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磷脂酰肌醇3激酶抑制剂Wortmannin对克罗恩病炎症大鼠的作用研究
1
作者 钟骏桥 陈恩 +2 位作者 陈青 易建中 方传发 《当代医学》 2025年第8期1-8,共8页
目的研究磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylin-ositol-3-kinase,PI3K)抑制剂Wortmannin通过PI3K/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路对克罗恩病(Crohn disease,CD)炎症大鼠的作用与机理。方法选取10周龄无特定病原体级健康雄性Wistar... 目的研究磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylin-ositol-3-kinase,PI3K)抑制剂Wortmannin通过PI3K/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路对克罗恩病(Crohn disease,CD)炎症大鼠的作用与机理。方法选取10周龄无特定病原体级健康雄性Wistar大鼠60只,建立CD大鼠模型,采用随机数字表法分为C1、C2、W1、W2、W3组,每组12只,分别采用0.9%氯化钠溶液、5%二甲基亚砜(dimethyl surfoxide,DMSO)及0.25、0.5、1.0 mg/kg Wortmannin+5%DMSO溶液腹腔注射处理12、24、48、72 h;并选取60只体质量等一般状况匹配的健康正常大鼠作为对照,采用随机数字表法分为CON1、CON2、CON3、CON4和CON5组,每组12只,处理方法及时间同上。各组均于处理12、24、48、72 h后,进行疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分、结肠总长度测量,苏木精-伊红染色观察饲养72 h后结肠组织病理学改变,采用酶联免疫吸附法检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)含量,逆转录-聚合酶链式反应检测结肠组织PI3K mRNA表达量,蛋白质免疫印迹法检测PI3K、Akt、磷酸化Akt(phosphorylated Akt,p-Akt)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、TNF-α、IL-1、IL-6蛋白表达量,采用钙卫蛋白检测试剂盒测定粪便钙卫蛋白含量。结果饲养12、24、48、72 h,CON1、CON2、CON3、CON4、CON5组间及C1、C2组间DAI评分、结肠总长度及血清TNF-α、IL-1、IL-6含量和粪便钙卫蛋白含量比较差异均无统计学意义;饲养24、48、72 h,W1、W2、W3组DAI评分均低于C2组,且W3组饲养24 h DAI评分低于W2组,W2组饲养48、72 h DAI评分均低于W1组(P<0.05);饲养48、72 h,W1、W2、W3组结肠总长度均长于C2组,且W2、W3组均长于W1组,W3组长于W2组,W3组饲养12 h及W2、W3组饲养24 h结肠总长度均长于C2组,W3组饲养24 h长于W2组,差异有统计学意义(P<0.05)。饲养72 h,与C2组比较,W1、W2、W3组结肠组织病理学炎症表现依次好转。饲养12、24、48、72 h,与C2组比较,血清中TNF-α、IL-1、IL-6含量依次降低(P<0.05)。饲养72 h,CON1、CON2、CON3、CON4、CON5组及C1、C2组结肠组织中PI3K mRNA和PI3K、p-Akt、NF-κB、TNF-α、IL-1、IL-6蛋白表达量比较差异无统计学意义;与C2组比较,W1、W2、W3组72 h结肠组织PI3K mRNA,PI3K、p-Akt、NF-κB、TNF-α、IL-1、IL-6蛋白表达量依次降低,Akt蛋白表达量依次升高(P<0.05)。与C2组比较,W1、W2、W3组饲养12、24、48、72 h大鼠粪便中钙卫蛋白含量降低(P<0.05)。结论PI3K抑制剂Wortmannin可改善CD大鼠炎症表现,具有一定治疗作用,其机理可能是通过阻断PI3K/Akt通路,降低下游炎症因子水平,从而发挥抗炎效果。 展开更多
关键词 克罗恩病炎症大鼠 磷脂酰肌醇3激酶 蛋白激酶B 信号通路 wortmannin
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Wortmannin通过抑制癫痫大鼠海马自噬活性发挥神经保护作用 被引量：16
2
作者 曹丽丽 董艳 +3 位作者 徐婧婧 林幽町 迟令懿 迟兆富 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1584-1588,共5页
目的:探讨癫痫大鼠海马自噬活性的变化及自噬抑制剂wortmannin(WM)对致痫大鼠海马神经元的保护作用。方法:实验大鼠分为对照组、致痫2 h、8 h、16 h、24 h、72 h组和WM干预组。应用HE染色和Nissl染色观察癫痫大鼠海马神经元损伤的变化... 目的:探讨癫痫大鼠海马自噬活性的变化及自噬抑制剂wortmannin(WM)对致痫大鼠海马神经元的保护作用。方法:实验大鼠分为对照组、致痫2 h、8 h、16 h、24 h、72 h组和WM干预组。应用HE染色和Nissl染色观察癫痫大鼠海马神经元损伤的变化。免疫印迹检测海马组织微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ/LC3Ⅰ的比值作为自噬活性的指标。结果:LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值在大鼠癫痫发作2 h时开始升高,24 h达到高峰,持续升高至少72 h。致痫24 h时海马CA1区出现明显神经元损伤和丢失。WM干预组CA1区存活神经元数目(100.88±18.73)显著高于癫痫组(70.16±5.09)(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值低于癫痫组(P<0.05)。结论:癫痫发作导致的海马损伤时存在自噬激活现象;WM通过抑制自噬活性减轻癫痫发作所致的海马损伤,具有神经保护作用。 展开更多
关键词 癫痫 自吞噬作用 微管相关蛋白1轻链3 海马 wortmannin
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wortmannin对重症急性胰腺炎大鼠胰肝损伤的保护作用 被引量：5
3
作者 李丙所 蔡文科 +4 位作者 任彦顺 党军强 周红兵 窦科峰 赵青川 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 2007年第10期976-978,共3页
目的探讨wortmannin预处理对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肝损伤的保护作用及其可能机制。方法健康成年SD大鼠54只,随机分为对照组(C组)、SAP组(P组)和SAP+wortmannin组(PW组),每组18只。除C组以生理盐水代牛磺胆酸钠外,另两组逆行胆胰管注... 目的探讨wortmannin预处理对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肝损伤的保护作用及其可能机制。方法健康成年SD大鼠54只,随机分为对照组(C组)、SAP组(P组)和SAP+wortmannin组(PW组),每组18只。除C组以生理盐水代牛磺胆酸钠外,另两组逆行胆胰管注射50g/L牛磺胆酸钠制备SAP模型。各组分别于术后3,6,12h检测血清中TNF-α,ALT,AST水平及肝组织中NF-κB活性,观察肝组织及胰腺组织的病理变化。结果P组血清中TNF-α,ALT,AST水平及肝组织中NF-κB活性(积分灰度)均显著高于C组(P<0.01);胰腺、肝组织病理损伤随病情进展而逐渐加重。PW组较C组各项指标均升高,但较P组明显降低(P<0.01);且胰腺、肝组织病理损伤亦较P组减轻。结论wort-mannin预处理对SAP大鼠胰肝损伤有一定的保护作用,其机制可能与其抑制了NF-κB的活化、减少TNF-α等多种炎症因子的释放有关。 展开更多
关键词 胰腺炎 急性坏死性/病理学 wortmannin NF—KB 肝损伤
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Wortmannin对胰腺癌细胞增殖和生存的影响 被引量：3
4
作者 赵闻雨 徐泽宽 +2 位作者 朱毅 吕京寰 苗毅 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期509-512,F0004,共5页
目的:观察Wortmannin对胰腺癌PANC-1、CFPAC-1细胞株增殖、凋亡的影响,探讨Wortmannin抗肿瘤的作用机制。方法:采用噻唑盐比色法(MTT)、平板克隆试验、流式细胞分析测定Wortmannin对PANC-1、CFPAC-1细胞增殖、凋亡的影响。结果:用不同浓... 目的:观察Wortmannin对胰腺癌PANC-1、CFPAC-1细胞株增殖、凋亡的影响,探讨Wortmannin抗肿瘤的作用机制。方法:采用噻唑盐比色法(MTT)、平板克隆试验、流式细胞分析测定Wortmannin对PANC-1、CFPAC-1细胞增殖、凋亡的影响。结果:用不同浓度Wortmannin培养CFPAC-1细胞24、48、72h后,其最大增殖抑制率分别为:10.6%、30.3%、18.9%(P<0.05),且呈明显的计量依赖效应,而Wortmannin对PANC-1细胞无明显抑制作用。Wortmannin可明显抑制CFPAC-1细胞克隆的形成(P<0.01),对PANC-1细胞克隆形成也有一定的抑制作用(P<0.05)。但Wortmannin对两株细胞均无诱导凋亡的作用。结论:Wortmannin通过阻断PI3K/Akt信号通路抑制胰腺癌细胞株增殖,达到抗肿瘤的作用;不同的细胞系对Wortmannin的敏感性不同。 展开更多
关键词 wortmannin 胰腺癌 PI3K AKT
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PI3K特异性抑制剂Wortmannin和APP17肽对SY5Y细胞胰岛素信号转导通路的作用 被引量：2
5
作者 张景燕 孟艳 +2 位作者 王蓉 姬志娟 盛树力 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期429-431,共3页
目的利用PI3K的特异性抑制剂Wortmannin阻断体外培养的人神经母细胞瘤株SY5Y细胞的存活信号转导通路,观察β淀粉样肽前体蛋白(APP)17肽对SY5Y细胞生长的影响及其作用机制。方法体外培养SY5Y细胞,分为对照组、Wortmannin组、APP17肽组、A... 目的利用PI3K的特异性抑制剂Wortmannin阻断体外培养的人神经母细胞瘤株SY5Y细胞的存活信号转导通路,观察β淀粉样肽前体蛋白(APP)17肽对SY5Y细胞生长的影响及其作用机制。方法体外培养SY5Y细胞,分为对照组、Wortmannin组、APP17肽组、APP17肽+Wortmannin组、葡萄糖组、葡萄糖+APP17肽组、葡萄糖+Wortmannin+APP17肽组,观察各组细胞的噻唑蓝(MTT)代谢率、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、细胞轴突长度、胞体面积。结果(1)APP17肽可促进SY5Y细胞MTT代谢率升高、LDH漏出率降低、细胞轴突长度和胞体面积增加,但经Wortmannin作用后,其作用减弱。(2)APP17肽对高糖环境下的SY5Y细胞也有上述作用,且经Wortmannin作用后其作用减弱。结论APP17肽能通过激活胰岛素的PI3K信号转导通路发挥其神经保护作用。 展开更多
关键词 β淀粉样肽前体蛋白 胰岛素 wortmannin
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Wortmannin对凝血酶诱导的人血小板聚集和磷脂酰肌醇三磷酸累积的影响 被引量：3
6
作者 刘文 黄石安 梁念慈 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第4期620-623,共4页
Ｗ ｏｒｔｍ ａｎｎｉｎ 是肌醇磷脂３激酶的不可逆抑制剂．用比浊法分析血小板聚集；肌醇磷脂用３２ Ｐ磷酸钠标记，用氯仿和甲醇抽提，用 Ｔ Ｌ Ｃ和放射自显影分析，研究了 Ｗ ｏｒｔｍ ａｎｎｉｎ 对凝血酶诱导的人血小板... Ｗ ｏｒｔｍ ａｎｎｉｎ 是肌醇磷脂３激酶的不可逆抑制剂．用比浊法分析血小板聚集；肌醇磷脂用３２ Ｐ磷酸钠标记，用氯仿和甲醇抽提，用 Ｔ Ｌ Ｃ和放射自显影分析，研究了 Ｗ ｏｒｔｍ ａｎｎｉｎ 对凝血酶诱导的人血小板聚集和磷脂酰肌醇三磷酸（ Ｐ Ｉ Ｐ３）累积的影响．结果显示， Ｗ ｏｒｔｍ ａｎｎｉｎ 对凝血酶（５００ Ｕ／ Ｌ）诱导的人血小板聚集有抑制作用，这种抑制作用在一定范围内呈剂量依赖关系（２０～８０μｍ ｏｌ／ Ｌ）．凝血酶（５００ Ｕ／ Ｌ）诱导人血小板 Ｐ Ｉ Ｐ３ 的累积， Ｗ ｏｒｔｍ ａｎｎｉｎ 对此累积有抑制作用，这种抑制作用在一定范围内呈剂量依赖关系（４０～１６０ μｍ ｏｌ／ Ｌ）．结果提示： Ｗ ｏｒｔｍ ａｎｎｉｎ 可能是潜在的抗血小板药物，抑制凝血酶诱导的人血小板聚集主要与其抑制 Ｐ Ｉ Ｐ３ 的累积有关．结果也提示，肌醇磷脂３激酶在血小板活化中起重要作用． 展开更多
关键词 wortmannin 血小板聚集 磷脂酰肌醇 三磷酸
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Wortmannin对急性肺损伤小鼠肺组织IL-1β和TNF-α表达的影响 被引量：6
7
作者 金龙 吴晓兰 +1 位作者 周昕欣 马腾 《解剖科学进展》 CAS 2014年第4期352-355,共4页
目的研究Wortmannin对急性肺损伤模型小鼠肺组织白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法 30只昆明小鼠随机分为正常对照组、急性肺损伤组和Wortmannin处理组。采用腹腔注射LPS(10 mg/kg)建立小鼠急性肺损伤模型,... 目的研究Wortmannin对急性肺损伤模型小鼠肺组织白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法 30只昆明小鼠随机分为正常对照组、急性肺损伤组和Wortmannin处理组。采用腹腔注射LPS(10 mg/kg)建立小鼠急性肺损伤模型,对照组腹腔注射同体积的生理盐水,Wortmannin处理组则于造模前2 h腹腔注射Wortmannin(1.4 mg/kg)。LPS注射后6 h处死大鼠,计算肺组织湿/干重(W/D)比值,Western blot方法检测三组小鼠肺组织内IL-1β和TNF-α蛋白的表达变化,RT-PCR方法检测三组小鼠肺组织内IL-1βmRNA和TNF-αmRNA的表达变化。结果急性肺损伤组小鼠肺组织IL-1β和TNF-α蛋白及mRNA表达水平显著上升,显著高于正常对照组(<0.05);相比于急性肺损伤组小鼠,Wortmannin处理组小鼠肺组织IL-1β和TNF-α蛋白及mRNA表达水平显著降低(<0.05)。结论 Wortmannin能抑制急性肺损伤小鼠肺组织IL-1β和TNF-α表达。 展开更多
关键词 急性肺损伤 wortmannin 白介素-1Β 肿瘤坏死因子-α 肺 昆明小鼠
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脑室预注射Wortmannin对沙土鼠海马缺血耐受的影响 被引量：2
8
作者 冯美江 丁新生 吴祖舜 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期75-76,79,共3页
目的:探讨磷脂酰肌醇-3(羟基)激酶(PI-3K)与沙土鼠海马缺血耐受的关系。方法:沙土鼠24只,随机分为A(2min缺血组)、B(5min缺血组)、C(2min缺血+5min缺血组)、D(假手术组)、E(脑室预注射PBS组)、F(脑室预注射Wortmannin组)6组,每组4只。TU... 目的:探讨磷脂酰肌醇-3(羟基)激酶(PI-3K)与沙土鼠海马缺血耐受的关系。方法:沙土鼠24只,随机分为A(2min缺血组)、B(5min缺血组)、C(2min缺血+5min缺血组)、D(假手术组)、E(脑室预注射PBS组)、F(脑室预注射Wortmannin组)6组,每组4只。TUNEL法检测海马CA1区锥体细胞凋亡。结果:B组锥体细胞凋亡数较A、C、E3组显著增多,F组凋亡细胞数较C组明显增多。D组未见明显凋亡细胞。结论:脑室预注射Wortmannin可抑制海马CA1区的缺血耐受现象,PI-3K可能参与介导了沙土鼠海马缺血耐受。 展开更多
关键词 磷脂酰肌醇-3(羟基)激酶 wortmannin 缺血耐受 凋亡
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H89和wortmannin对霍乱毒素促进远端视神经损伤后视网膜节细胞再生的影响 被引量：3
9
作者 马宁芳 李海标 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期319-321,共3页
目的:探讨H89和wortamnnin对霍乱毒素(CTx)促进成年金黄地鼠远端视神经受损后视网膜节细胞(RGCs)再生的影响。方法:远端切断视神经并对接一段自体坐骨神经(AG),玻璃体内注射CTx及H89、wortman—nin。动物随机分为AG组;AG+CTx组;AG+CTx+... 目的:探讨H89和wortamnnin对霍乱毒素(CTx)促进成年金黄地鼠远端视神经受损后视网膜节细胞(RGCs)再生的影响。方法:远端切断视神经并对接一段自体坐骨神经(AG),玻璃体内注射CTx及H89、wortman—nin。动物随机分为AG组;AG+CTx组;AG+CTx+H89组;AG十CTx+wortmannin组,4 w后粒蓝逆行标记再生的RGCs,荧光显微镜下观察计数。结果:AG十CTx组再生的视网膜节细胞平均数(43.2)明显高出AG组(2.6),AG+CTx+H89组平均再生数为3.2,与AG组相近,明显低于AG+CTx组。AG+CTx+W组平均再生数为9.6,明显高于AG组,低于AG+CTx组。结论:H89和wortmannin可部分抑制CTx对视神经远端切断后视网膜节细胞再生的促进作用。 展开更多
关键词 H89 wortmannin 霍乱毒素 远端视神经损伤 视网膜节细胞 再生
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wortmannin对重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的保护作用 被引量：1
10
作者 蔡文科 窦科峰 +3 位作者 赵青川 王玉同 党军强 周红兵 《第四军医大学学报》 北大核心 2007年第17期1566-1569,共4页
目的:观察磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)抑制剂wort-mannin对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺损伤的保护作用并探讨其机制.方法:将健康成年SD大鼠54只随机分为对照组、SAP组和SAP+wortmannin组,每组18只,逆行胆胰管注射50g/L牛磺胆酸钠制备SAP模型... 目的:观察磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)抑制剂wort-mannin对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺损伤的保护作用并探讨其机制.方法:将健康成年SD大鼠54只随机分为对照组、SAP组和SAP+wortmannin组,每组18只,逆行胆胰管注射50g/L牛磺胆酸钠制备SAP模型.检测血清TNF-α水平、肺组织湿/干质量比值、肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量;观察肺组织及胰腺组织的病理变化.结果:SAP组较对照组血清TNF-α水平、肺组织湿/干质量比值、BALF蛋白含量及肺组织MPO活性均显著升高(P<0.01),胰腺、肺组织病理损伤随病情进展而逐渐加重;SAP+wortmannin组较对照组各项指标均升高,但较SAP组均明显降低(P<0.01),胰腺、肺组织病理损伤较SAP组减轻.结论:wortmannin对SAP大鼠肺损伤有一定的保护作用,其机制可能与其抑制了中性粒细胞内PI3K信号转导通路的活化,使多种炎症细胞的活化和TNF-α等炎症因子的释放受到抑制有关. 展开更多
关键词 重症急性胰腺炎 wortmannin 中性粒细胞 磷脂酰肌醇3激酶 肺/损伤
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辐射增敏剂Wortmannin促进组蛋白去乙酰化酶抑制剂诱导的MOLT-4细胞凋亡 被引量：1
11
作者 楼炜 刘斌 宋宜 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 2013年第12期1280-1285,共6页
目的探讨选择性磷脂酰肌醇激酶相关蛋白激酶家族(PIKKs)的小分子抑制剂Wortmannnin对组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDIs)诱导的细胞凋亡的影响,并探讨DNA损伤功能信号级联在HDIs类药物抗肿瘤效应中的功能机制。方法流式细胞术分析加药后不同... 目的探讨选择性磷脂酰肌醇激酶相关蛋白激酶家族(PIKKs)的小分子抑制剂Wortmannnin对组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDIs)诱导的细胞凋亡的影响,并探讨DNA损伤功能信号级联在HDIs类药物抗肿瘤效应中的功能机制。方法流式细胞术分析加药后不同时间点的细胞周期分布和细胞凋亡情况;荧光显微镜下观察用药后的细胞核形态;免疫印迹法检测加药前后Caspase-2,Caspase-3,Caspase-7和Survivin蛋白表达情况。结果低剂量Wortmannin单独作用对肿瘤细胞生存率未见显著影响,但能够激活G1/S细胞周期阻滞、抑制TSA引发的G2/M阻滞、并显著促进肿瘤细胞凋亡。在此过程中,Wortmannin促进凋亡效应分子Caspase-2,Caspase-3和Caspase-7的激活并抑制Survivn的表达。结论 PIKKs家族的小分子抑制剂Wortmannnin通过下调Survivin并促进Caspase信号级联而促进TSA诱导的肿瘤细胞凋亡。 展开更多
关键词 wortmannin 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 曲古抑菌素A 肿瘤 凋亡
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H-89和wortmannin对forskolin和IBMX促进受损视网膜节细胞再生作用的影响 被引量：1
12
作者 梁玉香 李海标 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期45-48,共4页
目的　探讨forskolin和IBMX促进受损视网膜节细胞 (RGCs)再生的作用机制。　方法　采用荧光逆行示踪标记术和自体坐骨神经移植术 ,研究蛋白激酶A(PKA)抑制剂H 89或 /和PI3 K特异抑制剂wortmannin玻璃体内注射对forskolin和IBMX促进成年... 目的　探讨forskolin和IBMX促进受损视网膜节细胞 (RGCs)再生的作用机制。　方法　采用荧光逆行示踪标记术和自体坐骨神经移植术 ,研究蛋白激酶A(PKA)抑制剂H 89或 /和PI3 K特异抑制剂wortmannin玻璃体内注射对forskolin和IBMX促进成年金黄地鼠受损RGCs再生的影响。结果　H 89和wortmannin均可部分抑制forskolin和IBMX对受损RGCs的促再生作用 ,wortmannin的抑制作用更大 ;两药联合应用 ,可完全抑制forskolin和IB MX对受损RGCs的促再生作用。　结论　forskolin和IBMX可能是通过PKA CREB和PI3 K 展开更多
关键词 再生 H-89 wortmannin FORSKOLIN IBMX 视网膜节细胞 金黄地鼠
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Wortmannin对急性肺损伤小鼠肺组织IL-6和IL-10表达的影响 被引量：1
13
作者 金龙 吴晓兰 +1 位作者 周昕欣 马腾 《解剖学研究》 CAS 2014年第3期180-183,共4页
目的研究Wortmannin对急性肺损伤模型小鼠肺组织白介素-6(IL-6)和白介素-10(IL-10)表达的影响。方法30只昆明小鼠随机分为正常对照组、急性肺损伤组和Wortmannin处理组。采用腹腔注射LPS(10 mg/kg)建立小鼠急性肺损伤模型,对照组腹腔注... 目的研究Wortmannin对急性肺损伤模型小鼠肺组织白介素-6(IL-6)和白介素-10(IL-10)表达的影响。方法30只昆明小鼠随机分为正常对照组、急性肺损伤组和Wortmannin处理组。采用腹腔注射LPS(10 mg/kg)建立小鼠急性肺损伤模型,对照组腹腔注射同体积的生理盐水,Wortmannin处理组则于造模前2 h腹腔注射Wortmannin(1.4 mg/kg)。LPS注射后6 h处死大鼠,计算肺组织湿/干重(w/D)比值,Western blot方法检测三组小鼠肺组织内IL-6和IL-10的表达变化,RT-PCR方法检测三组小鼠肺组织内IL-6 mRNA和IL-10 mRNA的表达变化。结果急性肺损伤组小鼠肺组织IL-6蛋白表达显著上升,平均光密度值为(0.38±0.03),显著高于正常对照组的表达(0.09±0.01),P<0.05;相比于急性肺损伤组小鼠,Wortmannin处理组小鼠肺组织IL-6蛋白表达显著降低,光密度值为(0.21±0.02),P<0.05;急性肺损伤组小鼠肺组织IL-10蛋白表达显著降低,平均光密度值为(0.11±0.01),显著低于正常对照组的表达(0.21±0.01),P<0.05;相比于急性肺损伤组小鼠,Wortmannin处理组小鼠肺组织IL-10蛋白表达显著升高,光密度值为(0.18±0.02),P<0.05。RT-PCR方法检测三组小鼠IL-6mRNA时发现,Wortmannin处理组小鼠肺组织IL-6 mRNA的平均光密度值为(0.37±0.03),显著低于急性肺损伤组小鼠肺组织IL-6 mRNA的的平均光密度值为(0.26±0.02),P<0.05;RT-PCR方法检测三组小鼠IL-10mRNA时发现,Wortmannin处理组小鼠肺组织IL-10 mRNA的平均光密度值为(0.27±0.02),显著高于急性肺损伤组小鼠肺组织IL-10 mRNA(0.18±0.02)的表达,P<0.05。结论 Wortmannin能抑制急性肺损伤小鼠肺组织IL-6表达,上调IL-10的表达。 展开更多
关键词 急性肺损伤 wortmannin 白介素-6 白介素-10 肺 小鼠
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PKB在人上皮性卵巢癌中的表达及P13K抑制剂Wortmannin对细胞增殖的影响 被引量：1
14
作者 郭科军 张颐 庞丽 《解剖科学进展》 CAS 2008年第2期212-215,共4页
目的检测蛋白激酶B(PKB)在上皮性卵巢癌组织中的表达,以及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)特异性抑制剂wortmannin对卵巢癌细胞株CAOV3细胞增殖的影响,探讨PI3K/PKB信号传导通路在卵巢癌发生发展中的意义。方法应用RT-PCR和western印迹方法对50... 目的检测蛋白激酶B(PKB)在上皮性卵巢癌组织中的表达,以及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)特异性抑制剂wortmannin对卵巢癌细胞株CAOV3细胞增殖的影响,探讨PI3K/PKB信号传导通路在卵巢癌发生发展中的意义。方法应用RT-PCR和western印迹方法对50例上皮性卵巢癌组织PKB的表达进行了分析。通过MTT比色法,观察wortmannin对卵巢癌细胞增殖的影响。流式细胞仪测定wortmannin对细胞周期的影响。结果PKBmRNA在上皮性卵巢癌组织中表达,与正常卵巢、卵巢瘤样病变及卵巢良性肿瘤相比,无显著差异(P>0.05);western印迹检测见上皮性卵巢癌组织中磷酸化PKB蛋白条带深于正常卵巢、卵巢瘤样病变及卵巢良性肿瘤组织,量化后比较差异显著(P<0.05),且在Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌中的表达水平明显高于Ⅰ～Ⅱ期(P<0.0 5)。加入wortmannin后,CAOV3细胞株增殖比明显下降,其增殖下降程度与wortmannin浓度呈显著正相关,在wortmannin的作用下,由GO+G1期进入S和G2+M期的细胞明显减少,并在一定浓度范围内成剂量依赖性,与对照组比较,差异显著。结论磷酸化PKB蛋白与上皮性卵巢癌的发生、发展、浸润呈正相关,wortmannin可有效阻滞此传导途径。 展开更多
关键词 蛋白激酶B wortmannin 上皮性卵巢癌
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Wortmannin对表皮生长因子诱导的血管平滑肌细胞增殖及迁移的影响 被引量：3
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作者 陈龙菊 卢进昌 +4 位作者 姜铧 梁江红 刘志祥 张正洪 王汉琴 《郧阳医学院学报》 2008年第5期398-400,404,共4页
目的:研究PI3K抑制剂Wortmannin对表皮生长因子(EGF)诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖、迁移及磷酸化Akt蛋白表达的影响,旨在探讨EGF诱导的VSMCs增殖和迁移的信号通路。方法:以低血清培养的VSMCs作为对照,采用细胞计数、划痕损伤实... 目的:研究PI3K抑制剂Wortmannin对表皮生长因子(EGF)诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖、迁移及磷酸化Akt蛋白表达的影响,旨在探讨EGF诱导的VSMCs增殖和迁移的信号通路。方法:以低血清培养的VSMCs作为对照,采用细胞计数、划痕损伤实验和WesternBlotting技术,观察Wortmannin对EGF诱导的VSMCs增殖、迁移及磷酸化Akt蛋白表达的影响。结果:干预后24h,EGF组VSMCs增殖、迁移较对照组明显增强,同时磷酸化Akt蛋白的表达平行增高。而Wortmannin则明显抑制了VSMCs的增殖、迁移和磷酸化Akt蛋白的表达。结论:PI3K/Akt信号通路参与了EGF诱导的VSMCs增殖和迁移。 展开更多
关键词 wortmannin 血管平滑肌细胞 增殖 迁移 表皮生长因子
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Wortmannin和U0126抑制胰岛素对大鼠骨骼肌成肌细胞的促分化作用
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作者 周小鸥 赵勇 +4 位作者 徐良贤 李兴暖 陈培良 邹恒 于欢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期717-720,共4页
目的观察wortmannin和U0126抑制胰岛素对大鼠成肌细胞向成熟肌细胞分化作用,探索定向诱导肌分化的途径及其分子机制。方法分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,用含不同浓度胰岛素的DMEM培养基培养,收集细胞,在相差显微镜下观察形态变化,并通... 目的观察wortmannin和U0126抑制胰岛素对大鼠成肌细胞向成熟肌细胞分化作用,探索定向诱导肌分化的途径及其分子机制。方法分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,用含不同浓度胰岛素的DMEM培养基培养,收集细胞,在相差显微镜下观察形态变化,并通过免疫细胞化学方法和Western blot法检测生肌素(myogenin)表达。用磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)特异性抑制剂wortmannin和MEK特异性抑制剂U0126干预后,观察胰岛素对骨骼肌成肌细胞分化的影响。结果胰岛素能明显促进骨骼肌成肌细胞形成肌小管,诱导2 d开始有肌管形成并逐渐增多到7 d达到高峰;胰岛素促进骨骼肌成肌细胞的生肌素阳性细胞核和生肌素蛋白表达增多,而wortmannin和U0126能下调胰岛素的这种作用。结论 Wortmannin和U0126可阻断胰岛素促进骨骼肌成肌细胞向成熟肌细胞分化,使肌管生成减少,生肌素表达下调。 展开更多
关键词 wortmannin U0126 胰岛素 骨骼肌成肌细胞 分化
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Wortmannin和LiCl对AML细胞系Hedgehog/gli通路的调节作用
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作者 潘登 李艳 +3 位作者 李哲 王庆玲 魏鑫 王亚柱 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第1期31-33,共3页
目的:研究通路阻断剂Wortmannin和LiCl对急性髓细胞白血病细胞系Hedgehog/gli通路的调节作用。方法:选取HL-60和K562细胞系,采用Western blot方法检测gli1和gli2蛋白表达,定量PCR检测gli1和gli2 mRNA的变化,WST-1检测不同通路阻断剂联... 目的:研究通路阻断剂Wortmannin和LiCl对急性髓细胞白血病细胞系Hedgehog/gli通路的调节作用。方法:选取HL-60和K562细胞系,采用Western blot方法检测gli1和gli2蛋白表达,定量PCR检测gli1和gli2 mRNA的变化,WST-1检测不同通路阻断剂联合对细胞增殖的抑制作用。结果:Wortmannin和LiCl均可以上调两细胞系中gli蛋白和mRNA的表达,并可减弱gli阻断剂GANT61对AML细胞系的毒性作用。结论:Wortmannin和LiCl可以上调AML细胞系中Hedgehog通路的表达。 展开更多
关键词 急性髓细胞白血病 HEDGEHOG wortmannin 氯化锂 GANT61
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WORTMANNIN的辐射增敏与NF-kB相关
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作者 李雨 赵芳 郑秀龙 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2009年第3期187-189,共3页
用凝胶迁移实验(Electrophoretic mobility shift assay,EMSA)研究PI-3K的特异性抑制剂WORTMANNIN(WT)影响细胞辐射反应与核因子NF-kB的关系。合成含kB位点的双链寡核苷酸碱基序列,以无菌双蒸水稀释,退火,制备放射性核苷酸探针。常规方... 用凝胶迁移实验(Electrophoretic mobility shift assay,EMSA)研究PI-3K的特异性抑制剂WORTMANNIN(WT)影响细胞辐射反应与核因子NF-kB的关系。合成含kB位点的双链寡核苷酸碱基序列,以无菌双蒸水稀释,退火,制备放射性核苷酸探针。常规方法培养LP3细胞,实验LP3细胞样品受WT作用及5Gyγ射线照射后,提取核蛋白,与标记探针进行结合反应,进行非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳。真空干胶,低温环境中进行放射自显影,照相扫描,进行转录因子的凝胶迁移率改变分析。未受WT作用的LP3细胞转录因子NF-kB结合活性在受5Gyγ射线照后6h内,经历从8%升高至50%然后降低至12%,50μmol/L WT明显抑制了转录因子受照后的变化幅度。电离辐射可能通过一些信号传导途径激活NF-kB,进而促使一些与DNA损伤修复和细胞其它防御机制有关的基因活动,以减轻辐射损伤,WT有可能是通过阻滞这一过程的早期阶段而发生辐射增敏效应。 展开更多
关键词 wortmannin 辐射 NF-KB 凝胶迁移实验
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Wortmannin与ABT-737诱导卵巢癌细胞凋亡的协同作用研究
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作者 黄素培 田鑫 程亮星 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2013年第13期2140-2144,共5页
目的:探讨磷酸肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂wortmannin单用以及与Bcl-2蛋白抑制剂ABT-737联合应用对人卵巢癌细胞系存活率和凋亡率的影响。方法:①CCK-8法分别测定Wortmannin、ABT-737单独以及联合应用对人卵巢癌细胞ES-2和SKVO-3生长的抑制... 目的:探讨磷酸肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂wortmannin单用以及与Bcl-2蛋白抑制剂ABT-737联合应用对人卵巢癌细胞系存活率和凋亡率的影响。方法:①CCK-8法分别测定Wortmannin、ABT-737单独以及联合应用对人卵巢癌细胞ES-2和SKVO-3生长的抑制率,并计算其IC50。②Annexin-V/PI法流式细胞仪检测细胞凋亡率以及对细胞周期的影响,Western blot法检测相关蛋白的表达水平,分别测定Wortmannin、ABT-737单独以及联合应用对人卵巢癌细胞ES-2和SKVO3凋亡的影响。结果:①Wortmannin和ABT-737单独作用对ES-2细胞株的IC50分别为14.12μM和31.31μM,两药联合应用的IC50为8.15μM;Wortmannin和ABT-737单独作用对SKVO-3细胞的IC50分别为16.72μM和37.56μM,联合用药的IC50为9.25μM。②0.2μM的Wortmannin作用48 h后ES-2和SKVO-3细胞的凋亡率分别为9.9%和8.7%,5μM的ABT-737作用48 h后ES-2和SKVO-3细胞凋亡率分别为10.2%和9.1%,两者联合应用对两种细胞的凋亡率分别为45.0%和53.0%,组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。③Wortmannin和ABT-737联合应用可以明显的增加cleaved-caspase-3、细胞色素C以cleaved-PARP的表达量,Wortmannin和ABT-737联合应用可以明显的对人卵巢癌ES-2和SKVO-3细胞周期阻滞在G0/G1期。结论:Wortmannin和ABT-737能够通过线粒体途径抑制卵巢癌细胞株的生长并诱导其凋亡,且Wortmannin和ABT-737联合应用具有协同作用。 展开更多
关键词 wortmannin ABT-737凋亡卵巢癌
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Wortmannin对急性肺损伤小鼠肺组织VEGF和NF-кB表达的影响
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作者 金龙 吴晓兰 +1 位作者 周昕欣 马腾 《解剖科学进展》 CAS 2015年第4期394-396,400,共4页
目的研究Wortmannin对急性肺损伤模型小鼠肺组织血管内皮生长因子(VEGF)和核转录因子-кB(NF-кB)表达的影响。方法 30只昆明小鼠随机分为正常对照组、急性肺损伤组和Wortmannin处理组。采用腹腔注射LPS(10 mg/kg)建立小鼠急性肺损伤模... 目的研究Wortmannin对急性肺损伤模型小鼠肺组织血管内皮生长因子(VEGF)和核转录因子-кB(NF-кB)表达的影响。方法 30只昆明小鼠随机分为正常对照组、急性肺损伤组和Wortmannin处理组。采用腹腔注射LPS(10 mg/kg)建立小鼠急性肺损伤模型,对照组腹腔注射同体积的生理盐水,Wortmannin处理组则于造模前2 h腹腔注射Wortmannin(1.4 mg/kg)。LPS注射后6 h处死大鼠,计算肺组织湿/干重(W/D)比值,Western blot方法检测三组小鼠肺组织内VEGF和NF-кB的表达变化,RT-PCR方法检测三组小鼠肺组织内VEGF mRNA和NF-кB mRNA的表达变化。结果急性肺损伤组小鼠肺组织VEGF和NF-кB蛋白和mRNA表达产物的平均光密度值显著高于正常对照组,而Wortmannin处理组显著低于急性肺损伤组小鼠。结论 Wortmannin能抑制急性肺损伤小鼠肺组织VEGF和NF-кB表达。 展开更多
关键词 急性肺损伤 wortmannin 血管内皮生长因子 核转录因子-КB 肺 小鼠
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