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前癃通胶囊对前列腺增生大鼠前列腺组织TFF2、Wnt4、Wnt6的影响 被引量:3
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作者 朱文雄 袁轶峰 +4 位作者 陈立蔓 张熙 刘涛 李博 陈其华 《湖南中医药大学学报》 CAS 2022年第5期743-747,共5页
目的观察前癃通胶囊对前列腺增生大鼠前列腺组织三叶因子2(trefoil factor 2,TFF2)、Wnt4、Wnt6的影响及其作用机制。方法取12只大鼠作为空白对照组。另取60只大鼠行去势手术,术后随机均分为前癃通高、中、低剂量组和癃闭舒组、模型对照... 目的观察前癃通胶囊对前列腺增生大鼠前列腺组织三叶因子2(trefoil factor 2,TFF2)、Wnt4、Wnt6的影响及其作用机制。方法取12只大鼠作为空白对照组。另取60只大鼠行去势手术,术后随机均分为前癃通高、中、低剂量组和癃闭舒组、模型对照组,于术后第8天开始皮下注射丙酸睾酮,每次1 mg/300 g,1次/d,连续30 d,建立前列腺增生大鼠模型。造模的同时,进行灌胃干预,每次1 mL/100 g,1次/d,持续30 d。前癃通低、中、高剂量组前癃通药液56.25、112.5、225.0 mg/mL;癃闭舒组给予癃闭舒药液168.75 mg/mL;空白对照组、模型对照组给予蒸馏水。末次给药结束后24 h,比较各组体质量及前列腺湿质量、体积、指数;采用HE染色法观察前列腺组织;采用Western blot检测各组大鼠前列腺组织中TFF2、Wnt4、Wnt6蛋白表达情况。结果空白对照组前列腺腔平滑圆润,上皮低柱状,管腔内见淡粉染均质状物,间质内几乎没有血管充血、炎性细胞浸润;模型对照组前列腺腔明显扩张,腺上皮呈高柱状,腔内充满粉色浓染均质状物,有明显的炎性细胞浸润;前癃通各剂量组和癃闭舒组前列腺组织病理改变较模型对照组有不同程度的改善,腔内均质状物颜色变浅,上皮低柱状,未见明显炎性细胞浸润。其中,前癃通高剂量组与癃闭舒组改善效果更为明显。模型对照组TFF2、Wnt4、Wnt6蛋白表达水平、前列腺湿质量、体积、指数均明显大于空白对照组(P<0.05,P<0.01)。前癃通中、高剂量组及癃闭舒组TFF2、Wnt4、Wnt6蛋白表达水平、前列腺湿质量、体积、指数均明显小于模型对照组(P<0.05,P<0.01)。前癃通低剂量组前列腺湿质量、体积、指数均明显大于癃闭舒组(P<0.05,P<0.01)。前癃通中、高剂量组Wnt4、Wnt6蛋白表达水平、前列腺湿质量、体积、指数及前癃通高剂量组TFF2蛋白表达水平均明显小于前癃通低剂量组(P<0.05,P<0.01)。前癃通高剂量组前列腺体积明显小于前癃通中剂量组、癃闭舒组(P<0.01)。前癃通中、高剂量组Wnt4、Wnt6蛋白及前癃通高剂量组TFF2蛋白表达水平均明显小于癃闭舒组(P<0.01)。前癃通高剂量组TFF2、Wnt4蛋白表达水平明显小于前癃通中剂量组(P<0.01)。结论前癃通各剂量组在降低前列腺湿质量、减少前列腺体积与指数方面呈现出一定的正相关性量效关系。前癃通胶囊治疗前列腺增生疗效确切,其作用机制可能与干预TFF/Wnt信号通路,下调TFF2、Wnt4、Wnt6蛋白表达有关。 展开更多
关键词 前列腺增生 前癃通胶囊 WNT 三叶因子2 Wnt4 wnt6
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WNT6在BMSCs增殖、迁移和成骨分化中的作用 被引量:4
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作者 曹玉净 吕翠田 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期92-96,共5页
目的探讨WNT6对BMSCs增殖、成骨分化和迁移能力的影响。方法取小鼠BMSCs培养至30%-50%融合时,分别行WNT6沉默及过表达观察。WNT6沉默实验分为3组,分别为转染WNT6特异性sh RNA组(A1组)、转染对照sh RNA组(B1组)、未转染的正常细胞组... 目的探讨WNT6对BMSCs增殖、成骨分化和迁移能力的影响。方法取小鼠BMSCs培养至30%-50%融合时,分别行WNT6沉默及过表达观察。WNT6沉默实验分为3组,分别为转染WNT6特异性sh RNA组(A1组)、转染对照sh RNA组(B1组)、未转染的正常细胞组(C1组)。过表达观察实验分为3组,分别为转染WNT6重组表达质粒组(A2组)、转染空载体组(B2组)、未转染的正常细胞组(C2组)。倒置显微镜下观察细胞形态,A1、B1、A2、B2组筛选稳定转染细胞;于转染后48 h取细胞,采用实时荧光定量PCR检测WNT6mRNA表达,Western blot检测WNT6及Ki73蛋白表达,Transwell法检测细胞迁移,MTT法检测细胞增殖;C1、C2组培养后相同时间点取细胞进行以上观测。各组细胞经成骨诱导培养12 d,检测ALP活性及钙沉积量。结果倒置显微镜下,A1、B1、C1组及A2、B2、C2组细胞形态基本一致。A1组WNT6 mRNA及蛋白、Ki67蛋白表达、细胞增殖及细胞迁移数目、ALP活性以及钙沉积量均显著低于B1、C1组,差异均有统计学意义(P〈0.05),B1、C1组间比较差异均无统计学意义(P〉0.05);而A2组以上各指标均显著高于B2、C2组,差异均有统计学意义(P〈0.05),B2、C2组间比较差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论 WNT6能促进小鼠BMSCs增殖和迁移,并增强其成骨分化能力。 展开更多
关键词 wnt6 BMSCS 细胞增殖 细胞迁移 成骨分化
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WNT6基因在原发性骨肉瘤组织中的表达及其临床意义 被引量:1
3
作者 曾照辉 闫康 +3 位作者 任坤 文艳华 杨连甲 马保安 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第11期2104-2109,共6页
目的:骨肉瘤是最常见的恶性骨肿瘤之一,好发于青少年,致残致死率高。因此,骨肉瘤的早期诊断、治疗及其发病原因和机制已成为现阶段骨肉瘤研究领域的主要方向之一。通过观察WNT6在骨肉瘤组织中的表达,探讨其在原发性骨肉瘤发生发展中的... 目的:骨肉瘤是最常见的恶性骨肿瘤之一,好发于青少年,致残致死率高。因此,骨肉瘤的早期诊断、治疗及其发病原因和机制已成为现阶段骨肉瘤研究领域的主要方向之一。通过观察WNT6在骨肉瘤组织中的表达,探讨其在原发性骨肉瘤发生发展中的可能作用机制,为以WNT6为指标对原发性骨肉瘤的诊断和以WNT6为靶点进行原发性骨肉瘤生物学治疗提供理论依据。方法:收集70例原发性骨肉瘤、28例骨样骨瘤和25例骨软骨瘤标本的存档蜡块,应用SP免疫组织化学染色法检测组织中WNT6蛋白的表达情况,并应用统计学处理数据分析其与骨肉瘤临床病理参数及预后的关系。结果:WNT6在原发性骨肉瘤、骨样骨瘤和骨软骨瘤组织中的阳性表达率分别为90.00%(63/70)、14.29%(4/28)和12.00%(3/25)。骨样骨瘤组织WNT6阳性表达率与骨软骨瘤组织相比差异无统计学意义(P>0.05);原发性骨肉瘤组织WNT6阳性表达率明显高于骨样骨瘤组织和骨软骨瘤组织,差异均有统计学意义(均P<0.05)。WNT6在骨肉瘤组织中的表达与Enneking分期、肺转移和预后呈正相关关系。结论:WNT6在原发性骨肉瘤中的表达明显上调,WNT6表达与骨肉瘤的Enneking分期、年龄、肺转移等相关,同时WNT6高表达患者生存率降低,对骨肉瘤的诊断和预后评估具有重要价值,并在临床可能成为一个诊断原发性骨肉瘤的检测指标,为骨肉瘤的生物学治疗提供新的靶点。 展开更多
关键词 骨肉瘤 wnt6基因 免疫组织化学
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山羊Wnt6基因克隆及组织表达分析
4
作者 林森 林亚秋 +4 位作者 朱江江 李倩 杨显英 张亚楠 王永 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第7期92-95,共4页
为了研究Wnt6基因在简州大耳羊不同器官组织中的表达水平,试验采用RT-PCR方法克隆山羊Wnt6基因序列,采用荧光定量PCR技术检测该基因在各器官组织中的表达情况。结果表明:获得山羊Wnt6基因序列1 120 bp(Gen Bank登录号为KU950833),其中CD... 为了研究Wnt6基因在简州大耳羊不同器官组织中的表达水平,试验采用RT-PCR方法克隆山羊Wnt6基因序列,采用荧光定量PCR技术检测该基因在各器官组织中的表达情况。结果表明:获得山羊Wnt6基因序列1 120 bp(Gen Bank登录号为KU950833),其中CDS为1 098 bp,5'UTR16 bp和3'UTR 6 bp,编码365个氨基酸,存在1个信号肽剪切位点,跨膜序列为7~29位氨基酸。氨基酸同源性比较发现,山羊Wnt6与绵羊和牛的同源性最高达99%;山羊Wnt6基因在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脂肪、背最长肌、股二头肌、臂三头肌中存在广泛表达,且在脂肪组织中的表达水平极显著高于其他器官组织(P<0.01)。 展开更多
关键词 山羊 wnt6基因 克隆 组织表达 荧光定量PCR
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生物信息学分析筛查并探讨WNT6与FZD7在前列腺癌中表达的意义 被引量:8
5
作者 贺子秋 杜丹(指导) +3 位作者 张志 付海波 胡忠贵 舒峰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第14期1756-1761,共6页
目的:筛选前列腺癌组织与正常前列腺组织的差异表达基因(DEGs),探讨基因WN76与FZD7基因在人前列腺癌组织中的蛋白表达水平并进行临床分析。方法:公共基因芯片数据库中下载2组前列腺癌表达谱芯片数据,筛选出前列腺癌组织与正常前列腺组织... 目的:筛选前列腺癌组织与正常前列腺组织的差异表达基因(DEGs),探讨基因WN76与FZD7基因在人前列腺癌组织中的蛋白表达水平并进行临床分析。方法:公共基因芯片数据库中下载2组前列腺癌表达谱芯片数据,筛选出前列腺癌组织与正常前列腺组织DEGs,进行差异基因的功能注释、通路分析及蛋白互作网络分析,筛选出存在上下调关系的2个基因。收集2018年1月~2019年8月于我院就诊的40例前列腺癌患者及40例良性前列腺增生患者的组织标本,分为观察组(前列腺癌组织)及对照组(前列腺增生组织),Western blot和免疫组化法检测蛋白表达水平,统计学分析验证其与前列腺癌临床病理参数的关系。结果:筛选出286个DEGs,主要参与细胞黏附、细胞或亚细胞运动等生物学进程,富集于黏附斑激酶通路及WNT信号通路,WNT6及其假定受体FZD7均为前列腺癌的下调基因,富集于WNT信号通路。WNT6在前列腺增生组织中的阳性表达率为92.5%(37/40),在前列腺癌组织中的阳性表达率为37.5%(15/40)(P<0.01);FZD7在前列腺增生组织中的阳性表达率为47.5%(19/40),在前列腺癌组织中的阳性率为20.0%(8/40)(P<0.05)。WNT6及FZD7的阳性表达与前列腺癌患者的年龄及临床分期无关(P>0.05),与术前血清PSA水平及Gleason评分相关(P<0.05)。结论:前列腺癌相关基因芯片数据的生物信息学分析为深入研究前列腺癌的相关分子机制提供了理论依据。WNT6及FZD7下调可能是前列腺癌发生的原因之一,可作为前列腺癌预后的分子标志,为前列腺癌的诊断及预后评估提供了新思路。 展开更多
关键词 前列腺癌 生物信息学 wnt6 FZD7
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鹅皮肤毛囊中WNT6基因mRNA的表达分析 被引量:4
6
作者 刘静 孙越 +4 位作者 周宇轩 李晟毅 杨薇 隋玉健 孙永峰 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期210-214,共5页
为了探究可能影响毛囊发育的WNT6基因在鹅皮肤毛囊各个生长发育时期是否表达以及毛囊发育状况,试验选择18,35,48,68,88,108日龄6个不同生长时期的卡洛斯鹅和籽鹅,采集背部皮肤,通过组织消化法获得皮肤毛囊并提取总RNA,采用荧光定量PCR... 为了探究可能影响毛囊发育的WNT6基因在鹅皮肤毛囊各个生长发育时期是否表达以及毛囊发育状况,试验选择18,35,48,68,88,108日龄6个不同生长时期的卡洛斯鹅和籽鹅,采集背部皮肤,通过组织消化法获得皮肤毛囊并提取总RNA,采用荧光定量PCR的方法计算WNT6基因在皮肤毛囊中的相对表达量,并通过HE染色法观察不同时期毛囊的发育状况及毛囊的不同形态结构。结果表明:WNT6基因在鹅皮肤毛囊的各个生长发育阶段均有表达且表达量有较大差别。在卡洛斯鹅中,WNT6基因在18日龄中相对表达量最高,88日龄相对表达量最低。在籽鹅中,WNT6基因在108日龄中相对表达量最高,88日龄中相对表达量最低。表明WNT6基因在参与鹅的皮肤毛囊生长发育过程中起到一定的促进作用。 展开更多
关键词 wnt6基因 毛囊生长 卡洛斯鹅 籽鹅
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WNT6基因对蛋鸡卵泡颗粒细胞的影响及机制研究 被引量:1
7
作者 祝启钊 谢晓磊 +3 位作者 杨海霞 王晋 片慧芳 虞德兵 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期143-149,共7页
[目的]本文旨在研究WNT6基因在蛋鸡卵泡发育过程中的生物学功能及其作用机制。[方法]以300日龄海兰蛋鸡为研究对象,检测WNT6 mRNA在不同组织中表达特征。对体外培养的鸡卵泡颗粒细胞进行敲减和过表达WNT6基因后,用CCK-8试剂盒检测细胞增... [目的]本文旨在研究WNT6基因在蛋鸡卵泡发育过程中的生物学功能及其作用机制。[方法]以300日龄海兰蛋鸡为研究对象,检测WNT6 mRNA在不同组织中表达特征。对体外培养的鸡卵泡颗粒细胞进行敲减和过表达WNT6基因后,用CCK-8试剂盒检测细胞增殖,ELISA检测细胞培养基中的孕酮(P4)含量,荧光定量PCR检测卵泡刺激素受体(FSHR)和StAR、CYP11A1等基因表达水平。设立卵泡刺激素(FSH)浓度梯度处理体外培养的蛋鸡卵泡颗粒细胞,研究FSH对WNT6及WNT通路相关基因表达水平的影响。[结果]WNT6 mRNA在蛋鸡卵泡颗粒细胞内特异表达,在处于卵泡选择关键时期的小黄卵泡颗粒细胞内具有最高表达水平;与对照组相比,过表达WNT6极显著促进颗粒细胞增殖(P<0.01),极显著提高颗粒细胞P4合成量(P<0.01),并显著提高FSHR、CYP11A1、StAR、CYP19A1和HSD3B1基因表达水平(P<0.05);相反,敲减WNT6后颗粒细胞增殖被抑制(P<0.01),P4合成量极显著显著减少(P<0.01),并显著降低FSHR、CYP11A1、StAR、CYP19A1和HSD3B1基因表达水平(P<0.05);FSH呈剂量依赖性促进WNT6基因表达(P<0.05),还可显著提高颗粒细胞LRP1基因表达水平(P<0.05),而极显著降低FOXO1基因表达水平(P<0.01)。[结论]WNT6在蛋鸡卵泡颗粒细胞内特异性表达,其表达水平受FSH调控,WNT6促进颗粒细胞增殖与类固醇激素合成,并提高颗粒细胞FSHR基因表达表达水平。WNT6协同FSH促进蛋鸡卵泡发育并调控蛋鸡卵泡选择。 展开更多
关键词 wnt6 颗粒细胞 卵泡选择 卵泡刺激素
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棉酚衍生物ApoG2诱导胃癌细胞凋亡及对Wnt6调控作用的研究 被引量:6
8
作者 李天晓 元刚 +2 位作者 叶丽君 孙健 黎曙霞 《新医学》 2014年第6期359-363,共5页
目的研究棉酚衍生物ApoG2诱导胃癌细胞凋亡作用及对Wnt6调控作用的影响。方法以人胃腺癌细胞系BGC823细胞为模型,检测ApoG2作用下BGC823细胞生长抑制、形态学变化和细胞周期变化,以及给药前、后细胞Bcl2、Bax和Bak mRNA表达水平和Wnt6... 目的研究棉酚衍生物ApoG2诱导胃癌细胞凋亡作用及对Wnt6调控作用的影响。方法以人胃腺癌细胞系BGC823细胞为模型,检测ApoG2作用下BGC823细胞生长抑制、形态学变化和细胞周期变化,以及给药前、后细胞Bcl2、Bax和Bak mRNA表达水平和Wnt6蛋白表达水平的变化。结果 ApoG2对BGC823细胞的生长抑制呈浓度依赖性,给药后经Hoechst染色可观察到典型凋亡细胞,经PI染色用流式细胞仪可检测到明显sub-G1峰;Wnt6蛋白含量和Bcl2 mRNA含量随ApoG2浓度升高而降低,Bax和Bak mRNA含量随ApoG2浓度升高而升高。结论 ApoG2能明显抑制人胃癌细胞BGC823的生长,诱导细胞凋亡,可能通过抑制细胞Wnt6蛋白表达从而调控Bcl2蛋白家族的基因转录,继而引起细胞凋亡。 展开更多
关键词 胃癌 棉酚衍生物 Bcl2抑制剂 细胞信号通路
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先天性牙发育不全WNT6基因突变的新位点
9
作者 戴卓 李丽丽 +2 位作者 张晓昕 牟永斌 陈斌 《口腔疾病防治》 2023年第8期552-558,共7页
目的探讨先天性牙发育不全病例与相关基因突变可能存在的联系,为疾病的早期诊断提供参考。方法通过收集1例罕见先天性牙发育不全病例的临床和影像学资料,评估牙齿的形态、数量以及全身健康状况;采集患者静脉外周血,对与牙齿发育紧密关联... 目的探讨先天性牙发育不全病例与相关基因突变可能存在的联系,为疾病的早期诊断提供参考。方法通过收集1例罕见先天性牙发育不全病例的临床和影像学资料,评估牙齿的形态、数量以及全身健康状况;采集患者静脉外周血,对与牙齿发育紧密关联的PAX9和MSX1基因双向测序;进行全外显子测序,筛查与牙发育异常相关的其他突变位点,对先证者儿子进行新发现突变位点的Sanger测序;通过模拟测算工具和体外细胞转染实验评估突变对基因表达的影响。结果患者的临床特征是先天性右下颌单侧第一磨牙缺失,第二磨牙为单根,且伴有右下第二前磨牙多生。在PAX9和MSX1基因测序中发现,PAX9基因中c.717C>C/T为同义突变,MSX1基因中c.119C>G为错义突变,Polyphen预测为“良性”。全外显子测序发现WNT6基因的1个全新突变位点,内含子3中的c.637-7 C>A突变,经MAXENT预测,可能影响mRNA的剪切,且先证者及其儿子均携带该突变;细胞转染实验发现,该突变对WNT6基因的mRNA剪切没有影响。结论单核苷酸多态性之间的相互作用可能与先天性牙发育异常相关。 展开更多
关键词 牙发育不全 非综合征型 剪切突变 全外显子测序 wnt6基因 PAX9基因 MSX1基因 单核苷酸多态性
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Wnt6过表达改善PINK1突变转基因帕金森病果蝇的生物学行为 被引量:1
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作者 范晓丽 夏穗瑞 孙莉 《华夏医学》 CAS 2021年第6期1-4,共4页
目的:探讨Wnt6基因对PINK1突变型帕金森病果蝇运动能力的影响,为帕金森病的研究与治疗提供新思路。方法:利用GAL4-UAS系统构建转基因果蝇,分别为正常对照组(W1118/+;MHC-GAL4/+)、PINK1^(B9)帕金森疾病组(UAS-PINK1^(B9)/y;MHC-GAL4/+)... 目的:探讨Wnt6基因对PINK1突变型帕金森病果蝇运动能力的影响,为帕金森病的研究与治疗提供新思路。方法:利用GAL4-UAS系统构建转基因果蝇,分别为正常对照组(W1118/+;MHC-GAL4/+)、PINK1^(B9)帕金森疾病组(UAS-PINK1^(B9)/y;MHC-GAL4/+)和Wnt6过表达干预组(UAS-PINK1^(B9)/y;MHC-GAL4/Wnt6 OE)。观察果蝇的运动能力,即异翅率与飞行率;分析Wnt6基因对PINK1突变帕金森病果蝇生物学行为的影响;蛋白免疫印迹检测线粒体复合物Ndufs3蛋白的表达。结果:Wnt6基因过表达可改善PINK1^(B9)疾病果蝇的运动能力,上调线粒体复合物Ndufs3蛋白的表达。结论:Wnt6可能通过上调线粒体复合物Ndufs3蛋白表达改善PINK1^(B9)疾病果蝇的运动能力。 展开更多
关键词 帕金森病 wnt6 PINK1 线粒体复合物
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铜对wnt6基因表达及鹅羽绒生产性能影响的试验方法
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作者 赵明 《吉林农业(下半月)》 2010年第2期55-56,共2页
本文以吉林白鹅为研究对象,饲喂不同添加量铜日粮,结合Wnt6基因表达测定试探讨铜对鹅羽绒的促生长作用,重点介绍试验设计和试验方法,并提出试验难点和试验预期。
关键词 羽绒生产 wnt6基因表达 试验方法
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牙齿形状调控相关基因Wnt6的克隆 被引量:1
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作者 郑梁 金岩 +1 位作者 肖明振 轩昆 《临床口腔医学杂志》 2004年第4期212-214,共3页
目的 :获得新生猪牙胚的差异表达基因。方法 :利用消减杂交方法获得新生猪前后恒牙胚的差异表达基因 ,并通过反向点杂交排除假阳性 ,尔后进行测序定性分析。结果 :通过消减杂交获得Wnt6基因。结论
关键词 牙齿形状调控 基因表达 wnt6 基因调控 恒切牙
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人WNT6的基因克隆和序列分析
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作者 林媛 吴补领 +3 位作者 陆群 周鹏 孙强 韩骅 《临床口腔医学杂志》 2004年第3期150-151,共2页
目的:从人胎盘组织克隆WNT6的全部编码区,测定并分析其基因序列。方法:利用RT-PCR方法,扩增人WNT6基因片段,将基因片段插入pMD18-T载体,限制性内切酶酶切鉴定,测定序列。结果:重组质粒pMD18-T-WNT6酶切鉴定正确,测序结果经Blast分析与Ge... 目的:从人胎盘组织克隆WNT6的全部编码区,测定并分析其基因序列。方法:利用RT-PCR方法,扩增人WNT6基因片段,将基因片段插入pMD18-T载体,限制性内切酶酶切鉴定,测定序列。结果:重组质粒pMD18-T-WNT6酶切鉴定正确,测序结果经Blast分析与GeneBank公布的WNT6基因编码区一致。结论:成功克隆人WNT6编码区基因,为体外表达其活性蛋白奠定了基础。 展开更多
关键词 wnt6 基因克隆 基因序列 人胎盘组织
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青光安Ⅱ号方有效组分对慢性高眼压DBA/2J小鼠视网膜神经节细胞的保护作用及机制 被引量:5
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作者 曾志成 李银鑫 +3 位作者 秦惠钰 蒋鹏飞 彭俊 彭清华 《湖南中医药大学学报》 CAS 2022年第12期1973-1981,共9页
目的观察青光安Ⅱ号方及其低、中、高浓度有效组分对青光眼模型小鼠视网膜神经节细胞的保护作用机制。方法将8只雌性C57BL/6小鼠设为正常对照组(A组)并灌胃蒸馏水,48只38周龄雌性DBA/2J小鼠随机分成6组:模型组(B组)、益脉康分散片组(C组... 目的观察青光安Ⅱ号方及其低、中、高浓度有效组分对青光眼模型小鼠视网膜神经节细胞的保护作用机制。方法将8只雌性C57BL/6小鼠设为正常对照组(A组)并灌胃蒸馏水,48只38周龄雌性DBA/2J小鼠随机分成6组:模型组(B组)、益脉康分散片组(C组)、青光安Ⅱ号汤剂组(D组)、青光安Ⅱ号有效组分低浓度组(E组)、青光安Ⅱ号有效组分中浓度组(F组)、青光安Ⅱ号有效组分高浓度组(G组),分别灌胃蒸馏水、益脉康分散片混悬液、青光安Ⅱ号方汤剂、青光安Ⅱ号方有效组分低/中/高浓度汤剂。干预4周后,HE染色观察小鼠视网膜组织结构,TUNEL染色观察视网膜神经节细胞凋亡,免疫组化染色观察视网膜组织神经节细胞层糖原合酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、β-连环蛋白(β-Catenin)及同源盒基因-6(paired box gene-6,Pax6)表达情况,Western blot法测定视网膜组织GSK-3β、β-Catenin及Pax6蛋白相对表达量。结果眼压测量发现,DBA/2J小鼠眼压在26周及以后明显上升,从第14周开始DBA/2J小鼠眼压明显高于C57BL/6J组(P<0.05或P<0.01);A组小鼠视网膜各层组织结构清晰、完整、染色均匀、清晰可见3个核层,神经节细胞呈单层排列,比较连续无间断,细胞呈圆形或椭圆形;B组小鼠视网膜以神经节细胞层(ganglion cell layer,GCL)损伤最为明显,神经节细胞明显减少,连续性中断,胞内空泡样变性,核固缩;C组、D组、E组、F组、G组神经节细胞数目增多,胞内空泡样变性改变均有所改善。与A组比较,B组凋亡指数明显升高(P<0.01);与B组比较,C组、D组、E组、F组、G组凋亡指数均明显降低(P<0.01);与C组、D组比较,E组凋亡指数升高(P<0.05)。与A组比较,B组视网膜GSK-3β表达量明显升高(P<0.01),β-Catenin和Pax6表达量明显降低(P<0.01);与B组比较,C组、D组、E组、F组、G组GSK-3β表达量均明显降低(P<0.01),C组、D组、G组β-Catenin表达量均有升高(P<0.05或P<0.01),C组、D组、F组、G组Pax6表达量均有升高(P<0.05或P<0.01);与C组和D组比较,G组GSK-3β表达量降低(P<0.05),β-Catenin和Pax6表达量升高(P<0.01)。Western blot检测发现B组视网膜GSK-3β蛋白表达量明显升高(P<0.01),β-Catenin和Pax6蛋白表达量明显降低(P<0.01);与B组比较,C组、D组、E组、F组、G组GSK-3β蛋白表达量均明显降低(P<0.01),C组、D组、G组β-Catenin和Pax6蛋白表达量均有升高(P<0.05);与C组、D组比较,G组GSK-3β表达量降低(P<0.05),β-Catenin和Pax6表达量升高(P<0.01)。结论高浓度青光安Ⅱ号方有效组分能明显改善青光眼视网膜结构,抑制RGCs凋亡,抑制GSK-3β蛋白和促进β-Catenin、Pax6蛋白在视网膜中的表达,其作用可能与激活Wnt/β-Catenin/Pax6信号通路有关。 展开更多
关键词 青光安Ⅱ号方 青光眼 DBA/2J小鼠 Wnt/β-Catenin/Pax6信号通路 细胞凋亡
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基于Wnt/β-catenin/TRPC6/CaN通路探讨淫羊藿苷对激素抵抗性肾病综合征大鼠泼尼松抵抗的作用机制 被引量:4
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作者 白俊嫄 戴恩来 +1 位作者 蒲晓薇 张云霞 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2024年第5期85-91,共7页
目的观察淫羊藿苷对激素抵抗性肾病综合征(SRNS)大鼠泼尼松抵抗的改善作用,及对Wnt/β-catenin/TRPC6/CaN通路表达的影响。方法将50只SD大鼠分为空白组、模型组、泼尼松组(6.3 mg/kg)、淫羊藿苷组(50 mg/kg)和联合组,每组10只。采用2次... 目的观察淫羊藿苷对激素抵抗性肾病综合征(SRNS)大鼠泼尼松抵抗的改善作用,及对Wnt/β-catenin/TRPC6/CaN通路表达的影响。方法将50只SD大鼠分为空白组、模型组、泼尼松组(6.3 mg/kg)、淫羊藿苷组(50 mg/kg)和联合组,每组10只。采用2次尾静脉注射阿霉素建立SRNS大鼠模型,分别予相应方式干预6周。观察大鼠一般状态,检测24 h尿蛋白定量(24 h-UTP)、尿17-羟皮质类固醇(17-OHCS)及血清生化指标,Masson染色观察肾组织病理形态及超微结构,RT-PCR、Westernblot检测肾组织Wnt/β-catenin/TRPC6/CaN通路相关基因及蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠体质量、进食量、饮水量均明显减少,24 h-UTP增加、尿17-OHCS含量减少(P<0.01),血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)含量升高(P<0.01),血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)含量降低(P<0.05,P<0.01);肾小球增大,基底膜增厚,球囊壁增厚伴纤维化,足细胞空泡变性,有大量胶原纤维沉积,胶原容积分数(CVF)增加(P<0.01);Wnt、β-catenin、TRPC6、CaM、CaN、NFAT1 mRNA和蛋白表达均明显升高(P<0.01),F-actin、MYH9mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01)。与模型组比较,联合组大鼠体质量、饮水量明显增加,24 h-UTP降低、尿17-OHCS含量增加(P<0.01),SCr、BUN、TG含量降低(P<0.01);肾组织纤维化程度减轻,CVF减少(P<0.01),足突融合现象明显好转,足细胞结构趋于正常;肾组织Wnt、β-catenin、TRPC6、CaM、CaN、NFAT1 mRNA和蛋白表达明显降低,F-actin、MYH9 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.01,P<0.05)。结论淫羊藿苷可能通过抑制Wnt/β-catenin/TRPC6/CaN通路,上调骨架蛋白F-actin、MYH9基因和蛋白表达,进而保护足细胞结构、减缓足细胞损伤,改善SRNS大鼠泼尼松抵抗。 展开更多
关键词 激素抵抗性肾病综合征 淫羊藿苷 足细胞 阿霉素肾病 Wnt/β-catenin/TRPC6/CaN通路 大鼠
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丹参酮B调控LRP6/Wnt1/β-catenin通路对血管性痴呆性小鼠认知功能的影响 被引量:16
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作者 叶明灯 汪晶莹 +3 位作者 周源 程玉洁 陈明 俞斐 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期255-260,共6页
目的探究丹参酮B对血管性痴呆小鼠认知功能障碍的保护机制。方法C57BL/6雄性小鼠,分Control组、模型组(VD组)、丹参酮B低、中、高剂量组(TSB 2、4、8 mg·kg^(-1))、盐酸多奈哌齐1 mg·kg^(-1),每组各10只。采用小鼠双侧颈总动... 目的探究丹参酮B对血管性痴呆小鼠认知功能障碍的保护机制。方法C57BL/6雄性小鼠,分Control组、模型组(VD组)、丹参酮B低、中、高剂量组(TSB 2、4、8 mg·kg^(-1))、盐酸多奈哌齐1 mg·kg^(-1),每组各10只。采用小鼠双侧颈总动脉缩窄法构建VD模型,造模成功10 d后分别给药,Control组和VD组小鼠腹腔注射等量生理盐水,共计20 d。Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力;分光光度法测定MDA、SOD、GSH-Px;HE染色观察病理学改变;Western blot检测p-LRP6、LRP6、Wnt1、β-catenin蛋白表达。结果与Control组相比,VD组小鼠记忆能力降低,MDA含量升高,SOD和GSH-Px活性降低(P<0.01),海马区域病理损伤明显,p-LRP6、Wnt1以及β-catenin蛋白表达均明显降低(P<0.01)。与VD组相比,TSB治疗组小鼠学习记忆能力提升,MDA含量降低,SOD和GSH-Px活性升高,海马区域病理损伤明显改善,p-LRP6、Wnt1以及β-catenin蛋白表达均明显升高(P<0.01)。结论TSB能改善VD小鼠认知功能障碍,可能与LRP6/Wnt1/β-catenin通路有关。 展开更多
关键词 丹参酮B 血管性痴呆 LRP6/Wnt1/β-catenin 认知功能 多奈哌齐 MDA
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