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kar交配法转移YACs至新宿主的研究
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作者 杨智勇 匡达人 《实验生物学报》 CSCD 1996年第3期247-253,共7页
利用改进的kar交配法,将一个含有340kb人基因组DNA的YAC片段的供体酵母菌株YAC23与受体菌株YLB504进行交配,以选择平板对所形成的候选YAC导入菌进行筛选。经PCR分析,候选YAC导入菌在404bp处有一个扩增带,即具有受体菌株的交配型(MAT α... 利用改进的kar交配法,将一个含有340kb人基因组DNA的YAC片段的供体酵母菌株YAC23与受体菌株YLB504进行交配,以选择平板对所形成的候选YAC导入菌进行筛选。经PCR分析,候选YAC导入菌在404bp处有一个扩增带,即具有受体菌株的交配型(MAT α)。进一步用脉冲电泳进行核型鉴定,证实YACs己成功地进入受体,实现了YACs从一个宿主到另一个宿主之间的转移。 展开更多
关键词 酵母人工染色体 kar交配 YAC导入菌 新宿主
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人工染色体载体系统的研究进展 被引量:1
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作者 姚春馨 吴成军 +1 位作者 程在全 黄兴奇 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 2006年第2期135-141,共7页
酵母人工染色体(YACs),细菌人工染色体(BACs),噬菌体P1衍生的人工染色体(P1 s),细菌人工染色体双元载体(B IBACs),具有转化能力的载体系统(TACs),哺乳动物人工染色体(MACs)和人工游离基因染色体(HAECs)等人工染色体载体系统,是近年来不... 酵母人工染色体(YACs),细菌人工染色体(BACs),噬菌体P1衍生的人工染色体(P1 s),细菌人工染色体双元载体(B IBACs),具有转化能力的载体系统(TACs),哺乳动物人工染色体(MACs)和人工游离基因染色体(HAECs)等人工染色体载体系统,是近年来不断发展起来的DNA克隆载体系统。作为一种重要的分子生物学技术,人工染色体载体系统在生物基因组测序分析,基因的结构与功能,表达与调控,定位与分离以及遗传病的基因治疗等研究领域得到了广泛的应用。本文着重介绍细菌人工染色体载体系统(BACs)的结构,功能及发展应用情况,同时比较和介绍了YACs,PACs,PBCs,B IBACs,TACs,MACs和HAECs等人工染色体载体系统的特点。 展开更多
关键词 人工染色体 研究进展 yacs BACS
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培基介导的辐射旁效应及机理初探 被引量:4
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作者 涂序珉 雷苏文 +7 位作者 李文建 王菊芳 吕彗敏 张志兴 张翠兰 齐雪松 郝述霞 刘洪武 《辐射研究与辐射工艺学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第4期254-256,共3页
采用ICR小鼠,转移受照射细胞的条件培养液来培养未受照射细胞,检测YAC?I(小鼠T淋巴瘤)细胞对小鼠自然杀伤(NK)细胞的敏感性变化,测定小鼠脾细胞增殖能力,观察自由基清除剂二甲基亚砜(Dimethylsulfoxide,DMSO)照射前处理细胞的影响。初... 采用ICR小鼠,转移受照射细胞的条件培养液来培养未受照射细胞,检测YAC?I(小鼠T淋巴瘤)细胞对小鼠自然杀伤(NK)细胞的敏感性变化,测定小鼠脾细胞增殖能力,观察自由基清除剂二甲基亚砜(Dimethylsulfoxide,DMSO)照射前处理细胞的影响。初步研究了电离辐射旁效应(Bystandereffect,BE)及其可能的机理。结果显示,条件培养液培养的Yac?I细胞对NK细胞的敏感性明显升高。用条件培养液培养的小鼠脾细胞的增殖能力也明显受到抑制,提示辐射旁效应的存在,观察到DMSO对旁效应有一定的抑制作用,说明活性氧(Reactiveoxygenspecies,ROS)等自由基对旁效应有一定贡献。然而在淋巴细胞增殖实验ICM+1%DMSO组的数据显示DMSO对旁效应的抑制作用非常有限,表明除自由基外必定存在其他因素介导旁效应的发生。 展开更多
关键词 ^60COΓ射线照射 旁效应 Yac—I细胞 NK细胞活性 小鼠脾细胞增殖
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人类X染色体Xp11.3~21.3区部分YAC重叠群构建及大尺度物理图谱分析 被引量:2
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作者 缪为民 魏勇 +4 位作者 邓炜 周炜 李恒俊 柴建华 谈家桢 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1997年第2期99-108,共10页
人类X染色体短臂11.3~21.3区是含有视网膜色素变性等数种遗传病基因位点的区域。我们对这个具有重要医学生物学意义的区段进行了YAC重叠群构建及大尺度物理作图。用这一区域已知的探针(OTC、2bA3、DMDcDNA... 人类X染色体短臂11.3~21.3区是含有视网膜色素变性等数种遗传病基因位点的区域。我们对这个具有重要医学生物学意义的区段进行了YAC重叠群构建及大尺度物理作图。用这一区域已知的探针(OTC、2bA3、DMDcDNA),以YAC菌落原位杂交法及PCR法进行了YAC的筛选;也采用了法国CEPH和英国ICRF的部分YAC,总共得到了77年阳性YAC。对上述YAC进行了长度测定。26对微卫星STS图谱分析,单拷贝探针的杂交定位,Alu-PCR指纹图谱分析和稀切点酶大尺度物理图谱分析。综合上述信息,对这些YAC进行了排序,在Xp11.3~21.3区得到了6个YAC重叠群,总共覆盖了约15.3Mb的范围。这些YAC重叠群的构建为开展该区域疾病基因的定位克隆(Positionalcloning)及DNA顺序测定奠定了基础。 展开更多
关键词 人类遗传学 人类基因组 X染色体 YAC重叠群
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濒危畜禽品种YAC基因组文库的构建 被引量:7
5
作者 关伟军 马月辉 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2003年第4期77-79,共3页
尽管酵母人工染色体 (Yeast artificial chrom osome,YAC)存在着克隆效率低、嵌合体出现率高、部分克隆不稳定和缺失等弊端 ,但由于它容纳高分子量 DNA的优点其它载体无法替代 ,而成为人类和动物基因组研究中最为主要的研究工具之一。因... 尽管酵母人工染色体 (Yeast artificial chrom osome,YAC)存在着克隆效率低、嵌合体出现率高、部分克隆不稳定和缺失等弊端 ,但由于它容纳高分子量 DNA的优点其它载体无法替代 ,而成为人类和动物基因组研究中最为主要的研究工具之一。因此 ,利用 YAC载体系统构建我国濒危畜禽品种的基因组文库 ,对于在分子水平保存国家重要的基因资源和深入的分子生物学研究等方面 ,均具有非常重要的意义。 展开更多
关键词 濒危畜禽品种 基因组文库 酵母人工染色体 种质资源 YAC
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用万能引物PCR法从YAC中分离制备荧光原位杂交探针的研究 被引量:1
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作者 史庆华 张坚宣 +8 位作者 潘淑娟 张锡然 陈宜峰 单祥年 黄浩杰 余龙 赵寿元 郑其平 Adler I-D 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1998年第5期403-408,共6页
报道了一种从微量且未知碱基顺序的YAC DNA中制备FISH探针的新方法——万能引物PCR(UP PCR),即把复性后的UP-Linker连接于PFGE分离后经Alu Ⅰ酶切的YAC DNA上,再用UP对其进行PCR扩增和标记。由于Alu Ⅰ的广谱性和UP与Linker长度不同等,... 报道了一种从微量且未知碱基顺序的YAC DNA中制备FISH探针的新方法——万能引物PCR(UP PCR),即把复性后的UP-Linker连接于PFGE分离后经Alu Ⅰ酶切的YAC DNA上,再用UP对其进行PCR扩增和标记。由于Alu Ⅰ的广谱性和UP与Linker长度不同等,使该法能根据PCR效率调节扩增产物的广泛性向特异性的转变,且产物能覆盖YAC嵌入DNA的全长。此法制备的人21号染色体FISH探针,特异性强,杂交信号明亮,21号染色体的检出率高。该法稳定简便。 展开更多
关键词 万能引物(UP) PCR YAC FISH
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用荧光原位杂交技术显示染色体易位(英文) 被引量:3
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作者 朱冠山 Oliver Bartsch +2 位作者 万谟彬 Gabriele Gillessen-Kaesbach Eberhard Passarge 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第9期853-856,F003,共5页
目的 :应用荧光原位杂交技术 (fluorescence in situ hybridization,FISH)对 G显带提示有染色体易位的病例进行分析 ,阐明易位本质。 方法 :以定位于待研究染色体区段的酵母人工染色体 (yeast artificialchrom osom e,YAC)作为 DNA来源 ... 目的 :应用荧光原位杂交技术 (fluorescence in situ hybridization,FISH)对 G显带提示有染色体易位的病例进行分析 ,阐明易位本质。 方法 :以定位于待研究染色体区段的酵母人工染色体 (yeast artificialchrom osom e,YAC)作为 DNA来源 ,采用 DOP- PCR(degenerate oligonucleotide- primed,PCR)方法制备荧光标记的位点特异性探针 ,进行染色体原位杂交。结果 :两例经 G显带未能明确显示的染色体结构异常 ,经 FISH证实 ,一例为发生于 11号染色体与 13号染色体之间的平衡易位 ;另一例为发生于 6号染色体与 X染色体之间的不平衡易位。结论 :FISH技术以其高度的灵敏性及特异性 ,成为常规染色体显带技术的一个重要补充 ,特别适用于对微小染色体结构重排以及染色体片段起源的阐明。 展开更多
关键词 染色体结构异常 荧光原位杂交 YAC DOP-PCR
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膜型IL-15联合RAE-1ε增强小鼠NK细胞的杀伤活性 被引量:1
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作者 钱莉 陆家辉 +5 位作者 傅奕 郑月娟 佟大可 龚卫娟 潘兴元 季明春 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期611-616,共6页
目的:探讨视黄酸早期转录因子1ε(retinoic acid early transcript 1ε,RAE-1ε)和膜型IL-15对小鼠NK细胞杀伤功能的影响。方法:前期研究以小鼠原B淋巴细胞株BaF3为基础构建了3株BaF3工程细胞株,即表达膜型IL-15的BaF3/mb15细胞、表达RA... 目的:探讨视黄酸早期转录因子1ε(retinoic acid early transcript 1ε,RAE-1ε)和膜型IL-15对小鼠NK细胞杀伤功能的影响。方法:前期研究以小鼠原B淋巴细胞株BaF3为基础构建了3株BaF3工程细胞株,即表达膜型IL-15的BaF3/mb15细胞、表达RAE-1ε的BaF3/RAE细胞和同时表达膜型IL-15和RAE-1ε的BaF3/mb15/RAE细胞。将γ射线灭活后的3株BaF3工程细胞株作为刺激细胞,分别刺激小鼠NK细胞。流式细胞术检测刺激后NK细胞表面分子的表达,胞内染色法检测NK细胞穿孔素和颗粒酶B的分泌,流式细胞术检测NK细胞对小鼠淋巴瘤YAC1细胞的杀伤活性。结果:与BaF3/mb15和BaF3/RAE细胞相比,BaF3/mb15/RAE细胞可有效上调NK细胞表面CD25、CD44、FasL和CD107a的表达,但对穿孔素和颗粒酶B的分泌没有明显刺激作用。当效靶比为20:1时,BaF3/mb15、BaF3/RAE和BaF3/mb15/RAE细胞刺激后NK细胞对靶细胞YAC1的杀伤率分别为(39.7±2.9)%、(45.3±2.3)%和(59.0±6.9)%,均高于BaF3组的(28.3±1.5)%(P<0.01),且BaF3/mb15/RAE组高于BaF3/mb15和BaF3/RAE组(P<0.05)。结论:膜型IL-15联合RAE-1ε可促进NK细胞活化并增强NK细胞的杀伤活性。 展开更多
关键词 膜型IL-15 视黄酸早期转录因子1ε NK细胞 CD107a 淋巴瘤 YAC1细胞
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激光陶瓷——固体激光工作物质探索的新热点 被引量:18
9
作者 刘颂豪 《激光与红外》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期385-390,共6页
简要评述了激光陶瓷的研究进展,作为固体激光工作物质,已显示出较目前常用的激光晶体和激光玻璃具有潜在优势。接着分别介绍了激光陶瓷的种类、激光离子、光谱与激光特性和激光陶瓷的制备方法。最后指出,Nd∶YAG激光陶瓷很可能在未来几... 简要评述了激光陶瓷的研究进展,作为固体激光工作物质,已显示出较目前常用的激光晶体和激光玻璃具有潜在优势。接着分别介绍了激光陶瓷的种类、激光离子、光谱与激光特性和激光陶瓷的制备方法。最后指出,Nd∶YAG激光陶瓷很可能在未来几年会取代Nd∶YAG激光晶体的地位。 展开更多
关键词 激光陶瓷 Nd:YAC陶瓷 激光离子 光谱性能
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小儿肝豆状核变性发病的基因基础和治疗进展 被引量:2
10
作者 冯琳 陈源 张会丰 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期58-59,共2页
关键词 肝豆状核变性 治疗进展 发病 性基因 ATP7B基因 小儿 限制性片段长度多态性 YAC 微卫星DNA RFLP
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用Alu-VectorettePCR方法从酵母人工染色体末端分离人基因组单拷贝片段 被引量:1
11
作者 韩顺生 余龙 +1 位作者 邓余 赵寿元 《高技术通讯》 CAS CSCD 1995年第3期40-43,共4页
分离和克隆YAC插入片段的末端顺序是构建YAC重叠群的重要手段之一,我们采用Alu载体(Alu-vectorette)PCR方法成功地从含人淀粉样蛋白前体(APP)基因的法国人类多态研究中心(CEPH,Centred... 分离和克隆YAC插入片段的末端顺序是构建YAC重叠群的重要手段之一,我们采用Alu载体(Alu-vectorette)PCR方法成功地从含人淀粉样蛋白前体(APP)基因的法国人类多态研究中心(CEPH,Centred'EtudeduPolymorphismeHuman)YAC克隆599G11的未端分离到一个0.58kb的单拷贝片段。测序后经核普酸顺序检索分析,证明这是一个新的STS顺序。用这个片段作探针,在英国肿瘤研究基金会(ICRF)的YAC库中筛选到一个新的YAC克隆,证明这是获得contig的有效而快捷的方法。 展开更多
关键词 YAC 未端克隆 PCR 聚合酶链反应 基因组
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人X染色体2bA3-YAC克隆重叠群的构建及其与DMD-YAC的串联 被引量:1
12
作者 魏勇 蔡倜 +2 位作者 吴晓晖 康毅滨 柴建华 《高技术通讯》 CAS CSCD 1994年第12期1-4,共4页
用Alu-PCR指纹图谱法分析了人Xp21.1一21.2上一系列的YAC克隆,发现其中的两个YAC克隆构成包含DXS166位点的重叠群,而且这一重叠群与以前构建的包含DMD基因全顺序的YAC重叠群相连接,YAC克隆未... 用Alu-PCR指纹图谱法分析了人Xp21.1一21.2上一系列的YAC克隆,发现其中的两个YAC克隆构成包含DXS166位点的重叠群,而且这一重叠群与以前构建的包含DMD基因全顺序的YAC重叠群相连接,YAC克隆未端探针杂交证实了这一重叠,使这一YAC重叠群至少延伸至DXS166位点,形成一个跨度为3.5Mb的YAC大重叠群。这一工作为这一区域进一步的图谱分析及DMD基因的5′远端调控和该区域未知基因克隆奠定了基础。 展开更多
关键词 YAC重叠群 X染色体 DMD基因 无性系
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溶胶-凝胶法引入烧结助剂制备SiC-Y_3Al_5O_(12)复相陶瓷 被引量:3
13
作者 王建武 杨辉 +2 位作者 郭兴忠 高黎华 李祥云 《耐火材料》 EI CAS 北大核心 2005年第3期192-195,共4页
以碳化硅、六水硝酸钇、九水硝酸铝和六次甲基四胺为主要原料,通过溶胶-凝胶法引入Al2O3和Y2O3复合烧结助剂,液相烧结制备得到SiC-Y3Al5O12(Y3Al5O12简称YAG)复相陶瓷。采用DTA、TEM、XRD等分析测试技术研究了溶胶-凝胶法引入复合烧结... 以碳化硅、六水硝酸钇、九水硝酸铝和六次甲基四胺为主要原料,通过溶胶-凝胶法引入Al2O3和Y2O3复合烧结助剂,液相烧结制备得到SiC-Y3Al5O12(Y3Al5O12简称YAG)复相陶瓷。采用DTA、TEM、XRD等分析测试技术研究了溶胶-凝胶法引入复合烧结助剂过程及复合烧结助剂对SiC-YAG陶瓷的烧结性能、力学性能、物相组成与显微结构的影响。结果表明:干凝胶在920℃左右已完全转变成YAG相,最终获得的YAG粒径小,并均匀分散在SiC表面的SiC-YAG复合粉体;复合粉体先干压、再等静压成型后,在1860℃下烧结45min,所制得复相陶瓷的相对密度达到了96.5%,抗弯强度达到486MPa,断裂韧性达到5.7MPa·m1/2。 展开更多
关键词 烧结助剂 复相陶瓷 Y3Al5O12 SiC 溶胶-凝胶法 制备 溶胶一凝胶法 六次甲基四胺 分析测试技术 复合粉体 Al2O3 等静压成型 YAC Y2O3 液相烧结 烧结性能 力学性能 显微结构 物相组成 均匀分散 相对密度 抗弯强度 断裂韧性
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几种从凝胶中回收YAC DNA的方法及其效果的比较
14
作者 朱冠山 缪为民 +3 位作者 周炜 姚玉河 焦炳华 柴建华 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期483-484,共2页
几种从凝胶中回收YACDNA的方法及其效果的比较*朱冠山缪为民△周炜▲姚玉河▲焦炳华△柴建华▲自1987年首次构建了人类基因组酵母人工染色体(YAC)分子克隆库[1],目前YAC的克隆容量已达800~1000kb,由... 几种从凝胶中回收YACDNA的方法及其效果的比较*朱冠山缪为民△周炜▲姚玉河▲焦炳华△柴建华▲自1987年首次构建了人类基因组酵母人工染色体(YAC)分子克隆库[1],目前YAC的克隆容量已达800~1000kb,由此而成为基因组作图和测序的一个最重... 展开更多
关键词 染色体 YAC 凝胶 PFGE 回收 DNA 分离
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动物乳腺组织高效表达通用型YAC载体的构建
15
作者 任立明 郭英 +4 位作者 桑璐 安晓荣 侯健 关宏 陈永福 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2004年第1期37-41,共5页
以含有人α-乳白蛋白基因功能域的YAC(yeast artificial chromosome)为起始材料,构建了可以在动物乳腺高效表达外源基因的载体系统。根据已发表的人α-乳白蛋白基因序列,通过PCR的方法,扩增出了其5’端的837bp及3’端的1007bp片段,... 以含有人α-乳白蛋白基因功能域的YAC(yeast artificial chromosome)为起始材料,构建了可以在动物乳腺高效表达外源基因的载体系统。根据已发表的人α-乳白蛋白基因序列,通过PCR的方法,扩增出了其5’端的837bp及3’端的1007bp片段,构建了整合型载体pRLA22。利用pRLA22在大肠杆菌中进行基因操作,可以将外源基因准确地置于乳白蛋白基因启动子控制之下。把重组的pRLA22导入含YAC的酵母菌后,高频率同源重组事件将会把外源基因插入YAC。本实验通过上述程序,将鸡的γ-干扰素基因cDNA序列导入了YAC。经过PCR检测,证明鸡的γ-干扰素cDNA序列已被重组到YAC的预定位置。因此,大肠杆菌载体pRLA22和含人的α-乳白蛋白基因的YAC,将构成能在动物乳腺高表达外源基因的有效载体系统。 展开更多
关键词 乳腺组织 人α-乳白蛋白基因 YAC 酵母人工染色体 蛋白载体 整合 转基因动物 蛋白表达
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人类X染色体Xp21.3-11.3区YAC重叠群的构建
16
作者 缪为民 魏勇 +4 位作者 邓炜 周炜 李恒俊 柴建华 谈家桢 《高技术通讯》 CAS CSCD 1996年第8期41-45,共5页
人类X染色体短臂21.3—11.3区是含有视网膜色素变性等数种遗传病基因位点的区域。我们对这个具有重要医学生物学意义的区段进行了YAC重叠群构建。用这一区域已知的探针(OTC、DXS166、DMDcDNA)及STS位... 人类X染色体短臂21.3—11.3区是含有视网膜色素变性等数种遗传病基因位点的区域。我们对这个具有重要医学生物学意义的区段进行了YAC重叠群构建。用这一区域已知的探针(OTC、DXS166、DMDcDNA)及STS位标,以YAC菌落原位杂交法及PCR法进行了YAC的筛选;也采用了法国CEPH和英国ICRF的部分YAC;总共得到了55个阳性YAC。对上述YAC进行了长度测定,26对微卫星STS图谱分析,单拷贝探针的杂交定位,Alu-PCR指纹图谱分析。综合上述信息,对这些YAC进行了排序,在Xp21.3-11.3区得到了6个0YAC重叠群,覆盖了约15Mb的范围。这些YAC重叠群的构建为开展该区域疾病基因的定位克隆(Positionalcloning)及DNA顺序测定奠定了基础。 展开更多
关键词 人类基因组 X染色体 YAC重叠群
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Alu-PCR联合荧光原位杂交技术鉴定bcr基因相关YAC克隆
17
作者 刘晓力 郑维扬 +4 位作者 刘孟珉 宋兰林 杜庆锋 陈赛娟 周淑芸 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第5期321-323,F002,共4页
目的制备慢性髓细胞性白血病(CML)bcr基因重排的DNA探针。方法应用Alu-PCR和荧光原位杂交(FISH) 技术,对3个酵母人工染色体(YAC)候选克隆进行鉴定,制备DNA探针,并经正常人外周血淋巴细胞和慢性髓... 目的制备慢性髓细胞性白血病(CML)bcr基因重排的DNA探针。方法应用Alu-PCR和荧光原位杂交(FISH) 技术,对3个酵母人工染色体(YAC)候选克隆进行鉴定,制备DNA探针,并经正常人外周血淋巴细胞和慢性髓细胞性 白血病患者骨髓细胞筛选。结果确定了YAC765E3为非嵌合体,定位于染色体22qll bcr基因区域,而且可在Ph染 色体阳性细胞中易位至9q34。探针特异性杂交效率达95%。结论FISH技术是染色体、染色体畸变鉴定和染色体上特 殊序列定位的重要检测方法。联合应用Alu-PCR技术特异性扩增载体YAC中人类基因组来源的DNA制备探针,为慢性髓细胞白血病的诊断和监测微小残留病提供了一个新的手段。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 荧光原位杂交 酵母人工染色体 BCR基因 慢性髓细胞白血病 YAC DNA探针
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人X染色体YAC图谱分析及DMD基因研究──在第二届联合国教科文组织南北人类基因组学术会议上的报告
18
作者 柴建华 《生物工程进展》 CSCD 1995年第2期8-10,共3页
人X染色体YAC图谱分析及DMD基因研究──在第二届联合国教科文组织南北人类基因组学术会议上的报告柴建华(复旦大学遗传学研究所人类基因组实验室上海200433)我们实验室从1987年在国家高技术发展计划(863)的资... 人X染色体YAC图谱分析及DMD基因研究──在第二届联合国教科文组织南北人类基因组学术会议上的报告柴建华(复旦大学遗传学研究所人类基因组实验室上海200433)我们实验室从1987年在国家高技术发展计划(863)的资助下开始人类基因组研究。现在还同时... 展开更多
关键词 人类 基因组 X染色体 YAC 图谱分析 DMD基因
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Q开关Nd:YAC激光仪治疗雀斑临床疗效观察
19
作者 李国柱 郑晓琴 +1 位作者 楚春香 曾玫蔓 《中华今日医学杂志》 2003年第17期33-33,共1页
关键词 雀斑 Q开关Nd:YAC激光仪 激光治疗 临床疗效
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人类YAC库PCR三维筛选体系的建立及质量考核 被引量:2
20
作者 余才林 章彤 +7 位作者 顾柏炜 叶菁 陈赛娟 陈竺 韩顺生 石景茂 余龙 赵寿元 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1996年第4期249-254,共6页
为了在知道某个区域、位点、基因或DNA片段的部分信息后,能从CEPHYAC库中筛选出与其对应的YAC克隆,为进一步研究奠定基础,需要建立一个筛选体系。本文概述了这一筛选体系的建立过程。随后,用两对与已知基因对应的引物... 为了在知道某个区域、位点、基因或DNA片段的部分信息后,能从CEPHYAC库中筛选出与其对应的YAC克隆,为进一步研究奠定基础,需要建立一个筛选体系。本文概述了这一筛选体系的建立过程。随后,用两对与已知基因对应的引物进行了筛选验证工作,证明了这一体系的可用性,同时提出了以后筛选的途径,即首先筛选YAC库的MegaYAC部分,并以5块板为一组进行筛选。另外,运用荧光原位杂交技术(FBH),对CEPHYAC库的质量及其第一代人类基因组物理图谱进行了考察。我们取26个YAC克隆进行FISH定位,结果其中嵌合体13个,占50%。定位错误的克隆有6个,占23%。非嵌合体且定位正确的共9个,占35%。 展开更多
关键词 人类遗传 YAC库 PC筛选体系 酵母人工染色体
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