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黄瓜线粒体基因CsWHY2与启动子克隆及过表达分析
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作者 何小露 程春燕 +3 位作者 夏磊 袁高雅 孟雅 陈劲枫 《分子植物育种》 北大核心 2025年第7期2156-2163,共8页
本研究旨在探讨黄瓜WHIRLY2(WHY2)对成熟花粉粒中mtDNA数量的调控作用,为揭示黄瓜线粒体父系遗传分子机制提供理论基础。以黄瓜高代自交系‘CCMC’为材料,克隆CsWHY2基因及其启动子序列,并对启动子序列进行生物信息学分析;依据花蕾大小... 本研究旨在探讨黄瓜WHIRLY2(WHY2)对成熟花粉粒中mtDNA数量的调控作用,为揭示黄瓜线粒体父系遗传分子机制提供理论基础。以黄瓜高代自交系‘CCMC’为材料,克隆CsWHY2基因及其启动子序列,并对启动子序列进行生物信息学分析;依据花蕾大小收集花粉发育不同时期花药组织,通过实时荧光定量PCR分析花药组织中CsWHY2相对表达量;构建p-ProWHY2-CsWHY2表达载体,通过农杆菌介导法获得p-ProWHY2-CsWHY2转基因拟南芥,并进行表型观察;DAPI染色观察过表达植株成熟花粉粒中mtDNA数量的变化。结果表明:CsWHY2基因及启动子全长分别为726、2598 bp,启动子序列分析表明,其包含核心元件、植物激素响应及光响应等多个元件;RT-qPCR结果显示花药中CsWHY2相对表达量在变圆期急剧增加,成熟期显著下降,开花当天相对表达量最低,整体呈波峰型曲线变化;表型观察发现过表达植株更为矮小且叶片早衰;DAPI染色发现,过表达植株与野生型相比其营养细胞周围存在明显点状信号,这说明过表达植株花粉mtDNA数量显著多于野生型。综上表明CsWHY2影响花粉中的mtDNA数量,与黄瓜线粒体父系遗传密切相关。 展开更多
关键词 黄瓜 线粒体父系遗传 why2 MTDNA DAPI染色
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