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补骨脂酚抑制PI3K/Akt/Nrf2/HO-1对氧糖剥夺所致SH-SY5Y细胞损伤的作用及机制 被引量:2
1
作者 徐玥玮 张珅 +6 位作者 高晓明 王丽 杨满琴 张梦翔 杨晓丹 戴文玲 蔡明 《药物评价研究》 北大核心 2025年第2期448-454,共7页
目的研究补骨脂酚对氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)诱导人源性神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)损伤的影响。方法MTT法检测补骨脂酚(5、10、20、40、80μmol·L^(-1))对SH-SY5Y细胞活性的影响。将SH-SY5Y细胞分为对照组、模型组、补骨脂酚(5、1... 目的研究补骨脂酚对氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)诱导人源性神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)损伤的影响。方法MTT法检测补骨脂酚(5、10、20、40、80μmol·L^(-1))对SH-SY5Y细胞活性的影响。将SH-SY5Y细胞分为对照组、模型组、补骨脂酚(5、10、20μmol·L^(-1))组、补骨脂酚(20μmol·L^(-1))+ML385(2μmol·L^(-1),Nrf2抑制剂)组、补骨脂酚(20μmol·L^(-1))+LY294002[5μmol·L^(-1),磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂]组。MTT法检测SH-SY5Y细胞活力,倒置显微镜观察各组SH-SY5Y细胞形态,试剂盒法检测细胞上清超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性,实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法和Western blotting法测定磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝氨酸/苏氨酸激酶B(Akt)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)mRNA和蛋白水平。结果补骨脂酚对正常SH-SY5Y细胞存活率无影响。与对照组比较,模型组细胞存活率显著下降(P<0.01),细胞个数明显减少,部分细胞裂解成碎片,部分细胞死亡;SOD、CAT活性显著降低(P<0.01),PI3K/Akt/Nrf2/HO-1 mRNA及蛋白水平显著下调(P<0.05、0.01、0.001)。与模型组比较,补骨脂酚显著增加细胞存活率(P<0.01),明显增加细胞个数,显著上调SOD、CAT活性(P<0.05、0.01),显著上调PI3K/Akt/Nrf2/HO-1 mRNA及蛋白水平(P<0.05、0.01、0.001)。与补骨脂酚(20μmol·L^(-1))组比较,补骨脂酚+ML385可逆转补骨脂酚对HO-1 mRNA及蛋白的上调作用(P<0.05、0.01),补骨脂酚+LY294002可逆转补骨脂酚对Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白水平的上调作用(P<0.05、0.01)。结论补骨脂酚可显著改善OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞损伤,且机制可能是通过激活PI3K/Akt进而上调Nrf2/HO-1抑制氧化应激改善神经损伤。 展开更多
关键词 补骨脂酚 SH-Sy5Y细胞 脑缺血再灌注 氧糖剥夺/复糖复氧 Nrf2/HO-1 PI3K/AKT
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DpdtaA对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖、细胞周期、凋亡、副凋亡的影响
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作者 张正艳 李长正 +2 位作者 李静 王艳 路承彪 《郑州大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第3期332-336,共5页
目的:探讨DpdtaA对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞恶性生物学行为的影响及可能机制。方法:SH-SY5Y细胞用终浓度分别为0.156、0.312、0.625、1.250、2.500、5.000μmol/L DpdtaA处理24 h,采用MTT法检测细胞增殖,计算增殖抑制率。SH-SY5Y细胞... 目的:探讨DpdtaA对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞恶性生物学行为的影响及可能机制。方法:SH-SY5Y细胞用终浓度分别为0.156、0.312、0.625、1.250、2.500、5.000μmol/L DpdtaA处理24 h,采用MTT法检测细胞增殖,计算增殖抑制率。SH-SY5Y细胞分为对照组(给予二甲基亚砜)和DpdtaA组(0.5μmol/L DpdtaA),处理24 h后采用PI染色法检测细胞周期,Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡,在倒置显微镜和透射电镜下观察细胞形态和超微结构,采用荧光探针DCFH-DA法检测细胞内活性氧(ROS)水平。另取细胞,分4组,采用Western blot检测DpdtaA与ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)单独及联合作用后细胞凋亡相关蛋白ALG-2相互作用蛋白X(Alix)的表达。结果:DpdtaA可呈浓度依赖性抑制SH-SY5Y细胞增殖,半数抑制浓度为(0.54±0.13)μmol/L。与对照组比较,DpdtaA组细胞周期阻滞在G0/G1期,细胞凋亡增多(P<0.05);DpdtaA组细胞核周围有大量空泡,线粒体肿胀,ROS水平升高,提示可能发生副凋亡。DpdtaA处理后Alix蛋白表达水平下降;NAC预处理后,Alix蛋白表达水平均升高(P<0.05)。结论:DpdtaA能够抑制SH-SY5Y细胞增殖,引起周期阻滞,诱导细胞凋亡和副凋亡,部分机制可能与上调ROS及抑制Alix蛋白表达有关。 展开更多
关键词 DpdtaA 神经母细胞瘤 SH-Sy5Y细胞 增殖 副凋亡 氧化应激 凋亡相关基因2相互作用蛋白X
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枸杞多糖干预β-淀粉样蛋白1-42诱导SH-SY5Y细胞损伤:线粒体自噬的保护作用 被引量:1
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作者 苏琴 贾思玮 +6 位作者 郭敏芳 孟涛 李雁冰 穆秉桃 宋丽娟 马存根 尉杰忠 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第31期6688-6696,共9页
背景:神经退行性疾病与线粒体自噬调节失衡密切相关。课题组前期研究表明枸杞多糖具有神经保护作用,但其能否通过调控线粒体自噬来改善β-淀粉样蛋白1-42诱导的SH-SY5Y细胞损伤尚不明确。目的:探讨枸杞多糖对β-淀粉样蛋白1-42诱导的SH-... 背景:神经退行性疾病与线粒体自噬调节失衡密切相关。课题组前期研究表明枸杞多糖具有神经保护作用,但其能否通过调控线粒体自噬来改善β-淀粉样蛋白1-42诱导的SH-SY5Y细胞损伤尚不明确。目的:探讨枸杞多糖对β-淀粉样蛋白1-42诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及机制。方法:通过β-淀粉样蛋白1-42诱导SH-SY5Y细胞建立阿尔茨海默病细胞模型,并用枸杞多糖进行干预。将SH-SY5Y细胞分为3组:对照组,β-淀粉样蛋白1-42组(20μmol/Lβ-淀粉样蛋白1-42干预24 h),枸杞多糖组(先提前1 h加入1 g/L枸杞多糖形成保护作用,然后再加入20μmol/Lβ-淀粉样蛋白1-42与枸杞多糖共同干预24 h)。CCK-8法检测细胞活力;JC-1检测线粒体膜电位;TUNEL染色检测细胞凋亡;免疫荧光和Western blot检测突触、凋亡和线粒体自噬相关指标的表达。结果与结论:①与对照组比较,β-淀粉样蛋白1-42组细胞活力下降(P<0.05),细胞凋亡率上升(P<0.05),线粒体膜电位下降(P<0.05),促凋亡蛋白Bax、Caspase-3表达升高(P<0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低(P<0.05),突触相关蛋白Syn、PSD-95表达降低(P<0.05),线粒体自噬相关蛋白Pink1、LC3A/B、Parkin、Beclin-1表达降低(P<0.05),P62表达升高(P<0.05);②与β-淀粉样蛋白1-42组比较,枸杞多糖组细胞活力升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),线粒体膜电位上升(P<0.05),Bax和Caspase-3表达降低(P<0.05),Bcl-2表达升高(P<0.05),Syn和PSD-95表达升高(P<0.05),Pink1、LC3A/B、Parkin、Beclin-1表达升高(P<0.05),P62表达降低(P<0.05)。结果表明:枸杞多糖可能通过调控线粒体自噬来抑制β-淀粉样蛋白1-42诱导的SH-SY5Y细胞损伤,减少细胞凋亡,增加神经元突触可塑性。 展开更多
关键词 枸杞多糖 阿尔茨海默病 SH-Sy5Y细胞 线粒体自噬 Β-淀粉样蛋白 细胞凋亡 工程化细胞
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卷曲螺旋结构域蛋白2通过促进线粒体自噬抑制帕金森病SH-SY5Y细胞凋亡 被引量:1
4
作者 祝柳慧 张歆悦 +3 位作者 朱洲海 杨兴隆 管莹 刘彬 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第25期5403-5413,共11页
背景:卷曲螺旋结构域蛋白2(coiled-coil-helix-coiled-coil-helix domain-containing 2,CHCHD2)能否调控PINK1/Parkin介导的线粒体自噬在帕金森病中发挥神经保护作用尚未可知。目的:探讨CHCHD2在6-羟基多巴胺诱导的帕金森病细胞模型中对... 背景:卷曲螺旋结构域蛋白2(coiled-coil-helix-coiled-coil-helix domain-containing 2,CHCHD2)能否调控PINK1/Parkin介导的线粒体自噬在帕金森病中发挥神经保护作用尚未可知。目的:探讨CHCHD2在6-羟基多巴胺诱导的帕金森病细胞模型中对PINK1/Parkin信号通路介导的线粒体自噬发挥的作用及机制。方法:利用重组质粒转染技术过表达或敲低CHCHD2,用6-羟基多巴胺构建SH-SY5Y细胞帕金森病模型后分对照组、模型组、过表达阴性对照+6-羟基多巴胺组、敲低阴性对照+6-羟基多巴胺组、过表达CHCHD2+6-羟基多巴胺组和敲低CHCHD2+6-羟基多巴胺组。Western blot及RT-qPCR检测CHCHD2的表达;Western blot检测LC3Ⅰ/Ⅱ、p62、MFN1、COXⅣ、DRP1、PINK1、Parkin、TIM23、Bax、Bcl-2及cleavedcaspase3蛋白表达;CCK-8、JC-1和活性氧试剂盒检测细胞活性、线粒体膜电位和活性氧水平,单丹磺酰尸胺染色观察细胞自噬情况,透射电镜观察自噬溶酶体。结果与结论:①与对照组相比,模型组细胞活性、线粒体膜电位及CHCHD2、PINK1、Parkin蛋白表达降低,活性氧水平、凋亡水平及LC3Ⅰ/Ⅱ、p62蛋白表达升高(P<0.05),并观察到自噬溶酶体的存在;②与模型组相比,过表达CHCHD2能降低细胞活性氧水平,升高线粒体膜电位及PINK1、Parkin和MFN1蛋白表达水平,并观察到线粒体自噬溶酶体增多,而敲低CHCHD2后有与上述相反的作用,并伴有COXⅣ、TIM23和p-DRP1蛋白表达的升高(P<0.05);③与模型组相比,过表达CHCHD2能减少细胞凋亡,上调Bcl-2并下调Bax及cleavedcaspase3蛋白的表达,而敲低CHCHD2后有与上述相反的作用(P<0.05);④结果提示,CHCHD2在6-羟基多巴胺诱导的帕金森病细胞模型中可以通过促进PINK1/Parkin介导的线粒体自噬改善线粒体功能从而减轻细胞凋亡发挥神经保护作用。 展开更多
关键词 帕金森病 卷曲螺旋结构域蛋白2 PINK1 Parkin 线粒体自噬 线粒体功能 细胞凋亡 6-羟基多巴胺 SH-Sy5Y细胞
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原花青素B_2对高糖诱导SH-SY5Y细胞铁死亡的抑制作用及机制
5
作者 王佳琪 陈秀婷 +1 位作者 夏星 周金玲 《食品科学》 北大核心 2025年第5期161-169,共9页
目的:研究原花青素B_(2)对高糖诱导人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)分化细胞铁死亡的神经保护作用及相关机制。方法:以45 mmol/L的葡萄糖处理分化后的SH-SY5Y细胞构建高糖诱导体外损伤细胞模型。随机分为正常对照组、高糖模型组、高质量浓度原... 目的:研究原花青素B_(2)对高糖诱导人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)分化细胞铁死亡的神经保护作用及相关机制。方法:以45 mmol/L的葡萄糖处理分化后的SH-SY5Y细胞构建高糖诱导体外损伤细胞模型。随机分为正常对照组、高糖模型组、高质量浓度原花青素B_(2)治疗组、低质量浓度原花青素B_(2)治疗组、利普司他汀-1(阳性对照)组。采用CCK8法检测细胞活力,流式细胞术检测Fe^(2+)和脂质过氧化物(lipid peroxide,LPO)水平,免疫荧光法检测脂质活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位,透射电镜观察细胞线粒体铁死亡特征性形态变化,利用Western blot法检测铁死亡相关蛋白溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7member 11,SLC7A11)和转铁蛋白受体(transferrin receptor,TFRC)水平变化。结果:与正常对照组比较,高糖模型组的细胞活力、细胞线粒体膜电位、还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)/氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)比值以及SLC7A11蛋白表达水平显著下降,细胞内Fe^(2+)、LPO、脂质ROS和TFRC蛋白水平显著上升。与高糖模型组比较,一定质量浓度的原花青素B_(2)能够明显上调细胞活力、细胞线粒体膜电位、GSH/GSSG比值以及SLC7A11蛋白表达水平,同时下调LPO、脂质ROS水平。透射电镜观察结果显示原花青素B_(2)明显改善了高糖引起的细胞线粒体萎缩、脊断裂、消失等畸变现象。结论:原花青素B_(2)能抑制高糖诱导SH-SY5Y分化细胞的脂质过氧化损伤,其作用机制与其通过调节谷胱甘肽途径抑制铁死亡有关。 展开更多
关键词 原花青素B_(2) 高糖损伤 铁死亡 SH-Sy5Y细胞 神经保护
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皮质酮对人神经母瘤细胞SH-SY5Y的损伤作用及抑郁症细胞模型的构建
6
作者 龚舒 赖妙榕 +2 位作者 郭钰 刘秋君 刘文华 《肇庆学院学报》 2025年第5期14-20,共7页
细胞模型在抑郁症体外研究中发挥着重要作用,研究采用人神经母瘤细胞SH-SY5Y作为研究对象,皮质酮作为应激损伤源,从细胞表型及分子机制探究皮质酮作用于SH-SY5Y细胞构建抑郁症细胞模型的合理性.研究方法为:使用200、300、400、600和800... 细胞模型在抑郁症体外研究中发挥着重要作用,研究采用人神经母瘤细胞SH-SY5Y作为研究对象,皮质酮作为应激损伤源,从细胞表型及分子机制探究皮质酮作用于SH-SY5Y细胞构建抑郁症细胞模型的合理性.研究方法为:使用200、300、400、600和800μmol/L皮质酮处理SH-SY5Y细胞48 h,采用MTT比色法检测细胞活性,确定400μmol/L为后续建模浓度;接下来从细胞内氧化损伤、线粒体膜电位损伤、细胞凋亡、抑郁症相关蛋白BDNF mRNA水平以及凋亡相关蛋白表达量来检测皮质酮作用于SH-SY5Y后的细胞表型及分子指标.研究结果表明:与不加药对照组相比,皮质酮作用48 h后,当浓度大于等于300μmol/L时,细胞存活率显著降低(p<0.01),且细胞存活率随着皮质酮浓度的升高而降低;皮质酮作用后的SH-SY5Y细胞内活性氧水平显著升高(p<0.01),线粒体膜电位下降(p<0.05),细胞核皱缩有碎片并呈亮蓝色荧光,凋亡率显著升高(p<0.01),BDNF mRNA水平降低,且凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3、Bax表达量增加.因此,皮质酮能对SH-SY5Y细胞产生氧化应激损伤,该过程伴随线粒体功能失调及细胞凋亡.皮质酮可以用作应激损伤药物作用于SH-SY5Y细胞构建抑郁症体外细胞模型. 展开更多
关键词 皮质酮 SH-Sy5Y细胞 氧化应激 细胞凋亡 抑郁症
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Mdivi-1对氟氯氰菊酯诱导SH-SY5Y细胞线粒体损伤的调节作用
7
作者 吕燕灵 庞立香 +4 位作者 李玉斌 张凌鹤 杨惠芳 陈楠 赵吉 《宁夏医科大学学报》 2025年第1期8-13,52,共7页
目的 探讨线粒体分裂抑制剂1(Mdivi^(-1))在氟氯氰菊酯诱导的SH-SY5Y细胞线粒体损伤中的作用。方法 用100μg·mL^(-1)的氟氯氰菊酯处理SH-SY5Y细胞建立细胞模型,细胞分为空白对照组(0.1%DMSO)、氟氯氰菊酯染毒组(100μg·mL^(-... 目的 探讨线粒体分裂抑制剂1(Mdivi^(-1))在氟氯氰菊酯诱导的SH-SY5Y细胞线粒体损伤中的作用。方法 用100μg·mL^(-1)的氟氯氰菊酯处理SH-SY5Y细胞建立细胞模型,细胞分为空白对照组(0.1%DMSO)、氟氯氰菊酯染毒组(100μg·mL^(-1))、Mdivi^(-1)干预组(2μg·mL^(-1))、氟氯氰菊酯+Mdivi^(-1)干预组(100μg·mL^(-1)+2μg·mL^(-1))。通过CCK-8法检测SH-SY5Y细胞活力;倒置显微镜观察SH-SY5Y细胞形态;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测氟氯氰菊酯染毒后对SH-SY5Y细胞的细胞膜损伤;激光共聚焦显微镜观察SH-SY5Y细胞线粒体形态;线粒体膜电位检测试剂盒(JC^(-1))检测SH-SY5Y细胞线粒体膜电位;三磷酸腺苷(ATP)试剂盒检测SH-SY5Y细胞ATP含量。结果 与氟氯氰菊酯染毒组比较,Mdivi^(-1)干预组中细胞损伤减轻,LDH表达减少(P<0.05);Mdivi^(-1)干预后,细胞中的线粒体损伤减轻,线粒体膜电位和ATP水平升高(P均<0.05)。结论 Mdivi^(-1)可以减轻氟氯氰菊酯导致的SH-SY5Y细胞损伤和线粒体损伤。 展开更多
关键词 氟氯氰菊酯 SH-Sy5Y细胞 线粒体损伤 细胞损伤 线粒体分裂抑制剂1
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猴头菇提取物对Aβ_(1-42)诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用
8
作者 杨天潇 史富强 +4 位作者 车海燕 王梦阳 初航 田荣荣 孙晓丽 《中国医药科学》 2025年第11期49-53,共5页
目的考察猴头菇提取物(HEE)对β淀粉样多肽(1-42)(Aβ_(1-42))诱导人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)损伤的保护作用。方法采用CCK-8法检测HEE对Aβ_(1-42)诱导损伤的细胞存活率的影响;试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘... 目的考察猴头菇提取物(HEE)对β淀粉样多肽(1-42)(Aβ_(1-42))诱导人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)损伤的保护作用。方法采用CCK-8法检测HEE对Aβ_(1-42)诱导损伤的细胞存活率的影响;试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)和乳酸脱氢酶(LDH)的变化,ELISA法和蛋白免疫印迹法检测神经生长因子(NGF)水平。结果HEE 6.25、3.12、1.56 mg/ml明显提高了Aβ_(1-42)诱导损伤细胞活力(P<0.05);与模型组相比,HEE干预给药后SOD和GSH活力明显升高,LDH活力明显降低(P<0.05);NGF含量明显升高,MDA含量明显降低(P<0.05);NGF蛋白的表达显著提高(P<0.05)。结论HEE对Aβ_(1-42)诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有一定的保护作用,可能与降低氧化应激损伤和提高神经生长因子表达有关。 展开更多
关键词 猴头菇提取物 Β淀粉样蛋白 SH-Sy5Y细胞 氧化应激 神经生长因子
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利用α-突触核蛋白预制纤维作用于分化的SH-SY5Y细胞建立帕金森病细胞模型
9
作者 粟璟曦 宋琼 +2 位作者 景子涵 陈良颢 邹春林 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第1期5-11,共7页
目的探讨利用α-突触核蛋白预形成纤维(α-Syn PFF)作用于视黄酸(RA)分化的SH-SY5Y细胞建立帕金森病细胞模型的可行性。方法将SH-SY5Y细胞随机分为未分化组和RA分化组,Western blotting检测酪氨酸羟化酶(TH)、多巴胺转运蛋白(DAT)、淋... 目的探讨利用α-突触核蛋白预形成纤维(α-Syn PFF)作用于视黄酸(RA)分化的SH-SY5Y细胞建立帕金森病细胞模型的可行性。方法将SH-SY5Y细胞随机分为未分化组和RA分化组,Western blotting检测酪氨酸羟化酶(TH)、多巴胺转运蛋白(DAT)、淋巴细胞活化基因3蛋白(LAG3)、巢蛋白(Nestin)表达水平,免疫荧光染色检测微管相关蛋白2(MAP2)、神经元特异核蛋白(NeuN)表达情况。将经RA分化后的SH-SY5Y细胞随机分为control组和α-Syn PFF组,Hoechst 33342染色检测细胞核固缩情况,一氧化氮(NO)含量检测试剂盒测定细胞内NO生成量,Western blotting检测TH、多聚腺苷酸二磷酸(PAR)、多聚腺苷酸二磷酸核糖酶(PARP)表达水平,免疫荧光染色检测细胞内129位丝氨酸磷酸化α-突触核蛋白(pS129-α-Syn)及磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)表达情况。结果RA处理可诱导SH-SY5Y细胞胞体变小、突起变长。Western blotting结果显示,RA处理可提高SH-SY5Y细胞TH、DAT、LAG3表达水平,降低Nestin表达水平(P<0.05);α-Syn PFF处理可使分化的SH-SY5Y细胞TH蛋白表达水平降低,PAR、PARP-1、cleaved PARP-1蛋白表达水平升高(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示,RA处理能提高SH-SY5Y细胞MAP2和NeuN表达水平(P<0.001);α-Syn PFF处理可使分化的SH-SY5Y细胞γH2AX和pS129-α-Syn的表达水平升高(P<0.01)。Hoechst 33342染色结果显示,α-Syn PFF处理可使分化的SH-SY5Y细胞核固缩(P<0.001)。NO检测结果显示,α-Syn PFF处理可提高分化的SH-SY5Y细胞内NO含量(P<0.01)。结论α-Syn PFF作用于RA分化的SH-SY5Y细胞可建立帕金森病细胞模型。 展开更多
关键词 帕金森病 α-突触核蛋白预制纤维 视黄酸 SH-Sy5Y细胞 细胞模型
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敲低FCGBP对Aβ_(25-35)诱导的SH-SY5Y细胞凋亡和炎症因子表达的影响
10
作者 董帅 靳晓华 +2 位作者 杨立军 陈丽 李向华 《老年医学研究》 2025年第3期59-63,共5页
目的探讨FCGBP在Aβ_(25-35)诱导的SH-SY5Y细胞凋亡和炎症中的作用。方法选取GEO数据库中的GSE3300数据集分析并筛选阿尔茨海默病(AD)组织中的差异表达基因。用0、5、10和20μmol/L的淀粉样β蛋白25-35(Aβ_(25-35))诱导SH-SY5Y细胞24 h... 目的探讨FCGBP在Aβ_(25-35)诱导的SH-SY5Y细胞凋亡和炎症中的作用。方法选取GEO数据库中的GSE3300数据集分析并筛选阿尔茨海默病(AD)组织中的差异表达基因。用0、5、10和20μmol/L的淀粉样β蛋白25-35(Aβ_(25-35))诱导SH-SY5Y细胞24 h后,用Western blotting法检测FCGBP的表达变化,以明确构建体外AD细胞模型的最佳Aβ_(25-35)浓度。随后将si-FCGBP及其阴性对照si-NC转染至SH-SY5Y细胞中,用20μmol/L Aβ_(25-35)处理24 h后,用Western blotting评估细胞转染效率,CCK-8检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI法和Western blotting检测细胞凋亡和凋亡相关蛋白的表达,ELISA检测细胞上清中炎症因子的水平。结果分析GSE3300数据集发现FCGBP在AD组织中的表达量较正常组织明显升高(P<0.05)。20μmol/L Aβ_(25-35)处理SH-SY5Y细胞24 h为最佳AD细胞建模条件。敲低FCGBP可促进Aβ_(25-35)诱导的SH-SY5Y细胞的活力(P<0.05),减少细胞的凋亡率(P<0.05),上调Bcl-2(P<0.05),下调Bax和cleaved Caspase3(P均<0.05),抑制炎症因子IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α的表达(P均<0.05)。结论FCGBP在AD脑组织中高表达,敲低FCGBP可以促进Aβ_(25-35)诱导的SH-SY5Y细胞的活力、抑制细胞凋亡、减少炎症因子的释放。 展开更多
关键词 FCGBP 阿尔茨海默病 SH-Sy5Y细胞 细胞凋亡 炎症因子
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赖氨酸、天冬酰胺与葡萄糖美拉德反应产物对丙烯酰胺诱导的HT-29和SH-SY5Y细胞损伤的保护作用
11
作者 郝瑞芳 冯雅蓉 《晋中学院学报》 2025年第3期20-26,共7页
以丙烯酰胺(AA)诱导的人结肠腺癌细胞(HT-29)和人神经母细胞瘤株(SH-SY5Y)细胞损伤模型为样本,通过观察细胞形态、分析细胞存活率和乳酸脱氢酶(LDH)释放率,评价美拉德产物对细胞损伤的保护作用。结果表明,用300μg/m L AA分别对HT-29和S... 以丙烯酰胺(AA)诱导的人结肠腺癌细胞(HT-29)和人神经母细胞瘤株(SH-SY5Y)细胞损伤模型为样本,通过观察细胞形态、分析细胞存活率和乳酸脱氢酶(LDH)释放率,评价美拉德产物对细胞损伤的保护作用。结果表明,用300μg/m L AA分别对HT-29和SH-SY5Y处理6 h和8 h,细胞均受损,细胞存活率分别下降至71.8%和69.9%。经不同分子量的赖氨酸/葡萄糖反应产物和天冬酰胺/葡萄糖反应产物(H-LGP、L-LGP、H-AGP和L-AGP)预孵育后,50μg/m L的H-LGP、H-AGP和L-AGP对HT-29保护作用最强,细胞存活率最高达107.2%,LDH为119.0%。不同浓度的四种产物均对AA诱导的SH-SY5Y损伤有显著保护作用,存活率最高达93.6%,LDH为123.6%,且保护作用与添加物剂量呈相关性。 展开更多
关键词 赖氨酸/葡萄糖美拉德反应产物 天冬酰胺/葡萄糖美拉德反应产物 丙烯酰胺 HT-29细胞 SH-Sy5Y细胞
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槟榔碱对H_(2)O_(2)诱导SH-SY5Y神经细胞氧化应激损伤的保护作用及机制研究 被引量:2
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作者 孙源 王丹阳 +6 位作者 孙晶 白亚娟 范蓓 宋洪波 吉建邦 卢聪 王凤忠 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第6期1252-1261,共10页
本研究通过建立过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的SH-SY5Y神经细胞氧化应激模型,旨在探究槟榔碱对氧化应激诱导神经细胞损伤的保护作用及其作用机制。采用CCK-8法检测细胞活力,采用分光光度法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放、丙二醛(MDA)含量、超氧... 本研究通过建立过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的SH-SY5Y神经细胞氧化应激模型,旨在探究槟榔碱对氧化应激诱导神经细胞损伤的保护作用及其作用机制。采用CCK-8法检测细胞活力,采用分光光度法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性,采用流式细胞术检测细胞凋亡、线粒体膜电位,采用Western blot技术检测Nrf2、HO-1、Keap1、Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达。结果表明:槟榔碱干预均能有效降低细胞凋亡并显著上调线粒体膜电位;在提高SOD、CAT水平的同时降低MDA水平;140μmol/L槟榔碱处理能够显著上调Nrf2、HO-1、Bcl-2蛋白的表达(P<0.001,P<0.0001),并下调Keap1、Bax、Caspase-3蛋白的表达(P<0.001,P<0.0001)。表明槟榔碱能够有效改善H_(2)O_(2)诱导的氧化应激损伤,其作用机制与激活Nrf2/HO-1信号通路、提升细胞抗氧化活力、调控Bcl-2/Bax/Caspase-3信号通路和抑制细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 槟榔碱 SH-Sy5Y 氧化应激 神经保护 作用机制
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佛手多糖对1-甲基-4-苯基-吡啶离子诱导人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞损伤的保护作用研究 被引量:1
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作者 陈进炫 龚舒 +3 位作者 刘天开 龚记熠 乙引 刘文华 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期17-23,共7页
该文探究佛手多糖对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenyl-pyridine ion,MPP+)诱导人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞损伤的保护作用及其机制。佛手多糖经大孔吸附树脂AB-8进行纯化。体外培养SH-SY5Y细胞,构建帕金森病(Parkinson′s dis... 该文探究佛手多糖对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenyl-pyridine ion,MPP+)诱导人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞损伤的保护作用及其机制。佛手多糖经大孔吸附树脂AB-8进行纯化。体外培养SH-SY5Y细胞,构建帕金森病(Parkinson′s disease,PD)细胞模型,实验分为对照组、MPP+模型组、佛手多糖组。采用噻唑蓝(methye thiazdye telrazlium,MTT)法检测细胞存活率,Hoechst33258染色法观察细胞形态,2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐荧光探针检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,JC-1荧光探针法检测线粒体膜电位,蛋白免疫印迹(Western blot)检测磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-Akt)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(phosphorylated extracellular regulated protein kinases1/2,p-ERK1/2)和细胞色素c(cytochrome c,Cyt-c)蛋白表达水平。结果表明,佛手多糖的得率4.86%,纯度为44.46%,经过AB-8纯化后,纯度提高到60.81%;与对照组相比,模型组细胞的存活率显著降低,Hoechst33258染色下可见细胞破碎,细胞核皱缩,细胞内ROS显著增加,线粒体膜电位显著降低。与模型组相比,佛手多糖组的细胞存活率显著增加,细胞形态明显得到改善,ROS水平下降,线粒体膜电位升高。Western blot结果显示,佛手多糖能抑制MPP+引起的p-Akt和p-ERK1/2的降低,以及Cyt-c的上升。综上,佛手多糖对MPP+诱导SH-SY5Y细胞损伤具有保护作用,其机制可能是通过调节线粒体ROS的产生和Cyt-c的释放,进而维持线粒体稳态,激活Akt信号通路和ERK信号通路,抑制细胞的凋亡,从而起到保护作用。研究结果可为缓解帕金森病的发生发展提供理论依据,同时也能更好地开发和利用佛手资源。 展开更多
关键词 佛手多糖 提取纯化 MPP+ SH-Sy5Y细胞 保护作用
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miR-181a靶向Bcl-2调控氧糖剥夺/再灌注模型诱导的SH-SY5Y神经细胞凋亡 被引量:5
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作者 袁珊 杨玉莹 +2 位作者 许梅梅 胡广泽 高蕊 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第1期91-100,共10页
目的皮层是响应脑缺血缺氧最为敏感的组织之一,基于前期深度测序技术,我们筛选获得响应脑缺血缺氧应激的皮层区目标基因miR-181a及Bcl-2。本研究旨在SH-SY5Y细胞株氧糖剥夺/复糖复氧模型验证二者靶向调控关系及功能,明确miR-181a—Bcl-... 目的皮层是响应脑缺血缺氧最为敏感的组织之一,基于前期深度测序技术,我们筛选获得响应脑缺血缺氧应激的皮层区目标基因miR-181a及Bcl-2。本研究旨在SH-SY5Y细胞株氧糖剥夺/复糖复氧模型验证二者靶向调控关系及功能,明确miR-181a—Bcl-2调控网络在OGD/R诱导的神经细胞凋亡中的作用。方法采用线栓法构建大鼠缺血缺氧再灌注损伤模型,脑切片TTC染色及行为学评分法评估模型。应用qRT-PCR及Western Blot验证目标基因的表达。生物信息学分析miR-181a与Bcl-2的靶向结合位点并比对结合位点的保守性,双荧光素酶报告基因实验验证miR-181a与Bcl-2靶向结合的特异性。采用OGD/R细胞模型体外模拟脑缺血再灌注损伤,检测凋亡相关蛋白表达及Hoechst荧光染色评估细胞凋亡。结果大鼠大脑中动脉阻塞后miR-181a、Bcl-2表达变化趋势相反。RNA hybird软件预测miR-181a可结合Bcl-2的3′-UTR区,且结合区域高度保守。双荧光素酶报告基因实验发现,相对于Bcl-23′UTR-WT与mimic-NC共转染组,Bcl-23′UTR-WT与miR-181a mimic共转染后的荧光活性更低(P<0.001),而Bcl-2-Mut与miR-181a mimic共转染组,荧光活性无显著差异(P>0.05)。分别用miR-181a的模拟物及抑制物转染OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞,miR-181a可以抑制Bcl-2 mRNA及其蛋白的表达水平(P<0.001)。过表达miR-181a显著增加了SH-SY5Y细胞的凋亡(P<0.001),而抑制miR-181a表达可使SH-SY5Y细胞凋亡显著降低(P<0.001)。结论miR-181a可靶向结合Bcl-2,下调miR-181a可通过促进Bcl-2的表达进而抑制SH-SY5Y神经细胞OGD/R损伤诱导的细胞凋亡。 展开更多
关键词 miR-181a BCL-2 SH-Sy5Y OGD/R 凋亡
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灵孢多糖对过氧化氢致SH-SY5Y细胞凋亡及线粒体功能障碍的调控 被引量:1
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作者 李雁冰 王记委 +8 位作者 刘晓琴 郭敏芳 牛晓洁 孟涛 苏琴 王瀚斌 杨立志 马存根 尉杰忠 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第25期4041-4047,共7页
背景:目前研究证实,灵孢多糖可促进神经退行性相关疾病的神经再生。神经退行性疾病的发生与线粒体功能失调密切相关,但灵孢多糖对神经退行性疾病的细胞凋亡及线粒体功能的调控作用尚不明确。目的:探索灵孢多糖对过氧化氢诱导的SH-SY5Y... 背景:目前研究证实,灵孢多糖可促进神经退行性相关疾病的神经再生。神经退行性疾病的发生与线粒体功能失调密切相关,但灵孢多糖对神经退行性疾病的细胞凋亡及线粒体功能的调控作用尚不明确。目的:探索灵孢多糖对过氧化氢诱导的SH-SY5Y细胞凋亡及线粒体功能障碍的调控作用及机制。方法:SH-SY5Y细胞分为3组:对照组,过氧化氢组,灵孢多糖组。对照组细胞正常培养,过氧化氢组细胞用300μmol/L过氧化氢处理24 h,灵孢多糖组先用300μg/μL灵孢多糖干预一两个小时,然后加入300μmol/L过氧化氢干预24 h,干预结束后用JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,TUNEL染色试剂盒检测细胞凋亡情况,丙二醛试剂盒和超氧化物歧化酶试剂盒检测丙二醛和超氧化物歧化酶活性,免疫荧光染色法和Western blot法检测凋亡、线粒体动力学相关蛋白的表达。结果与结论:①与对照组相比,过氧化氢组线粒体膜电位和超氧化歧化酶活性显著降低,细胞凋亡率、丙二醇水平显著增高,差异均有显著性意义(P<0.05);与过氧化氢组相比,灵孢多糖组线粒体膜电位和超氧化歧化酶活性显著增高,细胞凋亡率、丙二醛水平显著下降,差异均有显著性意义(P<0.05);②与对照组相比,过氧化氢组促凋亡蛋白Bax和Caspase-3的表达显著增加,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达显著下降,差异均有显著性意义(P<0.05);与过氧化氢组相比,灵孢多糖组促凋亡蛋白Bax、Caspase-3的表达显著降低,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达显著增加,差异均有显著性意义(P<0.05);③与对照组相比,过氧化氢组线粒体分裂蛋白Fis1与线粒体动力学蛋白p-Drp1的表达均显著增高,线粒体融合蛋白OPA1、Mfn1、Mfn2的表达均显著降低,差异均有显著性意义(P<0.05);与过氧化氢组相比,灵孢多糖组线粒体分裂蛋白Fis1与线粒体动力学蛋白p-Drp1的表达显著降低,线粒体融合蛋白OPA1、Mfn1、Mfn2的表达显著增高,差异均有显著性意义(P<0.05);④以上结果证实,灵孢多糖可通过改善线粒体功能障碍以减轻过氧化氢诱导的SH-SY5Y细胞氧化应激损伤和细胞凋亡。 展开更多
关键词 灵孢多糖 SH-Sy5Y细胞 细胞凋亡 线粒体功能障碍 氧化应激
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异菝葜皂苷元对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的影响 被引量:1
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作者 范蕾 何萱 +2 位作者 茅洪维 张评奥 张永芳 《现代生物医学进展》 CAS 2024年第14期2601-2605,共5页
目的:探讨菝葜皂苷元对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的影响及机制。方法:采用MPP+处理人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞构建体外PD细胞模型。取对数生长期的SH-SY5Y细胞分为四组:Control组(正常对照组),MPP+组(模型组),异菝葜皂苷元组(10μM),MP... 目的:探讨菝葜皂苷元对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的影响及机制。方法:采用MPP+处理人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞构建体外PD细胞模型。取对数生长期的SH-SY5Y细胞分为四组:Control组(正常对照组),MPP+组(模型组),异菝葜皂苷元组(10μM),MPP++异菝葜皂苷元组(3 m M,10μM)。首先采用细胞增殖实验(CCK-8)检测异菝葜皂苷元作用的最佳浓度及对SH-SY5Y细胞活力的影响。采用AnnexinV-FITC/PI双染法检测异菝葜皂苷元对SH-SY5Y细胞凋亡率的影响,采用蛋白免疫印迹实验检测凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2的蛋白表达。结果:细胞活力实验确定10μM/m L的异菝葜皂苷元作为后续试验的添加浓度。与对照组相比,MPP+组细胞活力显著降低(P<0.001),细胞凋亡率显著升高(P<0.001),凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2表达显著升高(P<0.01)。相较于MPP+组,MPP++异菝葜皂苷元组细胞活力显著升高(P<0.001),细胞凋亡率显著降低(P<0.01),凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2表达显著升高降低(P<0.01)。结论:异菝葜皂苷元可以抑制MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,可能与其调节抗凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2的蛋白表达有关。 展开更多
关键词 异菝葜皂苷元 中草药 SH-Sy5Y 细胞凋亡 帕金森病
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老化黑碳颗粒诱导人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y炎症反应及机制
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作者 黄津 王田田 +2 位作者 安静 钟玉芳 尚羽 《上海大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期218-228,共11页
以人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y为研究对象,分析被臭氧氧化的黑碳(oxidized black carbon,OBC)颗粒引起的炎症反应以及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)和磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylin-ositol-3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein ... 以人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y为研究对象,分析被臭氧氧化的黑碳(oxidized black carbon,OBC)颗粒引起的炎症反应以及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)和磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylin-ositol-3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称Akt)信号通路的作用.结果显示:随着OBC颗粒染毒质量浓度的增加(5、10、20、40µg/mL),细胞内线粒体跨膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)水平逐渐下降,DNA损伤程度逐渐升高,呈现质量浓度和时间依赖性;细胞外泌白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)水平升高和细胞内肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)基因高表达,说明OBC颗粒会促进SH-SY5Y细胞发生炎症反应;细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平升高,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)基因表达量升高,且HO-1蛋白水平升高,说明细胞发生氧化应激;胞内NF-κB和PI3K/Akt通路相关蛋白显著变化,表明OBC颗粒激活了NF-κB和PI3K/Akt信号通路.综上,OBC颗粒可诱导SH-SY5Y细胞发生氧化应激造成DNA损伤,促进炎症反应,且对NF-κB和PI3K/Akt信号通路有重要调控作用. 展开更多
关键词 黑碳颗粒 SH-Sy5Y细胞 炎症反应 核因子-ΚB
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不同浓度阿达帕林诱导SH-SY5Y细胞的分化及凋亡
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作者 刘娜娜 张俊娇 +2 位作者 张樊 吴聪英 姜玉武 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期282-288,共7页
目的探讨不同浓度阿达帕林对人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞形态学及功能的影响,以及诱导细胞分化及凋亡的作用。方法将SH-SY5Y细胞分为对照组、低浓度(0.1μM和1μM)阿达帕林组、高浓度(10μM)阿达帕林组。采用延时显微拍摄技术观察S... 目的探讨不同浓度阿达帕林对人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞形态学及功能的影响,以及诱导细胞分化及凋亡的作用。方法将SH-SY5Y细胞分为对照组、低浓度(0.1μM和1μM)阿达帕林组、高浓度(10μM)阿达帕林组。采用延时显微拍摄技术观察SH-SY5Y细胞形态学变化,采用免疫荧光染色法检测神经元特异性标志物β-微管蛋白Ⅲ和成熟神经元标志物神经丝重链多肽表达,采用多电极阵列记录SH-SY5Y细胞的电生理特征,细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡情况。结果低浓度阿达帕林促进SH-SY5Y细胞突起形成,突起之间相互连接形成网络;低浓度阿达帕林处理SH-SY5Y细胞可见自发性放电活动。与对照组比较,1μM阿达帕林组SH-SY5Y细胞β-微管蛋白Ⅲ和神经丝重链多肽表达升高,高浓度阿达帕林组细胞凋亡水平升高(P<0.05)。结论低浓度阿达帕林可诱导SH-SY5Y细胞分化为成熟的功能性神经元,高浓度阿达帕林可诱导SH-SY5Y细胞凋亡。 展开更多
关键词 阿达帕林 分化 凋亡 SH-Sy5Y细胞
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Myod1通过调节lncRNA SNHG15和miR-24-3p对氧糖剥夺SH-SY5Y细胞增殖及凋亡的影响 被引量:2
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作者 冀方超 张晨昕 +3 位作者 任占军 潘云志 逯琦 孙兴元 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期989-999,共11页
目的:探讨肌源性分化蛋白1(Myod1)对氧糖剥夺(OGD)诱导的SH-SY5Y细胞增殖抑制和凋亡的影响,并阐明其作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测正常对照组研究对象和缺血性脑梗死组患者外周血及正常培养的SH-SY5Y细胞(对照组)... 目的:探讨肌源性分化蛋白1(Myod1)对氧糖剥夺(OGD)诱导的SH-SY5Y细胞增殖抑制和凋亡的影响,并阐明其作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测正常对照组研究对象和缺血性脑梗死组患者外周血及正常培养的SH-SY5Y细胞(对照组)和OGD细胞模型(OGD组)细胞中Myod1和长链非编码RNA(lncRNA)小核仁RNA宿主基因15(SNHG15)mRNA表达水平。分别采用si-Myod1、pcDNA3.0-Myod1、si-SNHG15、pcDNA3.0-SNHG15、si-NC、空载质粒(Vector)、miR-NC和miR-24-3p模拟物(miR-mimics)质粒转染SH-SY5Y细胞后,进行OGD处理,将SH-SY5Y细胞分为对照组、OGD组、OGD+Vector组、OGD+Myod1组、OGD+si-NC组、OGD+si-Myod1组、OGD+si-SNHG15组、OGD+si-SNHG15+Vector组、OGD+si-SNHG15+Myod1组、OGD+miR-NC组、OGD+miR-mimics组、OGD+miR-mimics+Vector组和OGD+miR-mimics+SNHG15组。采用CCK-8法检测各组细胞活性,采用5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)染色法检测各组EdU阳性细胞率,采用原位末端转移酶标记(TUNEL)法检测各组TUNEL阳性细胞率,采用Western blotting法检测各组细胞中裂解的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)、裂解的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(cleaved caspase-9)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平。染色质免疫共沉淀(CHIP)法评估Myod1和SNHG15之间的关联。双荧光素酶报告基因实验评估Myod1与SNHG15及SNHG15与miR-24-3p的靶向关系。结果:与正常对照组比较,缺血性脑梗死组患者外周血中Myod1和SNHG15 mRNA表达水平均升高(P<0.05)。与对照组比较,OGD组细胞中Myod1和SNHG15 mRNA表达水平均明显升高(P<0.05)。与OGD组比较,48和72 h时OGD+Myod1组细胞活性和EdU阳性细胞率均降低(P<0.01),TUNEL阳性细胞率升高(P<0.01);OGD+si-Myod1组细胞活性和EdU阳性细胞率均升高(P<0.01),TUNEL阳性细胞率降低(P<0.01)。Myod1可与SNHG15的启动子序列结合。SNHG15可吸附miR-24-3p,Myod1与SNHG15及SNHG15与miR-24-3p存在靶关系。敲低SNHG15后,与OGD组比较,48和72 h时OGD+si-SNHG15组细胞活性和EdU阳性细胞率均升高(P<0.01),TUNEL阳性细胞率降低(P<0.01),细胞中Bax、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白表达水平降低(P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.01);与OGD+si-SNHG15组比较,48和72 h时OGD+si-SNHG15+Myod1组细胞活性和EdU阳性细胞率降低(P<0.05),TUNEL阳性细胞率升高(P<0.05),细胞中Bax、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白表达水平升高(P<0.05),Bcl-2的蛋白表达水平降低(P<0.05)。过表达miR-24-3p和SNHG15后,与OGD组比较,48和72 h时OGD+miR-mimics组细胞活性和EdU阳性细胞率升高(P<0.01),TUNEL阳性细胞率降低(P<0.01),细胞中Bax、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白表达水平降低(P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.01);与OGD+miR-mimics组比较,48和72 h时OGD+miR-mimics+SNHG15组细胞活性和EdU阳性细胞率降低(P<0.05),TUNEL阳性细胞率升高(P<0.05),细胞中Bax、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白表达水平升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:Myod1可通过与SNHG15启动子区结合进而吸附miRNA-24,促进OGD诱导的SH-SY5Y细胞的增殖抑制和细胞凋亡。 展开更多
关键词 肌源性分化蛋白1 小核仁RNA宿主基因15 微小RNA-24-3p SH-Sy5Y细胞 脑梗死
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杨桃根提取物DMDD对α-synuclein PFFs所致分化SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及机制研究
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作者 粟璟曦 宋琼 +4 位作者 苏迎 周宇光 黄仁彬 王丽惠 邹春林 《广西医科大学学报》 CAS 2024年第10期1433-1441,共9页
目的:探讨不同浓度杨桃根提取物DMDD对α-突触核蛋白预制原纤维(α-Syn PFFs)所致分化SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及作用机制。方法:使用不同浓度DMDD作用于视黄酸分化的SH-SY5Y细胞,通过MTS测定细胞活力,确定DMDD作用于分化SH-SY5Y细胞... 目的:探讨不同浓度杨桃根提取物DMDD对α-突触核蛋白预制原纤维(α-Syn PFFs)所致分化SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及作用机制。方法:使用不同浓度DMDD作用于视黄酸分化的SH-SY5Y细胞,通过MTS测定细胞活力,确定DMDD作用于分化SH-SY5Y细胞的低、中、高浓度;使用不同浓度的DMDD处理5μg/mLα-Syn PFFs诱导的细胞损伤模型,采用Hoechst 33342染色和一氧化氮试剂盒分别检测细胞核损伤细胞数与细胞内一氧化氮产生量;采用蛋白质印迹法检测细胞内酪氨酸羟化酶(TH)、多聚腺苷酸二磷酸(PAR)及多聚腺苷酸二磷酸核糖酶-1(PARP-1)蛋白表达水平;采用免疫荧光技术检测细胞内129位丝氨酸磷酸化α-突触核蛋白(pS129-α-Syn)、磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)阳性细胞数及凋亡诱导因子(AIF)核易位细胞数。结果:Hoechst 33342染色结果显示,与α-Syn PFFs模型组比较,各浓度DMDD处理组出现细胞核损伤的细胞数明显减少(P<0.001);一氧化氮检测结果显示,与α-Syn PFFs模型组比较,各浓度DMDD处理组细胞一氧化氮生成量显著降低(P<0.01或P<0.001);蛋白质印迹法结果显示,与α-Syn PFFs模型组比较,高浓度DMDD处理组细胞TH蛋白表达水平明显升高(P<0.05),而中、高浓度DMDD处理组细胞PAR蛋白表达水平明显降低(P<0.05),高浓度DMDD处理组细胞PARP-1、Cleaved PARP-1蛋白表达水平明显降低(P<0.05);免疫荧光结果显示,与α-Syn PFFs模型组比较,中、高浓度DMDD处理组pS129-α-Syn阳性细胞数明显减少(P<0.05或P<0.01),各浓度DMDD处理组γH2AX阳性细胞数明显减少(P<0.01或P<0.001),AIF核易位细胞数也明显减少(P<0.01或P<0.001)。结论:DMDD可能通过抑制PARP-1/AIF通路介导的PARP-1依赖性死亡途径减轻α-Syn PFFs所致分化SH-SY5Y细胞损伤。 展开更多
关键词 杨桃根 DMDD α-突触核蛋白预制原纤维 PARP-1依赖性细胞死亡 SH-Sy5Y
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