苦参素注射液与顺铂联合对人肝癌细胞SMMC-7721端粒酶活性及wtp53、hTERT mRNA表达的影响 被引量：10

1

作者 韦星 黄赞松 +3 位作者 黄岑汉 周喜汉 黄衍强 邓志华 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第11期1759-1761,共3页

目的:探讨苦参素注射液与顺铂(DDP)联合对人肝癌SMMC-7721细胞端粒酶活性及wtp53、hTERTmRNA表达的影响。方法:采用MTT法测定细胞的增殖抑制率,应用金氏公式分析药物间的相互作用,TRAP-ELISA检测端粒酶活性,半定量RT-PCR法检测wtp53和hT... 目的:探讨苦参素注射液与顺铂(DDP)联合对人肝癌SMMC-7721细胞端粒酶活性及wtp53、hTERTmRNA表达的影响。方法:采用MTT法测定细胞的增殖抑制率,应用金氏公式分析药物间的相互作用,TRAP-ELISA检测端粒酶活性,半定量RT-PCR法检测wtp53和hTERTmRNA表达。结果:苦参素注射液、DDP单独应用均能抑制SMMC-7721细胞增殖,两药联合具有单纯相加或协同作用,与DDP单药组相比,联合用药组的细胞抑制率明显增加(P<0.01),端粒酶活性显著下降(P<0.01),wtp53mRNA表达明显升高(P<0.01),hTERTmRNA表达明显减少(P<0.01)。结论:苦参素注射液和DDP联合应用具有单纯相加或协同抗肝癌SMMC-7721细胞增殖的作用,其机制可能通过上调wtp53和下调hTERT基因表达,从而有效抑制端粒酶活性。 展开更多

关键词 肝肿瘤 苦参素 顺铂 SMMC-7721细胞 端粒酶 wtp53 HTERT

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黄芪总苷对肝癌细胞凋亡及wtp53基因表达的影响 被引量：51

2

作者 杨雁 陈敏珠 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期447-451,共5页

目的　研究黄芪总苷 (TA)对肝癌细胞凋亡的影响及其机制。方法　将两种人肝癌细胞株HepG2细胞和Bel 740 4细胞分别与TA(2 0 ,40和 80mg·L-1)共培养 6d ,经流式细胞术检测凋亡峰以及p5 3癌基因的表达。结果　TA(2 0 ,40和 80mg·... 目的　研究黄芪总苷 (TA)对肝癌细胞凋亡的影响及其机制。方法　将两种人肝癌细胞株HepG2细胞和Bel 740 4细胞分别与TA(2 0 ,40和 80mg·L-1)共培养 6d ,经流式细胞术检测凋亡峰以及p5 3癌基因的表达。结果　TA(2 0 ,40和 80mg·L-1)可明显促进人肝癌HepG2细胞和Bel 740 4细胞的DNA亚G1峰 (凋亡峰 )升高 ,分别使HepG2细胞凋亡率由 4 1%增至 2 5 4%、5 7 0 %、74 6 % ;使Bel 740 4细胞凋亡率由 4 5 %增至 43 6 %、48 1%、5 0 5 %。TA(80mg·L-1)可促进人肝癌HepG2细胞野生型 p5 3(wtp5 3)的表达 ,还可促进Bel 740 4细胞的wtp5 3癌基因表达 ,并有降低突变型 p5 3(mtp5 3)表达的趋势。 结论　TA具有诱导肝癌细胞凋亡的作用 ,其机制可能与其上调肝癌细胞的wtp5 展开更多

关键词 黄芪总苷 肝癌 细胞凋亡 基因表达 wtp53

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8-Br-cAMP与顺铂对Eca-109细胞DNA polβ,wtp53基因表达及多药耐受蛋白的影响 被引量：4

3

作者 郑乃刚 李士坤 +1 位作者 吴景兰 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2003年第5期657-660,共4页

目的 :比较分化诱导剂 8 Br cAMP与基因毒性药物顺铂对Eca 10 9细胞DNApolβ及wtp5 3基因表达和多药耐受蛋白的影响。方法 :分别制备生物素和地高辛标记的polβ探针和生物素标记的野生型p5 3(wtp5 3)探针 ,并检测各探针灵敏度。将培养... 目的 :比较分化诱导剂 8 Br cAMP与基因毒性药物顺铂对Eca 10 9细胞DNApolβ及wtp5 3基因表达和多药耐受蛋白的影响。方法 :分别制备生物素和地高辛标记的polβ探针和生物素标记的野生型p5 3(wtp5 3)探针 ,并检测各探针灵敏度。将培养的人食管癌Eca 10 9细胞分组如下 :① 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②不加 8 Br cAMP的对照组 (C1组 ) ,①②组同时培养 4 8h ;③顺铂组 (Pt组 ) ;④不加Pt的对照组 (C2组 ) ,③④组同时培养 2 4h。应用原位杂交技术显示各组细胞polβ基因的表达。对①②及③组细胞进行polβ及wtp5 3双信号原位杂交 ,并应用多药耐受蛋白 (MRP)的免疫组化方法检测耐药性。结果 :生物素标记的polβ探针的杂交信号呈兰紫色细颗粒 ,分布于胞质 ;Br组信号弱于C1组 ,P <0 .0 5。Pt组的信号比C2组强 ,P <0 .0 5。Br组的MRP IR弱于C1组 ,P <0 .0 5 ;Pt组的多药耐受蛋白免疫反应性 (MRP IR)强于C2组 ,P <0 .0 5。地高辛标记的polβ探针的杂交信号呈橙色细颗粒 ,生物素标记的wtp5 3探针的杂交信号呈蓝紫色细颗粒 ,均分布于胞质。在双杂交信号细胞内C1组的橙色强于蓝紫色信号 ;而Br组的蓝紫色信号较明显 ,Pt组的橙色信号较C1组更显著 ,3组相比P皆 <0 .0 5。结论 :8 Br cAMP可下调polβ基因表达及耐药性 ,上? 展开更多

关键词 DNA聚合酶Β 8-BR-CAMP 顺铂 wtp53 耐药性 ECA-109细胞 食管癌

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促红细胞生成素对糖尿病大鼠视网膜bcl-2、bax和WTp53表达的影响 被引量：6

4

作者 张燕 牛膺筠 +1 位作者 赵岩松 曲虹 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2008年第9期680-684,共5页

目的研究bcl-2,bax和WTp53蛋白在糖尿病大鼠视网膜组织中的表达及促红细胞生成素(EPO)对其表达的影响。方法48只Wistar大鼠用链脲佐菌素诱导糖尿病(DM),随机分为糖尿病未治疗组和EPO治疗组,分别于1、3、6个月处死大鼠,8只正常Wistar大... 目的研究bcl-2,bax和WTp53蛋白在糖尿病大鼠视网膜组织中的表达及促红细胞生成素(EPO)对其表达的影响。方法48只Wistar大鼠用链脲佐菌素诱导糖尿病(DM),随机分为糖尿病未治疗组和EPO治疗组,分别于1、3、6个月处死大鼠,8只正常Wistar大鼠作为对照组。TUNEL法检测细胞凋亡情况,免疫组织化学法检测大鼠视网膜组织中bcl-2、bax和WTp53蛋白的表达及EPO对其表达的影响。结果DM3和DM6组大鼠视网膜凋亡细胞较正常组和DM1组大鼠增多;与正常组和DM1组大鼠比较,DM3组和DM6组视网膜bcl-2蛋白阳性细胞数减低,bax及WTp53蛋白表达阳性细胞数较多。EPO3、EPO6组与DM3组和DM6组比较,bcl-2阳性细胞数增多,bax和WTp53蛋白表达明显下降(P<0.05)。结论EPO能减少DM大鼠视网膜神经细胞的凋亡,其机制可能与上调bcl-2及下调bax以及WTp53蛋白的表达有关。 展开更多

关键词 糖尿病 视网膜 细胞凋亡 BCL-2 BAX wtp53 促红细胞生成素

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EPO对视网膜缺血再灌注损伤中WTp53、CyclinD1含量变化的影响 被引量：2

5

作者 周玮琰 牛膺筠 +3 位作者 周占宇 杨文毅 杨莹 谢迎宾 《眼科新进展》 CAS 2007年第10期738-741,共4页

目的研究促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)与视网膜缺血再灌注损伤(retinal ischemical reperfusion injury,RIRI)视网膜组织中野生型p53(wild type p53,WTp53)、CyclinD1的关系,为EPO治疗RIRI提供理论依据。方法前房穿刺加压法制作... 目的研究促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)与视网膜缺血再灌注损伤(retinal ischemical reperfusion injury,RIRI)视网膜组织中野生型p53(wild type p53,WTp53)、CyclinD1的关系,为EPO治疗RIRI提供理论依据。方法前房穿刺加压法制作大鼠RIRI模型,28只大鼠随机分为正常组和手术组,其中手术组大鼠左眼为RIRI组,右眼为治疗组(于再灌注开始即刻玻璃体腔内注射EPO20I U),手术组又按照再灌注后不同时间段分为1h、6h、12h、24h、48h、72h组。SABC免疫组织化学法检测视网膜组织中WTp53、CyclinD1的表达。结果RIRI组视网膜在再灌注6h后可发现有WTp53、CyclinD1的表达,24h达到高峰,48h仍持续强表达,72h表达已明显下降。玻璃体腔内注射EPO后上述因子表达趋势不变,但各时间点治疗组较RIRI组表达强度明显减少(P<0.01)。结论玻璃体腔内注射EPO可以抑制WTp53、CyclinD1表达,这可能是EPO治疗RIRI的机制之一。 展开更多

关键词 视网膜 缺血再灌注损伤 促红细胞生成素 wtp53 细胞周期蛋白D1

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WTp53基因联合TK/GCV、CD/5-Fc系统治疗人结肠癌的实验研究 被引量：3

6

作者 魏冬 何庆泗 +2 位作者 吴雪 谭伟 牛洪欣 《中国现代普通外科进展》 CAS 2005年第6期342-345,共4页

目的:观察WTp53基因联合TK/GCV、CD/5-Fc系统对人结肠癌的治疗效果,并探讨其作用机理。方法:采用培养细胞移植法,将人结肠癌细胞系SW480接种于裸鼠背部皮下,建立裸鼠人结肠癌移植瘤模型,将32只裸鼠随机分为4组:对照组、WTp53组、TK、CD... 目的:观察WTp53基因联合TK/GCV、CD/5-Fc系统对人结肠癌的治疗效果,并探讨其作用机理。方法:采用培养细胞移植法,将人结肠癌细胞系SW480接种于裸鼠背部皮下,建立裸鼠人结肠癌移植瘤模型,将32只裸鼠随机分为4组:对照组、WTp53组、TK、CD组、WTp53与TK、CD组,每组8只,WTp53采用脂质体介导,TK、CD采用逆转录病毒介导。将WTp53、TK、CD注入移植瘤体内,瘤内注射TK、CD的裸鼠同时腹腔注射GCV、5-Fc治疗,观察各组小鼠的生存状况及肿瘤体积、瘤重、肿瘤生长抑制率、常规病理、生存期等指标,比较观察各治疗组的治疗效果及对荷瘤裸鼠存活的影响。结果:各治疗组裸鼠人结肠癌移植瘤的生长均受到显著抑制,裸鼠存活期显著延长,联合基因治疗组效果更好,WTp53、与TK、CD有交互协同作用。结论:WTp53、TK/GCV、CD/5-Fc对人结肠癌SW480细胞有明显抑制作用,WTp53基因联合TK/GCV、CD/5-Fc系统效果更强。 展开更多

关键词 基因 wtp53 胸苷激酶 丙氧鸟苷 胞嘧啶脱氨酶 氟胞嘧啶 结直肠肿瘤 基因疗法 小鼠

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视网膜缺血再灌注损伤中WTp53蛋白、CyclinD1 表达的研究及bFGF对其的影响 被引量：2

7

作者 袁春燕 周占宇 +1 位作者 牛膺筠 赵岩松 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2005年第2期151-154,共4页

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在大鼠视网膜缺血再灌注损伤(RIRI)中的治疗作用及机制。方法将28只Wistar大鼠随机分为正常组、缺血组和bFGF治疗组,其中后两组又按再灌注时间不同分为再灌注后1、6、12、24、48和72h6个时间段。... 目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在大鼠视网膜缺血再灌注损伤(RIRI)中的治疗作用及机制。方法将28只Wistar大鼠随机分为正常组、缺血组和bFGF治疗组,其中后两组又按再灌注时间不同分为再灌注后1、6、12、24、48和72h6个时间段。通过前房穿刺加压法制作成RIRI动物模型,并在以bFGF(治疗组)或平衡盐溶液(缺血组)玻璃体腔注射后按不同时段处死动物,通过免疫组织化学链酶卵白素-生物素复合体(SABC)法检测各时段视网膜组织中野生型p53蛋白(WTp53)和细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的表达变化。结果缺血组视网膜在再灌注后6h可发现有WTp53蛋白及CyclinD1的表达,24h达到高峰,48h仍持续强表达,72h表达已明显下降;bFGF治疗组各观察指标变化规律基本与缺血组相似,但表达量相对明显减弱,两组比较,在再灌注6-48h时段差别P值均<0.05,具有统计学意义。结论bFGF可抑制RIRI时WTp53蛋白和CyclinD1在视网膜表达的增高。 展开更多

关键词 视网膜 缺血再灌注损伤 碱性成纤维细胞生长因子 wtp53 细胞周期蛋白D1

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8-Br-cAMP对Eca-109细胞c-myc,wtp53,iNOS基因和EGFR表达的影响 被引量：1

8

作者 王红梅 宫璀璀 +1 位作者 吴景兰 王一菱 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2003年第5期669-672,共4页

目的 :探讨 8 Br cAMP对Eca 10 9细胞c myc、wtp5 3、iNOS基因和EGFR表达的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分为 2组 :①实验组 :加 8 Br cAMP至终浓度为 2× 10 -5mol/L ,培养 2 4h ;②对照组 :不加 8 Br cAMP ,培养 2 4... 目的 :探讨 8 Br cAMP对Eca 10 9细胞c myc、wtp5 3、iNOS基因和EGFR表达的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分为 2组 :①实验组 :加 8 Br cAMP至终浓度为 2× 10 -5mol/L ,培养 2 4h ;②对照组 :不加 8 Br cAMP ,培养 2 4h。对 2组的细胞涂片和硝酸纤维素膜 (NCM)标本进行c myc、wtp5 3、iNOS基因和EGFR表达检测 ,并对扫描数值进行统计学处理。结果 :原位杂交及免疫组化反应信号皆定位于Eca 10 9细胞的胞质 ,扫描数值显示 :①c mycmRNA :实验组为 3.38± 0 .99,对照组为 5 .18± 1.39;②wtp5 3mRNA :实验组为 2 .74± 0 .83,对照组为 0 .38±0 .2 7;③iNOSmRNA :实验组为 4 .5 2± 0 .74 ,对照组为 2 .6 3± 0 .13;④EGFR IR :实验组为 2 .37± 1.0 5 ,对照组为 4 .38±0 .4 8。以上实验组与对照组比较差异有统计学意义 (P均 <0 .0 5 )。结论 :c myc、wtp5 3和NO均可参与 8 Br 展开更多

关键词 C-MYC基因 wtp53基因 INOS基因 EGFR 8-BR-CAMP ECA-109细胞 癌细胞

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碱性成纤维细胞生长因子及WTp53在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的作用 被引量：1

9

作者 王红云 牛膺筠 +2 位作者 袁春燕 高云霞 丁玉枝 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2005年第6期140-141,i006,共3页

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的作用及其机制。方法:随机将28只大鼠分为正常组和手术组,其中手术组大鼠左眼为缺血再灌注组,右眼为治疗组(玻璃体腔内注射bFGF),观... 目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的作用及其机制。方法:随机将28只大鼠分为正常组和手术组,其中手术组大鼠左眼为缺血再灌注组,右眼为治疗组(玻璃体腔内注射bFGF),观察再灌注后不同时间段1,6,12,24,48,72h视网膜组织中细胞凋亡情况及WTp53的表达变化。前房加压法制作大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型。应用末端脱氧核酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记(TUNEL)法检测视网膜组织中凋亡细胞数,免疫组织化学SABC法检测视网膜组织中WTp53蛋白的表达。结果:视网膜神经细胞的凋亡出现于再灌注后6h,并逐渐递增,24h达到高峰,48h开始下降,72h组不明显。WTp53蛋白表达改变与凋亡的神经细胞改变基本一致。治疗组各观察指标表达变化规律与缺血再灌注组基本一致,但凋亡细胞数目在6～48h犤6,12,24,48h分别为(358.3±43.4),(859.5±12.0),(1006.5±49.4),(695.7±72.2)个/mm2犦明显低于缺血再灌注组犤(444.8±89.7),(1053.0±96.1),(1254.0±164.8),(891.0±87.2)个/mm2犦(t=2.9131～4.299,P均<0.05);WTp53表达在6～48h缺血再灌注组显著下降(t=3.342～4.781,P<0.05;t=52.586,P<0.01)。结论:WTp53参与视网膜缺血-灌注损伤,促进神经节细胞的凋亡; 展开更多

关键词 wtp53 视网膜缺血再灌注损伤 大鼠 表达 凋亡细胞 碱性成纤维细胞生长因子 治疗组 核酸 转移酶 FGF

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顺铂对肝癌细胞凋亡中wtp53、C-myc基因表达的影响 被引量：3

10

作者 刘登洋 马力 +1 位作者 张德奎 武桂芳 《兰州医学院学报》 2000年第2期1-3,共3页

目的　研究顺铂对抑癌基因wtp53及癌基因C -myc在肝癌细胞凋亡过程中表达的影响。方法　用抑癌药顺铂诱导凋亡 ,通过细胞形态学检查 ,DNA琼脂糖凝胶电泳证明凋亡发生 ,采用原位杂交技术检测wtp53、C myc基因在人肝癌细胞株SMMC 772 1凋... 目的　研究顺铂对抑癌基因wtp53及癌基因C -myc在肝癌细胞凋亡过程中表达的影响。方法　用抑癌药顺铂诱导凋亡 ,通过细胞形态学检查 ,DNA琼脂糖凝胶电泳证明凋亡发生 ,采用原位杂交技术检测wtp53、C myc基因在人肝癌细胞株SMMC 772 1凋亡过程中的表达。结果　wtp53基因在顺铂作用后 1h开始表达 ,6h达到高峰 ,12h则明显下降。C myc基因在顺铂作用后表达逐渐增强 ,12h达到高峰。结论　wtp53、C myc基因均参与了肝癌细胞的凋亡过程 ,具有促进细胞凋亡作用。wtp53基因对C myc基因在转录水平上可能有上调作用。 展开更多

关键词 细胞凋亡 肝癌 顺铂 治疗 wtp53 C-MYC 基因表达

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NGF对癫痫大鼠海马神经细胞wtp53表达的影响 被引量：2

11

作者 丛树艳 刘冰 柳忠兰 《辽宁医学杂志》 2000年第4期181-183,共3页

为探讨神经生长因子 (NGF)对红藻氨酸 (KA)诱导癫痫发作大鼠海马神经细胞野生型 p53(wtp53) 蛋白的表达有无抑制作用 ,我们采用KA诱导癫痫大鼠模型 ,分别于实验 1 2小时、2 4小时、4 8小时用免疫组织化学SP法检测wtp53蛋白表达及NGF对... 为探讨神经生长因子 (NGF)对红藻氨酸 (KA)诱导癫痫发作大鼠海马神经细胞野生型 p53(wtp53) 蛋白的表达有无抑制作用 ,我们采用KA诱导癫痫大鼠模型 ,分别于实验 1 2小时、2 4小时、4 8小时用免疫组织化学SP法检测wtp53蛋白表达及NGF对其表达的结果。结论 :大鼠急性癫痫发作后 ,其海马CA1区神经细胞wtp53蛋白表达在各时间点明显增强 ( P <0 0 1 ) ;给予NGF ,在各相应时间点wtp53蛋白表达显著性下降 ( P <0 0 1 )。结果 :NGF能抑制癫痫发作后海马神经细胞wtp53蛋白表达 。 展开更多

关键词 神经生长因子 癫痫 红藻氨酸 wtp53 大鼠

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腺病毒介导的wtp53基因对五种癌细胞系的生长抑制作用

12

作者 史国利 冯宇新 +3 位作者 刘丛 赵立青 房欣 陈德风 《南开大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期91-94,126,共5页

构建重组腺病毒载体 Ad CMVp53 ,将 wtp53分别导入 PG(人肺巨细胞瘤细胞 )、CAE(人结肠癌细胞 )、HCT(人结肠癌细胞 )、He La(人宫颈癌细胞 )及 BEL74 0 2 (人肝癌细胞 )五种癌细胞中 ,测定 Ad CMVp53对癌细胞的半抑制浓度 ( IC5 0 )和... 构建重组腺病毒载体 Ad CMVp53 ,将 wtp53分别导入 PG(人肺巨细胞瘤细胞 )、CAE(人结肠癌细胞 )、HCT(人结肠癌细胞 )、He La(人宫颈癌细胞 )及 BEL74 0 2 (人肝癌细胞 )五种癌细胞中 ,测定 Ad CMVp53对癌细胞的半抑制浓度 ( IC5 0 )和细胞生长曲线 ,分析不同组织癌细胞对 Ad CMVp53的敏感程度 .结果表明 ,Ad CMVp53对癌细胞具有与病毒剂量相关的明显致死作用 ,但不同细胞对腺病毒剂量的敏感程度有差异 ,PG、CAE和BEL74 0 2三个细胞系较为敏感 ,其 IC5 0 低于 1 5MOI(重复感染率 ,multipicity of infection) ;而 He La和 HCT细胞需要较高的病毒剂量 ,IC5 0 分别为 1 0 0 MOI和 80 0 MOI. 展开更多

关键词 腺病毒载体 癌细胞 生长抑制作用 wtp53基因

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D-氨基葡萄糖衍生物对人食管癌Eca-109细胞Bcl-2及WTp53蛋白表达的影响

13

作者 强占荣 吴静 +4 位作者 李娟 杨国栋 周永宁 王爱勤 薛群基 《现代肿瘤医学》 CAS 2009年第5期808-811,共4页

目的:探讨D-氨基葡萄糖衍生物2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖(CO-PADG)对人食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:体外培养Eca-109细胞,CO-PADG作用Eca-109细胞不同时间;倒置显微镜下观察细胞形态学变化;MTT法... 目的:探讨D-氨基葡萄糖衍生物2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖(CO-PADG)对人食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:体外培养Eca-109细胞,CO-PADG作用Eca-109细胞不同时间;倒置显微镜下观察细胞形态学变化;MTT法检测不同时间点细胞增殖抑制率;流式细胞术检测COPADG作用后Eca-109细胞内Bcl-2及WTp53蛋白表达的变化;AnnexinV/PI染色结合流式细胞术检测COPADG作用后Eca-109细胞凋亡率。结果:COPADG作用显著增加Eca-109细胞增殖抑制率及凋亡率;COPADG作用使Eca-109细胞内Bcl-2蛋白表达明显下调而WTp53蛋白表达无变化。结论:COPADG显著抑制Eca-109细胞增殖并诱导细胞凋亡发生,细胞内Bcl-2蛋白表达下调,并可能通过该机制诱导细胞凋亡的发生。 展开更多

关键词 2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖 食管癌 凋亡 BCL-2 wtp53

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Src基因和mRNA、wtp53基因mRNA在乳腺癌中的表达及预后的相关性

14

作者 王登山 李兰萍 +2 位作者 沈美玲 卢根福 孙吉心 《世界肿瘤杂志》 2004年第2期130-135,F004,共7页

目的 探讨Src基因mRNA、wtp53基因mRNA、nm23基因mRNA和bcl-2基因mRNA在乳腺癌预后中的意义。方法 采用分子原位杂交技术检测133例乳腺癌组织中Src基因mRNA、wtp53基因mRNA、nm23基因mRNA和bcl-2基因mRNA表达水平，并对患者生存率进行... 目的 探讨Src基因mRNA、wtp53基因mRNA、nm23基因mRNA和bcl-2基因mRNA在乳腺癌预后中的意义。方法 采用分子原位杂交技术检测133例乳腺癌组织中Src基因mRNA、wtp53基因mRNA、nm23基因mRNA和bcl-2基因mRNA表达水平，并对患者生存率进行了回顾性随访。结果 Src基因mRNA、wtp53基因mRNA和nm23基因mRNA在乳腺癌阳性组与阴性组生存率差异有显著性(P=0．0004，P=0．0033，P=0．0226)。腋下淋巴结转移阴性组与阳性组生存率差异也有显著性(P=0．0005)。Src基因mRNA、wtp53基因mRNA和nm23基因mRNA在乳腺良、恶性肿瘤的表达，差异具有显著性意义(P＜0．05)。bcl-2基因mRNA在乳腺良、恶性肿瘤表达差异无显著性(P＞0．05)。结论 经COX比例风险模型多变量分析，最具价值的指标是Src基因mRNA和wtp53基因mRNA。此外，nm23基因mRNA、腋下淋巴结转移也是重要的预后指标。多种指标的联合应用，有助于提高判断的正确性。 展开更多

关键词 Src基因 wtp53基因 MRNA 乳腺癌 基因表达 腋下淋巴结转移

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苦参素注射液联合顺铂对人肝癌SMMC-7721细胞端粒酶活性及wtp53、hTERT mRNA表达的影响 被引量：2

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作者 卞光亮 蒋华 马秀建 《中国药房》 CAS CSCD 2014年第48期4561-4563,共3页

目的:观察苦参素注射液联合顺铂(DDP)对人肝癌SMMC-7721细胞端粒酶活性、野生型p53(wtp53)、端粒酶逆转录酶(h TERT)m RNA表达的影响。方法:将Dulbecco改良Eagle培养基培养的人肝癌SMMC-7721细胞分为苦参素组、DDP组、联合组和对照组。... 目的:观察苦参素注射液联合顺铂(DDP)对人肝癌SMMC-7721细胞端粒酶活性、野生型p53(wtp53)、端粒酶逆转录酶(h TERT)m RNA表达的影响。方法:将Dulbecco改良Eagle培养基培养的人肝癌SMMC-7721细胞分为苦参素组、DDP组、联合组和对照组。苦参素组低、中、高质量浓度分别为0.75、1.5、3.0 mg/ml,DDP组低、中、高质量浓度分别为1、2、4 mg/ml,联合组浓度按两药联合用药1∶1的比例应用,对照组加入200μl磷酸缓冲盐溶液(PBS),不给予药物干预。观察4组人肝癌SMMC-7721细胞凋亡率及药物间的相互作用,端粒酶活性吸光度差值(ΔA),wtp53和h TERTm RNA相对表达量。结果:联合组人肝癌SMMC-7721细胞凋亡率>苦参素组>DDP组>对照组,4组比较差异有统计学意义(P<0.01),q值提示苦参素与DDP存在单纯相加或协同作用。苦参素组、DDP组及联合组SMMC-7721细胞端粒酶活性ΔA、h TERTm RNA均显著低于对照组,且联合组<DDP组<苦参素组,苦参素组、DDP组及联合组wtp53显著高于对照组,且联合组>DDP组>苦参素组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:苦参素注射液联合DDP可增加人肝癌SMMC-7721细胞的凋亡,其机制可能与wtp53表达上调、h TERTm RNA表达下调,从而影响端粒酶活性有关。 展开更多

关键词 苦参素注射液 顺铂 SMMC-7721细胞 肝癌 端粒酶 wtp53 端粒酶逆转录酶

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热休克蛋白70对X射线照射下wtp53蛋白的影响 被引量：1

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作者 赵玫 范云霞 +3 位作者 黄常志 徐枫 杜菲 林梁 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2001年第1期51-54,共4页

目的　探讨反义热休克蛋白 70 (hsc70 )在X射线照射下对野生型p5 3(wtp5 3)的影响。方法　利用脂质体方法将本室构建的反义hsc70真核表达重组质粒pXAhsc70转染wtp5 3的MCF 7乳腺癌细胞 ,PCR证实外源DNA存在。Westernblot检测hsc70蛋白... 目的　探讨反义热休克蛋白 70 (hsc70 )在X射线照射下对野生型p5 3(wtp5 3)的影响。方法　利用脂质体方法将本室构建的反义hsc70真核表达重组质粒pXAhsc70转染wtp5 3的MCF 7乳腺癌细胞 ,PCR证实外源DNA存在。Westernblot检测hsc70蛋白下降程度。X射线照射转染细胞后 ,检测wtp5 3蛋白的表达情况及半衰期变化。结果　转染重组质粒的细胞中hsc70蛋白下降 5 3% ;不同剂量X射线照射下 ,反义hsc70的存在能够提高wtp5 3的表达 ;4Gy相同剂量照射后 ,转染反义hsc70重组质粒的细胞中wtp5 3的半衰期延长。结论　反义hsc70能够上调wtp5 3的表达、稳定X射线照射下的wtp5 3蛋白并延长其半衰期 ;推测hsc70可能参与了wtp5 展开更多

关键词 反义RNA 野生型p53蛋白 热休克蛋白70 X射线照射 肿瘤 放射治疗

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瓦斯爆炸对大鼠心肌损伤过程中HIF-1α的动态变化 被引量：6

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作者 王桂芝 任文杰 +6 位作者 吴松远 秦祖暄 郭乔楠 可金星 刘良明 王小民 刘雅 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期640-642,共3页

目的　探索瓦斯爆炸伤致伤心肌缺氧后HIF 1αmRNA及其蛋白表达的动态变化规律及其在瓦斯爆炸伤心肌继发性损害发病机制中的作用。方法　建立瓦斯爆炸伤动物实验模型,并分析爆炸后3 0min、2、4、8、12、2 4、48h时段心肌组织大体、光镜... 目的　探索瓦斯爆炸伤致伤心肌缺氧后HIF 1αmRNA及其蛋白表达的动态变化规律及其在瓦斯爆炸伤心肌继发性损害发病机制中的作用。方法　建立瓦斯爆炸伤动物实验模型,并分析爆炸后3 0min、2、4、8、12、2 4、48h时段心肌组织大体、光镜及超微结构特点;用地高辛标记HIF 1αcDNA探针进行心肌组织原位杂交;用RT PCR方法对心肌组织HIF 1αmRNA进行半定量检测,用S P法进行心肌组织HIF 1α及wtP5 3免疫组化染色。结果　存活动物全身表皮可见不同程度烧伤,以四肢为重,实质脏器未见明显破裂,心内膜下可见附壁血栓。电镜下见:①心肌细胞水肿,线粒体肿胀、空化,内质网扩张;②部分肌丝排列紊乱,肌丝有局灶性溶解,闰盘分离;③核形不规则,异染色质边集,可见核溶解;④毛细血管周围间隙增宽,内皮细胞肿胀、变性,管腔狭窄。此病变在4h内明显,随时间延长,病变程度减轻。HIF 1αmRNA及其蛋白表达明显增加,且2h达高峰值,明显高于3 0min及48h组,对照组无表达(P <0 0 1)。wtP5 3表达明显增加,2h为高峰值。结论　HIF 1α在瓦斯爆炸伤致心肌缺氧的继发性损害发病机制中起重要作用,且与损伤程度密切相关,wtP5 3可降低HIF 1α的活性,减少HIF 1α的过量表达,增加wtP5 3的活性及量可减轻瓦斯爆炸所致的心肌损伤,对心肌起保护作用。 展开更多

关键词 瓦斯爆炸 心肌 HIF-α wtp53

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野生型p53/junB融合基因真核表达载体的构建 被引量：3

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作者 郭成 张雷 +4 位作者 刘青光 宋涛 杨雪 郑鑫 姚英民 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期41-46,共6页

目的通过构建抑癌基因野生型p53(wtp53)与核转录因子junB的融合基因真核表达载体,为进一步研究联合基因疗法在肝癌中的应用奠定一定的基础。方法运用PCR(polymerase chain reaction)、RT-PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)、基因... 目的通过构建抑癌基因野生型p53(wtp53)与核转录因子junB的融合基因真核表达载体,为进一步研究联合基因疗法在肝癌中的应用奠定一定的基础。方法运用PCR(polymerase chain reaction)、RT-PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)、基因重组技术构建携带增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluoresent protein,EGFP)报告基因的wtp53/junB融合基因真核表达载体pEGFP-C1-wtp53/junB。通过观察绿色荧光定位的方法验证wtp53/junB融合基因的真核表达载体转染人肝癌细胞株HepG2的情况。结果成功地将p53/junB融合基因克隆到pEGFP-C1质粒中,其序列与设计的完全一致;转染人肝癌细胞株HepG2后可观察到绿色荧光定位于细胞核中,证明wtp53/junB融合基因成功转染入肝癌细胞株中。结论成功构建了携带EGFP的pEGFP-C1-wtp53/junB融合基因真核表达载体,并转染入人肝癌细胞核中,为进一步研究两者在肝癌中的协同作用奠定了基础。 展开更多

关键词 wtp53 JUNB HEPG2 融合基因 肝细胞癌

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DNA-PKcs反义寡核苷酸对不同p53功能状态的鼻咽癌细胞株辐射抗性的影响 被引量：13

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作者 蒋昌斌 刘秀芳 +2 位作者 贺玉香 牛道立 夏云飞 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第2期139-143,共5页

背景与目的:DNA依赖性蛋白激酶(DNA-dependent protein kinase,DNA-PK)是一种双链断裂修复蛋白,可以修复细胞的DNA双链断裂损伤。本研究通过转染DNA-PKcs反义寡核苷酸入鼻咽癌细胞株,探讨DNA-PKcs反义寡核苷酸对不同p53功能状态的鼻咽... 背景与目的:DNA依赖性蛋白激酶(DNA-dependent protein kinase,DNA-PK)是一种双链断裂修复蛋白,可以修复细胞的DNA双链断裂损伤。本研究通过转染DNA-PKcs反义寡核苷酸入鼻咽癌细胞株,探讨DNA-PKcs反义寡核苷酸对不同p53功能状态的鼻咽癌细胞株的放射敏感性的影响。方法:利用LipofectamineTM2000转染DNA-PKcs反义寡核苷酸入鼻咽癌细胞株CNE-1和CNE-1-wtp53;设0、0.5、1、2、4、6、8Gy7个放射剂量点,用集落形成法分析转染反义寡核苷酸前后细胞的存活情况,并分别用线性二次模型和单击多靶模型拟合出细胞的剂量存活曲线,求出放射生物学参数α、β、α/β、SF2、D0、Dq和N值,评价细胞放射敏感性的变化。结果:转染DNA-PKcs反义寡核苷酸前,CNE-1和CNE-1-wtp53的α值分别为0.03、0.05,SF2值分别为0.73、0.50,D0值分别为2.08Gy、1.13Gy,Dq值分别为2.04Gy、1.36Gy。转染DNA-PKcs反义寡核苷酸后,CNE-1和CNE-1-wtp53的α值分别为0.04、0.26,SF2值分别为0.45、0.21,D0值分别为1.07Gy、0.83Gy,Dq值分别为1.24Gy、0.73Gy。转染DNA-PKcs反义寡核苷酸后,鼻咽癌细胞的α值增大,SF2、D0、Dq值均减小。结论:DNA-PKcs反义寡核苷酸可逆转CNE-1的辐射抗性,该逆转作用不依赖细胞的p53功能状态。 展开更多

关键词 DNA依赖性蛋白激酶(DNA—PK) 反义寡核苷酸 鼻咽肿瘤 放射敏感性 CNE-1细胞株 CNE-1-wtp53细胞株

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正反p33^(ING1b)对人类胰腺癌细胞SW1990生长的影响 被引量：2

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作者 于观贞 陈颖 +1 位作者 祝峙 朱明华 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1107-1110,共4页

目的:探讨p33ING1b和wtp53体外对胰腺癌细胞生物学活性的影响。方法:脂质体法将正义和反义p33ING1b以及wtp53单转染和共转染胰腺癌细胞SW1990;Western印迹法检测p33ING1b和wtp53蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞周期改变情况;特殊染色... 目的:探讨p33ING1b和wtp53体外对胰腺癌细胞生物学活性的影响。方法:脂质体法将正义和反义p33ING1b以及wtp53单转染和共转染胰腺癌细胞SW1990;Western印迹法检测p33ING1b和wtp53蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞周期改变情况;特殊染色观察细胞凋亡情况。结果:转染p33ING1b组和共转染p33ING1b和wtp53组,两者蛋白水平明显较反义组和空转组高(P<0.05);共转组SW1990细胞生长周期较其他各组缩短;转染p33ING1b组和共转染p33ING1b和wtp53组,两者凋亡细胞数目较反义组和空转组多。结论:p33ING1b对细胞可能存在正性调控作用,这种作用可能主要通过p53来发挥作用的。 展开更多

关键词 胰腺肿瘤 P33^ING1B wtp53 细胞凋亡

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