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单氰胺破除葡萄休眠生理生化响应及相关基因克隆与表达分析
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作者 李小琴 陶兴梅 +3 位作者 王凯 谯祖勤 刘朝 张永福 《广西植物》 CSCD 北大核心 2024年第12期2197-2211,共15页
为探究单氰胺破除葡萄休眠的生理生化响应及分子调控机理,该研究以‘水晶’葡萄(Vitis vinifera×V.labrusca‘Shuijing’)为试验材料,测定单氰胺处理‘水晶’葡萄后芽内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性... 为探究单氰胺破除葡萄休眠的生理生化响应及分子调控机理,该研究以‘水晶’葡萄(Vitis vinifera×V.labrusca‘Shuijing’)为试验材料,测定单氰胺处理‘水晶’葡萄后芽内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性,丙二醛(MDA)和H_(2)O_(2)含量及氧自由基产生速率的变化,并通过RT-PCR技术克隆得到其葡萄芽的2个FT(Flowering locus T)基因(VvFT 1和VvFT 2)和1个CBF(C-repeat Binding Factor)基因(VvCBF)的全长cDNA序列,分析其理化性质、系统进化、保守基序及结构域和单氰胺处理后其在葡萄芽中的表达水平差异等。结果表明:(1)生理生化指标分析表明,单氰胺处理后葡萄芽内SOD、POD和CAT活性,MDA和H_(2)O_(2)含量及氧自由基产生速率均明显增加。(2)‘水晶’葡萄VvFT 1和VvFT 2的cDNA全长为525 bp,编码174个氨基酸(aa);VvCBF的cDNA全长为826 bp,编码237 aa。(3)同源性分析表明,‘水晶’葡萄VvFT1与荔枝(Litchi chinensis,LcFT:AEU08960.1)和龙眼(Dimocarpus longan,DlFT2:ALA55998.1)的氨基酸同源性最高,VvFT2与LcFT(AEU08961.1)和DlFT2(AHF27444.1)的氨基酸同源性最高。系统进化分析表明,VvFT1、VvFT2、LcFT(AEU08960.1,AEU08961.1)和DlFT2(ALA55998.1,AHF27444.1)聚为一支,亲缘关系最近;VvCBF与野扁桃(Prunus ledebouriana,PlCBF:AEB69782.1)的氨基酸同源性最高,系统进化分析表明VvCBF和PlCBF聚为一支,亲缘关系最近。(4)qRT-PCR分析表明,单氰胺处理后葡萄芽中VvFT 1和VvFT 2基因的表达量显著增加,而VvCBF基因的表达量显著降低。该研究较为全面地分析了VvFT 1、VvFT 2和VvCBF基因的系统进化和单氰胺处理后葡萄芽内各基因表达模式及生理生化指标变化,为单氰胺破除葡萄休眠的分子和生理机制研究提供了理论参考。 展开更多
关键词 单氰胺 葡萄 休眠 转录因子 vvcbf VvFTs
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