介绍了磷化工副产混酸YP5-1代替硫酸、磷酸应用于磷矿反浮选工艺中的工程化应用。实践表明,在其他工艺条件相同的情况下,与使用硫酸、磷酸相比,使用磷化工副产混酸YP5-1不但可以取得相近或更好的工艺技术指标,而且可以有效降低用酸量。
关键词 磷化工副产混酸YP5-1 磷矿反浮选 工程化应用
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YPS1/YPS2失活改进酿酒酵母An-α菌株β-葡萄糖苷酶分泌表达 被引量:2
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作者 郭敬涵 陆海燕 +2 位作者 洪解放 贾玉蝶 邹少兰 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期4485-4495,共11页
【背景】工业酵母菌株的蛋白质表达通常存在表达量低、分泌效率低的问题。【目的】考察失活Yapsin蛋白酶Yps1p和Yps2p对β-葡萄糖苷酶在酿酒酵母An-α菌株中表达的影响。【方法】利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术,首先构建得到未折叠蛋白... 【背景】工业酵母菌株的蛋白质表达通常存在表达量低、分泌效率低的问题。【目的】考察失活Yapsin蛋白酶Yps1p和Yps2p对β-葡萄糖苷酶在酿酒酵母An-α菌株中表达的影响。【方法】利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术,首先构建得到未折叠蛋白响应(Unfolded Protein Response,UPR)指示菌株An-α(leu2::UPRE-lac Z)即An-αL,然后分别失活其YPS1和YPS2基因,导入以YEplac195为载体的β-葡萄糖苷酶表达质粒(简称BG),进行生长和酶活分析评价。【结果】菌株An-αL的YPS1和YPS2基因失活对其在酵母浸出粉胨葡萄糖(Yeast Extract Peptone Dextrose,YPD)培养基中的生长未造成明显的不利影响;导入质粒BG后将在酵母浸出粉胨纤维二糖(Yeast Extract Peptone Cellobiose,YPC)培养基中生长的最大OD_(600)分别提高了21.9%和7.4%;最大总酶活值为0.087 5和0.068 6 U/(m L·OD_(600)),是对照菌株相应值的2.268倍和1.778倍;分泌比例提高了19.4%和22.2%;β-葡萄糖苷酶表达水平与β-半乳糖苷酶酶活水平所代表的UPR信号响应值之间呈现良好的相关性。【结论】YPS1和YPS2基因失活有助于改进酿酒酵母An-α菌株中β-葡萄糖苷酶的分泌表达。 展开更多
关键词 YPS1/YPS2基因失活 酿酒酵母An-α Β-葡萄糖苷酶 分泌表达
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高效毕赤酵母表达载体的改造与应用 被引量:2
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作者 侯增淼 李晓颖 +2 位作者 高恩 杨小琳 赵金礼 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期107-111,共5页
构建一种可促进外源蛋白在毕赤酵母中高表达的载体,实现在同一载体中外源基因与二硫键异构酶共表达,同时失活YPS1基因。以p PICZαA载体为骨架载体,将酵母YPS1基因C端和N端非功能区序列连接至p PICZαA载体,获得重组载体p PICZαA-YPSΔ... 构建一种可促进外源蛋白在毕赤酵母中高表达的载体,实现在同一载体中外源基因与二硫键异构酶共表达,同时失活YPS1基因。以p PICZαA载体为骨架载体,将酵母YPS1基因C端和N端非功能区序列连接至p PICZαA载体,获得重组载体p PICZαA-YPSΔ;将酵母PDI基因序列连接至p PICZαA载体,获得重组载体p PICZαAPDI,再以重组载体p PICZαA-PDI为模板通过PCR获得PDI表达盒,然后将PDI表达盒连接至重组载体p PICZαAYPSΔ,筛选获得高效表达载体p PICZαA-PDI-YPSΔ。最后,将外源基因HSA、h GH导入此载体,转化毕赤酵母GS115,检测HSA和h GH蛋白的表达。结果显示,高效表达载体p PICZαA-PDI-YPSΔ构建成功,外源蛋白HSA、h GH利用此载体,可获得高表达,具有很好的工业前景。 展开更多
关键词 YPS1基因 PDI表达盒 毕赤酵母 人血清白蛋白 人生长激素
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对《请专家支招》一文所提问题的一点建议
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作者 王辉 《印刷技术》 北大核心 2004年第23期60-60,共1页
关键词 YP4A1四色胶印机 调试 杠子 对比排除法 维修 使用
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北人YP4A1对开四色胶印机“透印”故障检修
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作者 刘惠一 秦茂盛 《印刷技术》 北大核心 1999年第10期76-77,共2页
关键词 北人YP4A1 对开四色胶印机 透印故障 检修
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毕赤酵母YPS1基因的失活对减少重组人血清白蛋白降解的作用 被引量:1
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作者 陈莹 袁汉英 +1 位作者 李海 吕红 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期311-317,共7页
重组人血清白蛋白在毕赤酵母系统的分泌表达产物除了完整的重组人血清白蛋白外,还存在一约45ku大小的主要降解片段,直接影响了重组人血清白蛋白的产量和后续的纯化研究.为了减少重组人血清白蛋白的降解,采用同源重组的方法,使毕赤酵母... 重组人血清白蛋白在毕赤酵母系统的分泌表达产物除了完整的重组人血清白蛋白外,还存在一约45ku大小的主要降解片段,直接影响了重组人血清白蛋白的产量和后续的纯化研究.为了减少重组人血清白蛋白的降解,采用同源重组的方法,使毕赤酵母中蛋白酶基因YPS1失活,构建获得蛋白酶缺陷型菌株,研究YPS1基因失活后对重组人血清白蛋白降解的影响.结果表明,毕赤酵母YPS1基因的失活有效地减少了重组人血清白蛋白的降解,完整的重组人血清白蛋白在总蛋白中的比例由原来的60%提高到88%,降解片段由原先的40%降低到10%左右. 展开更多
关键词 毕赤酵母 重组人血清白蛋白 蛋白降解 YPS1基因
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