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拟南芥WOX5功能依赖突变体的筛选和遗传分析
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作者 南文斌 李均瑶 +7 位作者 赵滢滢 陈雪梅 黄东惠 赵紫薇 秦小健 梁永书 李明 张汉马 《植物生理学报》 北大核心 2025年第1期29-36,共8页
拟南芥WUSCHEL RELATED HOMEOBOX 5 (WOX5)在根尖静止中心(QC)特异性表达,其蛋白能从QC细胞移动至小柱干细胞(columella stem cells, CSCs),在根尖干细胞维持中发挥着关键的调控作用。本研究构建了受地塞米松(DEX)诱导控制的WOX5过表达... 拟南芥WUSCHEL RELATED HOMEOBOX 5 (WOX5)在根尖静止中心(QC)特异性表达,其蛋白能从QC细胞移动至小柱干细胞(columella stem cells, CSCs),在根尖干细胞维持中发挥着关键的调控作用。本研究构建了受地塞米松(DEX)诱导控制的WOX5过表达株系,以此建立甲基磺酸乙酯(EMS)诱变的突变体库,并进行了突变体的筛选。结果显示WOX5过表达不仅能诱导根尖产生多层CSC类似细胞,而且还能抑制拟南芥幼苗主根的生长发育。此外,通过筛选获得了46个WOX5过表达表型减弱或不能实现的突变体,其中10个为显性突变体、36个为隐性突变体。通过基因表达分析,我们发现隐性突变体中有些能维持WOX5的过表达状态,而有些WOX5表达量则显著下降。以上研究结果和获得的突变体材料为后续基因定位和WOX5调控机制的研究奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 拟南芥 wox5 突变体筛选 遗传分析 根尖干细胞维持
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WOX5在拟南芥根尖的调控功能:组织与器官之间的落差
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作者 钟正钰 周鹭 +1 位作者 王爽 张汉马 《植物学研究》 2025年第3期145-150,共6页
WOX5是拟南芥根尖干细胞调控网络中的一个关键因子,正常时空表达时主要在静止中心和柱干细胞中发挥作用,在细胞与组织层面具有促进干细胞特性维持和抑制细胞分化的功能,但WOX5功能完全缺失的突变体在器官与个体水平没有明显的表型,弄清... WOX5是拟南芥根尖干细胞调控网络中的一个关键因子,正常时空表达时主要在静止中心和柱干细胞中发挥作用,在细胞与组织层面具有促进干细胞特性维持和抑制细胞分化的功能,但WOX5功能完全缺失的突变体在器官与个体水平没有明显的表型,弄清引起WOX5在细胞组织和器官个体之间功能差异的原因可能会刷新我们目前有关根干细胞调控的认识。 展开更多
关键词 wox5 根干细胞 根生长 拟南芥 干细胞维持
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巨桉EgrWOX5基因的克隆、表达分析与超表达载体构建
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作者 徐双 曾炳山 范春节 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2014年第10期1957-1962,共6页
以巨桉(Eucalyptus grandis)EG5无性系为试验材料,通过RT-PCR技术从中克隆得到了1个巨桉WOX家族基因成员的CDS序列,命名为Egr WOX5(Gen Bank登录号为KF964019)。该基因全长为543 bp,编码181个氨基酸,具有WOX基因家族最保守的特征结构域-... 以巨桉(Eucalyptus grandis)EG5无性系为试验材料,通过RT-PCR技术从中克隆得到了1个巨桉WOX家族基因成员的CDS序列,命名为Egr WOX5(Gen Bank登录号为KF964019)。该基因全长为543 bp,编码181个氨基酸,具有WOX基因家族最保守的特征结构域-Homeobox domain(HD)结构域;其氨基酸序列与草本植物的拟南芥At WOX5基因和木本植物杨树Ptr WOX5基因的氨基酸序列有较高的相似性。组织表达分析结果显示,Egr WOX5基因特异性地在巨桉EG5的根组织中表达。这些结果间接或直接地说明Egr WOX5在巨桉根组织的发育过程中发挥重要作用。本研究还利用Gateway技术成功构建了Egr WOX5基因的超表达载体,为后续基因功能的进一步鉴定奠定基础。 展开更多
关键词 巨桉 wox5 基因克隆 表达分析 超表达载体构建
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mir160和WOX5过量表达对拟南芥根冠细胞的不同的影响
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作者 张腾腾 严欢欢 张汉马 《植物学研究》 2021年第3期225-230,共6页
WOX5和mir160过量表达均可在拟南芥根冠中诱导未分化的细胞累积,但这些根冠细胞间是否存在差异目前并不十分明了。本研究发现在mir160和WOX5过表达诱导产生的根冠细胞对秋水仙素呈现出不同的响应模式。在相同秋水仙素浓度处理条件下,WOX... WOX5和mir160过量表达均可在拟南芥根冠中诱导未分化的细胞累积,但这些根冠细胞间是否存在差异目前并不十分明了。本研究发现在mir160和WOX5过表达诱导产生的根冠细胞对秋水仙素呈现出不同的响应模式。在相同秋水仙素浓度处理条件下,WOX5过表达诱导产生中央根冠细胞(即柱细胞和柱干细胞)显著膨大(p<0.01),而侧根冠细胞无明显膨大;相反,经秋水仙素处理后mir160过量表达的幼苗中侧根冠细胞明显膨大,而柱细胞膨大的幅度相对较小。mir160和WOX5过表达诱导的根冠细胞对秋水仙素的不同响应表明该两条途径诱导产生的根冠细胞间存在差异,暗示其诱导机理可能不同。 展开更多
关键词 拟南芥 根冠细胞 wox5 mir160 秋水仙素
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WOX5-1AA17 Feedback Circuit-Mediated CellularAuxin Response Is Crucial for the Patterning ofRoot Stem Cell Niches in Arabidopsis 被引量:5
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《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2014年第2期277-289,共13页
In plants, the patterning of stem cell-enriched meristems requires a graded auxin response maximum thatemerges from the concerted action of polar auxin transport, auxin biosynthesis, auxin metabolism, and cellular aux... In plants, the patterning of stem cell-enriched meristems requires a graded auxin response maximum thatemerges from the concerted action of polar auxin transport, auxin biosynthesis, auxin metabolism, and cellular auxinresponse machinery. However, mechanisms underlying this auxin response maximum-mediated root stem cell mainte-nance are not fully understood. Here, we present unexpected evidence that WUSCHEL-RELATED HOMEOBOX 5 (WOX5)transcription factor modulates expression of auxin biosynthetic genes in the quiescent center (QC) of the root and thusprovides a robust mechanism for the maintenance of auxin response maximum in the root tip. This WOX5 action is bal-anced through the activity of indole-3-acetic acid 17 (IAA17) auxin response repressor. Our combined genetic, cell biol-ogy, and computational modeling studies revealed a previously uncharacterized feedback loop linking WOX5-mediatedauxin production to IAA17-dependent repression of auxin responses. This WOX5-1AA17 feedback circuit further assuresthe maintenance of auxin response maximum in the root tip and thereby contributes to the maintenance of distal stemcell (DSC) populations. Our experimental studies and in silico computer simulations both demonstrate that the WOX5-iAA17 feedback circuit is essential for the maintenance of auxin gradient in the root tip and the auxin-mediated root DSCdifferentiation. 展开更多
关键词 wox5 AUXIN MAXIMUM IAA17 AXR3 ROOT PATTERNING COMPUTER simulation
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Salicylic acid promotes quiescent center cell division through ROS accumulation and down-regulation of PLT1,PLT2,and WOX5 被引量:5
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作者 Zhuqing Wang Duoyan Rong +4 位作者 Dixing Chen Yang Xiao Renyi Liu Shuang Wu Chizuko Yamamuro 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2021年第3期583-596,共14页
Salicylic acid(SA)plays a crucial role in plant immunity.However,its function in plant development is poorly understood.The quiescent center(QC),which maintains columella stem cells(CSCs)in the root apical meristem an... Salicylic acid(SA)plays a crucial role in plant immunity.However,its function in plant development is poorly understood.The quiescent center(QC),which maintains columella stem cells(CSCs)in the root apical meristem and typically exhibits low levels of cell division,is critical for root growth and development.Here,we show that the Arabidopsis thaliana SA overaccumulation mutant constitutively activated cell death 1(cad1),which exhibits increased cell division in the QC,is rescued by additional mutations in genes encoding the SA biosynthetic enzyme SALICYLIC ACID INDUCTION DEFFICIENT2(SID2)or the SA receptor NONEXPRESSER OF PR GENES1(NPR1),indicating that QC cell division in the cad1 mutant is promoted by the NPR1-dependent SA signaling pathway.The application of exogenous SA also promoted QC cell division in wild-type plants in a dose-dependent manner and largely suppressed the expression of genes involved in QC maintenance,including those encoding the APETALA2(AP2)transcription factors PLETHORA1(PLT1)and PLT2,as well as the homeodomain transcription factor WUSCHEL-RELATED HOMEOBOX5(WOX5).Moreover,we showed that SA promotes reactive oxygen species(ROS)production,which is necessary for the QC cell division phenotype in the cad1 mutant.These results provide insight into the function of SA in QC maintenance. 展开更多
关键词 PLT1 PLT2 QC cell division reactive oxygen species salicylic acid wox5
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独脚金内酯通过PLT途径调控拟南芥根尖干细胞生长 被引量:3
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作者 史盼盼 杨磊 +2 位作者 周善民 杨佳慧 刘维仲 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期954-964,共11页
独脚金内酯作为一种新型植物激素,在调控植物生长和发育等方面发挥着重要功能。本研究用独脚金内酯类似物GR24处理拟南芥幼苗后,利用高通量测序技术进行转录组测序,分析差异表达基因的生物学功能和代谢通路,以探究独脚金内酯对根生长发... 独脚金内酯作为一种新型植物激素,在调控植物生长和发育等方面发挥着重要功能。本研究用独脚金内酯类似物GR24处理拟南芥幼苗后,利用高通量测序技术进行转录组测序,分析差异表达基因的生物学功能和代谢通路,以探究独脚金内酯对根生长发育的调控作用。结果显示:在GR24处理后,拟南芥Col-0共有63个差异基因表达,而突变体wox5-2共有746个差异基因表达。GO和KEGG分析显示,GR24处理后差异表达基因主要富集在植物激素信号转导和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路上。进一步运用定量分析,发现GR24促进根尖干细胞发育相关基因PLT1、PLT2和WOX5的表达来调控根分生组织的伸长和分化。本研究揭示了独脚金内酯对拟南芥根尖干细胞生长的调控作用,为利用独脚金内酯促进植物生长发育提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 独脚金内酯 根尖干细胞 wox5 细胞分裂 拟南芥
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拟南芥静止中心细胞特异性基因表达系统的构建及功能验证 被引量:2
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作者 陈月琴 严欢欢 +3 位作者 陈玉洁 陈丽华 王甜 张汉马 《植物学研究》 2019年第3期181-189,共9页
静止中心是高等植物根尖分生组织中一群重要细胞,在根尖生长点功能和干细胞调控中起关键作用。但由于缺少静止中心细胞特异性的基因表达工具,对该细胞群中基因功能的了解非常有限。本研究利用拟南芥WOX5基因的启动子片段和GAL4-VP16-UA... 静止中心是高等植物根尖分生组织中一群重要细胞,在根尖生长点功能和干细胞调控中起关键作用。但由于缺少静止中心细胞特异性的基因表达工具,对该细胞群中基因功能的了解非常有限。本研究利用拟南芥WOX5基因的启动子片段和GAL4-VP16-UAS人工合成基因转录激活系统构建了一个可在拟南芥根尖静止中心细胞中特异性地驱动目的基因表达的转基因系统。通过绿色荧光蛋白基因证实了该表达系统的静止中心细胞特异性,并用两个已知根干细胞调控基因WOX5和FEZ检测了该表达系统用于研究静止中心基因功能的可行性及功效。研究结果表明所构建的表达系统具静止中心细胞特异性,可用来研究不同调控基因在该细胞群中的功能。 展开更多
关键词 拟南芥 静止中心 细胞特异性表达 wox5 启动子
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Pattern analysis of stem cell differentiation during in vitro Arabidopsis organogenesis
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作者 Ying Hua SU Zhi Juan CHENG +1 位作者 Yu Xiao SU Xian Sheng ZHANG 《Frontiers in Biology》 CSCD 2010年第5期464-470,共7页
Plant somatic cells have the capability to switch their cell fates from differentiated to undifferen-tiated status under proper culture conditions,which is designated as totipotency.As a result,plant cells can easily ... Plant somatic cells have the capability to switch their cell fates from differentiated to undifferen-tiated status under proper culture conditions,which is designated as totipotency.As a result,plant cells can easily regenerate new tissues or organs from a wide variety of explants.However,the mechanism by which plant cells have such remarkable regeneration ability is still largely unknown.In this study,we used a set of meristem-specific marker genes to analyze the patterns of stem cell differentiation in the processes of somatic embryogenesis as well as shoot or root organogenesis in vitro.Our studies furnish preliminary and important information on the patterns of the de novo stem cell differentiation during various types of in vitro organogenesis. 展开更多
关键词 Organ regeneration stem cell differentiation WUS expression wox5 expression
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CRE/LOX-based analysis of cell lineage during root formation and regeneration in Arabidopsis
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作者 Ning Zhai Lin Xu 《aBIOTECH》 2020年第3期153-156,共4页
The root system of Arabidopsis thaliana comprises primary,lateral,and adventitious roots.Different types of roots are formed by diverse inductive cues and developmental programs.Here,we adopted the CRE/LOX system to t... The root system of Arabidopsis thaliana comprises primary,lateral,and adventitious roots.Different types of roots are formed by diverse inductive cues and developmental programs.Here,we adopted the CRE/LOX system to trace cell lineage during the three types of root formation under the control of the promoter of WUSCHEL-RELATED HOMEOBOX5.The results show that the cells forming adventitious roots during de novo root regeneration from detached leaves and lateral roots from the primary root are descendants of the WOX5-expressing root primordium.During the post-embryonic growth of the primary root,some vascular and root cap cells are descendants of the WOX5-expressing stem cell niche in the root apical meristem.Overall,our data suggest that the CRE/LOX system is a useful tool to trace cell lineage in different types of root organogenesis. 展开更多
关键词 Root regeneration Adventitious root Lateral root CRE/LOX wox5 Arabidopsis thaliana
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