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A Study of the Technique of Western Blot for Diagnosis of Lyme Disease caused by Borrelia afzelii in China 被引量:8
1
作者 LIU Zhi Yun HAO Qin +4 位作者 HOU Xue Xia JIANG Yi GENG Zhen WU Yi Mou WAN Kang Lin 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2013年第3期190-200,共11页
Objective To study the technique of Western blot for the diagnosis of Lyme disease caused by Borrelia afzelii in China and to establish the standard criteria by operational procedure. Methods FP1, which is the represe... Objective To study the technique of Western blot for the diagnosis of Lyme disease caused by Borrelia afzelii in China and to establish the standard criteria by operational procedure. Methods FP1, which is the representative strain of B. afzelii in China, was analyzed by SDS-PAGE, electro transfer and irnmunoblotting assays. The molecular weights of the protein bands of FP1 were analyzed by Gel-Pro analysis software. In a study using 451 serum samples (159 patients with Lyme disease and 292 controls), all observed bands were recorded. The accuracy of the WB as a diagnostic test was established by using the ROC curve and Youden index. Results Criteria for a positive diagnosis of Lyme disease were established as at least one band of P83/100, P58, P39, OspB, OspA, P30, P28, OspC, P17, and P14 in the IgG test and at least one band of P83/100, P58, P39, OspA, P30, P28, OspC, P17, and P41 in the IgM test. For IgG criteria, the sensitivity, specificity and Youden index were 69.8%, 98.3%, and 0.681, respectively; for IgM criteria, the sensitivity, specificity and Youden index were 47%, 94.2%, and 0.412, respectively. 展开更多
关键词 Lyme disease western blot Diagnostic method Borrelia afzelii
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不同方法检测非先天性梅毒患儿体内梅毒抗体衰减规律的应用评价
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作者 徐敬轩 彭文红 +6 位作者 王佳丽 钱云芳 赵仙华 冷柠 杨勇 储磊 谢而付 《临床检验杂志》 2025年第2期88-91,共4页
目的探讨不同检测方法在监测非先天性梅毒患儿体内梅毒特异性抗体衰减规律中的应用价值。方法纳入80例非先天性梅毒患儿,采集出生后血清标本,分别用电化学发光法(ECLIA)、免疫印迹法(WB)、梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)、酶联免疫吸附试... 目的探讨不同检测方法在监测非先天性梅毒患儿体内梅毒特异性抗体衰减规律中的应用价值。方法纳入80例非先天性梅毒患儿,采集出生后血清标本,分别用电化学发光法(ECLIA)、免疫印迹法(WB)、梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)检测梅毒特异性抗体。每3个月随访1次,直至ELISA和TRUST结果转阴。结果ECLIA法显示,非先天性梅毒患儿体内梅毒特异性抗体水平在出生后2~3个月内可降至出生时的25%,且衰减速度与初始浓度无关。WB法提示,非先天性梅毒患儿出生时的特异性IgG条带与母体一致,其消退顺序依次为TPN47、TPN15、TPN45和TPN17。受方法学限制,ELISA法在高浓度抗体存在时,出生后前3个月吸光度变化不明显,但对低浓度抗体的检出灵敏度高。以ELISA阳性为参考,比较ECLI、TPPA和WB方法的检出率:出生时分别为100%、100%和90%,3月龄时为100%、100%和75%,6月龄时为100%、46%和15%,9月龄时为83%、33%和0%。TRUST阳性率在出生时为17.5%,3月龄随访时均转阴。结论梅毒特异性IgG抗体可完全传递给胎儿,并在出生后按一定规律消退。综合分析4种方法的检测结果,ECLIA法动态检测可在随访3个月时提前判断非先天性梅毒风险或终止随访,WB法早于TPPA法提示阴转,而ELISA法需随访时间最长。 展开更多
关键词 妊娠梅毒 甲苯胺红不加热血清试验 酶联免疫吸附试验 电化学发光法 免疫印迹法
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磁微粒化学发光法与胶体金法检测HIV感染与免疫印迹法确证对照分析
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作者 唐耀敏 唐贵文 《中国医学创新》 2025年第6期144-148,共5页
目的:以免疫印迹法(Western blotting,WB)为参照,分析磁微粒化学发光法、胶体金法对人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染筛查的效能。方法:于2023年7月3日—2024年10月31日选取400例在贵阳市第二人民医院进行HIV联... 目的:以免疫印迹法(Western blotting,WB)为参照,分析磁微粒化学发光法、胶体金法对人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染筛查的效能。方法:于2023年7月3日—2024年10月31日选取400例在贵阳市第二人民医院进行HIV联合筛查的病例。所有病例均在本院进行磁微粒化学发光法、胶体金法检测,由贵州省临床检验中心进行WB检测。以WB检测结果为金标准,分析微粒化学发光法、胶体金法检测结果及其与WB检测的一致性,并比较微粒化学发光法、胶体金法筛查HIV感染的效能。结果:WB检测结果显示,269例HIV感染,131例无HIV感染。磁微粒化学发光法检测与WB检测的Kappa值为0.927,一致性良好。胶体金法检测与WB检测的Kappa值为0.875,一致性良好。磁微粒化学发光法诊断HIV感染的敏感度、准确度及阴性预测值均高于胶体金法,差异均有统计学意义(P<0.05);两种方法诊断HIV感染的特异度、阳性预测值比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:微粒化学发光法筛查HIV感染与WB具有较高一致性,且诊断敏感度、准确度均优于胶体金法。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒 免疫印迹法 磁微粒化学发光法 胶体金法
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红参中精氨酸双糖苷对小鼠的抗疲劳作用 被引量:14
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作者 黄宝亮 丁传波 +4 位作者 王佳奇 郑毅男 刘文丛 张晶 徐晓华 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期897-902,共6页
目的:观察小鼠强迫性游泳诱发的疲劳现象,探讨红参中非皂苷类物质——精氨酸双糖苷(AFG)对小鼠的抗疲劳作用及其初步机制。方法:从红参中分离出AFG提取物,将80只ICR小鼠分为空白对照组,低、中和高剂量(100、200和400mg·kg^(-1))AFG... 目的:观察小鼠强迫性游泳诱发的疲劳现象,探讨红参中非皂苷类物质——精氨酸双糖苷(AFG)对小鼠的抗疲劳作用及其初步机制。方法:从红参中分离出AFG提取物,将80只ICR小鼠分为空白对照组,低、中和高剂量(100、200和400mg·kg^(-1))AFG组,每组20只,连续灌胃给药28d后对小鼠进行强迫性游泳实验,检测各组小鼠体质量,脏器指数,强迫性游泳时间,乳酸(LD)、尿素氮(BUN)、肝糖原(Gly)水平及腓肠肌中PGC-1α基因表达水平。结果:与空白对照组比较,低、中和高剂量AFG组小鼠的体质量和脏器指数差异无统计学意义(P>0.05);与空白对照组比较,低、中和高剂量AFG组小鼠强迫性游泳时间、Gly水平和PGC-1αmRNA基因表达水平均明显增加(P<0.05或P<0.01),且呈剂量依赖性;与空白对照组比较,低、中和高剂量AFG组小鼠血清中的LD和BUN水平明显降低(P<0.01)。结论:AFG对小鼠有抗疲劳作用,其机制可能与能量代谢有关。 展开更多
关键词 红参 精氨酸双糖苷 力竭性游泳 实时荧光定量聚合酶链反应 免疫印迹法
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不同程度间歇性低氧大鼠海马区磷酸化JNK的表达及其意义 被引量:7
5
作者 赵雅宁 王红阳 +3 位作者 郭霞 李琳 韩晓庆 张盼盼 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1135-1140,I0013,共7页
目的:探讨不同程度间歇性低氧大鼠海马区磷酸化JNK表达水平变化,阐明低氧大鼠认知功能障碍的发生机制。方法:96只雄性SD大鼠随机分成对照组和轻、中、重度间歇低氧组,每组24只。对照组大鼠暴露于空气中,不同程度间歇低氧组大鼠分别暴露... 目的:探讨不同程度间歇性低氧大鼠海马区磷酸化JNK表达水平变化,阐明低氧大鼠认知功能障碍的发生机制。方法:96只雄性SD大鼠随机分成对照组和轻、中、重度间歇低氧组,每组24只。对照组大鼠暴露于空气中,不同程度间歇低氧组大鼠分别暴露于不同低氧条件(100、75和50mL.L-1,暴露时间每天8h,持续8周)。采用Western blotting和免疫组织化学法检测大鼠海马区磷酸化JNK蛋白表达水平;采用原位缺口末端标记(TUNEL)法检测各组大鼠凋亡细胞数量;采用Morris水迷宫法检测各组大鼠学习记忆功能。结果:与对照组比较,随低氧时间的延长,轻、中、重度间歇性低氧组大鼠海马区磷酸化JNK阳性细胞数和JNK蛋白表达水平均增加(P<0.05),TUNEL阳性细胞增多(P<0.05);水迷宫法检测,轻、中、重度间歇性低氧组大鼠逃避潜伏期时间延长和穿台次数减少(P<0.05)。与轻、中度间歇性低氧组比较,在重度间歇性低氧组TUNEL阳性细胞数增多,JNK蛋白表达水平和大鼠逃避潜伏期延长,穿台次数减少(P<0.05);轻、中度间歇性低氧组磷酸化JNK表达水平和TUNEL阳性细胞6周时达高峰,8周时降低,但组间各时间点比较差异无统计学意义(P>0.05);重度间歇性低氧组磷酸化JNK表达水平和TUNEL阳性细胞8周时达高峰,组间各时间点比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:不同程度间歇性低氧可导致大鼠认知功能损伤,其机制与激活大鼠海马区JNK、调控神经细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 有丝分裂原活化蛋白激酶 细胞凋亡 免疫组织化学 免疫印迹法 大鼠 SD 间歇性低氧
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北京某地区HIV抗体筛查阳性情况和确证结果分析 被引量:18
6
作者 朱立国 庄远 +4 位作者 王海宝 席朝运 魏超 姜蕾 汪德清 《中国卫生检验杂志》 CAS 北大核心 2013年第15期3101-3103,共3页
目的分析北京某地区ELISA检测HIV抗体阳性情况与免疫印迹试验(WB)结果,了解北京市该地区的HIV流行特征和规律,探索筛查阳性与确证试验结果的关系。方法对2005年-2012年北京地区无偿献血人群中HIV抗体阳性者的资料进行流行病学分析... 目的分析北京某地区ELISA检测HIV抗体阳性情况与免疫印迹试验(WB)结果,了解北京市该地区的HIV流行特征和规律,探索筛查阳性与确证试验结果的关系。方法对2005年-2012年北京地区无偿献血人群中HIV抗体阳性者的资料进行流行病学分析,并与确证试验结果比较。结果在165566名无偿献血人群中,HIV抗体筛查阳性的有375例,阳性率为0.23%,男女比例为6:1,18-25年龄段比例最大。经WB确证后,HIV阳性21例(占5.6%)、阴性307例(占81.87%)、不确定47例(占12.53%)。不确定的样本中,P24条带出现的几率最高,达到70.7%,其余都在20%以下。结论北京地区的HIV抗体筛查阳性率逐年升高,并呈现年轻化态势。WB确证方法仍存在不足,需辅助检测。 展开更多
关键词 HIV抗体 血液筛查 免疫印迹试验
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电针对非酒精性脂肪肝大鼠血清RBP4水平的影响及其脂质调节作用机制 被引量:8
7
作者 蒋娟 黄学宽 +4 位作者 曾志华 骆言 张超男 万磊 王玲 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期602-606,共5页
目的:探讨电针对高脂高胆固醇造模的非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠的脂质调节作用,阐明血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)水平以及肝 X受体α(LXR-α)和肝脏固醇调节元件结合蛋白-1 c (SREBP-1 c)表达的调节作用机制。方法:44只雌性 S... 目的:探讨电针对高脂高胆固醇造模的非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠的脂质调节作用,阐明血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)水平以及肝 X受体α(LXR-α)和肝脏固醇调节元件结合蛋白-1 c (SREBP-1 c)表达的调节作用机制。方法:44只雌性 SD大鼠适应性喂养7 d,随机分为正常组、模型组、东宝肝泰组和电针组,每组11只。正常组大鼠用标准饲料喂养,其余各组大鼠用高脂高胆固醇饲料喂养。8周后电针组针刺“肝俞”、“脾俞”和“膈俞”进行治疗,电压9 V,电流强度1~3 mA,频率为1.5~2.0 Hz,疏密波,留针15 min,每天1次,连续28 d。检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、血清游离脂肪酸(FFA)和肝组织匀浆甘油三酯(TC)、总胆固醇(TG)的变化,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清 RBP4水平,采用 Western blotting法检测大鼠肝组织中 LXR-α和SREBP-1 c蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠的 FBG、FFA、肝组织匀浆中 TC和 TG以及血清 RBP4水平升高(P<0.01), LXR-α和 SREBP-1 c蛋白表达水平也升高(P<0.01);与模型组比较,电针组和东宝肝泰组大鼠 FBG、FFA、肝组织匀浆TC和TG水平下降(P<0.05或P<0.01),血清 RBP4水平下降(P<0.01), LXR-α和 SREBP-1 c蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:电针“肝俞”、“脾俞”、“膈俞”能降低 NAFLD大鼠血清 RBP4水平,调节脂质代谢,改善脂质沉积,对 NAFLD有明显的治疗作用,其机制可能与抑制肝组织中 LXR-α和 SREBP-1 c蛋白表达上调有关。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪肝 电针 视黄醇结合蛋白4 蛋白免疫印迹法 肝X受体Α 固醇调节元件结合蛋白-1C
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鼻咽癌患者放疗前后血清EB病毒特异性DNA酶抗体的变化 被引量:3
8
作者 李泽卿 王秋萍 +3 位作者 田勇泉 肖健云 赵素萍 陶正德 《医学研究生学报》 CAS 2001年第5期406-408,共3页
目的:了解鼻咽癌(NPC)患者放疗前后血清EB病毒特异性DNA酶(EBV-DNase)抗体的变化,以评估其预后. 方法:用Western Blot及放射免疫法检测24例NPC患者放疗前后血清EBV-DNase抗体,并用免疫酶法测定血清EB病毒壳抗原IgA(EBVCA-IgA). 结果... 目的:了解鼻咽癌(NPC)患者放疗前后血清EB病毒特异性DNA酶(EBV-DNase)抗体的变化,以评估其预后. 方法:用Western Blot及放射免疫法检测24例NPC患者放疗前后血清EBV-DNase抗体,并用免疫酶法测定血清EB病毒壳抗原IgA(EBVCA-IgA). 结果:①用Western Blot检测NPC患者放疗前后血清EBV-DNaes抗体,放疗前抗体阳性率87.50%(21/24),放疗后为29.16%(7/24),差异显著(P<0.01);②放免法测得两组血清抗酶率(AER)平均值分别为74.02%、31.75%,二者有显著差异(P<0.05);③放疗后的血清EBVCA-IgA平均几何滴度(GMT)为1∶23.4,较放疗前明显降低(P<0.05). 结论:PNC放疗后血清EBV-DNase抗体水平有明显下降,比EBVCA-IgA检测更加准确地反映了病情变化.提示血清EBV-DNase抗体检测对评估NPC预后、疗效监测可能有帮助. 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 EB病毒特异性DNA酶 westernblot 放疗
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乙酰肝素酶和整合素α5β1蛋白在葡萄胎组织中的表达及其临床意义 被引量:3
9
作者 王闯 于淑莉 +2 位作者 李桃 呂蓉蓉 齐洁敏 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1361-1366,I0020,共7页
目的:观察乙酰肝素酶(HPA)蛋白和整合素α5β1蛋白在人良、恶性葡萄胎组织中的表达情况,阐明其在良、恶性葡萄胎发生发展中的作用。方法:选择人正常胎盘绒毛组织50例(正常胎盘绒毛组)、良性葡萄胎组织40例(良性葡萄胎组)和恶性葡萄胎组... 目的:观察乙酰肝素酶(HPA)蛋白和整合素α5β1蛋白在人良、恶性葡萄胎组织中的表达情况,阐明其在良、恶性葡萄胎发生发展中的作用。方法:选择人正常胎盘绒毛组织50例(正常胎盘绒毛组)、良性葡萄胎组织40例(良性葡萄胎组)和恶性葡萄胎组织17例(恶性葡萄胎组)。采用免疫组织化学SP法检测各组组织中HPA和整合素α5β1蛋白的阳性表达率和阳性表达强度,Western blotting法分别检测各组组织中HPA和整合素α5β1蛋白表达水平,Spearman等级相关分析法分析良、恶性葡萄胎组织中HPA蛋白和整合素α5β1蛋白表达的相关性。结果:良性葡萄胎组和恶性葡萄胎组组织中HPA和整合素α5β1蛋白阳性表达率、阳性表达强度和表达水平高于正常胎盘绒毛组(P<0.05);恶性葡萄胎组组织中HPA和整合素α5β1蛋白阳性表达率、阳性表达强度和表达水平高于良性葡萄胎组(P<0.05)。在良、恶性葡萄胎组织中HPA蛋白与整合素α5β1蛋白的表达均呈正相关关系(r=0.506,P<0.05;r=0.555,P<0.05)。结论:联合检测HPA和整合素α5β1蛋白的表达可成为良性葡萄胎和恶性葡萄胎鉴别诊断的预测指标。 展开更多
关键词 葡萄胎 免疫组织化学 western blotting法 乙酰肝素酶 整合素Α5Β1
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屋尘螨变应原制剂质量标准的研究 被引量:4
10
作者 石继春 王春娥 +3 位作者 王珊珊 李茂光 王琨 叶强 《中国药事》 CAS 2014年第6期622-625,共4页
目的对屋尘螨变应原制剂质量标准进行修订研究。方法除原注册标准的检测项目外,增加了以ImmunoCAP方法检测氢氧化铝吸附的螨变应原注射液制品的总生物学活性和游离过敏原生物活性测定,以Western-Blot法对其主要成分进行检测。结果10... 目的对屋尘螨变应原制剂质量标准进行修订研究。方法除原注册标准的检测项目外,增加了以ImmunoCAP方法检测氢氧化铝吸附的螨变应原注射液制品的总生物学活性和游离过敏原生物活性测定,以Western-Blot法对其主要成分进行检测。结果10批制品的总特异性IgE测定的均值为20.58kUa·L-1,总过敏原对血清库抑制率均值为67.70%,批间变异系数为1.48%;游离特异性IgE测定的均值为58.24kUa·L-1,游离过敏原对血清库抑制率均值为9.0%,批间变异系数为35.49%。Western Blot结果显示各批制品均与内参有相同的图谱,并在25kD、14kD具有明显的条带。结论新增的的质控方法和质量标准可用于螨变应原注射液产品的常规检定,可以作为考察制品批间一致性的指标。 展开更多
关键词 螨变应原注射液 质量控制 标准修订 总生物学活性 游离过敏原生物活性 全自动体外免 疫检测方法 免疫印迹方法
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杠板归总黄酮抗肝纤维化大鼠的作用及其机制研究 被引量:19
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作者 高雅 李豪 +2 位作者 钟明利 陈毅飞 张可锋 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2015年第2期181-183,共3页
目的研究杠板归总黄酮对二甲基亚硝胺(DMN)诱导的肝纤维化大鼠的拮抗作用。方法将120只SD大鼠随机均分成正常组、模型组、秋水仙碱组和杠板归总黄酮高、中、低剂量(0.15、0.1、0.5 g·kg-1)组。除正常组外,各组大鼠均ip0.5%DMN溶液2... 目的研究杠板归总黄酮对二甲基亚硝胺(DMN)诱导的肝纤维化大鼠的拮抗作用。方法将120只SD大鼠随机均分成正常组、模型组、秋水仙碱组和杠板归总黄酮高、中、低剂量(0.15、0.1、0.5 g·kg-1)组。除正常组外,各组大鼠均ip0.5%DMN溶液2.0 m L·kg-1,隔天注射1次,造模成功后,各给药组均ig给药,qd,连续8周,正常组与模型组ig等量生理盐水。于8周末取血和肝脏,酶联免疫吸附法检测血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和转化生长因子β1(TGF-β1);HE染色观察肝纤维化(HF)形成;Western blot法检测肝组织中TGF-β1的表达。结果与模型组比较,杠板归总黄酮各剂量均可有效降低HF大鼠血清中HA、LN、PCⅢ和TGF-B1的水平;杠板归总黄酮可明显降低HF大鼠肝脏中TGF-β1的表达。结论杠板归总黄酮对DMN诱导的大鼠HF具有良好的拮抗作用,可能通过抗肝损伤和降低TGF-β1的表达来实现。 展开更多
关键词 杠板归总黄酮 肝纤维化 二甲基亚硝胺 转化生长因子β1 western bolt法 酶联免疫吸附法
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金地鼠颊囊癌变过程中p65蛋白的表达研究 被引量:2
12
作者 莫珩 高文信 +1 位作者 王莉 冯小东 《现代口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期165-167,共3页
目的探讨核转录因子-κB家族成员中的一个重要亚基p6 5在DMBA诱导的金地鼠颊囊鳞状细胞癌发生过程中的表达及意义。方法建立金地鼠颊囊癌变的动物模型。采用Westernblot法检测12组配对金地鼠正常颊粘膜、上皮单纯增生、上皮异常增生和... 目的探讨核转录因子-κB家族成员中的一个重要亚基p6 5在DMBA诱导的金地鼠颊囊鳞状细胞癌发生过程中的表达及意义。方法建立金地鼠颊囊癌变的动物模型。采用Westernblot法检测12组配对金地鼠正常颊粘膜、上皮单纯增生、上皮异常增生和鳞状细胞癌组织所提取的核蛋白中p6 5的表达差异。结果在正常颊粘膜和上皮单纯增生组织中未见明显的p6 5表达,且两者相比无显著性差异(P >0 .0 5 )。随着上皮异常增生的出现,p6 5表达增强,较正常组和单纯增生组均有显著性差异(P <0 .0 1)。在鳞状细胞癌组织中,p6 5的表达进一步增强,与正常组和异常增生组相比均有显著性差异(P <0 .0 1)。结论p6 5在金地鼠颊囊鳞状细胞癌发生、发展过程中被激活。P6 5在金地鼠颊囊癌变过程中的表达异常,尤其是在上皮异常增生阶段的表达水平上调,可能是口腔粘膜上皮癌变过程中的一个早期事件。 展开更多
关键词 地鼠 表达水平 癌变过程 颊囊癌 正常 上皮异常增生 鳞状细胞癌 表达差异 核蛋白 粘膜
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胃癌原发灶中上皮间质转化相关因子和CD133的表达及其与临床病理特征和预后的关系 被引量:3
13
作者 蔡成 俞继卫 +4 位作者 吴巨钢 陆瑞祺 倪晓春 王守练 姜波健 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2013年第5期492-498,共7页
目的研究上皮间质转化(EMT)相关因子Snail、E-cadherin、N-cadherin与胃癌患者临床病理特征、预后及胃癌肿瘤起始细胞表面标志物CD133表达的关系。方法利用Western blot方法检测50例胃癌及癌旁正常胃黏膜组织中EMT相关因子及CD133蛋白... 目的研究上皮间质转化(EMT)相关因子Snail、E-cadherin、N-cadherin与胃癌患者临床病理特征、预后及胃癌肿瘤起始细胞表面标志物CD133表达的关系。方法利用Western blot方法检测50例胃癌及癌旁正常胃黏膜组织中EMT相关因子及CD133蛋白的定位及定量表达,分析EMT相关因子及CD133蛋白表达与胃癌患者的临床病理学指标的关系,Spearman等级相关分析EMT相关因子和CD133表达的关系,Kaplan-Meier方法分析EMT相关因子及CD133表达与胃癌患者生存的关系。结果①胃癌组织中Snail、N-cadherin及CD133蛋白表达相对灰度值明显高于其在癌旁正常胃黏膜组织中的表达(Snail:0.599±0.114比0.259±0.108,P=0.020;N-cadherin:0.754±0.154比0.329±0.134,P=0.001;CD133:0.635±0.119比0.485±0.116,P=0.029),E-cadherin蛋白表达相对灰度值明显低于其在癌旁正常胃黏膜组织中的表达(0.378±0.123比0.752±0.156,P=0.003)。②Snail蛋白、N-cadherin蛋白表达平均相对灰度值在有血管浸润、淋巴管浸润、N3淋巴结转移及肿瘤直径≥5 cm和Ⅲ+Ⅳ期胃癌患者中的表达明显高于无血管浸润、淋巴管浸润、N0~N2淋巴结转移及肿瘤直径<5 cm和Ⅰ+Ⅱ期的胃癌患者(P<0.05),而E-cadherin蛋白表达平均相对灰度值在有血管浸润、淋巴管浸润、N3淋巴结转移及Ⅲ+Ⅳ期胃癌患者中的表达显著低于无血管浸润、淋巴管浸润、N0~N2淋巴结转移及Ⅰ+Ⅱ期的胃癌患者(P<0.05),CD133蛋白表达平均相对灰度值在有淋巴管浸润、N3淋巴结转移、肿瘤直径≥5 cm和Ⅲ+Ⅳ期胃癌患者中的表达显著高于无淋巴管浸润、N0~N2淋巴结转移、肿瘤直径<5 cm和Ⅰ+Ⅱ期的胃癌患者(P<0.05)。③Snail、N-cadherin蛋白表达与CD133蛋白表达分别均呈正相关(rs=0.278,P=0.048;rs=0.406,P=0.003),而E-cadherin蛋白表达与CD133蛋白表达呈负相关(rs=-0.504,P=0.000)。④Snail、N-cadherin及CD133蛋白低表达组的生存时间明显长于其高表达者(P<0.05),联合EMT相关因子和CD133蛋白表达能够最有效预测患者生存。结论EMT与胃癌肿瘤起始细胞特性之间存在明显相关,并且两者与胃癌的高侵袭的临床病理特征相关,联合EMT相关因子Snail、E-cadherin、N-cadherin与CD133能够最有效预测胃癌患者的预后。 展开更多
关键词 新生物 上皮间质转化 CD133 预后 westernblot方法
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大鼠脑组织中P-糖蛋白的免疫印迹检测方法 被引量:2
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作者 王冰 潘彦舒 +2 位作者 华茜 侯金才 李澎涛 《现代生物医学进展》 CAS 2007年第3期329-331,共3页
目的:确定蛋白免疫印迹检测大鼠脑组织中P-糖蛋白的最佳实验条件。方法:将成年雄性Wistar大鼠随机分为正常组和模型组。模型组分八个时间点,采用反复夹闭颈总动脉辅以硝普钠降压的方法制备脑缺血再灌注模型。正常组直接断头取脑分别进... 目的:确定蛋白免疫印迹检测大鼠脑组织中P-糖蛋白的最佳实验条件。方法:将成年雄性Wistar大鼠随机分为正常组和模型组。模型组分八个时间点,采用反复夹闭颈总动脉辅以硝普钠降压的方法制备脑缺血再灌注模型。正常组直接断头取脑分别进行组织匀浆和提取微血管,而模型组断头取脑均提取微血管,利用蛋白免疫印迹检测大鼠脑内P-糖蛋白的表达水平。结果:最佳实验条件是:提取微血管,用裂解液C冰上裂解30min,然后40000g离心30min留上清,蛋白定量后在5*上样缓冲液中25℃处理30min。而模型组各时间点P-糖蛋白的表达量随时间的延长逐渐增多。结论:利用提取脑微血管的方法在上述实验条件下进行P-糖蛋白的检测方便、可行,明显优于脑组织匀浆;并且在脑缺血再灌注这种病理状态下脑组织内P-糖蛋白的表达呈现一定的时序特征。 展开更多
关键词 P-糖蛋白 蛋白免疫印迹 检测方法 脑缺血再灌注 微血管
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抗核糖体抗体阳性判断标准的探讨 被引量:1
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作者 彭晓东 王兰兰 +2 位作者 武永康 张瑞薇 刘瑾 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期638-640,共3页
目的 :分析针对分子量为 38kD和 或 15 16 5kD多肽抗原的抗核糖体抗体 (anti ribosomalantibodies)与SLE的关系 ,探讨抗核糖体抗体的阳性判断标准及其在SLE中的检出情况。方法 :收集病人血清 2 6 2例 ,包括SLE115例、RA5 7例、硬皮病 ... 目的 :分析针对分子量为 38kD和 或 15 16 5kD多肽抗原的抗核糖体抗体 (anti ribosomalantibodies)与SLE的关系 ,探讨抗核糖体抗体的阳性判断标准及其在SLE中的检出情况。方法 :收集病人血清 2 6 2例 ,包括SLE115例、RA5 7例、硬皮病 2 0例、MCTD39例及其他免疫性疾病 31例 ,用免疫印迹法 (Western blot)检测其抗ENA抗体谱。结果 :分别以同时出现 38kD和 16 5 15kD蛋白条带以及出现 38kD蛋白条带为判断抗核糖体抗体阳性的标准 ,则该抗体对诊断SLE的敏感性和特异性结果分别为 2 8 7% (33 115 )、96 6 % (14 2 14 7)及 17 4 % (2 0 115 )、97 3% (14 3 14 7) ,两者比较敏感性有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,特异性无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;仅 38kD分子阳性的 14例样本中 ,SLE占大多数 ,显著多于其它疾病 (71 4 %比 2 8 6 % ,P <0 0 5 ) ;38kD分子阳性同时伴抗Sm抗体阳性者多于抗Sm抗体阴性者 ,但无显著性差异 (6 4 3%比 35 7% ,P >0 0 5 )。结论 :抗核糖体抗体 38kD分子与SLE密切相关 ,而与抗Sm抗体相关性不强。以 38kD为主要抗原多肽判断抗核糖体抗体 ,不仅可以提高该抗体的阳性检出率 ,同时也不会降低其对SLE诊断的特异性 ,该判断方法值得推广应用。 展开更多
关键词 抗核糖体抗体 阳性判断标准 免疫印迹法 SLE
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两种方法检测幽门螺旋杆菌抗体及其分型的比较 被引量:6
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作者 杨燕 单万水 +2 位作者 韩红星 李小勇 罗莎莎 《中国医药科学》 2013年第9期122-123,131,共3页
目的为考核南京大渊生物技术工程有限责任公司生产的蛋白芯片法检测幽门螺杆菌(Hp)抗体及其分型试剂的敏感性和特异性,从而判断其在临床诊断中的应用价值。方法临床上采用经SFDA注册的深圳市伯劳特生物制品有限公司的幽门螺杆菌抗体分... 目的为考核南京大渊生物技术工程有限责任公司生产的蛋白芯片法检测幽门螺杆菌(Hp)抗体及其分型试剂的敏感性和特异性,从而判断其在临床诊断中的应用价值。方法临床上采用经SFDA注册的深圳市伯劳特生物制品有限公司的幽门螺杆菌抗体分型检测试剂盒(免疫印迹法)检测幽门螺杆菌抗体及其分型(分为CagA、VacA和Urease),共检测血清476份,检测结果与对比试剂不同的标本用第三方经SFDA认证的试剂进行复核,对于Urease不符合的病例,采用北京康美天鸿生物科技有限公司的幽门螺杆菌尿素酶抗体检测试剂盒(胶体金法)进行检测,对于CagA和VacA不一致的标本,则采用上海研域生物科技有限公司提供的ELISA试剂盒进行检测。结果南京大渊生物技术工程有限责任公司生产的蛋白芯片法检测幽门螺杆菌抗体及其分型试剂CagA阳性符合率94.5%,阴性符合率96.5%,总符合率95.8%(P>0.05);Urease阳性符合率95.1%,阴性符合率92.7%,总符合率95.4%(P>0.05);VacA阳性符合率91.6%,阴性符合率97.1%,总符合率95.2%(P>0.05);两种方法结果经统计学检验差异无统计学意义。结论经以上结果的分析,本次临床试验的有效病例476例,大渊Hp分型检测试剂盒(蛋白芯片法)与伯劳特幽门螺杆菌抗体分型检测试剂盒(免疫印迹法)的一致率均在90%以上,产品质量达到临床使用要求。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌抗体 分型 蛋白芯片法 免疫印迹法
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黄芪(粗)多糖对麻黄素损伤小鼠肾组织结构和抗氧化物酶活性及Caspase-3蛋白表达的影响 被引量:14
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作者 魏娉婷 李重阳 +2 位作者 俞诗源 孟茹 袁静 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期564-571,共8页
目的探讨黄芪(粗)多糖(APS)对麻黄素致损伤小鼠肾组织结构和抗氧化物酶活性的影响。方法 72只昆明小鼠分为空白对照组、实验对照组和黄芪(粗)多糖1、2组。实验对照组和黄芪(粗)多糖1、2组连续腹腔注射0.2 ml浓度为4.0g/L麻黄素溶液,黄芪... 目的探讨黄芪(粗)多糖(APS)对麻黄素致损伤小鼠肾组织结构和抗氧化物酶活性的影响。方法 72只昆明小鼠分为空白对照组、实验对照组和黄芪(粗)多糖1、2组。实验对照组和黄芪(粗)多糖1、2组连续腹腔注射0.2 ml浓度为4.0g/L麻黄素溶液,黄芪(粗)多糖1、2组在腹腔注射麻黄素溶液1 h后,分别灌胃0.3 ml(12.5 g/L、25g/L)APS溶液,空白对照组注射和灌胃等量的生理盐水。用比色法测定小鼠血浆尿素氮(BUN)及肌酐(Cr)含量、肾组织超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量的变化,用显微镜观察小鼠肾组织结构的变化,用免疫组织化学法及Western blotting法检测肾组织Caspase-3蛋白表达的变化。结果实验对照组小鼠血浆BUN及Cr含量高于空白对照组,肾组织SOD活性低于空白对照组,MDA含量高于空白对照组(P<0.05或P<0.01),肾小球严重肿胀,肾小囊腔狭窄,肾小管上皮细胞有不同程度肿胀、坏死,肾组织Caspase-3蛋白表达高于空白对照组(P<0.05或P<0.01)。与实验对照组相比,APS组小鼠血浆BUN及Cr含量降低,肾组织SOD活性升高,MDA含量降低(P<0.05或P<0.01),肾小球肿胀显著减轻,肾小囊腔明显可见,肾小管肿胀明显减轻,Caspase-3蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论 APS能提高小鼠肾功能及肾组织细胞的抗氧化酶活性,能降低肾组织Caspase-3蛋白的表达,可有效减轻麻黄素对小鼠肾组织的损伤,对麻黄素致损伤小鼠有明显的保护效应。 展开更多
关键词 黄芪(粗)多糖 麻黄素 肾功能 组织结构 超氧化物歧化酶 比色法 免疫印迹法 小鼠
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ELISA、胶体硒和免疫印迹试验检测HIV抗体结果分析 被引量:6
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作者 张洪花 史晓燕 +2 位作者 赵国有 汪照国 张西江 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2006年第5期338-340,共3页
目的复检和确认初筛HIV抗体阳性血清,并对比分析试验结果。方法对初筛阳性血清,用胶体硒和ELISA试验复检,任一复检试验阳性的血清再用western blot(WB)试验确认。结果224份初筛阳性血清经复检84份阳性,WB确认61份HIV-1抗体阳性,不确定10... 目的复检和确认初筛HIV抗体阳性血清,并对比分析试验结果。方法对初筛阳性血清,用胶体硒和ELISA试验复检,任一复检试验阳性的血清再用western blot(WB)试验确认。结果224份初筛阳性血清经复检84份阳性,WB确认61份HIV-1抗体阳性,不确定10份,阴性13份。以WB结果为标准,ELISA、胶体硒法的阳性符合率分别为84.72%和82.43%。ELISA的敏感性为100%,特异性为96.84%,胶体硒法的敏感性为100%,特异性为95.03%。阳性、不确定和阴性组血清ELISA平均S/CO分别为20.550,2.244和1.434。ELISA和胶体硒法复检同时阳性,在阳性组、不确定组、阴性组分别为100%(61/61),10%(1/10)和0(0/13)。结论胶体硒和ELISA复检可排除大部分初筛假阳性,但两种复检试验均存在一定的假阳性。3种试验的不符情况仅出现在HIV抗体阴性和不确定组,确定HIV感染依赖于WB确认试验。 展开更多
关键词 HIV抗体 ELISA 胶体硒法 免疫印迹
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Survivin及E-cadherin在子宫腺肌病中的表达及相关性 被引量:4
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作者 夏红蕾 冯颖 +2 位作者 安自珍 贾渊雯 谢佳成 《中国临床研究》 CAS 2016年第10期1311-1314,共4页
目的观察凋亡抑制基因生存素(Survivin)和E-钙粘附素(E-cadherin)在子宫腺肌病的表达及其相关性。方法以兰州市妇幼保健院2013年5月至2014年3月68例子宫病变患者为研究对象应用免疫组化En Vision二步法,检测38例子宫腺肌病病灶及在位内... 目的观察凋亡抑制基因生存素(Survivin)和E-钙粘附素(E-cadherin)在子宫腺肌病的表达及其相关性。方法以兰州市妇幼保健院2013年5月至2014年3月68例子宫病变患者为研究对象应用免疫组化En Vision二步法,检测38例子宫腺肌病病灶及在位内膜组织中Survivin及E-cadherin蛋白的表达,并与30例无症状肌瘤患者的正常子宫内膜组织进行对照;应用Western blot法检测Survivin及E-cadherin在子宫腺肌病病灶与正常内膜的表达。统计学分析以α=0.05为检验水准,当采用R×C表χ2检验的分割法时,检验水准调整为α'=0.0125。结果子宫腺肌病病灶组织中,Survivin蛋白的阳性表达率(89.47%)明显高于在位内膜(55.26%)及正常内膜(6.67%,P均<0.0125)。腺肌病病灶组织中E-cadherin蛋白阳性表达率(47.37%)明显低于在位内膜(71.05%)及正常内膜(96.67%,P均<0.0125)。腺肌病病灶中Survivin和E-cadherin表达呈线性负相关(r=-0.988,P<0.01);Western blot结果显示Survivin蛋白在腺肌病病灶的相对表达量明显高于正常内膜,E-cadherin在腺肌病病灶的相对表达量明显低于正常内膜。结论 Survivin及E-cadherin可能与子宫腺肌病的发生、发展有关。 展开更多
关键词 子宫腺肌病 生存素 E-钙粘附素 子宫内膜 免疫组化 蛋白印迹法
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急性暴露尼古丁对未成年大鼠脑内神经元Caspase-3表达及凋亡的影响 被引量:4
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作者 李曼 翟秀岩 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期504-508,共5页
目的研究急性暴露尼古丁(nicotine)对未成年大鼠脑内神经细胞凋亡的影响。方法用免疫组织化学法和Westernblotting法检测急性暴露尼古丁的未成年模型大鼠脑内Caspase-3的表达;用原位末端标记法(TUNEL法)检测凋亡细胞。结果免疫组织化学... 目的研究急性暴露尼古丁(nicotine)对未成年大鼠脑内神经细胞凋亡的影响。方法用免疫组织化学法和Westernblotting法检测急性暴露尼古丁的未成年模型大鼠脑内Caspase-3的表达;用原位末端标记法(TUNEL法)检测凋亡细胞。结果免疫组织化学法检测到大脑皮层、海马齿状回、CA2区和CA3区的Caspase-3表达在实验组明显增高。蛋白质免疫印迹法(Westernblotting)检测到大脑皮层和海马Caspase-3原型及活性片段的表达在实验组明显增高。TUNEL法检测到大脑皮层和海马齿状回的阳性细胞在实验组明显增多。结论急性暴露尼古丁激活未成年大鼠脑内大脑皮层和海马内神经细胞Caspase-3,促进大脑皮层和海马齿状回的神经元凋亡。 展开更多
关键词 Caspase-3 凋亡 尼古丁 海马 免疫组织化学 免疫印迹法 原位末端标记法 大鼠
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