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WSB2在宫颈癌中的表达及其与临床相关性 被引量：2
1
作者 白云 熊艳杰 +1 位作者 吴颖露 陈佳新 《中国煤炭工业医学杂志》 2022年第3期247-251,共5页
目的 本研究旨在检测信号传导抑制蛋白WD重复蛋白2(WSB2)在宫颈癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系,并且分析与微血管密度(MVD)的相关性,探讨它们与宫颈癌发生发展的可能关系。方法通过免疫组织化学染色法检测华北理工大学附属医... 目的 本研究旨在检测信号传导抑制蛋白WD重复蛋白2(WSB2)在宫颈癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系,并且分析与微血管密度(MVD)的相关性,探讨它们与宫颈癌发生发展的可能关系。方法通过免疫组织化学染色法检测华北理工大学附属医院70例宫颈癌组织标本WSB2表达情况及其与临床病理参数之间的相关性,并进行MVD测定,分析WSB2表达与MVD的关系。另选宫颈上皮内病变组织30例和正常组织15例作为对照。结果 与正常组、良性组、癌组相比较,WSB2蛋白在70例宫颈癌组织中的阳性表达率高,为88.6%,在正常和良性组织表达率低,分别为13.3%和25.7%,差异有统计学意义(P<0.05),WSB2在宫颈癌的表达与患者年龄、病理分级、组织分型差异无统计学意义(P>0.05),与淋巴结转移和FIGO分期的进展表达量显著升高(P<0.05);MVD在宫颈癌的表达与临床分期、病理分级和淋巴结转移呈正相关,与年龄、组织分型差异无统计学意义(P>0.05)。结论 在宫颈癌组织中WSB2高表达,与分化程度和临床分期相关,提示WSB2可能与宫颈癌的发生发展有一定关联,将来可以作为宫颈癌的生物分子标记物。 展开更多
关键词 wsb2 宫颈癌 免疫组织化学
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CRISPR/Cas9技术敲除WSB2对MDA-MB-231增殖和迁移的影响
2
作者 李一菲 邓英姿 +3 位作者 李若兵 张运峰 白云 胡芬 《中国煤炭工业医学杂志》 2024年第5期454-460,共7页
目的 分析信号传导抑制蛋白WD重复蛋白2(WSB2)的乳腺组织和细胞系表达量,通过CRISPR/Cas9(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats/CRISPR-associated protein 9)技术构建WSB2基因敲除人乳腺癌(MDA-MB-231)单克隆... 目的 分析信号传导抑制蛋白WD重复蛋白2(WSB2)的乳腺组织和细胞系表达量,通过CRISPR/Cas9(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats/CRISPR-associated protein 9)技术构建WSB2基因敲除人乳腺癌(MDA-MB-231)单克隆细胞株,并探究WSB2敲除对MDA-MB-231细胞增殖和迁移的影响。方法 采用生物信息学和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析WSB2的表达水平;根据CRISPR/Cas9技术原理,设计靶向敲除WSB2基因的向导RNA(sgRNA)序列,构建WSB2敲除重组质粒并进行慢病毒包装后转染至MDA-MB-231细胞,嘌呤霉素筛选、基因组测序和蛋白质免疫印记实验(Western blot)验证WSB2基因敲除效果;分为野生型MDAMB-231细胞和WSB2基因敲除(MDA-MB-WSB2-KO)细胞两组,通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)、5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)染色实验、克隆形成实验、迁移(Transwell)实验及划痕实验检测两组细胞的增殖及迁移能力。结果 相较于正常组和Luminal组,WSB2在三阴性组中显著高表达(P<0.05);定量PCR结果显示,相较于人乳腺上皮细胞SVCT和MCF-10A细胞,WSB2 mRNA的表达在MDA-MB-231细胞中明显升高(SVCT细胞,t=5.505,P<0.01;MCF-10A细胞,t=4.508,P<0.05)。与野生型MDA-MB-231细胞相比,MDA-MB-231-WSB2-KO细胞活力(24h,t=8.411,P<0.01;48h,t=4.286,P<0.05;72h,t=4.657,P<0.01)、增殖(t=6.163,P<0.01)和克隆形成(t=7.374,P<0.01)能力,伤口愈合(24h,t=14.662,P<0.001;48h,t=14.724,P<0.001;72h,t=9.411,P<0.001)和迁移(t=8.141,P<0.01)能力也明显下降。结论 利用CRISPR/Cas9技术成功构建MDA-MB-231-WSB2-KO细胞株,WSB2被敲除后抑制了MDA-MB-231细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 wsb2 乳腺癌 增殖 迁移
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