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厌氧菌株Clostridium sp.WGC702的筛选及其β-葡萄糖苷酶基因的克隆
被引量:
1
1
作者
申佩弘
蒋承建
+2 位作者
杨霞
沈建涛
武波
《工业微生物》
CAS
CSCD
2011年第1期21-25,共5页
从沼气池中筛选一株产β-葡萄糖苷酶的厌氧菌菌株WGC702,基于16S rDNA序列及生理特性将其确定为梭菌属,命名为Clostridium sp.WGC702。用BamHI不完全酶切WGC702的总DNA,回收2~10kb范围内的DNA片段,连接到pGEM-3zf(+)载体上,电转化至大...
从沼气池中筛选一株产β-葡萄糖苷酶的厌氧菌菌株WGC702,基于16S rDNA序列及生理特性将其确定为梭菌属,命名为Clostridium sp.WGC702。用BamHI不完全酶切WGC702的总DNA,回收2~10kb范围内的DNA片段,连接到pGEM-3zf(+)载体上,电转化至大肠杆菌E.coliDH5α中构建基因文库,利用七叶苷平板筛选到120个能产黑色水解圈的阳性克隆。将其中一个含3.5kb左右大小的外源片段的阳性克隆子进行测序,结果发现其中含有一个1347bp大小的完整ORF框,进一步分析表明该片段编码448个氨基酸组成的蛋白质,氨基酸序列与来自Clostridiumcellulovorans 743B(登录号为EES30417.1)的β-葡萄糖苷酶具有48%的同源性,其预测的等电点和分子量分别为4.94和53978.6Da,可能为一个新的β-葡萄糖苷酶基因。
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关键词
wgc702
筛选
基因文库
Β-葡萄糖苷酶基因
克隆
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题名
厌氧菌株Clostridium sp.WGC702的筛选及其β-葡萄糖苷酶基因的克隆
被引量:
1
1
作者
申佩弘
蒋承建
杨霞
沈建涛
武波
机构
广西大学生命科学与技术学院
微生物及植物遗传工程教育部重点实验室
广西亚热带生物资源保护利用重点实验室
广西民族大学化学与生态工程学院
出处
《工业微生物》
CAS
CSCD
2011年第1期21-25,共5页
文摘
从沼气池中筛选一株产β-葡萄糖苷酶的厌氧菌菌株WGC702,基于16S rDNA序列及生理特性将其确定为梭菌属,命名为Clostridium sp.WGC702。用BamHI不完全酶切WGC702的总DNA,回收2~10kb范围内的DNA片段,连接到pGEM-3zf(+)载体上,电转化至大肠杆菌E.coliDH5α中构建基因文库,利用七叶苷平板筛选到120个能产黑色水解圈的阳性克隆。将其中一个含3.5kb左右大小的外源片段的阳性克隆子进行测序,结果发现其中含有一个1347bp大小的完整ORF框,进一步分析表明该片段编码448个氨基酸组成的蛋白质,氨基酸序列与来自Clostridiumcellulovorans 743B(登录号为EES30417.1)的β-葡萄糖苷酶具有48%的同源性,其预测的等电点和分子量分别为4.94和53978.6Da,可能为一个新的β-葡萄糖苷酶基因。
关键词
wgc702
筛选
基因文库
Β-葡萄糖苷酶基因
克隆
Keywords
wgc702
screening
gene library
β-glucosidase gene
cloning
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
厌氧菌株Clostridium sp.WGC702的筛选及其β-葡萄糖苷酶基因的克隆
申佩弘
蒋承建
杨霞
沈建涛
武波
《工业微生物》
CAS
CSCD
2011
1
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