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山药WD40基因家族全基因组鉴定以及抗性相关基因表达模式分析
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作者 仝辰炜 何雨龙 +7 位作者 常英英 李海兵 赵伟超 马思佳 陈慧萱 孙林涛 李明军 杨清香 《植物生理学报》 北大核心 2025年第8期1129-1147,共19页
WD40基因家族在真核生物中广泛存在,其功能是参与植物生长发育和抗性调节。本研究基于已发表的山药基因组数据,在参薯(Dioscorea alata)和几内亚山药(D.rotundata)中分别鉴定出190和203个WD40,并发现这些成员在进化中受到纯化选择。通... WD40基因家族在真核生物中广泛存在,其功能是参与植物生长发育和抗性调节。本研究基于已发表的山药基因组数据,在参薯(Dioscorea alata)和几内亚山药(D.rotundata)中分别鉴定出190和203个WD40,并发现这些成员在进化中受到纯化选择。通过分析顺式作用元件的组成,在‘紫玉淮山’(D.alata‘Ziyu Huaishan’)中筛选DaZWD40-43、DaZWD40-49、DaZWD40-64、DaZWD40-73、DaZWD40-90、DaZWD40-95、DaZWD40-109和DaZWD40-132八个基因进行克隆,测序结果显示对应的蛋白序列与已公开的参考基因组物种参薯相比高度保守;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定结果显示,所克隆的基因多数在块茎发育后期高表达,并且参与脱落酸信号及干旱刺激响应。本研究首次系统鉴定并分析了山药WD40家族成员,探讨了部分WD40成员在块茎发育及环境变化下的表达模式,为进一步揭示WD40基因家族在山药中的功能提供研究基础。 展开更多
关键词 山药 wd40基因 鉴定 表达模式
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弓形虫TGME49_240850基因编码的含WD40结构域蛋白的生物学功能
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作者 洪照微 王萌 +4 位作者 孙黎秀 寇永杰 马志雅 江新成 付宝权 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第5期577-585,共9页
为探究弓形虫中TGME49_240850基因编码的含WD40结构域蛋白的生物学功能,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建弓形虫TGME49_240850条件性敲除虫株(TGME49_240850-m AID-6HA),并分析该基因在弓形虫Pru-TIR1虫株的亚细胞定位和基本生物学功能... 为探究弓形虫中TGME49_240850基因编码的含WD40结构域蛋白的生物学功能,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建弓形虫TGME49_240850条件性敲除虫株(TGME49_240850-m AID-6HA),并分析该基因在弓形虫Pru-TIR1虫株的亚细胞定位和基本生物学功能。间接免疫荧光试验显示,TGME49_240850蛋白定位于细胞核,并且加入吲哚乙酸后能将该蛋白降解;Western-blot结果表明,TGME49_240850-m AID-6HA融合蛋白大小约为90 k Da;与对照组相比,TGME49_240850-m AID-6HA虫株形成噬斑的能力(P<0.001)和增殖能力(P<0.01)均显著降低,而对入侵、逸出和缓殖子转化能力却无明显影响(P>0.05)。以上结果表明,TGME49_240850蛋白的降解减弱了弓形虫的体外增殖能力。结论:成功构建了TGME49_240850条件性敲除虫株,为进一步研究弓形虫中含WD40结构域相关蛋白的功能奠定基础。 展开更多
关键词 弓形虫 wd40结构域 条件性敲除 生长素诱导降解系统
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MYB、bHLH、WD40调控兰科植物花色花香研究进展 被引量:1
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作者 杨跃敏 罗丹妮 +4 位作者 秦梦珂 郭润杰 王媛媛 刘锟鹏 马晓开 《植物遗传资源学报》 北大核心 2025年第12期2275-2287,共13页
MYB、bHLH和WD40转录因子在高等植物次级代谢途径(如花青素与原花青素代谢)、表皮细胞形态发育(如花瓣表皮细胞分化、毛状体形成)及环境响应中发挥核心调控作用。兰科植物具有多样花色、丰富花香和特化花部结构,这些性状对吸引传粉者以... MYB、bHLH和WD40转录因子在高等植物次级代谢途径(如花青素与原花青素代谢)、表皮细胞形态发育(如花瓣表皮细胞分化、毛状体形成)及环境响应中发挥核心调控作用。兰科植物具有多样花色、丰富花香和特化花部结构,这些性状对吸引传粉者以促进繁殖成功至关重要,也是其观赏价值与经济潜力的重要基础。近年来,研究者对兰科植物花色形成及花香合成相关代谢物的分子调控机制研究不断深入。本文系统梳理了MYB、bHLH和WD40参与兰科植物花色与花香形成调控机理的研究进展,重点综述花色素类型与花香味成分的次生代谢途径,MYB-bHLH-WD40复合体调控花色花香代谢的分子机制,为兰科植物花部综合性状的分子机理解析及观赏性状分子改良提供理论支持与方向。 展开更多
关键词 MYB BHLH wd40 兰科植物 花颜色 花气味
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威宁短柱油茶WD40基因家族鉴定及花青素合成相关基因筛选
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作者 徐嘉娟 李芳 +3 位作者 霍达 朱亚艳 黄磊 许杰 《贵州农业科学》 2025年第11期92-102,共11页
[目的]探明威宁短柱油茶WD40基因家族成员的结构功能,为研究WD40基因家族在威宁短柱油茶花青素合成过程中的作用及解析威宁短柱油茶多样化花色呈色机理奠定理论基础。[方法]从威宁短柱油茶转录组中筛选WD40基因家族成员,采用生物信息学... [目的]探明威宁短柱油茶WD40基因家族成员的结构功能,为研究WD40基因家族在威宁短柱油茶花青素合成过程中的作用及解析威宁短柱油茶多样化花色呈色机理奠定理论基础。[方法]从威宁短柱油茶转录组中筛选WD40基因家族成员,采用生物信息学分析WD40基因家族成员编码的蛋白序列,包括理化性质、亚细胞定位及系统发育。[结果]获得92个WD40基因家族成员,各成员编码的氨基酸序列具有共同特征结构域WD40且数量在1~12个,氨基酸序列长度为174~1888个氨基酸,多为不稳定的亲水性蛋白。亚细胞定位主要在细胞核和细胞质中,二级结构以无规则卷曲和延伸链为主。CwWD40蛋白家族成员均可与拟南芥花青素合成调控相关的WD40蛋白划为1个分支。基因CwWD40-24在红花型植株的花蕾、盛花期的花瓣中表达量显著高于白花型植株,在其他组织中的表达量无明显差异。[结论]威宁短柱油茶CwWD40基因在不同花色类型植株花瓣和花蕾中的表达量存在显著差异,在雄蕊、叶片等组织中的表达量无显著差异,推测威宁短柱油茶CwWD40-24基因参与花青素合成调控,与威宁短柱油茶花色多样化性状的形成有关。 展开更多
关键词 油茶 威宁短柱油茶 wd40蛋白 花青素 生物信息学 表达模式
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红花CtWD40转录因子家族基因的生物信息学分析 被引量:8
5
作者 王刚 章正仁 +5 位作者 王一非 洪瑛琦 刘秀明 姚娜 董园园 李海燕 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第14期3432-3440,共9页
WD40转录因子家族是真核生物中广泛存在的基因超家族,与植物生长及发育调控密切相关。并且在以往的研究中发现WD40转录因子参与花色苷的合成,而花色苷是红花类黄酮化合物的重要组成之一。该研究通过生物信息学手段及基因表达分析方法鉴... WD40转录因子家族是真核生物中广泛存在的基因超家族,与植物生长及发育调控密切相关。并且在以往的研究中发现WD40转录因子参与花色苷的合成,而花色苷是红花类黄酮化合物的重要组成之一。该研究通过生物信息学手段及基因表达分析方法鉴定了红花基因组中40个CtWD40家族成员。研究根据拟南芥等植物WD40蛋白序列及系统发育特点将红花CtWD40家族归为7个亚家族,结合保守基序分析揭示每个亚家族成员特定的保守基序与基因结构,发现进化关系邻近的家族成员在保守基序与基因结构上具有一定的相似性。其次,基因启动子顺式作用元件搜索发现CtWD40特定启动子元件,揭示其可能参与的代谢途径。接下来,使用功能富集分析,分析CtWD40蛋白的功能类别和细胞定位,并通过CtWD40蛋白间相互作用,预测其潜在的调控功能。最后,根据qRT-PCR揭示了红花CtWD40亚家族19个成员在红花不同组织及花期中的差异表达。该研究为红花CtWD40基因功能验证及表达分析提供了理论依据。 展开更多
关键词 红花 wd40基因 生物信息分析 表达分析 系统发育
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黑果枸杞WD40编码基因LrAN11的克隆及表达分析 被引量:10
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作者 严莉 陈建伟 +2 位作者 王翠平 乔改霞 李健 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期2103-2112,共10页
WD40蛋白广泛存在于真核生物中,是一类高度保守的蛋白家族,具有广泛的生物化学和细胞生物学功能。为探索黑果枸杞LrAN11的功能,采用同源克隆的方法克隆了黑果枸杞WD40蛋白基因,将其命名为LrAN11,Gen Bank登录号:KY131959。生物信息学分... WD40蛋白广泛存在于真核生物中,是一类高度保守的蛋白家族,具有广泛的生物化学和细胞生物学功能。为探索黑果枸杞LrAN11的功能,采用同源克隆的方法克隆了黑果枸杞WD40蛋白基因,将其命名为LrAN11,Gen Bank登录号:KY131959。生物信息学分析结果表明,该基因的编码区长1 029bp,编码342个氨基酸,蛋白分子量为38.3 kD,理论等电点为4.95,含有5个WD40基序,属于WD40类蛋白基因家族;经预测LrAN11定位于细胞质中,该基因编码的氨基酸序列具有较高的保守性,与马铃薯、番茄、甜椒和美花烟草具有较近的亲缘关系;定量RT-PCR检测表明,LrAN11基因在黑果枸杞各组织中均有表达,其中在青果中的相对表达量最高,在根和紫果中次之,而在黑果中表达最低,表明LrAN11可能参与黑果枸杞花青素的生物合成的调控;在韩国枸杞和0901枸杞品种中表达显著,在其他14个枸杞品种中表达均较低且无显著差异性(P>0.05),说明LrAN11的表达具有品种特异性。此外,随着NaCl处理时间的延长,该基因的表达量先降低后升高,且在2、12和24 h的表达量与对照相比存在显著差异性(P<0.05),说明LrAN11可能参与黑果枸杞对盐胁迫的响应。本研究结果为进一步阐明黑果枸杞LrAN11基因的功能及其在黑果枸杞遗传改良中的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 黑果枸杞 wd40蛋白 基因克隆 表达分析
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牡丹WD40类转录因子基因PsWD40-1和PsWD40-2的分离与序列分析 被引量:5
7
作者 张超 高树林 +2 位作者 杜丹妮 吴凡 董丽 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期85-90,共6页
利用已构建的牡丹‘洛阳红’花瓣转录组数据库,筛选得到2个与植物花青素苷合成WD40蛋白同源性较高的Unigene序列,分别命名为PsWD40-1和PsWD40-2。利用RT-PCR技术,设计特异性引物对PsWD40-1和PsWD40-2最大阅读框(ORF)序列进行扩增,测序... 利用已构建的牡丹‘洛阳红’花瓣转录组数据库,筛选得到2个与植物花青素苷合成WD40蛋白同源性较高的Unigene序列,分别命名为PsWD40-1和PsWD40-2。利用RT-PCR技术,设计特异性引物对PsWD40-1和PsWD40-2最大阅读框(ORF)序列进行扩增,测序结果表明PsWD40-1序列包含一个1 035 bp的ORF,编码一个344 aa的肽链;PsWD40-2序列包含一个1 032 bp的ORF,编码一个343 aa的肽链。牡丹PsWD40-1和PsWD40-2基因推测所编码蛋白序列均具有典型的WD40结构域。PsWD40-1蛋白序列与葡萄VvWDR2相似性为96%,PsWD40-2蛋白序列与葡萄VvWDR1相似性为87%。系统进化树分析发现,PsWD40-1与葡萄VvWDR2、拟南芥AtAN11、陆地棉GhTTG2等序列聚在MP1分支,而PsWD40-2与葡萄VvWDR1、矮牵牛PhAN11、紫苏PfWD40等序列聚在另一分支TTG1/PAC1分支。 展开更多
关键词 牡丹 花青素苷合成 调节基因 wd40蛋白
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花青素合成中的WD40蛋白 被引量:11
8
作者 闵远琴 闫海芳 李玉花 《植物生理学通讯》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期863-870,共8页
本文着重概述了不同植物中花青素合成WD40类转录调控因子的研究进展。
关键词 花青素 wd40蛋白 转录调控
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Cloning and Characterization of WD40 Gene in Cotton 被引量:4
9
作者 谢永芳 蔡应繁 +4 位作者 江怀仲 夏玉先 孙全 李生伟 王伯初 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2008年第4期60-63,共4页
A pair of PCR primers was designed based on the conserved sequences of WD40 family gene of different varieties.The normolization library was screened by PCR methods,the cDNA insert size of positive clones were analyze... A pair of PCR primers was designed based on the conserved sequences of WD40 family gene of different varieties.The normolization library was screened by PCR methods,the cDNA insert size of positive clones were analyzed by PCR method.A full-length cDNA of WD40(GenBank accession number:EU219610)in cotton was obtained from sequencing.This gene is 1 796 bp in length,containing an open reading frame encoding 274 amino acids and a stop codon from 35th to 860th position.The bioinformatics characterization indicates that the protein is encoded by WD40 domain.pI and molecular weight of the protein encoded were predicted to be 4.24 and 29 kDa,respectively.The yielded gene was accondingly named as GDRP1.RT-PCR analysis showed that the expression of GDRP1 varied during the gland formation process.These results will be helpful for our further study on the gland formation of cotton. 展开更多
关键词 COTTON wd40 CHARACTERIZATION
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基于转录组信息的黑果枸杞WD40蛋白质家族分析 被引量:7
10
作者 严莉 陈建伟 +4 位作者 王翠平 仝倩 王晨 乔改霞 李健 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期482-489,共8页
WD40蛋白质为真核生物中一种常见蛋白质,广泛参与植物生长发育的多种生物过程,在蛋白质-蛋白质及蛋白质-DNA的相互作用中发挥重要作用。为系统分析黑果枸杞WD40蛋白质家族成员,本研究以黑果枸杞青色期、转色期和成熟期3个发育时期的果... WD40蛋白质为真核生物中一种常见蛋白质,广泛参与植物生长发育的多种生物过程,在蛋白质-蛋白质及蛋白质-DNA的相互作用中发挥重要作用。为系统分析黑果枸杞WD40蛋白质家族成员,本研究以黑果枸杞青色期、转色期和成熟期3个发育时期的果实转录组测序数据为基础,结合Nr、Nt、Pfam、KOG/COG、Swiss-prot、KEGG及GO 7个数据库和NCBI网站,对黑果枸杞WD40蛋白质编码基因进行筛选注释。结果表明,共得到77个黑果枸杞WD40蛋白质家族成员,黑果枸杞WD40蛋白质结构域组成多样,且在不同物种间高度保守;亚细胞定位预测分析表明,黑果枸杞WD40蛋白质家族成员多位于细胞核及细胞质中;黑果枸杞和拟南芥WD40蛋白质共建的系统进化树可分为五个亚家族; WD40蛋白质家族成员编码基因随果实发育的表达模式表明,黑果枸杞WD40蛋白质家族成员可能参与了其果实花青素的变化调控。本研究结果为枸杞WD40蛋白质的分离及功能研究奠定了一定的理论基础。 展开更多
关键词 黑果枸杞 转录组测序 wd40蛋白 分层聚类分析 表达模式
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WD-repeat蛋白及其在植物中的作用 被引量:4
11
作者 段红英 丁笑生 卢龙斗 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第4期1007-1008,共2页
综述了WD-repeat蛋白的结构域以及WD-repeat蛋白在植物中的作用。
关键词 wd基元 真核生物 wd-repeat蛋白 拟南芥
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拟南芥WD40蛋白 被引量:9
12
作者 杨红玉 张学琴 《植物生理学通讯》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期1025-1033,共9页
拟南芥植物中已经鉴定出十几个WD40蛋白。本文介绍这些蛋白在拟南芥生长发育过程中的功能及其分子机制的研究进展。
关键词 拟南芥 wd40蛋白 功能 作用机制
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紫色番茄SlWD40-like基因克隆与表达分析 被引量:2
13
作者 张园 徐绍忠 +2 位作者 毛自朝 林春 刘正杰 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期586-593,共8页
WD-重复蛋白(WD-repeat protein)是一类含有WD40基序的蛋白,在植物响应非生物逆境胁迫的过程中具有重要调控作用。为揭示紫色番茄中WD40重复蛋白的功能,从富含花青素紫色番茄品种‘砚紫1号’中克隆 SlWD40-like基因,并对该基因在不同组... WD-重复蛋白(WD-repeat protein)是一类含有WD40基序的蛋白,在植物响应非生物逆境胁迫的过程中具有重要调控作用。为揭示紫色番茄中WD40重复蛋白的功能,从富含花青素紫色番茄品种‘砚紫1号’中克隆 SlWD40-like基因,并对该基因在不同组织部位和不同胁迫条件下的表达模式进行分析。结果表明, SlWD40-like基因编码1个含有460个氨基酸的蛋白质。蛋白序列分析显示,SlWD40-like蛋白含有6个WD40基序,是典型的WD40重复蛋白。预测分析发现,该蛋白为亲水性蛋白,其二级结构以无规则卷曲为主;该蛋白序列在物种间具有高度的保守性,系统发生进化树分析表明紫番茄SlWD40-like氨基酸序列与潘那利番茄蛋白亲缘关系最近,其次是胡萝卜。应用qRT-PCR分析 SlWD40-like基因组织特异表达发现,该基因在叶和紫色果实中表达量最高。qRT-PCR分析表明, SlWD40-like基因受到盐胁迫、干旱胁迫脱落酸(ABA)和茉莉酸甲酯(MeJA)诱导表达,推测该基因可能参与紫色番茄逆境胁迫应答。该研究为后续进一步分析紫色番茄 SlWD40-like基因功能奠定了基础。 展开更多
关键词 紫色番茄 wd40重复蛋白 Slwd40-like 克隆 非生物胁迫
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海南龙血树WD40转录因子基因DcWD40-1的克隆和表达分析 被引量:2
14
作者 朱家红 夏栋楠 +4 位作者 王颖 郭冬 李辉亮 梅文莉 彭世清 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期136-142,共7页
海南龙血树是国产血竭的主要基源植物,其血竭主要化学成分为类黄酮化合物。为进一步了解DcWD40-1在类黄酮生物合成中的潜在功能和作用机制,该研究根据海南龙血树转录组数据,利用RT-PCR技术在海南龙血树中克隆了一个WD40基因DcWD40-1,该... 海南龙血树是国产血竭的主要基源植物,其血竭主要化学成分为类黄酮化合物。为进一步了解DcWD40-1在类黄酮生物合成中的潜在功能和作用机制,该研究根据海南龙血树转录组数据,利用RT-PCR技术在海南龙血树中克隆了一个WD40基因DcWD40-1,该基因全长1550 bp,包含一个1353 bp的开放阅读框,编码450个氨基酸,蛋白质分子量50.77 kD,理论等电点5.71。生物信息学分析显示,DcWD40-1属于WD40蛋白家族成员,具有5个保守的WD40结构域,和其他植物WD40蛋白同源性高,保守性强。利用Genome Walking方法分离了1503 bp的DcWD40-1启动子序列,该区域具有典型真核生物启动子结构特征,并含有多个应答激素和胁迫的响应元件。表达分析显示,血竭诱导剂能够诱导Dc WD40-1的表达,DcWD40-1的变化与血竭形成及类黄酮积累正相关。此外,DcWD40-1也能对茉莉酸甲酯、细胞分裂素、油菜素内酯和UV-B处理做出积极响应。 展开更多
关键词 海南龙血树 血竭 类黄酮 wd40转录因子 基因表达
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植物WD-repeat蛋白的研究进展 被引量:3
15
作者 段红英 丁笑生 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2007年第5期11-13,共3页
目前,在原核生物和真核生物中发现了很多WD-repeat蛋白,但是对植物中的WD-repeat蛋白研究的比较少。为此,总结了植物WD-repeat蛋白的相关研究,分析了植物WD-repeat蛋白的调控机理、在植物生长发育过程中的作用及其未来的研究方向。
关键词 wd基元 wd-repeat蛋白 植物
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生物信息学分析亚洲牛带绦虫WD40基因及其蛋白质的结构与功能 被引量:2
16
作者 郎书源 杜武英 +5 位作者 黄江 胡旭初 徐劲 余新炳 包怀恩 廖兴江 《热带医学杂志》 CAS 2008年第7期642-645,663,共5页
目的分析和预测亚洲牛带绦虫WD40基因及其编码蛋白的结构和特性,用于指导其生物学功能的实验研究。方法利用美国国家生物技术信息中心(NCBI,http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)、瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(ExPASY,http://ca.e... 目的分析和预测亚洲牛带绦虫WD40基因及其编码蛋白的结构和特性,用于指导其生物学功能的实验研究。方法利用美国国家生物技术信息中心(NCBI,http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)、瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(ExPASY,http://ca.expasy.org/)和IEDB Analysis Recource提供的各种生物信息学在线分析程序,结合其它生物信息学分析软件包如Pcgene和Vector NTI suite,从亚洲牛带绦虫全长cDNA质粒文库中识别WD40基因及其编码区,分析、预测该基因编码的蛋白质的理化特性、翻译后的修饰位点、功能域、亚细胞定位、拓扑结构、二级结构、三维空间构象等。结果该基因全长1208bp,编码区为81~1056bp,编码402个氨基酸,为全长基因;无跨膜区,具有多个磷酸化位点,蛋白的理化性质稳定,理论分子量为35942.4;没有质体、线粒体定位序列;预测该蛋白表面有三个亲水性强的线性表位和三个B细胞抗原表位。结论应用生物信息方法从亚洲牛带绦虫成虫cDNA文库中识别出了亚洲牛带绦虫WD40基因,并对其所编码的蛋白质的结构与功能进行了预测。 展开更多
关键词 亚洲牛带绦虫 wd40 结构与功能 生物信息学
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血红鸡爪槭叶片WD_(40)转录因子的克隆及序列分析 被引量:2
17
作者 安龙杰 冯大领 史宝胜 《北方园艺》 CAS 北大核心 2012年第12期148-152,共5页
以血鸡爪槭叶片总RNA为模板,采用RT-PCR和RACE-PCR的方法,研究血红鸡爪槭叶片花色素苷的合成机理,成功获得了调控花色素苷表达的转录因子WD_(40)基因。结果表明:WD_(40)基因全长1 104 bp,编码337个氨基酸。通过NCBI中的Blast软件对其进... 以血鸡爪槭叶片总RNA为模板,采用RT-PCR和RACE-PCR的方法,研究血红鸡爪槭叶片花色素苷的合成机理,成功获得了调控花色素苷表达的转录因子WD_(40)基因。结果表明:WD_(40)基因全长1 104 bp,编码337个氨基酸。通过NCBI中的Blast软件对其进行核苷酸序列和氨基酸序列的同源性进行分析,表明所获得的核苷酸序列和推导的氨基酸序列与其它物种的转录因子WD_(40)有较高的同源性,并且C端含有4个WD重复基序,推断该基因为血红鸡爪槭的WD_(40)转录因子。 展开更多
关键词 血红鸡爪槭 wd40转录因子 基因克隆 序列分析
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日本血吸虫WD40信号蛋白的原核表达 被引量:1
18
作者 罗荣 周春景 +2 位作者 石耀军 赵江平 程国锋 《中国动物传染病学报》 CAS 2012年第3期50-54,共5页
本研究克隆了编码日本血吸虫WD40信号蛋白的cDNA,并分析了WD40在日本血吸虫不同发育时期的转录情况。同时,还利用原核表达系统对该蛋白的部分序列进行了表达,并进行了重组蛋白的纯化和多克隆抗体的制备,Western blot分析表明本研究中获... 本研究克隆了编码日本血吸虫WD40信号蛋白的cDNA,并分析了WD40在日本血吸虫不同发育时期的转录情况。同时,还利用原核表达系统对该蛋白的部分序列进行了表达,并进行了重组蛋白的纯化和多克隆抗体的制备,Western blot分析表明本研究中获得多克隆抗体可与重组表达的蛋白和血吸虫全虫蛋白裂解物具有特异性反应。本试验结果为进一步研究WD40信号分子的功能奠定了初步基础。 展开更多
关键词 日本血吸虫 信号分子 wd40 克隆 原核表达
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亚洲牛带绦虫WD40基因表达及免疫学分析
19
作者 马俊英 黄江 +3 位作者 吴璇 胡旭初 余新炳 王虎 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1477-1478,共2页
目的对亚洲牛带绦虫WD40基因进行克隆、表达和免疫学研究。方法将亚洲牛带绦虫成虫WD40基因克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠埃希菌BL-21/DE3中用异丙硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝... 目的对亚洲牛带绦虫WD40基因进行克隆、表达和免疫学研究。方法将亚洲牛带绦虫成虫WD40基因克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠埃希菌BL-21/DE3中用异丙硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定,用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,纯化的重组蛋白用免疫印迹试验(Western Blotting)进行免疫学分析。结果PCR、双酶切及DNA测序结果均表明,pET-28a(+)-WD40重组质粒构建成功。SDS-PAGE结果表明,目的基因在大肠埃希菌BL-21/DE3中获得高效表达。重组蛋白能识别感染了亚洲牛带绦虫的猪血清和患者血清,表明其具有免疫反应性。结论亚洲牛带绦虫WD40基因可在原核表达系统中获得具有免疫学活性的表达,为进一步研究该蛋白的功能提供了基础依据。 展开更多
关键词 亚洲牛带绦虫 wd40基因 基因克隆 原核表达
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基于生物信息学分析微小隐孢子虫含WD40结构域的蛋白功能
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作者 陈川 荆春霞 +5 位作者 张鲍欢 张丽菊 黄伟煌 井立鹏 东方 杨光 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期583-587,共5页
目的对微小隐孢子虫中含WD40结构域的蛋白进行生物信息学分析,分析该蛋白家族的WD40结构并预测其功能,为微小隐孢子虫基因功能的研究提供一定的基础理论。方法通过隐孢子虫基因组数据库收集数据,获得微小隐孢子虫含WD40结构域蛋白家族... 目的对微小隐孢子虫中含WD40结构域的蛋白进行生物信息学分析,分析该蛋白家族的WD40结构并预测其功能,为微小隐孢子虫基因功能的研究提供一定的基础理论。方法通过隐孢子虫基因组数据库收集数据,获得微小隐孢子虫含WD40结构域蛋白家族的序列信息,搜索每个蛋白的CDD结构域并进行NCBI BLAST比对分析,确定为WD40结构域家族蛋白,分析结构域并预测功能。结果在C.parvum Iowa II中共搜索到50个含有WD40结构域的蛋白,其中cgd1_1930、cgd5_740和cgd4_3360含有CAF1C_H4-bd超家族结构,可能参与DNA修复和DNA复制过程;cgd4_260含有ACE1-Sec16-like超家族,可能参与囊泡的形成和物质运输;cgd1_2600含有TAF5_NTD2结构域,可能参与蛋白与蛋白的相互作用。结论在微小隐孢子虫中,WD40蛋白家族不仅可能单独发挥作用,而且还能通过相互辅助、结合发挥其生物效应。 展开更多
关键词 微小隐孢子虫 wd40结构域 生物信息学分析 功能预测
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