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载脂蛋白E敲除(ApoE^(-/-))小鼠整装(whole-mount)主动脉免疫荧光组织化学染色的血管外膜淋巴管成像
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作者 何玉莲 钟文飞 +3 位作者 林彩燕 李玉婷 冯森玲 严鹏科 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期527-531,共5页
目的 探索载脂蛋白E敲除(ApoE^(-/-))小鼠整装(whole-mount)主动脉免疫荧光组织化学染色法显示血管外膜淋巴管的可行性。方法 制备ApoE^(-/-)小鼠整装主动脉,进行淋巴管内皮受体1(LYVE1)、 α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫荧光组织化学染... 目的 探索载脂蛋白E敲除(ApoE^(-/-))小鼠整装(whole-mount)主动脉免疫荧光组织化学染色法显示血管外膜淋巴管的可行性。方法 制备ApoE^(-/-)小鼠整装主动脉,进行淋巴管内皮受体1(LYVE1)、 α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫荧光组织化学染色,染色后组织经5 g/L苏丹黑B处理30 min、组织透明液透明,移至自制的样本容器中,荧光显微镜下成像。结果经5 g/L苏丹黑B处理的整装主动脉可见血管自发荧光显著降低,外膜淋巴管的特异性荧光强度显著增强,更易观察且不会对其他通道荧光产生干扰。结论 建立的ApoE^(-/-)小鼠整装主动脉免疫荧光组织化学染色显示血管外膜淋巴管的方法操作简便,特异性好。 展开更多
关键词 载脂蛋白E敲除(ApoE^(-/-)) 整装(whole-mount)小鼠主动脉 动脉粥样硬化 淋巴管 苏丹黑B
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Value of MRI diffusion weighted imaging in localization of prostate cancer with whole-mount step section pathology
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作者 张凡 《外科研究与新技术》 2011年第4期258-259,共2页
Objective To evaluate the value of MRI diffusion weighted imaging in localization of prostate cancer with whole-mount step section pathology. Methods We treated 36 patients using laparoscopic radical prostatectomy fro... Objective To evaluate the value of MRI diffusion weighted imaging in localization of prostate cancer with whole-mount step section pathology. Methods We treated 36 patients using laparoscopic radical prostatectomy from Oct. 2009 to Jun. 2010. Patients who did not have an MRL /DWI examination or a surgical history of pros- 展开更多
关键词 MRI Value of MRI diffusion weighted imaging in localization of prostate cancer with whole-mount step section pathology
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Histopathological diagnosis of microvascular invasion in hepatocellular carcinoma:Is it reliable?
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作者 Liu-Jun Li Chao-Qun Wu +5 位作者 Fei-Le Ye Zhou Xuan Xiao-Li Zhang Jian-Ping Li Jia Zhou Zhong-Zhen Su 《World Journal of Gastroenterology》 2025年第5期105-116,共12页
BACKGROUND Microvascular invasion(MVI)is a critical prognostic factor for postoperative hepatocellular carcinoma recurrence,but the reliability of its current pathological diagnosis remains uncertain.AIM To evaluate t... BACKGROUND Microvascular invasion(MVI)is a critical prognostic factor for postoperative hepatocellular carcinoma recurrence,but the reliability of its current pathological diagnosis remains uncertain.AIM To evaluate the accuracy of current 7-point sampling methods and propose an optimal pathological protocol using whole-mount slide imaging(WSI)for better MVI detection.METHODS We utilized 40 New Zealand white rabbits to establish VX2 liver tumor models.The entire tumor-containing liver lobe was subsequently obtained,following which five different sampling protocols(A-E)were employed to evaluate the detection rate,accuracy,quantity,and distribution of MVI,with the aim of identifying the optimal sampling method.RESULTS VX2 liver tumor models were successfully established in 37 rabbits,with an incidence of MVI of 81.1%(30/37).The detection rates[27%(10/37),43%(16/37),62%(23/37),68%(25/37),and 93%(14/15)]and quantity(15,36,107,125,and 395)of MVI increased significantly from protocols A to E.The distribution of MVI showed fewer MVIs farther away from the tumor,but the percentage of MVI detected quantity gradually increased from 6.7%to 48.3%in the distant nonneoplastic liver tissue from protocols A to E.Protocol C was identified as the optimal sampling method by comparing them in sequence.The sampling protocol of three consecutive interval WSIs at the tumor center(WSI3)was further screened to determine the optimal number of WSIs.Protocol A(7-point sampling method)exhibited only 46%accuracy and a high false-negative rate of 67%.Notably,the WSI3 protocol improved the accuracy to 78%and decreased the false-negative rate to 27%.CONCLUSION The current 7-point sampling method has a high false-negative rate in MVI detection.In contrast,the WSI3 protocol provides a practical and effective approach to improve MVI diagnostic accuracy,which is crucial for hepatocellular carcinoma diagnosis and treatment planning. 展开更多
关键词 Hepatocellular carcinoma Microvascular invasion Histopathological diagnosis whole-mount slide imaging Sampling protocol
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3种典型贝壳形成基因在红条毛肤石鳖早中期担轮幼虫中的表达特征
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作者 滕镜如 刘新雨 +2 位作者 谭素建 郇聘 刘保忠 《海洋科学》 北大核心 2025年第6期25-36,共12页
多板纲软体动物(石鳖)生有沿前后轴排列的8片贝壳,与其他类群差异很大。从演化的角度看,石鳖属于有刺亚门,其祖先与蛤蜊、螺等有壳亚门动物类群祖先在演化早期即分开,代表了另一条演化路径。对石鳖独特贝壳性状开展研究对于理解软体动... 多板纲软体动物(石鳖)生有沿前后轴排列的8片贝壳,与其他类群差异很大。从演化的角度看,石鳖属于有刺亚门,其祖先与蛤蜊、螺等有壳亚门动物类群祖先在演化早期即分开,代表了另一条演化路径。对石鳖独特贝壳性状开展研究对于理解软体动物贝壳的起源和演化有重要的科学意义。本文以红条毛肤石鳖(Acanthochitona rubrolineata)为研究对象,筛选得到4个有壳亚门软体动物贝壳发育基因的同源基因,包括2个酪氨酸酶(tyrosinase)基因、信号通路分子bmp2/4基因和转录因子gata2/3基因(分别命名为AR-tyr1、AR-tyr2、AR-bmp2/4和AR-gata2/3),并分析了基因的表达模式与贝壳发育的相关性。首先预测候选基因编码蛋白的保守结构域并构建系统发育树,确定4个基因为tyrosinase、bmp2/4和gata2/3的直系同源基因,其包含该类基因典型的结构域。之后在石鳖早期贝壳发育关键阶段(24 hpf、36 hpf和48 hpf)的样品中进行整装原位杂交实验。结果显示,AR-tyr1和AR-tyr2在幼虫顶部、腹侧和担轮环处表达并且二者表达模式存在一定差异,AR-bmp2/4在顶部、腹侧、担轮环和背侧中胚层表达。这3个基因在贝壳发育区均没有明显的表达,与有壳亚门软体动物中特异性表达于贝壳发育区的表达模式截然不同。与此相对的,AR-gata2/3则在石鳖贝壳发育区几乎所有细胞中表达,虽然与贝壳形成相关,但与有壳亚门软体动物中局限在贝壳发育区外缘的表达模式非常不同。石鳖中这些重要贝壳形成基因的表达模式与在有壳亚门软体动物中存在显著的差异,提示两类动物贝壳早期发育机制存在重要的差别,为深入理解和探索不同软体动物类群贝壳的发育机制和同源性关系提供了支持。 展开更多
关键词 红条毛肤石鳖 贝壳发育 整装原位杂交 酪氨酸酶基因 bmp2/4 gata2/3
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互联网+车载智慧院前急救可视化全流程管理对院前急救响应时间的影响 被引量:2
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作者 周龙锦 肖文 +2 位作者 高明道 来积伟 张皓迪 《中国当代医药》 2025年第12期116-120,共5页
目的探讨互联网+车载智慧院前急救可视化全流程管理对院前急救响应时间和满意度的影响。方法选取2022年1月至2023年12月甘肃省紧急医疗救援中心兰州市区直属分站院前救治的36125例患者作为研究对象,将2022年1月至12月采用常规院前出诊... 目的探讨互联网+车载智慧院前急救可视化全流程管理对院前急救响应时间和满意度的影响。方法选取2022年1月至2023年12月甘肃省紧急医疗救援中心兰州市区直属分站院前救治的36125例患者作为研究对象,将2022年1月至12月采用常规院前出诊流程管理接诊的14668例患者设为对照组,2023年1月至12月采用互联网+车载智慧院前急救可视化全流程管理接诊的21457例患者设为观察组。比较两组的全流程急救响应时间和随访满意度。结果观察组急救反应时间、现场处置用时、送达医院用时、途中待命用时、急救响应总用时均短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组总满意率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组意见建议率、投诉率均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论互联网+车载智慧院前急救可视化全流程管理用于急诊患者中,利于缩短院前急救响应时间,提高院前急救患者满意度,具有推广应用价值。 展开更多
关键词 院前急救响应时间 互联网+车载智慧 可视化全流程管理 满意度
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大型轨道式集装箱龙门起重机变身工艺研究
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作者 俞小兵 《起重运输机械》 2025年第24期83-87,共5页
为解决大型轨道式集装箱龙门起重机因尺寸超限无法整机运输的问题,文中以4台空箱轨道式集装箱龙门起重机项目为研究对象,开展轨道式集装箱龙门起重机变身工艺的研究。基于项目周期超短、跨距大等特点,结合龙门架结构提出2种牵引方案与... 为解决大型轨道式集装箱龙门起重机因尺寸超限无法整机运输的问题,文中以4台空箱轨道式集装箱龙门起重机项目为研究对象,开展轨道式集装箱龙门起重机变身工艺的研究。基于项目周期超短、跨距大等特点,结合龙门架结构提出2种牵引方案与不同吊装设备的选择,经对比分析,最终确定采用牵引车加橡皮台车作为牵引设备,配合浮式起重机吊装的变身方案,严格按照工艺方案实施移腿变身,成功将大车轨距从46 m缩小至34 m,满足了船舶运输要求。此研究成果突破了传统运输的限制,通过创新性移腿方式充分释放甲板船空间,提升单船装船台数,降低发运成本,为大型轨道式集装箱龙门起重机变身发运提供实践经验与技术参考,对同类工程具有重要示范意义。 展开更多
关键词 轨道式集装箱龙门起重机 整机运输 移腿 吊装 变身工艺
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视黄酸影响斑马鱼胚胎心脏房室分化 被引量:7
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作者 张立凤 桂永浩 +5 位作者 钟涛 王跃祥 蒋球 崇梅 孙淑娜 宋后燕 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期88-91,共4页
目的观察外源性视黄酸对斑马鱼心脏前后轴发育即心脏房室分化的影响。方法采用化学遗传学方法在斑马鱼胚胎发育至12.5hpf(hours post fertilization)给予5×10-8mol/L和10-7mol/L外源性视黄酸处理1.5h。应用胚胎整体原位杂交观察视... 目的观察外源性视黄酸对斑马鱼心脏前后轴发育即心脏房室分化的影响。方法采用化学遗传学方法在斑马鱼胚胎发育至12.5hpf(hours post fertilization)给予5×10-8mol/L和10-7mol/L外源性视黄酸处理1.5h。应用胚胎整体原位杂交观察视黄酸对心脏特异基因vmhc,amhc,nkx2.5和nppa表达的影响。结果vmhc,amhc探针的整体原位杂交结果显示视黄酸处理会导致斑马鱼胚胎心脏的前后轴发育异常,表现为vmhc表达细胞的范围缩小,amhc表达细胞的范围明显增大。视黄酸可以明显增强nppa在心脏的表达。视黄酸对心脏房室分化的影响在48hpf后表现得明显。结论5×10-8mol/L和10-7mol/L视黄酸在12.5hpf处理斑马鱼胚胎对斑马鱼心脏早期发生没有影响。斑马鱼发育过程中,视黄酸对心脏的房室分化过程起着重要的调控作用,视黄酸支持心房的分化和发育,同时抑制心室发育。 展开更多
关键词 视黄酸 斑马鱼 心脏发育 整体原位杂交
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根治性前列腺切除术后病理大切片与常规切片的对比分析 被引量:10
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作者 常坤 杨晓群 +9 位作者 王朝夫 甘华磊 郑爱华 杨珺 戴波 瞿元元 张海梁 施国海 朱耀 叶定伟 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期824-829,共6页
背景与目的:在根治性前列腺切除术(radical prostatectomy,RP)组织标本中,应用病理大切片技术可以全面观察组织,其在病理诊断、形态学研究方面拥有独特的优势。但是由于制作技术、设备限制、工作量较大等原因,目前在临床上尚未常规开展... 背景与目的:在根治性前列腺切除术(radical prostatectomy,RP)组织标本中,应用病理大切片技术可以全面观察组织,其在病理诊断、形态学研究方面拥有独特的优势。但是由于制作技术、设备限制、工作量较大等原因,目前在临床上尚未常规开展。本研究通过比较RP后行常规切片及病理大切片患者的临床及病理变量,评价RP后病理大切片技术在前列腺癌诊断中的意义。方法:选择2012年12月—2014年2月在复旦大学附属肿瘤医院行RP后做病理大切片的229例前列腺癌患者作为研究组,同时选取2010年1月—2012年6月行RP后做常规病理切片的393例前列腺癌患者作为对照组,对比分析包括两组患者年龄,术前PSA值,术前是否接受新辅助内分泌治疗,前列腺癌确诊方式,确诊时Gleason评分、临床分期,RP后Gleason评分、病理分期、手术切缘、前列腺包膜外侵犯、精囊侵犯、术后盆腔淋巴结转移等变量。结果:两组患者术前临床及病理变量:RP后病理Gleason评分、病理分期、前列腺包膜外侵犯情况、术后盆腔淋巴结转移差异均无统计学意义(P>0.05),但是研究组患者手术切缘及精囊侵犯的阳性率明显高于对照组,差异有统计学意义(26.2%vs17.6%,P=0.010;23.1%vs 17.0%,P=0.025)。结论:应用病理大切片技术可明显提高前列腺标本切缘阳性及精囊侵犯的阳性检出率,因此病理大切片技术值得在前列腺癌病理诊断中推广。 展开更多
关键词 前列腺癌 病理大切片技术 根治性前列腺切除术
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日本血吸虫培养细胞整装内质网膜系统形态及基质对其结构的影响 被引量:6
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作者 董惠芬 朱俊勇 +3 位作者 钟沁萍 明珍平 蒋明森 徐明星 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期485-487,共3页
目的 研究日本血吸虫培养细胞整装内质网膜系统的三维结构及细胞外基质 (ECM)对其的作用。方法 用高锰酸钾作固定剂 ,制备日本血吸虫培养细胞整装内质网膜系统标本 ,扫描电镜下观察。结果 日本血吸虫培养细胞的内质网膜系统由膜性小... 目的 研究日本血吸虫培养细胞整装内质网膜系统的三维结构及细胞外基质 (ECM)对其的作用。方法 用高锰酸钾作固定剂 ,制备日本血吸虫培养细胞整装内质网膜系统标本 ,扫描电镜下观察。结果 日本血吸虫培养细胞的内质网膜系统由膜性小管、小泡相互连接构成小型扁囊样网络结构。基质中细胞的内质网膜系统较对照组发达、丰富 ;基质的种类不同 ,培养细胞内质网膜系统的形态各异。鼠尾胶中细胞多由膜性小管和小泡构成 ,其网眼数目较少 ,可见伪足样结构 ;伪足较短 ,也由膜性小管或小泡构成管囊状网络。肺基质中细胞几乎均为小管 ,小泡极少 ;网眼和伪足数目增多 ,伪足呈针状。肝基质中细胞的内质网膜系统与肺基质中的相似 ,但网眼和伪足数目更多 ,伪足细长 ,呈纤维状。结论 ECM可明显影响日本血吸虫培养细胞的内质网膜系统形态 ;ECM的种类不同 。 展开更多
关键词 日本血吸虫 培养细胞 整装 内质网膜系统 形态 细胞外基质
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半滑舌鳎骨形态发生蛋白4基因的克隆和表达分析 被引量:5
10
作者 马骞 冯文荣 +2 位作者 柳淑芳 庄志猛 马慧 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期500-512,共13页
本研究克隆了半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)骨形态发生蛋白4(BMP4)基因的c DNA序列,并分析其在半滑舌鳎成鱼的组织表达分布及其在早期发育阶段的定位和表达变化趋势。结果表明,半滑舌鳎BMP4基因c DNA全长为1680 bp,包括了419 bp的5... 本研究克隆了半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)骨形态发生蛋白4(BMP4)基因的c DNA序列,并分析其在半滑舌鳎成鱼的组织表达分布及其在早期发育阶段的定位和表达变化趋势。结果表明,半滑舌鳎BMP4基因c DNA全长为1680 bp,包括了419 bp的5′非翻译区(5′UTR)、编码403个氨基酸的1212 bp的开放阅读框(ORF)以及49 bp的3′非翻译区(3′UTR)。同源性分析和分子进化聚类分析结果显示,半滑舌鳎与已报道慈鲷科(Cichlidae)各鱼种的同源性最高,并与之共同聚为鱼类BMP4分支。BMP4 m RNA在半滑舌鳎成鱼的13个组织中具有广泛的分布,并在鳃组织中表达量最高,其次在背鳍、软骨等组织具有中等水平的表达。此外,BMP4基因在早期胚胎发育阶段(卵裂期和原肠期)具有极高水平的表达,此后其表达水平逐渐降低;但在后期仔鱼期(孵化后3日龄和4日龄),其表达水平再次升高。整体原位杂交检测结果表明,BMP4 m RNA在早期仔鱼期主要在头部及躯干前部表达;后期仔鱼BMP4基因主要在冠状幼鳍、上下颌及胸鳍处表达;进入稚鱼期后在鳃盖骨及各鳍均有表达。上述研究结果揭示了BMP4在半滑舌鳎早期骨骼发育中的重要作用,为揭示海水硬骨鱼类骨骼发生、发育的调控机制奠定了理论基础。 展开更多
关键词 半滑舌鳎 BMP4 克隆 基因表达 整体原位杂交 骨骼发育
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利用激光扫描共聚焦显微术对同源四倍体水稻胚囊形成与发育的进一步观察 被引量:13
11
作者 郭海滨 卢永根 +2 位作者 冯九焕 杨秉耀 刘向东 《激光生物学报》 CAS CSCD 2006年第2期111-117,共7页
应用改进的整体染色透明激光扫描共聚焦显微术(WCLSM),对同源四倍体水稻PDER-2B-4x胚囊的形成与发育过程进行观察。发现其胚囊的形成发育过程与二倍体的一致,可以清楚地划分为8个发育时期,即孢原细胞形成期、大孢子母细胞形成期、大孢... 应用改进的整体染色透明激光扫描共聚焦显微术(WCLSM),对同源四倍体水稻PDER-2B-4x胚囊的形成与发育过程进行观察。发现其胚囊的形成发育过程与二倍体的一致,可以清楚地划分为8个发育时期,即孢原细胞形成期、大孢子母细胞形成期、大孢子母细胞减数分裂期、功能大孢子形成期、单核胚囊形成期、胚囊有丝分裂期、八核胚囊发育期和成熟胚囊期。除正常发育的过程外,大孢子发育的各个过程均出现一些异常现象,包括:细胞退化、核位置异常、核数目异常和细胞分化异常等。这些异常可能最终导致多种结构异常成熟胚囊的形成。 展开更多
关键词 同源四倍体水稻 整体染色透明激光扫描共聚焦显微术(WCLSM) 胚囊 发育
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活体荧光染色联合组织透明法在显示小鼠皮肤微血管构筑中的应用 被引量:4
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作者 毛以华 丁茂超 +2 位作者 周鹏 邹天乐 唐茂林 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期774-776,共3页
目的探讨活体静脉注射荧光标记物结合组织透明法应用于皮肤微血管研究的可行性。方法 ICR小鼠20只,随机分为Ⅰ、Ⅱ两大组,分别通过尾静脉注射异硫氰酸荧光素(FITC)标记的血小板内皮细胞黏附分子-Ⅰ抗体(Anti-CD31/FITC)和FITC标记的荆... 目的探讨活体静脉注射荧光标记物结合组织透明法应用于皮肤微血管研究的可行性。方法 ICR小鼠20只,随机分为Ⅰ、Ⅱ两大组,分别通过尾静脉注射异硫氰酸荧光素(FITC)标记的血小板内皮细胞黏附分子-Ⅰ抗体(Anti-CD31/FITC)和FITC标记的荆豆凝集素-I(FITC-UEA-I)。每组动物再分为不透明组(a)和透明组(b),前者经冷冻切片后置于荧光显微镜下观察,后者不经冷冻切片,待完全透明后直接置于镜下观察。结果未透明组Ⅰa、Ⅱa经冷冻切片处理后,镜下所见血管密度低,血管体出现明显的破坏;而经过透明处理的Ⅰb、Ⅱb在镜下可透过1 000μm的厚度直接观察到清晰、完整的血管体结构。结论活体荧光染色和组织透明法联合应用实现了无需切片即可观察较厚标本的目的 ,这对维持标本内血管体结构的完整性起到了重要的作用。 展开更多
关键词 异硫氰酸荧光素 透明 整体标记 冷冻切片 小鼠
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银鲫pou2基因在胚胎发育过程中的时空表达图式 被引量:5
13
作者 尹隽 周莉 +2 位作者 刘军 杜新征 桂建芳 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期629-636,共8页
用RACE-PCR方法从原肠期SMART文库中扩增到银鲫pou2基因的全长cDNA,其全长为2421bp,开放阅读框为1416bp,编码471个氨基酸,与斑马鱼pou2基因的氨基酸序列一致性高达91.0%。我们用RT-PCR和整体原位杂交的方法研究了银鲫pou2基因在胚胎发... 用RACE-PCR方法从原肠期SMART文库中扩增到银鲫pou2基因的全长cDNA,其全长为2421bp,开放阅读框为1416bp,编码471个氨基酸,与斑马鱼pou2基因的氨基酸序列一致性高达91.0%。我们用RT-PCR和整体原位杂交的方法研究了银鲫pou2基因在胚胎发育过程中的时空表达图式。RT-PCR结果显示,银鲫pou2基因有母源转录本,其合子基因在高囊胚期强烈表达,在50%下包期和90%下包期也有高量的转录本,但在100%下包期表达量急剧降低,至体节期时已经完全检测不到其转录本。胚胎整体原位杂交结果显示其母源转录本在所有的胚盘细胞中。在高囊胚期和50%下包期,高度表达的合子转录本仍在所有的胚盘细胞中,但至90%下包期时,pou2的表达向胚胎背部的正中线汇聚,集中在神经板的两侧区域和脑部的两条横向条带。在100%下包期时,pou2的表达集中在神经板的中间区域以及预期形成的中后脑区域。至体节期时,转录本消失,这与RT-PCR结果高度一致。银鲫pou2基因的表达图式提示该基因在胚胎发育的早期具有重要作用,它可能参与调控神经板的形成和中后脑细胞的发育命运。 展开更多
关键词 银鲫pou2基因 胚胎发育 RT-PCR 胚胎整体原位杂交
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牙鲆变态过程中的细胞凋亡 被引量:7
14
作者 鲍宝龙 杨桂梅 任大明 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第2期355-361,共7页
利用整体的原位TUNEL方法检测了牙鲆(Paralichthysolivaceus)变态过程中身体各器官细胞凋亡的分布及变化情况。结果如下:(1)与眼睛移动相关的脑颅骨骼的细胞凋亡右侧眼睛移动开始之后,在额骨、中筛软骨和犁骨软骨中出现细胞凋亡,并保持... 利用整体的原位TUNEL方法检测了牙鲆(Paralichthysolivaceus)变态过程中身体各器官细胞凋亡的分布及变化情况。结果如下:(1)与眼睛移动相关的脑颅骨骼的细胞凋亡右侧眼睛移动开始之后,在额骨、中筛软骨和犁骨软骨中出现细胞凋亡,并保持到眼睛移动结束;(2)中枢神经和感觉器官的细胞凋亡在眼睛移动开始之前,脊髓和脊髓鞘出现细胞凋亡,在眼睛移动开始之后,脊髓和脊髓鞘细胞凋亡停止,而在脑、眼睛和内耳出现细胞凋亡,并一直持续到眼睛移动结束;(3)与游泳、捕食和消化等功能相关的器官的细胞凋亡在眼睛移动开始后,冠状幼鳍的基部出现凋亡;在变态中后期,尾鳍基部出现细胞凋亡;下颌骨、鳃弓以及肝脏在眼睛移动开始之后,出现细胞凋亡,也一直持续到眼睛移动结束。细胞凋亡通过有序地去除多余的细胞来参与器官形态建立和重组,本研究的结果表明,在牙鲆器官功能变化过程中,细胞凋亡在与其相适应的的器官形态重塑中起着重要作用[动物学报52(2):355-361,2006]。 展开更多
关键词 牙鲆 细胞凋亡 变态 整体TUNEL
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小鼠胚胎整体原位杂交实用技术的建立 被引量:5
15
作者 吴燕 马子敏 +2 位作者 刘淑红 范文红 范明 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期434-436,共3页
目的 优化小鼠胚胎整体原位杂交及数据分析方法。 方法 小鼠胚胎用 4 %多聚甲醛 4℃固定过夜 ,10mg L蛋白酶K(PK)室温消化 30min ,预杂交 2h后 ,加入探针 6 3℃反应 16~ 18h ,用盐溶液高温洗涤多次 ,RNA酶 37℃消化 1h ,封闭 4h后... 目的 优化小鼠胚胎整体原位杂交及数据分析方法。 方法 小鼠胚胎用 4 %多聚甲醛 4℃固定过夜 ,10mg L蛋白酶K(PK)室温消化 30min ,预杂交 2h后 ,加入探针 6 3℃反应 16~ 18h ,用盐溶液高温洗涤多次 ,RNA酶 37℃消化 1h ,封闭 4h后加入地高辛抗体 4℃过夜。抗体反应后反复洗涤并在水平摇床上振摇 ,NBT和BCIP显色系统避光显色。提取图像灰度值 ,扣除背景、对照等假阳性信号。 结果 KIAA170 8探针在脑、脊髓等 8个区域有杂交信号 ,对图像数据分析结果表明 ,只有 1个区域的信号在 95 %可信限范围内 ,为阳性信号。 结论 通过控制蛋白酶K消化时间、探针和地高辛抗体浓度 ,以及洗涤、显色过程 ,得到了低本底、着色清晰的杂交结果 ,结合图像的数据分析步骤 ,消除假阳性结果。建立了一套实用的小鼠胚胎整体原位杂交方法。 展开更多
关键词 方法改进 整体原位杂交 小鼠胚胎
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广东高州普通野生稻生殖特性的研究 Ⅱ.胚囊育性、胚囊发育、胚胎发生和胚乳发育 被引量:13
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作者 杨培周 郭海滨 +3 位作者 赵杏娟 李金泉 刘向东 卢永根 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 2006年第2期136-143,共8页
利用整体染色激光扫描共聚焦显微镜术(WCLSM),对采自广东省高州市6个地点共141个编号的高州普通野生稻的成熟胚囊育性和胚囊形成发育特点等进行研究。结果表明,供试的绝大多数高州普通野生稻材料成熟胚囊均存在不同程度的育性异常现象,... 利用整体染色激光扫描共聚焦显微镜术(WCLSM),对采自广东省高州市6个地点共141个编号的高州普通野生稻的成熟胚囊育性和胚囊形成发育特点等进行研究。结果表明,供试的绝大多数高州普通野生稻材料成熟胚囊均存在不同程度的育性异常现象,包括雌性生殖单位退化、极核位置异常、极核数目异常、胚囊退化等。这些异常结构的胚囊由于没有正常的卵细胞,不能正常受精,影响子粒结实。141个编号平均异常胚囊频率为11.11%,最高异常率为67.86%。高州普通野生稻胚囊发育过程与正常栽培稻一致,属蓼型。对一些结实率偏低材料的研究,发现在胚囊发育过程的不同时期存在一些异常现象,包括功能大孢子退化,二至八核胚囊发育异常等。对柱头上的花粉量调查,发现观察的69个编号中,多数编号柱头上花粉量偏少。研究表明,花粉量偏少影响受精是导致结实率偏低的最主要原因之一。本文对导致结实率偏低的综合因素进行了讨论。 展开更多
关键词 高州普通野生稻 胚囊 胚胎发生和胚乳发育 整体染色激光扫描共聚焦显微镜术(WCLSM)
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转录因子Tbx18在小鼠胚胎发育过程中的时空表达 被引量:5
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作者 蒲荻 杜建霖 +2 位作者 李晓群 翁敏杰 佘强 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1171-1175,共5页
目的检测胚胎期小鼠Tbx18在mRNA及蛋白水平的表达情况,了解Tbx18在小鼠胚胎发育过程中的时空表达模式。方法用整体原位杂交技术检测小鼠整胚TBX18 mRNA的表达,用X-gal染色检测Tbx18-Cre/Rosa26R/LacZ双杂合基因谱系示踪模型小鼠胚胎的... 目的检测胚胎期小鼠Tbx18在mRNA及蛋白水平的表达情况,了解Tbx18在小鼠胚胎发育过程中的时空表达模式。方法用整体原位杂交技术检测小鼠整胚TBX18 mRNA的表达,用X-gal染色检测Tbx18-Cre/Rosa26R/LacZ双杂合基因谱系示踪模型小鼠胚胎的报告基因LacZ蛋白的表达,用荧光定量PCR检测小鼠胚胎期心脏mRNA的定量表达。结果发现在小鼠胚胎期9.5~10.5 d转录因子Tbx18主要在前体心外膜表达,由前体心外膜逐渐迁移定位于心外膜;在11.5~12.5 d的小鼠胚胎Tbx18主要定位于心脏、上下肢、体节及上下唇鄂区域;大于12.5 d的小鼠胚胎Tbx18除了上述部位外还定位于肾、输尿管、膀胱等区域。结论转录因子Tbx18在小鼠胚胎发育过程中的表达具有时空特异性,对小鼠心脏的发育可能起着至关重要的作用;同时在上下肢、体节、唇鄂、肾、输尿管、膀胱的发育中也可能起非常重要的作用。 展开更多
关键词 转录因子Tbx18 整体原位杂交 小鼠 胚胎发育 时空表达
原文传递
鳜鱼生肌调节因子MyoD的克隆及其发育表达分析 被引量:4
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作者 李玉珑 农小献 +5 位作者 李虹辉 王贝贝 刘希良 褚武英 张建社 李琦华 《晓庄学院自然科学学报》 CAS 北大核心 2013年第4期63-68,共6页
生肌调节因子是肌肉形成的关键控制因素.通过RT-PCR方法克隆得到鳜鱼主要生肌调节因子MyoD序列.鳜鱼MyoD基因cDNA长度为813 bp,编码270个氨基酸,推导的氨基酸序列含有1个bHLH结构.经与其他动物MyoD氨基酸序列比对发现不同动物MyoD的bHL... 生肌调节因子是肌肉形成的关键控制因素.通过RT-PCR方法克隆得到鳜鱼主要生肌调节因子MyoD序列.鳜鱼MyoD基因cDNA长度为813 bp,编码270个氨基酸,推导的氨基酸序列含有1个bHLH结构.经与其他动物MyoD氨基酸序列比对发现不同动物MyoD的bHLH结构域保守性高.通过合成地高辛标记的反义RNA探针对鳜鱼不同发育阶段的胚胎进行整体胚胎原位杂交,结果发现:MyoD最早在肌节早期被检测到信号.伴随着鳜鱼体节从头部往后发育,MyoD也从头部往尾部表达.在体节期,MyoD在中后部表达.尾芽期MyoD的表达量达到最大值.然而,尾芽期过后,头部MyoD的表达量急剧减少,但尾部仍然有强烈的信号.在血流期仍然能在鳜鱼尾部检测到MyoD的微弱信号.到孵出期在鳜鱼鱼眼的后方和胸部腹侧检测到MyoD的强信号,而身体其他地方检测不到信号.仔鱼期没有检测到MyoD表达的信号. 展开更多
关键词 鳜鱼 生肌调节因子 MYOD 整体胚胎原位杂交 发育表达
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腹腔镜和开放前列腺癌根治术后配对比较切缘阳性情况 被引量:8
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作者 朱耀 韩成涛 +7 位作者 杨晓群 戴波 张海梁 施国海 沈益君 朱一平 王朝夫 叶定伟 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2015年第4期234-236,共3页
目的通过配对比较腹腔镜和开放性前列腺癌根治术两种不同手术方式,明确术后切缘阳性的影响因素。方法回顾性分析我院2012年12月至2014年7月行前列腺癌根治术230例患者,其中行开放手术136例,腹腔镜94例,术后通过前列腺整体组织大切片的... 目的通过配对比较腹腔镜和开放性前列腺癌根治术两种不同手术方式,明确术后切缘阳性的影响因素。方法回顾性分析我院2012年12月至2014年7月行前列腺癌根治术230例患者,其中行开放手术136例,腹腔镜94例,术后通过前列腺整体组织大切片的方式由我院泌尿病理医师阅片评估术后切缘阳性情况及部位。结果通过倾向指数评分配对比较腹腔镜和开放手术效果,其中腹腔镜94例占40.9%。根据患者年龄、PSA水平和穿刺Gleason评分进行配对,最终选取腔镜和开放手术患者各94例进行分析。两组人群的年龄、PSA水平、穿刺Gleason评分和病理T分期均无显著差异。年龄、PSA、穿刺Gleason综合、T分期和手术方式5个变量进行多因素分析,可发现仅有术后病理T分期可作为切缘阳性的独立预后因素。无论是总体切缘阳性率还是不同部位的切缘阳性率,腹腔镜手术和开放手术相比均没有显著差异(P>0.05)。结论两组人群的手术切缘阳性率没有显著性差异,提示腹腔镜手术提供了不劣于开放手术的肿瘤切除的完整性。 展开更多
关键词 前列腺癌根治术 腹腔镜 开放手术 切缘阳性 整体组织切片
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整体原位杂交检测ERα基因在小鼠胚胎发育中的表达 被引量:4
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作者 张子峰 樊少华 +4 位作者 陆军 吴冬梅 单群 胡斌 郑元林 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期39-44,共6页
为制备地高辛标记的小鼠雌激素受体α(ERα)RNA探针,用其研究ERα在小鼠胚胎发育过程中的表达。通过RT-PCR,获得ERα基因片段,构建ERα/pGEM-3Z重组质粒,分别用HindⅢ和EcoRⅠ进行酶切得到线性化DNA片段,以T7和Sp6聚合酶合成地高辛标记... 为制备地高辛标记的小鼠雌激素受体α(ERα)RNA探针,用其研究ERα在小鼠胚胎发育过程中的表达。通过RT-PCR,获得ERα基因片段,构建ERα/pGEM-3Z重组质粒,分别用HindⅢ和EcoRⅠ进行酶切得到线性化DNA片段,以T7和Sp6聚合酶合成地高辛标记的正反义RNA探针,然后通过胚胎整体原位杂交技术分析ERα在小鼠胚胎中的表达。结果构建了ERα/pGEM-3Z质粒,获得高效价的正反义dig-ERαRNA探针。运用该探针检测到ERα在10.5dpc胚胎的前脑、脊神经管、生殖嵴、肢芽及颌弓中表达,在13.5dpc胚胎的端脑、中脑、脊髓、肢芽及生殖系统中表达,为进一步研究ERα在小鼠胚胎发育中的功能打下了基础。 展开更多
关键词 雌激素受体α(ERα) RNA探针 整体原位杂交 小鼠胚胎
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