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A Vector-based Cellular Automata Model for Simulating Urban Land Use Change 被引量:3
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作者 LU Yi CAO Min ZHANG Lei 《Chinese Geographical Science》 SCIE CSCD 2015年第1期74-84,共11页
Cellular Automata(CA) is widely used for the simulation of land use changes. This study applied a vector-based CA model to simulate land use change in order to minimize or eliminate the scale sensitivity in traditiona... Cellular Automata(CA) is widely used for the simulation of land use changes. This study applied a vector-based CA model to simulate land use change in order to minimize or eliminate the scale sensitivity in traditional raster-based CA model. The cells of vector-based CA model are presented according to the shapes and attributes of geographic entities, and the transition rules of vector-based CA model are improved by taking spatial variables of the study area into consideration. The vector-based CA model is applied to simulate land use changes in downtown of Qidong City, Jiangsu Province, China and its validation is confirmed by the methods of visual assessment and spatial accuracy. The simulation result of vector-based CA model reveals that nearly 75% of newly increased urban cells are located in the northwest and southwest parts of the study area from 2002 to 2007, which is in consistent with real land use map. In addition, the simulation results of the vector-based and raster-based CA models are compared to real land use data and their spatial accuracies are found to be 84.0% and 81.9%, respectively. In conclusion, results from this study indicate that the vector-based CA model is a practical and applicable method for the simulation of urbanization processes. 展开更多
关键词 vector-based Cellular Automata(CA) land use change transition rule spatial accuracy Qidong City
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RNAi抗虫作物中RNA成分免提取一步式RT-qPCR快速检测方法的建立
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作者 安艺婷 高鸿飞 +4 位作者 翟杉杉 姚晓青 杨瑶 蔡万伦 吴刚 《中国油料作物学报》 北大核心 2025年第6期1455-1464,共10页
二化螟Chilo suppressalis是水稻重大农业害虫之一,其寄主种类多,分布广泛且危害严重,防治难度逐年增加。植物介导的RNA干扰技术(Plant-mediated RNA interference,RNAi)是一种新兴的作物保护技术,前期研究以二化螟的一个小的热休克蛋... 二化螟Chilo suppressalis是水稻重大农业害虫之一,其寄主种类多,分布广泛且危害严重,防治难度逐年增加。植物介导的RNA干扰技术(Plant-mediated RNA interference,RNAi)是一种新兴的作物保护技术,前期研究以二化螟的一个小的热休克蛋白基因(Chloroplast Small Heat Shock Protein,CssHsp)作为水稻RNAi靶点创制抗虫RNAi水稻。本研究以RNAi水稻叶片直接作为模板,开发了一种新型免提取一步式RT-qPCR快速检测植物中dsRNA成分的方法。针对CssHsp靶标序列设计了特异性引物和探针,优化了DNA聚合酶和逆转录酶组合、引物探针浓度、反应程序以及叶片取样直径大小。结果显示,优选扩增组合物中酶的组合为RRM014/200U,优选引物探针浓度为0.6/0.3μmol/L,优选叶片取样直径大小为1.5 mm。结合便携式荧光扩增仪,优选扩增程序时间为31 min。该方法从制样到结果鉴定全程分析不超过35 min,能够在田间快速准确、操作简单地鉴定RNA成分,为监测和掌握抗虫RNAi作物在不同生长时期表达目标dsRNA的情况以及对于害虫的防治提供精确的动向选择。 展开更多
关键词 rnai作物 RNA成分 免提取 一步式RT-qPCR扩增
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棉铃虫原肌球蛋白基因HaTm-1的RNAi效应及功能分析
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作者 关若冰 韩锐 +3 位作者 楚冬冬 徐赛博 刘晓光 李祥 《昆虫学报》 北大核心 2025年第9期1193-1202,共10页
【目的】本研究旨在对前期转录组测序鉴定到的棉铃虫Helicoverpa armigera原肌球蛋白基因HaTm-1进行组织表达谱和RNAi效应分析,探究HaTm-1作为鳞翅目(Lepidoptera)害虫广谱性RNA生物农药靶点的可行性和理论依据。【方法】PCR克隆棉铃虫H... 【目的】本研究旨在对前期转录组测序鉴定到的棉铃虫Helicoverpa armigera原肌球蛋白基因HaTm-1进行组织表达谱和RNAi效应分析,探究HaTm-1作为鳞翅目(Lepidoptera)害虫广谱性RNA生物农药靶点的可行性和理论依据。【方法】PCR克隆棉铃虫HaTm-1 cDNA序列并进行生物信息学分析;利用RT-qPCR检测HaTm-1在棉铃虫4龄幼虫不同组织(表皮、脂肪体、中肠、脑、精巢和马氏管)以及2-5龄幼虫表皮中的表达量;通过喷洒dsHaTm-1对棉铃虫和草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda 1龄幼虫HaTm-1进行RNAi,分别检测棉铃虫HaTm-1和草地贪夜蛾SfTm-1的表达量以及幼虫体重和幼虫存活率;对棉铃虫4龄幼虫注射dsHaTm-1,检测幼虫体重、蛹重、相对生长速率、相对代谢速率和取食量。【结果】棉铃虫HaTm-1全长cDNA为855 bp (GenBank登录号:XP021201113.1), HaTm-1与多物种中的同源蛋白都有超90%的氨基酸序列一致性。棉铃虫与草地贪夜蛾的Tm-1汇聚在同一分支上,亲缘关系最近。HaTm-1在棉铃虫4龄幼虫表皮中特异性高表达,且在不同龄期幼虫表皮中均有表达,其中在5龄幼虫表皮中表达量最高。与dsEGFP对照组相比,喷洒dsHaTm-1处理棉铃虫1龄幼虫12和24 h时,HaTm-1表达量分别降低了55.73%和50.85%;168 h时幼虫存活率显著降低,仅为43.33%;处理后72, 120和168 h时幼虫体重分别下降17.67%, 14.65%和18.90%。与dsEGFP对照组相比,喷洒dsHaTm-1处理草地贪夜蛾1龄幼虫12和24 h时SfTm-1表达量分别降低了44.72%和39.65%;144 h时幼虫存活率为60%;72和120 h时幼虫体重分别下降了13.00%和28.11%。与dsEGFP对照组相比,注射dsHaTm-1处理棉铃虫4龄幼虫24 h时HaTm-1表达量显著降低了55.66%,处理后72和120 h幼虫体重分别下降了50.34%和54.91%,蛹重也下降了13.14%,相对生长速率下降14.00%,相对代谢速率下降15.66%,取食量下降14.50%。取食消化过程受到影响进而导致了幼虫的死亡。【结论】干扰HaTm-1表达对棉铃虫的取食消化过程至关重要。本研究证明了原肌球蛋白作为潜在RNA生物农药广谱性害虫防治靶标的可行性,为其实际应用提供参考。 展开更多
关键词 棉铃虫 草地贪夜蛾 原肌球蛋白 rnai 存活率 体重 取食量
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Simulating multiple urban land use changes by integrating transportation accessibility and a vector-based cellular automata:a case study on city of Toronto
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作者 Xiaocong Xu Dachuan Zhang +2 位作者 Xiaoping Liu Jinpei Ou Xinxin Wu 《Geo-Spatial Information Science》 SCIE EI CSCD 2022年第3期439-456,共18页
The accessibility provided by the transportation system plays an essential role in driving urban growth and urban functional land use changes.Conventional studies on land use simulation usually simplified the accessib... The accessibility provided by the transportation system plays an essential role in driving urban growth and urban functional land use changes.Conventional studies on land use simulation usually simplified the accessibility as proximities and adopted the grid-based simulation strategy,leading to the insufficiencies of characterizing spatial geometry of land parcels and simulating subtle land use changes among urban functional types.To overcome these limita-tions,an Accessibility-interacted Vector-based Cellular Automata(A-VCA)model was proposed for the better simulation of realistic land use change among different urban functional types.The accessibility at both local and zonal scales derived from actual travel time data was considered as a key driver of fine-scale urban land use changes and was integrated into the vector-based CA simulation process.The proposed A-VCA model was tested through the simulation of urban land use changes in the City of Toronto,Canada,during 2012-2016.A vector-based CA without considering the driving factor of accessibility(VCA)and a popular grid-based CA model(Future Land Use Simulation,FLUS)were also implemented for compar-isons.The simulation results reveal that the proposed A-VCA model is capable of simulating fine-scale urban land use changes with satisfactory accuracy and good morphological feature(kappa=0.907,figure of merit=0.283,and cumulative producer’s accuracy=72.83%±1.535%).The comparison also shows significant outperformance of the A-VCA model against the VCA and FLUS models,suggesting the effectiveness of the accessibility-interactive mechanism and vector-based simulation strategy.The proposed model provides new tools for a better simula-tion of fine-scale land use changes and can be used in assisting the formulation of urban and transportation planning. 展开更多
关键词 Urban land use change simulation transportation accessibility vector-based cellular automata(VCA)
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Gene silencing in Xenopus laevis by DNA vector-based RNA interference and transgenesis
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作者 Ming Li Baerbel Rohrer 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2006年第1期99-105,共7页
A vector-based RNAi expression system was developed using the Xenopus tropicalis U6 promoter, which transcribes small RNA genes by RNA polymerase Ⅲ. The system was first validated in a Xenopus laevis cell line, desig... A vector-based RNAi expression system was developed using the Xenopus tropicalis U6 promoter, which transcribes small RNA genes by RNA polymerase Ⅲ. The system was first validated in a Xenopus laevis cell line, designing a short hairpin DNA specific for the GFP gene. Co-transfection of the vector-based RNAi and the GFP gene into Xenopus XR1 cells significantly decreased the number of GFP-expressing cells and overall GFP fluorescence. Vector-based RNAi was subsequently validated in GFP transgenic Xenopus embryos. Sperm nuclei from GFP transgenic males and RNAi construct-incubated-sperm nuclei were used for fertilization, respectively. GFP mRNA and protein were reduced by -60% by RNAi in these transgenic embryos compared with the control. This transgene-driven RNAi is specific and stable in inhibiting GFP expression in the Xenopus laevis transgenic line. Gene silencing by vector-based RNAi and Xenopus transgenesis may provide an alternative for 'repression of gene function' studies in vertebrate model systems. 展开更多
关键词 rnai Xenopus U6 promoter TRANSGENIC Xenopus laevis GFP
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昆虫RNAi:二十年回顾与展望
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作者 吕子豪 马海宾 张文庆 《应用昆虫学报》 北大核心 2025年第5期1299-1313,共15页
自21世纪初我国系统开展昆虫RNAi研究以来,该领域取得了显著进展,科研论文的发表数量与质量现均已达到国际先进水平。本文系统回顾了近二十年来RNAi技术对中国昆虫学研究的重大推动作用。借助RNAi技术,我国学者在昆虫基因功能解析方面... 自21世纪初我国系统开展昆虫RNAi研究以来,该领域取得了显著进展,科研论文的发表数量与质量现均已达到国际先进水平。本文系统回顾了近二十年来RNAi技术对中国昆虫学研究的重大推动作用。借助RNAi技术,我国学者在昆虫基因功能解析方面不断深入,揭示了昆虫翅型分化等重要生物过程的分子机制。同时,研究者们逐步探索了RNAi技术在田间应用的潜力,在靶标基因筛选、dsRNA递送技术、RNAi脱靶风险预测及产业化应用等方面积累了大量成果。目前,我国在政策支持与技术储备方面已具备良好基础,加快推进RNA生物农药的研发与应用,将显著提升我国农林产业的科技竞争力,为推动农林业绿色可持续发展提供有力支撑。 展开更多
关键词 昆虫 RNA干扰 基因功能 RNA生物农药 害虫控制 脱靶效应
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Down-regulation of STAT3 expression by vector-based small interfering RNA inhibits pancreatic cancer growth 被引量:6
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作者 Chen Huang Guang Yang +3 位作者 Tao Jiang Jun Cao Ke-Jian Huang Zheng-Jun Qiu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2011年第25期2992-3001,共10页
AIM:To evaluate the effect of RNA interference (RNAi) mediated silence of signal transduction and activation of transcription (STAT)3 on the growth of human pancreatic cancer cells both in vitro and in vivo.METHODS:ST... AIM:To evaluate the effect of RNA interference (RNAi) mediated silence of signal transduction and activation of transcription (STAT)3 on the growth of human pancreatic cancer cells both in vitro and in vivo.METHODS:STAT3 specific shRNA was used to silence the expression of STAT3 in pancreatic cancer cell line SW1990.The anti-growth effects of RNAi against STAT3 were studied in vitro and in experimental cancer xenografts in nude mice.The potential pathways involved in STAT3 signaling were detected using reverse transcription polymerase chain reaction and western blotting.RESULTS:The expression of the STAT3 was inhibited using RNAi in SW1990 cells.RNAi against STAT3 inhibited cell proliferation,induced cell apoptosis and significantly reduced the levels of CyclinD1 and Bcl-xL when compared with parental and control vector-transfected cells.In vivo experiments showed that RNAi against STAT3 inhibited the tumorigenicity of SW1990 cells and significantly suppressed tumor growth when it was directly injected into tumors.CONCLUSION:STAT3 signaling pathway plays an important role in the progression of pancreatic cancer,and silence of STAT3 gene using RNAi technique may be a novel therapeutic option for treatment of pancreatic cancer. 展开更多
关键词 Signal transduction and activation of tran-scription 3 RNA interference Pancreatic cancer GROWTH
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基于RNAi育种的农作物病虫害联合控制研究进展
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作者 郭芮 曹晓伟 郭伟 《中国农学通报》 2025年第21期10-17,共8页
为了构筑高效、可持续的RNAi育种防控体系,本综述归纳了RNAi技术在作物抗病虫中的应用潜力,总结了当前转基因RNAi作物的研发现状,分析了多靶点串联RNAi的设计策略与协同抗性机制;重点阐述了“dsRNA/microRNA稳定表达系统”“复合病虫害... 为了构筑高效、可持续的RNAi育种防控体系,本综述归纳了RNAi技术在作物抗病虫中的应用潜力,总结了当前转基因RNAi作物的研发现状,分析了多靶点串联RNAi的设计策略与协同抗性机制;重点阐述了“dsRNA/microRNA稳定表达系统”“复合病虫害(小麦赤霉病-蚜虫、棉花黄萎病-棉蚜)联合控制模型”“延缓抗性进化的基因精准干预途径”等内容,指出递送效率低、dsRNA环境稳定性差及生产成本高仍是RNAi技术规模化应用的瓶颈。提出通过纳米载体-植物共生递送、串联表达多基因沉默盒、结合生态平衡监测的精准施放技术,有望在5~10年内实现多病虫害协同治理;认为该体系将推动农业向“基因精准干预+生态平衡维护”的可持续模式转型,为全球粮食安全提供关键支撑。 展开更多
关键词 病虫害 rnai育种 基因沉默 串联表达 多重抗性
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RNAi技术在植物寄生线虫防控中的应用研究进展
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作者 于敬文 黄凌 +5 位作者 赵俊丽 仝允正 刘雅琴 陈燕雪 陈新娟 黄文坤 《湖南农业科学》 2025年第5期79-84,共6页
植物寄生线虫寄主范围广,严重危害作物根系,防治十分困难。RNAi技术能够使植物寄生线虫关键靶标基因的表达下调,具有特异性强、安全性高等优点。在植物与线虫互作过程中,RNAi技术已广泛应用于线虫的特定基因功能及防控技术研究。本文从R... 植物寄生线虫寄主范围广,严重危害作物根系,防治十分困难。RNAi技术能够使植物寄生线虫关键靶标基因的表达下调,具有特异性强、安全性高等优点。在植物与线虫互作过程中,RNAi技术已广泛应用于线虫的特定基因功能及防控技术研究。本文从RNAi技术的起源及作用机制、植物寄生线虫RNAi靶基因的选择以及dsRNA防控植物寄生线虫的递送策略几个方面进行综述,并对RNAi在植物寄生线虫防控中的应用前景进行探讨,以期为植物寄生线虫病害的防控提供新思路。 展开更多
关键词 RNA干扰 植物寄生线虫 dsRNA递送策略 线虫与植物互作 综述
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简析OECD《喷洒或外源施用双链RNAi农药的环境风险评估要点》
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作者 简秋 宗伏霖 《农药科学与管理》 2025年第9期1-3,17,共4页
本文重点介绍了经济合作与发展组织(OECD)《喷洒或外源施用双链RNAi农药的环境风险评估要点》(农药系列报告第104号)中有关环境风险识别,以及风险评估中需特别考虑的关注点和风险评估建议。提出了进一步加强研究,多方合作,建立相应的标... 本文重点介绍了经济合作与发展组织(OECD)《喷洒或外源施用双链RNAi农药的环境风险评估要点》(农药系列报告第104号)中有关环境风险识别,以及风险评估中需特别考虑的关注点和风险评估建议。提出了进一步加强研究,多方合作,建立相应的标准化测试和评价方法,以支持这一新兴农药类别的科学监管的建议。 展开更多
关键词 rnai农药 环境风险评估
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RNAi生物农药Ledprona在欧盟进入公众评议
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《中国农药》 2025年第3期94-95,共2页
2025年9月26日,GreenLight Biosciences,Inc.公司开发的RNA干扰(RNAi)新型生物农药Ledprona的活性物质批准申请正式进入欧盟公众评议阶段。这一进展标志着Ledprona在全球范围内的登记进程取得了关键性突破,预示着继在美国成功登记之后,... 2025年9月26日,GreenLight Biosciences,Inc.公司开发的RNA干扰(RNAi)新型生物农药Ledprona的活性物质批准申请正式进入欧盟公众评议阶段。这一进展标志着Ledprona在全球范围内的登记进程取得了关键性突破,预示着继在美国成功登记之后,欧洲市场也即将迎来这一颠覆性绿色植保解决方案。 展开更多
关键词 Ledprona 公众评议 生物农药 rnai GreenLight Biosciences
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RNAi杀菌剂Erysichrona、先正达Cyprometoxazam获ISO临时通用名
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《世界农药》 2025年第10期23-23,共1页
2025年10月13日,美国GreenLight Biosciences公司一款RNAi杀菌剂的新通用名称Erysichrona获ISO临时批准。该产品成分为特异性干扰白粉病的双链RNA(ES43),CAS号为3002952−14−6。2025年10月12日,先正达作物保护股份有限公司的杀菌剂Cyprom... 2025年10月13日,美国GreenLight Biosciences公司一款RNAi杀菌剂的新通用名称Erysichrona获ISO临时批准。该产品成分为特异性干扰白粉病的双链RNA(ES43),CAS号为3002952−14−6。2025年10月12日,先正达作物保护股份有限公司的杀菌剂Cyprometoxazam通用名获ISO临时批准,CAS号为2093177−34−3。 展开更多
关键词 ISO临时通用名 先正达 Erysichrona rnai杀菌剂
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RNAi technologies for insect control in crop protection
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作者 Xue Zhong Xiudao Yu +5 位作者 Jiahui Zhang Jiajing Xu Mengchao Qin Mingxin Cao Frédéric Francis Lanqin Xia 《The Crop Journal》 2025年第4期1009-1021,共13页
RNA interference(RNAi)has been used for agricultural insect pest control based on silencing of targeted insect genes.However,the effectiveness of RNAi and its applications in insect pest control remain challenging.Her... RNA interference(RNAi)has been used for agricultural insect pest control based on silencing of targeted insect genes.However,the effectiveness of RNAi and its applications in insect pest control remain challenging.Here we review factors that may affect the effectiveness of RNAi application,including the variability in RNAi efficacy among different insect species,a limited understanding of double-stranded RNA(dsRNA)uptake and systemic RNAi mechanisms,and the effective delivery of dsRNA in field conditions.Furthermore,we summarize recent progress in RNAi strategies for crop protection,discuss the advantages and disadvantages of RNAi-based insect control,and propose potential strategies to increase the effectiveness of RNAi in insect control. 展开更多
关键词 Crop protection Double-stranded RNA(dsRNA) Insect control RNA interference(rnai)
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RNAi农药开发技术新进展
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《世界农药》 2025年第2期40-40,共1页
基于RNAi的应用旨在通过摄取和处理dsRNA并随后降解目标基因mRNA,抑制目标生物中特定必需基因的表达。虽然关于基于RNAi农药的研究最初仅限于内源性应用(即由作物产生的dsRNA),但近年来,特别是RNAi喷雾等外源应用的技术发展有所增加。由... 基于RNAi的应用旨在通过摄取和处理dsRNA并随后降解目标基因mRNA,抑制目标生物中特定必需基因的表达。虽然关于基于RNAi农药的研究最初仅限于内源性应用(即由作物产生的dsRNA),但近年来,特别是RNAi喷雾等外源应用的技术发展有所增加。由于RNA分子的假设有益特性,如可降解性或目标特异性,RNAi技术在植物保护产品的开发中受到越来越多的关注。 展开更多
关键词 农药开发 可降解性 rnai DSRNA 特异性 RNA分子 内源性
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利用RNAi技术研究果蝇心脏发育基因的功能 被引量:30
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作者 袁婺洲 Bodmer R +3 位作者 朱传炳 王跃群 李永清 吴秀山 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第1期34-38,T001,共6页
RNAi是近两年发展起来的一种阻抑基因表达的新方法。它通过导入一段与内源基因同源的双链RNA序列(dsRNA) ,使内源mRNA降解 ,从而达到阻抑基因表达的目的。目前已在线虫、果蝇、臭虫、真菌及植物等生物中建立RNAi技术 ,用于研究某些特定... RNAi是近两年发展起来的一种阻抑基因表达的新方法。它通过导入一段与内源基因同源的双链RNA序列(dsRNA) ,使内源mRNA降解 ,从而达到阻抑基因表达的目的。目前已在线虫、果蝇、臭虫、真菌及植物等生物中建立RNAi技术 ,用于研究某些特定基因或已知基因在特定发育时期的功能。对于难于获得突变体的基因或生物体 ,RNAi技术尤其有效。虽然果蝇心脏发育基因wingless和tinman在果蝇心脏发育的早期功能已经清楚 ,它们都与果蝇心脏前体细胞的形成有关 ,但它们在果蝇心脏发育的后期功能仍有待进一步研究。实验运用RNAi技术 ,分别将tinman和wingless的dsRNA注入果蝇的早期胚胎 ,得到了这两个基因的dsRNA干扰表型 ,与两个基因的突变体表型非常相似 ,都表现为果蝇心脏前体细胞不能形成或心脏管缺失。尤其是tinman基因的dsRNA ,还引起了肠中胚层缺失和体壁肌肉组织的紊乱 ,而wingless基因的dsRNA却只影响心脏的形成 ,而不影响肠中胚层 ,说明dsRNA干扰具有非常强的特异性 ,因而不失为研究果蝇心脏发育基因功能的有效方法。 展开更多
关键词 rnai DSRNA 果蝇 心脏发育 调控基因 功能
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花椰菜ACC氧化酶基因的克隆及其RNAi对内源基因表达的抑制作用 被引量:25
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作者 陈银华 张俊红 +2 位作者 欧阳波 李汉霞 叶志彪 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第7期764-769,共6页
根据亲缘关系较近的几种作物ACC氧化酶氨基酸序列,设计一对简并引物,从花椰菜(Brassicaoleraceavar.botrytis)基因组中获得长1202bp的候选片段。序列分析表明该基因含有3个外显子(Exon)、2个内含子(Intron),编码区序列长756bp,编码252... 根据亲缘关系较近的几种作物ACC氧化酶氨基酸序列,设计一对简并引物,从花椰菜(Brassicaoleraceavar.botrytis)基因组中获得长1202bp的候选片段。序列分析表明该基因含有3个外显子(Exon)、2个内含子(Intron),编码区序列长756bp,编码252个氨基酸。同源性分析发现其与青花菜(Brassicaoleraceavar.Italica)上已发表mRNA序列同源率为99%(GenBank序列号:X81629),推断该基因为花椰菜ACC氧化酶基因,命名为BoACO(GenBank登录号:AY676466)。在此基础上,用BP克隆的方法构建BoACO的RNA干涉(RNAi)载体pHBACO,对花椰菜进行遗传转化,获得卡那霉素抗性转化植株5棵,分子检测证实外源片段成功导入其中3棵花椰菜基因组中。Northern杂交分析显示:转基因植株内源ACO基因转录的mRNA被降解。ACC氧化酶活性分析进一步表明,外源基因的导入大大地降低了ACC氧化酶活性。 展开更多
关键词 花椰菜 ACC氧化酶基因 rnai 遗传转化
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RNAi技术在植物功能基因组学中的研究进展 被引量:24
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作者 李丽文 朱延明 +2 位作者 李杰 柏锡 才华 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2007年第1期119-124,共6页
文章主要综述了RNA干涉(RNAi)技术在植物功能基因组学中的研究策略及研究现状,包括RNA干涉的作用机制及技术特征,引发植物RNAi机制的转基因RNAi技术以及病毒介导的基因沉默技术。转基因RNAi技术方面,包括载体结构的优化策略、高通量载... 文章主要综述了RNA干涉(RNAi)技术在植物功能基因组学中的研究策略及研究现状,包括RNA干涉的作用机制及技术特征,引发植物RNAi机制的转基因RNAi技术以及病毒介导的基因沉默技术。转基因RNAi技术方面,包括载体结构的优化策略、高通量载体的构建方法以及该技术的优缺点。病毒介导的基因沉默技术方面包括病毒载体及宿主种类,病毒感染方法,试验对照的建立、环境因素的影响以及该技术的优缺点。 展开更多
关键词 rnai 转基因rnai 病毒介导的基因沉默
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RNAi技术在昆虫功能基因研究中的应用进展 被引量:18
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作者 杨中侠 文礼章 +3 位作者 吴青君 王少丽 徐宝云 张友军 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1077-1082,共6页
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指外源或内源的双链RNA(dsRNA)特异性地引起基因表达沉默的现象,它作为一种有效的工具用来产生转录后沉默,从而抑制特定基因的表达,成为基因功能研究的一种新方法,除了在模式昆虫如果蝇Drosophila中广... RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指外源或内源的双链RNA(dsRNA)特异性地引起基因表达沉默的现象,它作为一种有效的工具用来产生转录后沉默,从而抑制特定基因的表达,成为基因功能研究的一种新方法,除了在模式昆虫如果蝇Drosophila中广泛应用之外,也在非模式昆虫中得到成功应用。近年来,RNAi技术在导入方法和基因功能分析方面都取得了飞速发展,且与转基因技术相结合成功应用于害虫防治领域。本文综述了RNAi技术在导入方法、昆虫功能基因组功能分析及害虫防治等领域新近的研究成果,并展望了该技术的应用前景。 展开更多
关键词 RNA干扰(rnai) 双链RNA(dsRNA) 昆虫 基因功能 应用
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飞蝗表皮蛋白Obstructor家族基因的分子特性及基于RNAi的功能分析 被引量:9
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作者 王燕 李大琪 +4 位作者 刘晓健 李涛 马恩波 范仁俊 张建珍 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期73-82,共10页
【目的】获得飞蝗(Locusta migratoria)表皮蛋白Obstructor(Obst)家族基因的c DNA序列,并研究其序列特征和m RNA表达特性,探讨其生物学功能,为害虫防治提供新的分子靶标。【方法】采用生物信息学方法搜索飞蝗转录组数据库获得Obst家族基... 【目的】获得飞蝗(Locusta migratoria)表皮蛋白Obstructor(Obst)家族基因的c DNA序列,并研究其序列特征和m RNA表达特性,探讨其生物学功能,为害虫防治提供新的分子靶标。【方法】采用生物信息学方法搜索飞蝗转录组数据库获得Obst家族基因c DNA片段,并进行BLAST分析得到Obst家族基因的c DNA序列;采用RACE技术扩增该家族基因的3′c DNA序列,拼接后获得全长;Signal P在线软件分析蛋白的信号肽,SMART网站预测其功能域,并使用Mega 5.10软件中Neighbor-Joining方法,与黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)Obst家族基因和赤拟谷盗(Tribolium castaneum)CPAP3家族基因(Obst家族基因的同源基因)氨基酸序列进行聚类分析;采用real-time quantitative PCR(q PCR)方法检测Lm Obst家族基因在5龄若虫不同组织部位和不同龄期体壁的表达情况,绘制表达图谱;采用RNA干扰(RNAi)技术探讨Lm Obsts对飞蝗发育的影响。【结果】在飞蝗转录组数据库中搜索得到8个Obst家族基因的c DNA片段,通过NCBI进行BLAST分析显示与赤拟谷盗CPAP3、黑腹果蝇Obst高度同源,属于Lm Obst家族基因片段,其中5个是全长序列,3个序列缺失3′端;采用RACE技术获得3′末端c DNA序列;将得到的8个Lm Obst家族基因全长序列进行功能域分析,发现具有Obst家族表皮蛋白的特点,即有1个信号肽与3个几丁质结合域Cht BD2;并与黑腹果蝇、赤拟谷盗同源基因进行进化树的构建,根据进化树分析结果,分别命名为Lm Obst-A1、Lm Obst-A2、Lm Obst-B、Lm Obst-C、Lm Obst-D1、Lm Obst-D2、Lm Obst-E1和Lm Obst-E2。q PCR结果显示Lm Obst-E1和Lm Obst-E2在前肠和后肠高特异性表达,Lm Obst-D1在体壁和前肠高表达,其他Lm Obsts在体壁或外胚层内陷形成的前肠和后肠高表达,在胃盲囊、中肠、马氏管和脂肪体中低表达;Lm Obst家族基因在5龄若虫不同天数体壁的表达趋势比较接近,在5龄前期高表达,中期降到最低,蜕皮前又上升到高水平。采用RNAi技术研究基因的生物学功能,5龄若虫第5天分别注射ds Lm Obst,对照组注射等量ds GFP,48 h后检测沉默效率,发现目的基因表达量显著降低;进一步观察发现,注射ds Lm Obst-E1的5龄若虫80%无蜕皮迹象,在5龄若虫状态下死亡,剩余20%若虫蜕皮延迟1—2 d,并且蜕至成虫后,16 h内全部死亡;其余注射双链的试虫普遍发生蜕皮延迟1—3 d的现象,但未发现其他可见的异常表型。【结论】获得8个飞蝗Lm Obst家族基因,所有Obst家族蛋白功能域保守,均有1个信号肽与3个几丁质结合域Cht BD2;Lm Obsts主要参与飞蝗体壁和前、后肠等外胚层发育来源组织器官的形成。Lm Obst-E1是飞蝗发育所必需的,该基因沉默可导致飞蝗死亡,其他7个Lm Obsts的沉默导致飞蝗发育延迟1-3 d,但无致死效应。 展开更多
关键词 飞蝗 表皮蛋白 Obstructor real-time QUANTITATIVE PCR rnai
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油菜基因BnWRI1的克隆及RNAi对种子含油量的影响 被引量:16
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作者 柴国华 白泽涛 +5 位作者 蔡丽 郭学兰 张学江 石磊 董彩华 刘胜毅 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期1512-1518,共7页
【目的】阐明油菜基因BnWRI1对其种子含油量的影响。【方法】采用RT-PCR技术从油菜中克隆到BnWRI1基因编码区内384bp的片段,将该片段正反向插入干扰载体pGΩ4ARi中,构建成RNAi表达载体pGΩ4ARi-WRI1,通过花粉管通道法将其转入油菜受体... 【目的】阐明油菜基因BnWRI1对其种子含油量的影响。【方法】采用RT-PCR技术从油菜中克隆到BnWRI1基因编码区内384bp的片段,将该片段正反向插入干扰载体pGΩ4ARi中,构建成RNAi表达载体pGΩ4ARi-WRI1,通过花粉管通道法将其转入油菜受体品种中双9号中,【结果】获得3棵转基因植株,PCR扩增和基因组Southern杂交证实外源片段已整合在受体油菜基因组中。利用半定量RT-PCR和改进的索氏提取法分别检测转基因T1代植株的BnWRI1基因表达量和种子含油量,结果表明:与非转基因对照相比,转基因植株的BnWRI1基因均受抑制,种子含油量有所降低。【结论】采用RNAi技术可使油菜内源基因BnWRI1沉默,表明油菜基因BnWRI1能有效调控种子含油量。 展开更多
关键词 油菜 含油量 WRI1基因 花粉管通道法 rnai
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