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Wip1磷酸酶对小鼠脾脏造血功能的调控作用
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作者 任小萍 常志林 +2 位作者 王依 朱慧敏 贺文艳 《中国实验血液学杂志》 北大核心 2025年第5期1491-1498,共8页
目的:研究Wip1磷酸酶对小鼠脾脏造血功能的调控作用。方法:繁育Wip1基因敲除小鼠,采用流式细胞术检测Wip1基因缺失对小鼠脾脏造血干、祖细胞和各系成熟造血细胞比例和数目的影响;采用Proteome Prof ilerTM固相抗体芯片分析Wip1基因缺失... 目的:研究Wip1磷酸酶对小鼠脾脏造血功能的调控作用。方法:繁育Wip1基因敲除小鼠,采用流式细胞术检测Wip1基因缺失对小鼠脾脏造血干、祖细胞和各系成熟造血细胞比例和数目的影响;采用Proteome Prof ilerTM固相抗体芯片分析Wip1基因缺失对小鼠脾脏CD45^(high)CD11b^(+)髓系细胞炎性细胞因子表达的作用。结果:Wip1基因敲除小鼠脾脏大体形态变小,细胞数减少;各级造血干、祖细胞绝对数减少;T、B淋巴细胞绝对数目减少;红系祖细胞及各阶段红系细胞比例显著增加,成熟红细胞数显著减少;中性粒细胞、单核细胞、CD45^(high)CD11b^(+)和CD45lowCD11b^(+)髓系细胞亚群均显著减少;脾脏中CD45^(high)CD11b^(+)髓系细胞呈促炎表型。结论:Wip1基因缺失损害成体脾脏的正常造血功能,导致脾脏各系成熟血细胞显著减少,脾脏CD45^(high)CD11b^(+)髓系细胞呈促炎表型。 展开更多
关键词 wip1磷酸酶 脾脏 造血 炎性细胞因子
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Wip1在肺癌细胞中的作用机制初探 被引量:2
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作者 赵吉星 鲁建军 +2 位作者 孙磊 罗红鹤 顾勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1619-1622,共4页
目的:检测Wip1及相关蛋白在肺癌细胞中的表达情况,探讨Wip1在肺癌发生中的作用机制。方法:Western blotting检测各种细胞(肺腺癌细胞A549、肺鳞癌细胞NCI-1299、大细胞肺癌细胞NCI-H460和正常支气管上皮细胞HBE)中Wip1、p53、p-p53、p38... 目的:检测Wip1及相关蛋白在肺癌细胞中的表达情况,探讨Wip1在肺癌发生中的作用机制。方法:Western blotting检测各种细胞(肺腺癌细胞A549、肺鳞癌细胞NCI-1299、大细胞肺癌细胞NCI-H460和正常支气管上皮细胞HBE)中Wip1、p53、p-p53、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白的表达。结果:A549、NCI-1299和H460细胞中Wip1蛋白的表达均高于HBE细胞(P<0.05);各种肺癌细胞间Wip1蛋白的表达无明显差异(P>0.05);p-p53和p-p38 MAPK蛋白在肺癌细胞中的表达低于HBE细胞(P<0.05);肺癌细胞中Wip1表达增加,p-p38MAPK和p-p53表达降低,存在着Wip1-p38 MAPK-p53信号通路的失衡。结论:肺癌细胞(A549、NCI-1299、H460)中存在Wip1-p38 MAPK-p53信号通路的失衡。这可能是Wip1在肺癌中的致癌机制之一。 展开更多
关键词 肺癌细胞 wip1 wip1-p38MAPK-p53通路
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WIP1在口腔鳞状细胞癌中的表达及其与MYLK3的相关性研究
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作者 张羽佳 高峰 +2 位作者 王云静 张英英 王大维 《延安大学学报(医学科学版)》 2024年第3期19-23,30,共6页
目的探讨野生型P53诱导的磷酸酶1(Wild-type P53-induced phosphatase1,WIP1)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达及其与肌球蛋白轻链激酶3(myosin light chain kinase 3,MYLK3)的相关性。方法采用免疫组化AB... 目的探讨野生型P53诱导的磷酸酶1(Wild-type P53-induced phosphatase1,WIP1)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达及其与肌球蛋白轻链激酶3(myosin light chain kinase 3,MYLK3)的相关性。方法采用免疫组化ABC法检测WIP1及MYLK3在65对OSCC及癌旁正常口腔黏膜中的表达,并通过肿瘤基因组图谱(the Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库对WIP1在OSCC中的表达加以验证。分析WIP1的表达与患者年龄、性别、肿瘤分化程度及淋巴结转移等临床病理学指标的关系及其与MYLK3的相关性。结果WIP1在OSCC中的阳性表达率明显高于癌旁正常口腔黏膜中的阳性表达率(47.7%vs 24.6%,P<0.05);对TCGA数据库32对OSCC及癌旁正常口腔黏膜组织分析显示,WIP1与MYLK3在OSCC的阳性表达率均显著高于二者在癌旁正常口腔黏膜中的阳性表达率;WIP1在低分化组的阳性表达率明显高于其在高分化组的阳性表达率(86.7%vs 36.0%,P<0.05);WIP1在伴淋巴结转移组的阳性表达率明显高于其在无淋巴结转移组的阳性表达率(90.0%vs 40.0%,P<0.05);WIP1与患者性别、年龄、部位、肿瘤大小无相关性(P>0.05);WIP1与MYLK3在OSCC中的表达呈正相关(r=0.531,P<0.001)。结论WIP1在OSCC的发生、发展、分化及转移过程中可能发挥重要作用,有望成为判断OSCC发生、发展及预测淋巴结转移的新的潜在生物学标志物,其作用机制可能与MYLK3在OSCC中的正协同作用有关。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 野生型P53诱导的磷酸酶1 肌球蛋白轻链激酶3 免疫组织化学 生物学标志物
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Wip1在非小细胞肺癌组织及细胞中的表达 被引量:5
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作者 赵吉星 张伟 +2 位作者 孙磊 罗红鹤 顾勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1731-1735,共5页
目的:检测肺癌组织和3种肺癌细胞中Wip1的表达水平,探讨肺癌中Wip1的表达水平与其各种临床病理特征之间的关系。方法:利用实时荧光定量PCR检测44例肺癌及相应正常肺组织中Wip1 mRNA的表达,分析Wip1 mRNA表达与各临床病理参数之间的关系... 目的:检测肺癌组织和3种肺癌细胞中Wip1的表达水平,探讨肺癌中Wip1的表达水平与其各种临床病理特征之间的关系。方法:利用实时荧光定量PCR检测44例肺癌及相应正常肺组织中Wip1 mRNA的表达,分析Wip1 mRNA表达与各临床病理参数之间的关系;利用实时荧光定量PCR的方法检测人肺腺癌细胞A549、人鳞癌细胞NCI-1299、人大细胞肺癌细胞NCI-H460和人正常支气管上皮细胞HBE中Wip1 mRNA的表达量,进行相对定量分析。结果:44例非小细胞肺癌及相应正常肺组织均有Wip1 mRNA的表达,其中17例肺癌中Wip1mRNA高表达,占38.6%,两者表达差异显著(ratio=2.1644±1.3940,P<0.05);分化程度低的肿瘤细胞Wip1 mR-NA表达量显著高于分化程度高者(P<0.05)。3种肺癌细胞中的Wip1 mRNA表达量显著高于正常支气管上皮细胞,差异显著(均P<0.05)。结论:Wip1mRNA在非小细胞肺癌中过表达,可能与肿瘤发生有关,有望成为非小细胞肺癌基因治疗的新靶点。Wip1 mRNA在非小细胞肺癌中的表达与肿瘤细胞分化程度有关,可能成为确定肿瘤恶性程度的分子生物学参考指标。 展开更多
关键词 非小细胞肺 基因 wip1
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玉米受伤诱导基因Wip1的启动子克隆及表达分析 被引量:4
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作者 练云 刘允军 王国英 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第14期2889-2896,共8页
【目的】植物蛋白酶抑制剂是抵抗动物摄食和病原侵染的重要防御蛋白。玉米Wip1(wound-induced protein)基因属于Bowman-Birk蛋白酶抑制剂(BBI)家族,了解Wip1(wound-induced protein)的启动子活性和Wip1组织表达特性、受胁迫诱导表达情... 【目的】植物蛋白酶抑制剂是抵抗动物摄食和病原侵染的重要防御蛋白。玉米Wip1(wound-induced protein)基因属于Bowman-Birk蛋白酶抑制剂(BBI)家族,了解Wip1(wound-induced protein)的启动子活性和Wip1组织表达特性、受胁迫诱导表达情况和在不同受伤时间下的表达模式,为抗虫基因在植物中应用提供新信息。【方法】以玉米叶片组织的cDNA为模板,采用克隆测序技术获得Wip1启动子序列和该基因的cDNA序列。将所得启动子与植物表达载体p1300连接,构建重组表达载体p1300-Wip1-GUS,并采用冻融法将其转入农杆菌LBA4404中。利用农杆菌介导的瞬时表达体系在玉米愈伤组织中对Wip1启动子的表达活性进行分析。利用热酚法提取玉米相应组织的总RNA,纯化后于含甲醛的变性胶中电泳分离,并将RNA转移到尼龙膜上,用[α-32P]dCTP标记探针的Northern blot技术对Wip1在玉米不同组织、不同胁迫条件、不同受伤时间下的表达模式进行分析。【结果】获得的启动子序列全长1 737 bp,cDNA全长512 bp。将含有重组质粒p1300-Wip1-GUS的农杆菌侵染玉米愈伤组织,3 d后,GUS染色显示侵染部位变蓝,说明所克隆的启动子在玉米愈伤中能启动GUS正常表达。基于Northern blot技术的植物组织表达结果显示,正常情况下,Wip1仅在胚芽鞘中有一定的表达,在受伤后的胚芽鞘、根、茎、叶、雌穗、雄穗、花丝及苞叶中均大量表达;在所设置的胁迫处理时间(2 h)内,Wip1不受缺氧、低温、脱水、PEG、ABA、NaCL和IAA胁迫诱导,仅受伤害胁迫诱导表达;Wip1在玉米叶片受伤胁迫下,玉米叶片受伤2 h时,检测到了Wip1表达,4—24 h时表达量迅速提高且处于持续增加趋势。【结论】玉米Wip1特异地受机械伤害诱导表达;Wip1启动子是一种有效的伤害诱导特异性启动子。 展开更多
关键词 玉米 受伤诱导 wip1 丝氨酸蛋白酶抑制剂 Bowman-Birk
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血清OPN、Wip1、HSP90α与晚期非小细胞肺癌患者一线化疗敏感性和预后的关系 被引量:4
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作者 朱淑敏 马进 +4 位作者 耿玉兰 代丽丽 赵小洁 魏从真 刘金锋 《现代生物医学进展》 CAS 2023年第24期4740-4745,共6页
目的:探讨血清骨桥蛋白(OPN)、野生型p53诱导的磷酸酶1(Wip1)、热休克蛋白90α(HSP90α)与晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者一线化疗敏感性和预后的关系。方法:选取2018年1月~2020年1月在河北医科大学附属第一医院接受一线化疗方案治疗的晚... 目的:探讨血清骨桥蛋白(OPN)、野生型p53诱导的磷酸酶1(Wip1)、热休克蛋白90α(HSP90α)与晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者一线化疗敏感性和预后的关系。方法:选取2018年1月~2020年1月在河北医科大学附属第一医院接受一线化疗方案治疗的晚期NSCLC患者137例,根据化疗疗效分为化疗不敏感组(38例)和化疗敏感组(99例)。采用酶联免疫吸附法检测血清OPN、HSP90α水平,实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清Wip1 mRNA水平。多因素Logistic回归分析影响晚期NSCLC患者一线化疗敏感性的因素。随访3年,Kaplan-Meier法分析高/低血清OPN、Wip1 mRNA、HSP90α水平晚期NSCLC患者一线化疗后的预后情况。结果:与化疗敏感组比较,化疗不敏感组血清OPN、Wip1 mRNA、HSP90α水平升高(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,低分化、TNM分期Ⅳ期和血清OPN、Wip1 mRNA、HSP90α水平升高为影响晚期NSCLC患者一线化疗敏感性的独立危险因素(P<0.05)。随访3年,137例晚期NSCLC患者总生存率为15.33%(21/137)。Kaplan-Meier生存曲线显示,血清OPN、Wip1 mRNA、HSP90α高水平组3年总生存率低于血清OPN、Wip1 mRNA、HSP90α低水平组(P<0.05)。结论:血清OPN、Wip1、HSP90α水平升高与晚期NSCLC患者一线化疗敏感性下降和预后不良有关。 展开更多
关键词 晚期非小细胞肺癌 OPN wip1 HSP90Α 化疗敏感性 预后
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靶向沉默Wip1基因协同替莫唑胺抑制脑胶质瘤细胞增殖的作用 被引量:5
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作者 王鹏 侯崇显 +4 位作者 詹升全 李炎稳 郭文龙 毛承亮 周东 《临床神经外科杂志》 CAS 2015年第1期1-4,共4页
目的研究靶向沉默Wip1基因对增敏替莫唑胺(TMZ)抑制脑胶质瘤细胞增殖作用的影响。方法体外培养人胶质瘤细胞株U-87MG,将携带Wip1基因RNA干扰载体的慢病毒感染U87-MG细胞。使用TMZ干预胶质瘤细胞,MTT法检测细胞的增殖,流式细胞术Annexin-... 目的研究靶向沉默Wip1基因对增敏替莫唑胺(TMZ)抑制脑胶质瘤细胞增殖作用的影响。方法体外培养人胶质瘤细胞株U-87MG,将携带Wip1基因RNA干扰载体的慢病毒感染U87-MG细胞。使用TMZ干预胶质瘤细胞,MTT法检测细胞的增殖,流式细胞术Annexin-V(APC染色)检测细胞的凋亡情况,流式细胞术PI染色法检测细胞周期。实验数据采用SPSS 16.0软件进行统计学分析。结果 Wip1基因沉默的胶质瘤细胞与空载体慢病毒对照组细胞对TMZ的作用对比,3d后细胞增殖率较对照组下降57.7%;Wip1基因沉默组TMZ处理5d后细胞凋亡率为15.3%,空载体对照组为5.65%;Wip1基因沉默组细胞凋亡率明显要高(P<0.05);细胞周期结果显示Wip1基因沉默组G2细胞为63.0%,而空载体对照组为23.8%,Wip1基因沉默组表现为G2/M期细胞明显增多(P<0.05)。结论靶向沉默Wip1基因可以显著增加TMZ对胶质瘤细胞增殖的抑制作用。 展开更多
关键词 wip1 P53 胶质瘤细胞 替莫唑胺
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原癌基因Wip1在室管膜瘤中表达增加并与P53相关 被引量:4
8
作者 梁朝辉 焦保华 +1 位作者 郭二坤 卢圣奎 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2011年第4期430-434,共5页
目的探讨野生型P53-诱导的蛋白磷酸酶1(Wip1)在室管膜瘤中的表达及其与P53相关性。方法用免疫组织化学、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测31例室管膜瘤及10例正常脑组织中Wip1mRNA、蛋白表达。并用免疫组化检测P53。同... 目的探讨野生型P53-诱导的蛋白磷酸酶1(Wip1)在室管膜瘤中的表达及其与P53相关性。方法用免疫组织化学、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测31例室管膜瘤及10例正常脑组织中Wip1mRNA、蛋白表达。并用免疫组化检测P53。同时,回顾性分析临床病理因素与Wip1表达之间的相关性。结果室管膜瘤中Wip1阳性表达率为19/31(60%),显著高于正常脑组织中的1/10(10%)(P<0.05)。31例室管膜瘤组织中P53阳性2例。Wip1 mRNA在室管膜瘤中表达相对量为0.34±0.07,显著高于正常脑组织的0.05±0.01(P<0.05)。室管膜瘤中Wip1蛋白表达相对量为0.83±0.16,显著高于正常脑组织的0.14±0.03(P<0.05)。Wip1表达与肿瘤大小、年龄、性别无关。结论 Wip1在室管膜瘤高表达,对P53表达可能起负反馈抑制作用,Wip1有望成为室管膜瘤预后及治疗的新靶点。 展开更多
关键词 室管膜瘤 wip1 P53
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Wip1基因在人脑胶质瘤组织中的表达及其与p53基因突变的相关性研究 被引量:2
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作者 王鹏 饶竞 +3 位作者 杨海峰 姚东晓 赵洪洋 杨林 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期481-485,共5页
背景与目的:野生型p53诱导的磷酸酶1(wild-type p53-induced phosphatase1,Wip1)是一种新发现的癌基因,其在多种肿瘤中存在过表达。本研究旨在探讨Wip1基因在脑胶质瘤组织中的表达及其与p53基因突变的相关性。方法:收集52例原发胶质瘤及... 背景与目的:野生型p53诱导的磷酸酶1(wild-type p53-induced phosphatase1,Wip1)是一种新发现的癌基因,其在多种肿瘤中存在过表达。本研究旨在探讨Wip1基因在脑胶质瘤组织中的表达及其与p53基因突变的相关性。方法:收集52例原发胶质瘤及8例脑外伤或脑出血后行内减压术的正常脑组织标本,采用实时荧光定量PCR(real-time fluorogentic quantitative,RFQ-PCR)法检测脑胶质瘤组织中Wip1mRNA的表达,Western blot法检测Wip1蛋白的表达,DNA直接测序法检测脑胶质瘤组织中p53基因的突变情况。统计学分析不同脑胶质瘤病理分级及p53的突变状态间Wip1的表达水平的差异。结果:52例脑胶质瘤中22例(42.3%)发生p53基因突变。Wip1 mRNA在高级别胶质瘤(Ⅲ~Ⅳ级)中的表达水平较低级别胶质瘤(Ⅰ~Ⅱ级)及正常脑组织中的表达要略高,但差异无统计学意义(P<0.05)。Wip1基因在无p53基因突变的胶质瘤组织中的表达水平较p53基因突变组要高,差异有统计学意义(P=0.009)。Wip1在野生型p53的胶质瘤中存在选择性的过表达,Wip1在胶质瘤中的过表达与病理分级无明显相关,而与p53的突变状态有关。结论:Wip1基因在脑胶质瘤中存在选择性地过表达,其过表达与p53基因野生型状态相关,可能是胶质瘤恶性进展中除p53基因突变外的另一关键作用因素。 展开更多
关键词 胶质瘤 wip1基因 P53 基因突变
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siRNA沉默Wip1基因对人肺腺癌细胞的影响 被引量:3
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作者 汪旭东 孙磊 +2 位作者 鲁建军 罗红鹤 顾勇 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第21期3212-3214,共3页
目的向肺腺癌A549细胞中导入靶向Wip1的siRNA,研究其对肺腺癌细胞生物学活性的影响。方法设计并合成Wip1基因特异性的siRNA,通过脂质体介导将siRNA瞬时转染肺腺癌A549细胞,用荧光定量PCR检测转染后细胞内Wip1基因的表达水平,流式细胞学... 目的向肺腺癌A549细胞中导入靶向Wip1的siRNA,研究其对肺腺癌细胞生物学活性的影响。方法设计并合成Wip1基因特异性的siRNA,通过脂质体介导将siRNA瞬时转染肺腺癌A549细胞,用荧光定量PCR检测转染后细胞内Wip1基因的表达水平,流式细胞学检测A549细胞凋亡、增殖以及用划痕实验和Transwell实验检测细胞迁徙的情况。结果特异转染组中Wip1 mRNA表达明显降低,并且处于G1期细胞比例增加,S期细胞比例降低,侵袭细胞数及迁移率均明显低于非特异转染组,细胞凋亡未见差异性改变。结论靶向Wip1基因的siRNA能有效降低目的基因mRNA的表达水平,抑制A549细胞的生长并引起细胞侵袭力及迁移力下降。 展开更多
关键词 肺腺癌 wip1 RNA干扰 细胞生物学特性
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WIP1基因对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化的影响及其在小鼠不同生长阶段的表达 被引量:2
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作者 王楠 冯保亮 +7 位作者 郑云曦 黄雷 王悦 徐松松 张秀玲 刘志国 李奎 牟玉莲 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第8期2869-2879,共11页
【目的】探究野生型p53诱导磷酸酶1(WIP1)基因与脂肪细胞增殖和分化的关系,以期为猪优质性状育种提供新基因素材。【方法】利用脂质体转染方法将合成的WIP1基因的3对siRNAs(WIP1-790、WIP1-893和WIP1-1845)和阴性对照NC-siRNA分别转染3T... 【目的】探究野生型p53诱导磷酸酶1(WIP1)基因与脂肪细胞增殖和分化的关系,以期为猪优质性状育种提供新基因素材。【方法】利用脂质体转染方法将合成的WIP1基因的3对siRNAs(WIP1-790、WIP1-893和WIP1-1845)和阴性对照NC-siRNA分别转染3T3-L1前脂肪细胞,通过实时荧光定量PCR检测WIP1基因的表达水平,比较不同siRNA的干扰效率。然后利用筛选到的干扰效率最高的siRNA敲减WIP1基因在3T3-L1前脂肪细胞中的表达,通过CCK-8检测siRNA敲减细胞和NC-siRNA细胞不同生长时期(0、12、24、48、72、96和120 h)的增殖情况,并通过实时荧光定量PCR检测上述2种细胞24和48 h的细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)和Cyclin D1的表达水平。对干扰效率最高的siRNA和NC-siRNA组3T3-L1前脂肪细胞进行成脂诱导分化,通过油红O染色和甘油三酯定量法评估成脂分化效率,利用实时荧光定量PCR检测过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)、CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD1)的表达水平,Western blotting法检测PPARγ蛋白的表达水平;通过实时荧光定量PCR检测WIP1基因在21日龄、8周龄和6月龄小鼠腹股沟皮下脂肪组织和性腺脂肪组织的时空表达情况。【结果】基因干扰试验结果显示,3对siRNAs对WIP1基因的表达均具有极显著的干扰作用(P<0.01),其中WIP1-790的干扰效率最高,达到了70%以上。CCK-8检测结果显示,与NC-siRNA组相比,WIP1-790干扰组细胞的增殖速率在各生长时期均极显著降低(P<0.01),且细胞周期基因Cyclin B1和Cyclin D1的表达量在24和48 h均极显著下调(P<0.01)。成脂诱导分化结果显示,与NC-siRNA组相比,WIP1-790干扰组细胞在成脂分化第8天油红O染色阳性细胞明显减少,脂滴含量极显著降低(P<0.01),甘油三酯含量显著降低(P<0.05);PPARγ、C/EBPα、FABP4、SCD1等标记基因mRNA表达水平均极显著降低(P<0.01),PPARγ蛋白表达水平极显著降低(P<0.01)。WIP1基因在8周龄和6月龄小鼠的腹股沟皮下脂肪组织中的表达量分别显著或极显著高于21日龄小鼠(P<0.05;P<0.01),且在6月龄小鼠的性腺脂肪组织中,WIP1基因的表达量极显著高于21日龄和8周龄的小鼠(P<0.01)。【结论】WIP1基因通过调控Cyclin B1、Cyclin D1和PPARγ等细胞周期和成脂分化相关基因的表达影响3T3-L1细胞的增殖和分化,且参与小鼠脂肪沉积过程,结果可为深入解析WIP1基因调控脂肪发生的分子机制提供参考。 展开更多
关键词 wip1基因 细胞增殖 成脂分化 脂肪沉积
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原癌基因Wip1在卵巢癌中的表达及临床意义 被引量:2
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作者 顾笑梅 康晓芳 +1 位作者 高淑凤 李娟 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第24期3478-3480,共3页
目的观察原癌基因Wip1在卵巢癌患者中的表达及临床意义。方法选取该院2002年1月至2012年1月收治的120例卵巢癌患者为观察对象,所有患者均经病理检查确诊。另选取同期活检正常卵巢组织120例作为对照,采用免疫组化法检测Wip1蛋白并进行比... 目的观察原癌基因Wip1在卵巢癌患者中的表达及临床意义。方法选取该院2002年1月至2012年1月收治的120例卵巢癌患者为观察对象,所有患者均经病理检查确诊。另选取同期活检正常卵巢组织120例作为对照,采用免疫组化法检测Wip1蛋白并进行比较分析。结果正常卵巢组织细胞中,Wip1免疫组化染色阴性或微弱。卵巢癌组织中Wip1染色呈浅黄色至黄褐色不等。采用蛋白质免疫印迹检测的Wip1蛋白在卵巢癌组织的阳性表达率为73.5%(88/120),高于正常卵巢组织20.8%(25/120),差异具有统计学意义(P<0.05),与P53表达水平存在关联(P<0.05)。结论 Wip1在卵巢癌中表达量高于正常卵巢组织,且其水平与年龄、雌孕激素状态、HER2、淋巴结状态、TNM分期均无关,与P53表达水平存在关联。 展开更多
关键词 wip1 卵巢癌 基因表达
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原癌基因Wip1在子宫内膜癌组织中表达水平的研究 被引量:1
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作者 顾笑梅 李娟 +2 位作者 高淑凤 郑玮 张浩 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第16期2210-2212,2215,共4页
目的观察子宫内膜癌患者临床分期、预后与Wip1表达量的关系。方法收集唐山市妇幼保健院2002年1月至2012年1月手术的120例子宫内膜癌患者,经手术切除子宫内膜癌蜡块标本作为实验组,标本均被病理证实,同期活检正常的子宫内膜标本120例作... 目的观察子宫内膜癌患者临床分期、预后与Wip1表达量的关系。方法收集唐山市妇幼保健院2002年1月至2012年1月手术的120例子宫内膜癌患者,经手术切除子宫内膜癌蜡块标本作为实验组,标本均被病理证实,同期活检正常的子宫内膜标本120例作为对照组。检测Wip1在2组中的表达水平。结果 (1)Wip1免疫组化染色结果:正常子宫内膜组织细胞中,Wip1免疫组化染色阴性或微弱。子宫内膜癌组织中Wip1染色呈浅黄色至黄褐色不等。Wip1蛋白在子宫内膜癌组织中的阳性表达率为77.5%(93/120),高于正常内膜组织22.5%(27/120),差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)Wip1蛋白在子宫内膜癌组织、正常内膜组织Western blot结果:Wip1蛋白在子宫内膜癌组织的相对含量为0.635±0.023。高于正常内膜组织的0.325±0.018,两组之间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)各样品实时荧光定量PCR结果:Wip1mRNA表达在子宫内膜癌组织高于正常内膜组织,基因表达值分别为0.628±0.053、0.191±0.009,两组之间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)Wip1的表达水平与年龄、雌孕激素状态、HER2、淋巴结状态、TNM分期均无关(P>0.05),与P53表达水平存在关联(P<0.05)。结论 (1)子宫内膜癌中Wip1表达量高,而正常内膜组织表达量低。(2)Wip1的表达水平与年龄、雌孕激素状态、HER2、淋巴结状态、TNM分期均无关,与P53表达水平存在关联。 展开更多
关键词 wip1 子宫内膜癌 基因沉默
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Wip1基因在人脑胶质瘤细胞恶性增殖中的作用及其机制 被引量:1
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作者 王鹏 詹升全 +4 位作者 林晓风 周德祥 李炎稳 侯崇显 周东 《中国微侵袭神经外科杂志》 CAS 2015年第10期462-465,共4页
目的研究Wip1基因在人脑胶质瘤细胞增殖的作用及机制。方法构建人Wip1基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,有效沉默胶质瘤细胞U251及U87-MG细胞的Wip1基因表达,检测细胞增殖能力。流式细胞术PI单染法检测Wip1基因沉默后细胞周期分布。实时定量... 目的研究Wip1基因在人脑胶质瘤细胞增殖的作用及机制。方法构建人Wip1基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,有效沉默胶质瘤细胞U251及U87-MG细胞的Wip1基因表达,检测细胞增殖能力。流式细胞术PI单染法检测Wip1基因沉默后细胞周期分布。实时定量PCR法及Western blotting分别检测差异性基因m RNA及蛋白表达。结果胶质瘤细胞Wip1基因表达被有效沉默。Wip1基因沉默的胶质瘤细胞增殖变慢,在U87-MG细胞更加明显。细胞周期分析显示:Wip1基因沉默对U251细胞周期无明显影响,而U87-MG细胞则在10 d时出现明显S期增多和G1、G2期细胞减少。Wip1基因沉默后,U251细胞中CDKN2A和p14ARF基因表达下调,而在U87-MG细胞中表达均上调。Western blotting结果显示:在U251与U87-MG胶质瘤细胞中p38MAPK表达均上调。在U87-MG细胞中p53及p-p53(Ser 15)表达均上调,但在U251细胞中无明显变化。结论 Wip1对胶质瘤细胞增殖具有重要作用。在U87-MG细胞增殖作用主要与其调节p53功能有关。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 wip1 P53 增殖 基因
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抑制Wip1磷酸酶对肝再生及肝细胞有氧糖酵解的影响 被引量:2
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作者 张鹏 李光兵 +3 位作者 贺竞毅 马立业 张家尧 刘军 《中国现代普通外科进展》 CAS 2019年第4期253-258,共6页
目的:探讨Wip1抑制剂GSK2830371对肝部分切除小鼠肝再生的影响及GSK2830371对肝细胞有氧糖酵解的影响。方法:小鼠2/3肝切除模型,腹腔注射GSK2830371,免疫组化Brd U染色和肝脏称重检测肝再生水平,酶学比色法检测肝脏中乳酸含量以及HK、PF... 目的:探讨Wip1抑制剂GSK2830371对肝部分切除小鼠肝再生的影响及GSK2830371对肝细胞有氧糖酵解的影响。方法:小鼠2/3肝切除模型,腹腔注射GSK2830371,免疫组化Brd U染色和肝脏称重检测肝再生水平,酶学比色法检测肝脏中乳酸含量以及HK、PFK、PK和LDH的活性。GSK2830371作用于LO2肝细胞,酶学比色法检测葡萄糖和乳酸水平及关键酶活性,酶化学发光法检测ATP水平,CCK-8检测线粒体活性,Western bot和QRT-PCR检测相关机制。结果:经GSK2830371治疗,小鼠肝再生明显加快,PFK、HK和LDH的活性以及肝脏乳酸量均增高。经GSK2830371刺激,LO2消耗的葡萄糖和产生的乳酸明显增多,PFK、HK和LDH的活性增强,mTOR蛋白表达量及其磷酸化水平增高,HIF1α、PDK1、GLUT1和MCT4的mRNA表达上调。结论:GSK2830371抑制Wip1后能促进肝再生并提高肝细胞的有氧糖酵解水平。 展开更多
关键词 wip1抑制剂 肝再生 有氧糖酵解 MTOR GSK2830371
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Wip1过表达转基因小鼠模型的制备与鉴定 被引量:1
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作者 高倩 胡言青 +1 位作者 唐懿挺 牟玉莲 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第12期3094-3100,共7页
本研究旨在构建Wip1过表达转基因小鼠,并对Wip1过表达转基因小鼠进行RNA水平上的筛选,为研究动脉粥样硬化的发生机制提供一种动物模型。通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)获得小鼠组织的cDNA,并以其为模板进行PCR扩增,对扩增片段进行胶... 本研究旨在构建Wip1过表达转基因小鼠,并对Wip1过表达转基因小鼠进行RNA水平上的筛选,为研究动脉粥样硬化的发生机制提供一种动物模型。通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)获得小鼠组织的cDNA,并以其为模板进行PCR扩增,对扩增片段进行胶回收,然后进行扩增片段和空载体的双酶切,将酶切后胶回收得到的Wip1基因全长与载体pcDNA3.1(+)进行连接,获得Wip1-pcDNA3.1(+)过表达载体,最终得到Wip1过表达转基因原代小鼠,并利用Southern blotting方法和实时荧光定量PCR方法对小鼠进行鉴定筛选。试验获得Wip1过表达转基因原代小鼠30只,利用Southern blotting方法鉴定出阳性小鼠11只,阳性率为36.67%,实时荧光定量PCR筛选Wip1过表达转基因小鼠阳性率为32.84%。以上结果表明,试验成功构建了Wip1-pcDNA3.1(+)过表达载体,并且经过Wip1基因在小鼠组织DNA和RNA水平上的鉴定筛选,成功获得了Wip1过表达转基因小鼠。 展开更多
关键词 wip1 过表达 小鼠模型
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Wip1在卵巢癌细胞系中的表达与沉默 被引量:1
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作者 冯艳萍 卞亚辉 +2 位作者 赵婷婷 王晶晶 孟亚丽 《河北医药》 CAS 2019年第14期2085-2090,共6页
目的探讨Wip1在不同卵巢癌细胞系中的表达情况,筛选出Wip1强表达的细胞系,为进一步研究Wip1在卵巢癌细胞系中的作用机制奠定基础。方法应用RT-PCR及Westernblot检测正常卵巢上皮细胞及卵巢癌细胞株SKOV3、CAOV3、A2780、ES2中Wip的表达... 目的探讨Wip1在不同卵巢癌细胞系中的表达情况,筛选出Wip1强表达的细胞系,为进一步研究Wip1在卵巢癌细胞系中的作用机制奠定基础。方法应用RT-PCR及Westernblot检测正常卵巢上皮细胞及卵巢癌细胞株SKOV3、CAOV3、A2780、ES2中Wip的表达情况,最终筛选出SKOV3作为实验细胞系。在卵巢癌SKOV3细胞中沉默Wip基因观察其生物学行为的变化。结果Wip1mRNA表达在SKOV3细胞中明显高于正常上皮细胞(P<0.01),在CAOV3、A2780、ES2细胞中也均高于卵巢正常上皮细胞(P<0.05)。Wip1蛋白表达在SKOV3、A2780、ES2细胞中明显高于正常上皮细胞(P<0.01),在CAOV3细胞中也高于卵巢正常上皮细胞(P<0.05)。转染siRNA-2的SKOV3细胞中Wip1蛋白表达最少,Wip1-siRNA-2转染SKOV3细胞后,Wip1的表达随着其浓度的增加呈减少趋势,在浓度为80nmol/L达到最低值;而作用时间为48hWip1蛋白表达也达到最低(P<0.01)。结论Wip1在SKOV3、CAOV3、A2780、ES2细胞中均呈过表达,在SKOV3细胞中表达水平最高,Wip1-siRNA转染SKOV3细胞在特定浓度和作用时间时沉默效果最好,为进一步阐述其分子机制提供了理论基础。 展开更多
关键词 wip1 人卵巢癌SKOV3细胞 小干扰RNA
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以Wip1为靶点的抗肿瘤研究进展 被引量:2
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作者 梁朝辉 焦保华 《癌变·畸变·突变》 CAS CSCD 2011年第4期312-314,318,共4页
Wip1是人们新近发现的一种原癌基因,已经证明它在多种肿瘤中存在高表达,能够促进肿瘤生长,并且与患者预后密切相关。许多研究表明,以Wip1为靶点的基因治疗,能够在体内外抑制肿瘤细胞增殖,延缓肿瘤生长。Wip1有望成为治疗恶性肿瘤的新靶点。
关键词 wip1 原癌基因 基因治疗
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Wip1基因在肿瘤中的研究进展 被引量:2
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作者 李莉 张荣新 《医学综述》 2012年第23期3972-3974,共3页
Wip1基因是与人类多种恶性肿瘤发生、发展相关的原癌基因,在胰腺癌、膀胱癌、肝癌、乳腺癌、神经母细胞瘤、卵巢透明细胞癌中存在过表达,但其作用机制尚未完全清楚。通过检测恶性肿瘤患者肿瘤组织中Wip1基因的表达情况,将有助于恶性肿... Wip1基因是与人类多种恶性肿瘤发生、发展相关的原癌基因,在胰腺癌、膀胱癌、肝癌、乳腺癌、神经母细胞瘤、卵巢透明细胞癌中存在过表达,但其作用机制尚未完全清楚。通过检测恶性肿瘤患者肿瘤组织中Wip1基因的表达情况,将有助于恶性肿瘤患者的治疗和预后评估。 展开更多
关键词 肿瘤 wip1基因 原癌基因
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原癌基因Wip1在多形性胶质母细胞瘤及其细胞株中的表达及意义 被引量:4
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作者 梁朝辉 焦保华 +2 位作者 卢圣奎 郭二坤 张广宇 《中国神经肿瘤杂志》 2011年第1期1-6,共6页
背景与目的:近年来,相继发现Wip1在多种肿瘤中高表达,并能通过p38MAPK/p53信号通路对p53起负反馈调控,导致p53表达下降及诱导p53突变,与患者预后密切相关。本研究探讨野生型p53-诱导的蛋白磷酸酶1(the wild-type p53-induced phosphatas... 背景与目的:近年来,相继发现Wip1在多种肿瘤中高表达,并能通过p38MAPK/p53信号通路对p53起负反馈调控,导致p53表达下降及诱导p53突变,与患者预后密切相关。本研究探讨野生型p53-诱导的蛋白磷酸酶1(the wild-type p53-induced phosphatase 1,Wip1)在人多形性胶质母细胞瘤及U87、U251细胞中表达及其临床意义。方法:应用免疫组织(细胞)化学、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blot检测31例多形性胶质母细胞瘤及U87、U251细胞中Wip1蛋白和mRNA表达,选取10例正常脑组织作对照,回顾临床病理因素与Wip1表达的相关性。结果:免疫组织化学:多形性胶质母细胞瘤阳性表达率70.9%(22/31)高于正常脑组织的10.0%(1/10),差异有统计学意义(P<0.05);荧光显微镜观察U251细胞阳性表达率73%,U87细胞Wip1阳性表达率65%。RT-PCR:多形性胶质母细胞瘤Wip1 mRNA表达相对量(0.45±0.08)高于正常脑组织(0.11±0.03),差异有统计学意义(P<0.05),U87细胞Wip1 mRNA表达低于U251。Western blot:Wip1蛋白在多形性胶质母细胞瘤表达(1.63±0.19)高于正常脑组织表达(0.23±0.05),差异有统计学意义(P<0.05),U87细胞Wip1蛋白表达低于U251表达。Wip1表达与患者性别、肿瘤大小、年龄无关(P>0.05)。结论:Wip1在多形性胶质母细胞瘤及U87、U251细胞中高表达,可能与肿瘤恶性生长有关,Wip1有望成为恶性胶质瘤治疗新靶点。 展开更多
关键词 多形性胶质母细胞瘤 wip1 U251 U87
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