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葡萄胚珠发育转录因子VvDDF2互作蛋白的筛选与验证
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作者 刘苗苗 姚锦 +2 位作者 邹福艳 楚言言 王西平 《园艺学报》 北大核心 2025年第11期2846-2860,共15页
为探究葡萄转录因子VvDDF2参与胚珠发育与无核性状形成的调控机制,构建了酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-VvDDF2,验证了VvDDF2具有转录自激活活性,且活性区域位于C端。利用酵母双杂交技术,从葡萄胚珠发育cDNA酵母文库中筛选获得VvDDF2的14个... 为探究葡萄转录因子VvDDF2参与胚珠发育与无核性状形成的调控机制,构建了酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-VvDDF2,验证了VvDDF2具有转录自激活活性,且活性区域位于C端。利用酵母双杂交技术,从葡萄胚珠发育cDNA酵母文库中筛选获得VvDDF2的14个候选互作蛋白,包括脂肪酶、胺氧化酶、胞外囊复合体亚基、核糖体大亚基蛋白等多种酶和蛋白,主要参与细胞分裂生长和形态建成、胚胎发育、植物激素信号转导、育性调控以及各类物质的生物合成和代谢反应,在植物种子发育过程中发挥重要的生物学功能。通过酵母双杂交、双分子荧光互补和分裂荧光素酶互补实验进一步验证了VvDDF2与胞外囊复合体亚基Vv EXO70A1之间存在互作关系。RT-qPCR分析表明,VvEXO70A1在有核及无核葡萄胚珠发育过程中的表达水平存在显著差异。综上,VvDDF2与VvEXO70A1两者可能通过蛋白相互作用形成复合物协同调控葡萄胚珠发育进程。 展开更多
关键词 葡萄 无核机制 胚珠发育 vvddf2 蛋白互作 VvEXO70A1
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