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双组分信号转导系统VraSR的研究进展
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作者 陈菲菲 潘徽文 +3 位作者 陈典言 高梦媛 刘佳缘 蓝乐夫 《中国抗生素杂志》 北大核心 2025年第12期1371-1385,共15页
双组分信号转导系统是细菌感知并响应环境信号的主要方式。金黄色葡萄球菌中目前已经发现16对双组分系统,其中,万古霉素耐药相关的信号转导系统VraSR(vancomycin-resistance associated sensor/regulator)可以帮助其响应靶向细胞壁的抗... 双组分信号转导系统是细菌感知并响应环境信号的主要方式。金黄色葡萄球菌中目前已经发现16对双组分系统,其中,万古霉素耐药相关的信号转导系统VraSR(vancomycin-resistance associated sensor/regulator)可以帮助其响应靶向细胞壁的抗生素所致压力,从而导致其对相关抗生素耐受,进而帮助金黄色葡萄球菌产生更为复杂的耐药机制。VraSR系统在厚壁菌门中高度保守,靶向VraSR系统有望开发新的抗生素增敏剂或抗致病力药物。本文主要综述了近年来VraSR系统在调控功能、调控机理及抑制剂方面的研究进展,以为后续深入阐明该系统调节作用的分子机理和开发针对该系统的潜在干预措施提供参考。 展开更多
关键词 vrasr 双组分系统 转录调控 细胞壁压力调节单元 抗生素耐药
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金黄色葡萄球菌二元调控系统vraSR基因敲除菌株的构建及其致病性研究 被引量:2
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作者 高彩虹 戴媛媛 +1 位作者 常文娇 马筱玲 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第10期1651-1655,共5页
利用基因敲除及基因回补技术构建异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌标准菌株(Mu3)vraSR基因敲除株(ΔvraSR)及基因回补株(CΔvraSR),使用小鼠皮肤脓肿形成模型研究VraSR在金黄色葡萄球菌致病性中的作用。PCR及RT-PCR验证vraSR基因敲除... 利用基因敲除及基因回补技术构建异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌标准菌株(Mu3)vraSR基因敲除株(ΔvraSR)及基因回补株(CΔvraSR),使用小鼠皮肤脓肿形成模型研究VraSR在金黄色葡萄球菌致病性中的作用。PCR及RT-PCR验证vraSR基因敲除株及其回补株构建成功。与野生株Mu3比较,ΔvraSR菌株小鼠皮肤脓肿面积显著减小(P<0.001),皮肤组织荷菌量明显减低(P<0.01),皮肤组织病理损伤减轻。CΔvraSR株可以恢复致病性。VraSR可增加金黄葡萄球菌的致病性。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 vrasr 基因敲除 致病性
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表皮葡萄球菌vraSR-srrAB突变株的构建及生物学表型 被引量:1
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作者 陈晓婷 乾莲 +4 位作者 陈卫国 孙士正 白宗凯 赵纯静 武有聪 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3562-3574,共13页
【背景】形成生物被膜是表皮葡萄球菌的主要致病方式,双组分系统(two-component regulatory system,TCS)VraSR和SrrAB与细菌的生长、生物被膜形成等多种生物学表型密切相关。敲除表皮葡萄球菌SE1457 vraSR后细胞壁变薄,生物被膜形成量降... 【背景】形成生物被膜是表皮葡萄球菌的主要致病方式,双组分系统(two-component regulatory system,TCS)VraSR和SrrAB与细菌的生长、生物被膜形成等多种生物学表型密切相关。敲除表皮葡萄球菌SE1457 vraSR后细胞壁变薄,生物被膜形成量降低,而敲除srrAB后生长进入稳定期的时间延长,生物被膜形成量也降低,且TCS-VraSR和SrrAB均通过ica途径调控表皮葡萄球菌生物被膜的形成。ica操作子是表皮葡萄球菌生物被膜形成的重要调节元件,由icaADBC这4个开放阅读框(openreadingframe,ORF)和1个转录方向相反的icaR组成,IcaR是icaADBC的抑制子。【目的】探索TCS-VraSR和SrrAB协同调控表皮葡萄球菌生长及生物被膜形成中的作用,为防控表皮葡萄球菌引起的持续性感染奠定基础。【方法】构建pKOR1-ΔvraSR重组质粒,经大肠杆菌DC10B修饰后转入ΔsrrAB,通过同源重组在ΔsrrAB突变株的基础上进一步敲除vraSR基因,疑似ΔvraSR-srrAB突变株经PCR、RT-PCR和测序验证。检测ΔvraSR-srrAB突变株的生长、生物被膜形成及药物敏感性。【结果】成功构建表皮葡萄球菌ΔvraSR-srrAB突变株。与表皮葡萄球菌SE1457野生株、ΔvraSR和ΔsrrAB突变株相比,ΔvraSR-srrAB突变株生长更为迟缓,药物敏感性增强,几乎不能形成生物被膜;RT-qPCR显示,ΔvraSR和ΔsrrAB突变株中icaA转录水平较SE1457下调约13%-17%,icaR转录水平上调约5-9倍,而ΔvraSR-srrAB突变株中icaA转录水平较SE1457下调约6%,icaR转录水平上调约14倍。【结论】VraSR-SrrAB可能通过ica途径协同调控表皮葡萄球菌生物被膜形成,对压力应激胁迫作用还需进一步研究。 展开更多
关键词 vrasr SrrAB 双组分信号转导系统 生物被膜 表皮葡萄球菌
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表皮葡萄球菌VraSR生物信息学分析及VraR蛋白的原核表达 被引量:1
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作者 乾莲 陈红玲 +3 位作者 孟媛媛 陈晓婷 孙士正 武有聪 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第10期1158-1162,共5页
目的对表皮葡萄球菌VraSR进行生物信息学分析并原核表达VraR蛋白,为表皮葡萄球菌VraSR系统功能研究奠定基础。方法 PCR扩增表皮葡萄球菌SE1457菌株vraR基因,PCR片段经酶切后连入载体pET28a,构建重组表达质粒pET28a-vraR,并转化至大肠埃... 目的对表皮葡萄球菌VraSR进行生物信息学分析并原核表达VraR蛋白,为表皮葡萄球菌VraSR系统功能研究奠定基础。方法 PCR扩增表皮葡萄球菌SE1457菌株vraR基因,PCR片段经酶切后连入载体pET28a,构建重组表达质粒pET28a-vraR,并转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达。重组蛋白His;-VraR经Western blot鉴定后采用Ni-NTA柱纯化。采用DNAMAN、SMART、Megalign等软件对VraSR系统进行生物信息学分析。结果成功构建重组表达质粒pET28a-vraR,在22℃、0.5 mmol/L IPTG诱导12 h高效表达重组蛋白His;-VraR。分析重组His;-VraR序列,与金黄色葡萄球菌VraS/VraR核苷酸同源性皆为82%,氨基酸同源性分别为92%/94%,氨基酸组成差异主要存在VraS的胞外区和VraR的CheY结构域。结论成功表达并纯化表皮葡萄球菌VraR蛋白,生物信息学分析表皮葡萄球菌VraSR的功能,可能不同于金黄色葡萄球菌。 展开更多
关键词 表皮葡萄球菌 vrasr 生物信息 原核表达
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表皮葡萄球菌ΔvraSR-lrgAB突变株的构建和生物学特性
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作者 尚爽婕 陈卫国 +4 位作者 张晓奎 朱健鹏 白松 陈晓婷 武有聪 《微生物学报》 北大核心 2025年第2期629-643,共15页
【目的】探究VraSR通过CidA-LrgAB系统调控表皮葡萄球菌的生物学功能。【方法】构建重组质粒pKOR1-ΔlrgAB,并将其转化至表皮葡萄球菌SE1457ΔvraSR突变株中。通过同源重组技术,在ΔvraSR突变株上进一步敲除lrgAB基因。利用PCR、RT-PCR... 【目的】探究VraSR通过CidA-LrgAB系统调控表皮葡萄球菌的生物学功能。【方法】构建重组质粒pKOR1-ΔlrgAB,并将其转化至表皮葡萄球菌SE1457ΔvraSR突变株中。通过同源重组技术,在ΔvraSR突变株上进一步敲除lrgAB基因。利用PCR、RT-PCR和测序技术鉴定表皮葡萄球菌ΔvraSR-lrgAB疑似突变株,并检测其生长特性、药物敏感性、自溶能力以及生物被膜形成能力。【结果】成功构建了表皮葡萄球菌ΔvraSR-lrgAB突变株。与表皮葡萄球菌SE1457、ΔvraSR和ΔlrgAB菌株相比,ΔvraSR-lrgAB突变株生长迟缓,特别是在25℃和40℃下尤为明显(P<0.001)。该突变株的药物敏感性增强(P<0.01),自溶能力显著增强(P<0.001),生物被膜形成能力降低(P<0.01)。【结论】VraSR可能部分通过LrgAB调控表皮葡萄球菌的生长、药物敏感性、自溶能力和生物被膜的形成。 展开更多
关键词 vrasr LrgAB 同源重组 表皮葡萄球菌
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葡萄球菌万古霉素耐药相关双组分系统VraSR研究进展 被引量:1
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作者 陈红玲 孟媛媛 +2 位作者 武有聪 白丽 瞿涤 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期150-156,共7页
葡萄球菌万古霉素耐药相关(vancomycin-resistance associated sensor/regulator,VraSR)双组分系统能感应细胞壁的损伤,并将此信号传至胞内,调控下游相关基因的转录,以应对外界环境压力的变化。有研究表明,金黄色葡萄球菌VraSR通过调控... 葡萄球菌万古霉素耐药相关(vancomycin-resistance associated sensor/regulator,VraSR)双组分系统能感应细胞壁的损伤,并将此信号传至胞内,调控下游相关基因的转录,以应对外界环境压力的变化。有研究表明,金黄色葡萄球菌VraSR通过调控一系列与肽聚糖合成相关基因的转录引起耐药性增加。表皮葡萄球菌中也存在类似的双组分系统,而且与金黄色葡萄球菌VraSR具有较高同源性,但是目前尚不清楚两者在耐药性及致病性上有什么异同。本文结合课题组研究工作,简要综述葡萄球菌VraSR双组分系统的调控机制。 展开更多
关键词 双组分系统 vrasr 葡萄球菌
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