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化学诱导激活型拟南芥突变体库的构建及分析 被引量：25
1
作者 张健 徐金相 +12 位作者 孔英珍 纪振动 王兴春 安丰英 李超 孙加强 张素芝 杨晓辉 牟金叶 刘新仿 李家洋 薛勇彪 左建儒 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1082-1088,共7页
利用化学诱导激活XVE(LexA-VP16-ER)系统构建了一个包含40000余个独立转化株系的拟南芥突变体库,并对其中的18000余个株系进行了初步的遗传学和表型分析鉴定。卡那霉素抗性分离比表明,51.6%的株系为单位点插入株系,T-DNA插入的平均拷贝... 利用化学诱导激活XVE(LexA-VP16-ER)系统构建了一个包含40000余个独立转化株系的拟南芥突变体库,并对其中的18000余个株系进行了初步的遗传学和表型分析鉴定。卡那霉素抗性分离比表明,51.6%的株系为单位点插入株系,T-DNA插入的平均拷贝数为每株系1.38个。部分T1代和T2代植株表现出了可见的形态变异,包括下胚轴长度、根长度、植株大小和颜色、叶子颜色和形态、开花时间、种皮颜色及结实情况等。对数个代表性突变株系表型及T-DNA插入位点侧翼序列进行了分析,结果表明突变体的表型是由于T-DNA的插入造成的,而且这些突变体中包括前人发现的AP2和AGAMOUS的等位基因。由于T-DNA标记或相邻的基因可被XVE系统诱导性的激活,或被T-DNA破坏导致功能缺失,该突变体库可以用于大规模筛选鉴定功能缺失性和功能获得性突变体。 展开更多
关键词 拟南芥 诱导性激活 突变体 T—DNA xve
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烟草化学诱导表达系统的建立 被引量：5
2
作者 代丽娟 郑唐春 +3 位作者 刘彩霞 刘轶 由香玲 曲冠证 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期917-924,共8页
化学诱导表达系统对植物功能基因的研究及植物基因工程应用有重要意义。XVE是以雌激素为基础的用于诱导转基因植物中目的基因表达的一种系统,能够在可调控方式下诱导基因的表达。目前,以烟草为遗传转化材料进行XVE系统研究的详细报道还... 化学诱导表达系统对植物功能基因的研究及植物基因工程应用有重要意义。XVE是以雌激素为基础的用于诱导转基因植物中目的基因表达的一种系统,能够在可调控方式下诱导基因的表达。目前,以烟草为遗传转化材料进行XVE系统研究的详细报道还未见发表。本文以烟草作为研究对象,利用PCR技术从本实验保存的质粒pROKII-GFP中扩增出GFP基因。构建雌激素诱导型植物表达载体(p ER8-GFP)并利用农杆菌介导的叶盘法将外源基因导入野生型烟草中;经潮霉素抗性筛选出转化植株后,用PCR鉴定出阳性转化植株,将阳性转化植株利用不同浓度和不同时间的雌激素进行处理,并结合定量PCR和Night SHADE植物活体成像系统对转基因植株的表达水平进行检测。结果表明诱导p ER8-GFP载体在烟草中表达的最适雌激素浓度为25μmol·L^(-1),最适时间为48 h;同时在烟草胚轴与根尖细胞中检测到荧光信号,表明XVE化学诱导系统在烟草中也可以高效、严格的依赖雌激素的诱导来控制目的基因表达。本研究将为烟草相关的化学诱导表达研究提供技术支持与解决方案。 展开更多
关键词 雌激素诱导 基因表达 xve 烟草
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转基因植物高效删除标记基因的实用型双元转化载体 被引量：5
3
作者 李霞 翁海波 +2 位作者 韩绍印 席宇 雍克兰 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期550-554,共5页
利用雌激素诱导的Cre/loxPDNA重组系统,构建用于转基因植物删除标记基因的实用新型载体,将所有非目的基因放于两同向loxP位点间,多克隆位点位于两loxP位点外,可插入目的基因,载体设计非常实用。在插入目的基因GUS后转化烟草,雌激素诱导... 利用雌激素诱导的Cre/loxPDNA重组系统,构建用于转基因植物删除标记基因的实用新型载体,将所有非目的基因放于两同向loxP位点间,多克隆位点位于两loxP位点外,可插入目的基因,载体设计非常实用。在插入目的基因GUS后转化烟草,雌激素诱导,分析诱导前后DNA的重组情况、不同时间基因转录水平,以及目的基因在诱导前后的表达。结果显示,诱导后染色体DNA实现了高效重组,非目的基因片段消失,目的基因GUS在诱导后表达正常。 展开更多
关键词 Cre/loxP 雌激素诱导 xve 无标记转基因植物
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狗蔷薇RaWUS基因的超量表达诱导转基因烟草根尖形成不定芽 被引量：7
4
作者 姜福星 刘凤栾 赵梁军 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第12期43-52,共10页
WUSCHEL是植物干细胞命运的决定基因,在植物发育过程中WUSCHEL基因的表达决定着干细胞的形成和器官的发生。从狗蔷薇的类原球茎中克隆出其同源基因;经过对其进行蛋白质序列比对和系统发育分析,将其命名为RaWUS基因。构建在XVE系统下的... WUSCHEL是植物干细胞命运的决定基因,在植物发育过程中WUSCHEL基因的表达决定着干细胞的形成和器官的发生。从狗蔷薇的类原球茎中克隆出其同源基因;经过对其进行蛋白质序列比对和系统发育分析,将其命名为RaWUS基因。构建在XVE系统下的化学调控的表达载体。在该系统下,RaWUS基因的超量表达能诱导转基因烟草根尖形成不定芽;同时显微观察表明,根部的皮层中有圆球形的分生组织干细胞团的产生。结果表明:RaWUS基因的过量表达能够促使根的皮层中薄壁细胞转变成为分生组织干细胞而形成不定芽在根尖异位发生,说明其能够在植物的根尖中诱导茎尖分生组织干细胞的活性和发育的可塑性。 展开更多
关键词 狗蔷薇 类原球茎 RaWUS基因 xve化学调控系统 干细胞
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超量表达细胞D型周期蛋白CYCD3;1影响拟南芥根的发育 被引量：6
5
作者 李芳 许颖 +2 位作者 张姣 殷姗 喻富根 《植物生理学通讯》 CSCD 北大核心 2008年第3期431-435,共5页
用雌激素诱导表达的启动子(XVE启动子)超量表达CYCD3;1的结果表明CYCD3;1的超量表达不仅抑制拟南芥初生根的伸长,而且还抑制初生根对重力刺激的反应能力。
关键词 拟南芥 xve启动子 CYCD3 1 根的发育 向重力性反应
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