vvIBDV诱导幼鸡免疫细胞凋亡的研究

1

作者 张燕 赵晖 +3 位作者 任前升 毛炳宇 王振光 张红卫 《山东大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期105-107,111,共4页

为研究超强毒传染性法氏囊病病毒 (vvIBDV)感染的致病机理 ,在 3— 6周龄SPF幼鸡法氏囊、脾脏、胸腺细胞培养体系中加入vvIBDV ,以流式细胞术 (FcM)、DNA琼脂糖凝胶电泳技术检测vvIBDV诱导的细胞凋亡 ,结果表明 ,在本实验的体外培养体系... 为研究超强毒传染性法氏囊病病毒 (vvIBDV)感染的致病机理 ,在 3— 6周龄SPF幼鸡法氏囊、脾脏、胸腺细胞培养体系中加入vvIBDV ,以流式细胞术 (FcM)、DNA琼脂糖凝胶电泳技术检测vvIBDV诱导的细胞凋亡 ,结果表明 ,在本实验的体外培养体系中 ,vvIBDV可直接和迅速引起幼鸡法氏囊细胞凋亡 。 展开更多

关键词 vvibdv 免疫细胞 细胞凋亡 细胞培养

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中等毒力IBD疫苗对SPF鸡人工感vvIBDV的免疫保护作用的研究 被引量：1

2

作者 刘文利 高崧 《中国家禽》 北大核心 2004年第13期9-12,共4页

本试验选用在山东省普遍使用的两种中等毒力IBD疫苗,分别在12和19日龄两次免疫SPF鸡,二免后13天人工接种vvIBDV,连续观察14天。结果表明,这两种疫苗均能有效地保护vvIBDV对SPF鸡的感染,而且也进一步证明,这两种疫苗免疫SPF鸡后,均能对SP... 本试验选用在山东省普遍使用的两种中等毒力IBD疫苗,分别在12和19日龄两次免疫SPF鸡,二免后13天人工接种vvIBDV,连续观察14天。结果表明,这两种疫苗均能有效地保护vvIBDV对SPF鸡的感染,而且也进一步证明,这两种疫苗免疫SPF鸡后,均能对SPF鸡法氏囊、胸腺、脾脏等免疫器官产生不同程度的病理性损伤并且这种损伤是可逆性的。 展开更多

关键词 毒力 IBD 疫苗 SPF鸡 免疫保护 接种 传染性法氏囊病

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泰山松花粉多糖对鸡感染vvIBDV诱导的免疫抑制的免疫调理作用 被引量：1

3

作者 王淑娟 黄河 +7 位作者 裴宗飞 胡莉萍 张静静 张浩 王慧宁 马丽莉 王海荣 朱瑞良 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1573-1579,共7页

鸡传染性法氏囊超强毒株（vvIBDV）可引起鸡群高死亡率及严重的免疫抑制，给养禽业带来巨大的经济损失。为了探究泰山松花粉多糖（TPPPS）对鸡传染性法氏囊病（IBD）的免疫调理作用，本研究以IBDVGX8／99超强毒株经鼻腔感染19日龄SPF鸡... 鸡传染性法氏囊超强毒株（vvIBDV）可引起鸡群高死亡率及严重的免疫抑制，给养禽业带来巨大的经济损失。为了探究泰山松花粉多糖（TPPPS）对鸡传染性法氏囊病（IBD）的免疫调理作用，本研究以IBDVGX8／99超强毒株经鼻腔感染19日龄SPF鸡，并分别于感染前、后连续14d口服饲喂TPPPS，同时设置IBD疫苗对照组，病毒对照组和健康对照组，分别对各组试验鸡体质量及法氏囊指数、法氏囊带毒量及抗体变化，以及其他相关免疫学指标进行检测比较。结果显示，连续14d口服TPPPS后，试验鸡体质量及法氏囊抑制程度得到明显改善，法氏囊带毒量减少，法氏囊损伤程度降低，IBD抗体分泌提前、分泌量增加，IL-2、IL-4细胞因子分泌水平提高，T淋巴细胞转化率、CD4＋和CD8＋T细胞数增加，ND抗体水平提高，其中TPPPS预防组的各项检测指标均高于TPPPS治疗组和IBD疫苗组。结果表明，TPPPS对vvlBDV诱导的鸡群免疫抑制具有一定的免疫调理作用，且以在病毒接种前口服TPPPS发挥的免疫调理作用最显著，TPPPS可以作为免疫增强剂用于防控vvIBDV的早期感染，降低其免疫抑制程度，减少经济损失。 展开更多

关键词 泰山松花粉多糖 鸡传染性法氏囊超强毒株 免疫抑制 免疫调理 抗病毒

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传染性法氏囊病超强毒Gx株的致弱研究 被引量：12

4

作者 曾祥伟 王笑梅 +2 位作者 高宏雷 付朝阳 魏萍 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期140-144,共5页

本研究成功将鸡传染性法氏囊病超强毒vvIBDVGx株通过SPF鸡胚的快速培育及鸡胚成纤维细胞传代致弱 ,揭示了vvIBDV从超强毒力向弱毒力转化过程中 ,其主要结构蛋白VP2基因核苷酸及推导的氨基酸序列的变化规律。对不同代次细胞毒进行了序列... 本研究成功将鸡传染性法氏囊病超强毒vvIBDVGx株通过SPF鸡胚的快速培育及鸡胚成纤维细胞传代致弱 ,揭示了vvIBDV从超强毒力向弱毒力转化过程中 ,其主要结构蛋白VP2基因核苷酸及推导的氨基酸序列的变化规律。对不同代次细胞毒进行了序列分析 ,发现细胞毒在第 7代以前 ,VP2基因序列没有改变 ,与欧洲标准超强毒氨基酸同源性达 10 0 % ;细胞毒第 8代 ,有个别核苷酸发生了改变 ,但没有影响氨基酸序列 ;细胞毒第 9代是变化复杂的过渡代 ;10代毒VP2基因与欧洲标准弱毒Cu_1氨基酸序列同源性达 97% ;以后的细胞适应毒至 2 0代 ,其VP2基因序列不再改变。致病性实验表明原代毒对 4周龄SPF鸡致死率为 6 4 % ,细胞毒第 5代的致死率为 6 0 % ,而 2 0代毒对鸡无致病性 ,在鸡体内连续传代 展开更多

关键词 鸡传染性法氏囊病超强毒 传代致弱 VP2 基因 vvibdv Gx株

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三株传染性法氏囊病病毒超强毒株全基因组的克隆与序列分析 被引量：4

5

作者 高立 李凯 +5 位作者 祁小乐 高玉龙 高宏雷 王永强 孔宪刚 王笑梅 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期887-894,共8页

为了获得本实验室3株(HuB-1、HeB10XS02、SD10LY01)传染性法氏囊病病毒(IBDV)分离毒株的全基因组序列,并了解其序列特征,首先测定了这3株毒株对SPF鸡的致死率,然后利用融合PCR技术扩增获得全基因组序列,对其进行遗传进化分析。结果显示,... 为了获得本实验室3株(HuB-1、HeB10XS02、SD10LY01)传染性法氏囊病病毒(IBDV)分离毒株的全基因组序列,并了解其序列特征,首先测定了这3株毒株对SPF鸡的致死率,然后利用融合PCR技术扩增获得全基因组序列,对其进行遗传进化分析。结果显示,3株毒株对SPF鸡的致死率均在60%以上,为IBDV超强毒株(vvIBDV)。遗传进化分析表明,3株分离毒株的A节段均位于超强毒分支。IBDV的B节段分为明显的3个亚群,其中HuB-1、SD10LY01的B节段属于第Ⅲ亚群,HeB10XS02的B节段则属于第Ⅱ亚群。第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ亚群之间在VP1蛋白上存在17个保守氨基酸差异位点,其中第145~147位氨基酸形成独特的'三联体'基序,不同亚群具有不同的基序。本研究结果为更好地了解vvIBDV基因组特征以及致病性分子基础的研究提供了重要理论依据。 展开更多

关键词 传染性法氏囊病病毒超强毒株(vvibdv) 全基因组克隆 序列分析

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超强毒IBDV GX8/99株不同传代毒致病性与VP5基因的关系分析 被引量：3

6

作者 赵昌亮 朱瑞良 +4 位作者 王尊民 王军委 赵庆友 杨世发 左雪梅 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1121-1125,共5页

将vvIBDV GX8/99株原代毒、鸡胚毒、克隆化毒、回传SPF鸡10代次毒及克隆化细胞传20代次毒分别测定ELD50,以相同的ELD50病毒量分别接种SPF鸡,从而观察vvIBDV GX8/99株在传代过程中致病性的变化规律。同时分别提取病毒RNA,通过RT-PCR、PC... 将vvIBDV GX8/99株原代毒、鸡胚毒、克隆化毒、回传SPF鸡10代次毒及克隆化细胞传20代次毒分别测定ELD50,以相同的ELD50病毒量分别接种SPF鸡,从而观察vvIBDV GX8/99株在传代过程中致病性的变化规律。同时分别提取病毒RNA,通过RT-PCR、PCR扩增、基因克隆、核苷酸序列测定和分析,对IBDV GX8/99株的24株不同传代毒的VP5基因进行比较,发现其同源性在94%～100%,并且有15个易发生变异的位点,其中位点bp#2、#8、#52、#145、#232、#272、#310、#364、#385、#409的碱基变异引起了相应氨基酸的改变,而位点bp#18、#285、#331、#354、#397的碱基变异没有引起相应氨基酸的变化。通过比较分析,可以看到在致死率由原代毒的86.7%降为GXE10的43.0%时VP5基因的核苷酸有4个位点发生了变异,致死率由GXE10的43.0%降为GXC23的3.3%时VP5基因的核苷酸有10个位点发生了变异;而将GXC23克隆化后的4株毒株致病性变化不大,并且仅在GXCL1-1的#8位点,GXCL2-1和GXCL4-1的#364位点发生变异;将4株克隆化毒株回鸡传10代后的致死率有一定程度的回升,且有2个位点发生变异;4株克隆化毒株在细胞上连续传20代后其致死率都降为0.0%,并且克隆株5没有发生核苷酸变异而克隆株1,2,4也仅有1个核苷酸位点发生变异。由此推论vvIBDVGX 8/99株的致病性与VP5基因某些氨基酸的变异有一定的关系,更可能与病毒对细胞的亲嗜性关系密切;这为探明vvIBDV毒力改变的分子基础,从而解释自然界中vvIBDV出现和致弱的原因提供了佐证。 展开更多

关键词 vvibdv 细胞适应毒 传代毒 致病性 VP5基因

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传染性法氏囊病病毒超强毒HZ株和XN株VP2基因的克隆和序列比较 被引量：3

7

作者 许信刚 李健强 +4 位作者 王笑梅 童光志 梁荣 张耀相 邢福珊 《动物医学进展》 CSCD 2000年第1期39-42,共4页

根据已发表的 5 2 / 70株 IBDV基因组序列 ,设计并合成了一对特异扩增IBDV VP2基因的引物。以陕西地区分离的IBDV野毒 XN株、HZ株为材料 ,以其基因组为模板利用 RT- PCR技术扩增出了 1 .5kb 的 c DNA 产物 ,将 VP2基因克隆于PUC1 1 9质... 根据已发表的 5 2 / 70株 IBDV基因组序列 ,设计并合成了一对特异扩增IBDV VP2基因的引物。以陕西地区分离的IBDV野毒 XN株、HZ株为材料 ,以其基因组为模板利用 RT- PCR技术扩增出了 1 .5kb 的 c DNA 产物 ,将 VP2基因克隆于PUC1 1 9质粒上 ,得到重组 PUC1 1 9质粒。并对 VP2基因全序列测定、分析和聚类表明 ,XN株和 HZ株与欧洲超强毒株非常相似 ,而与经典强毒株、弱毒株和变异株相差较大。 展开更多

关键词 传染性法氏囊病 序列分析 病毒 基因克隆 vvibdv

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4株IBDV分离株VP2基因的序列分析及原核表达 被引量：2

8

作者 肖跃强 管宇 +4 位作者 李书光 刘吉山 王金良 郭广君 沈志强 《畜牧与兽医》 北大核心 2010年第4期69-73,共5页

RT-PCR扩增获得4株鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)分离株(GT、HN、ZB、BZ)VP2基因并测序,序列分析结果表明:各基因全长均为1356bp,编码452个氨基酸残基;核苷酸、氨基酸序列同源性分别在93.2%～99.9%与93.6%～100%之间;除HN株与经典毒株Cu-1... RT-PCR扩增获得4株鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)分离株(GT、HN、ZB、BZ)VP2基因并测序,序列分析结果表明:各基因全长均为1356bp,编码452个氨基酸残基;核苷酸、氨基酸序列同源性分别在93.2%～99.9%与93.6%～100%之间;除HN株与经典毒株Cu-1核苷酸同源性为95.5%外,其余3株均为95.6%;GT、HN、ZB及BZ株与VariantE株核苷酸同源性均为95.9%;该4株病毒与北欧、非洲、西亚、东南亚、东亚等地区于1998～2008年报道的超强毒株的核苷酸与氨基酸序列同源性均非常高。根据VP2蛋白氨基酸序列特征,HN、ZB、BZ株病毒皆为超强毒株(vvIBDV),GT株除254位氨基酸残基为变异株特征性的S(丝氨酸)外,其余均与超强毒株特征相符。以GT株VP2基因克隆至原核表达载体pBV220,转化大肠杆菌BL21(DE3),低温培养后42℃热诱导,并对诱导产物进行SDS-PAGE、Western-blot分析。结果显示,目的基因获得表达,并与阳性抗体具有良好的反应原性,为以VP2为基础的基因工程亚单位疫苗的研制奠定基础。 展开更多

关键词 vvibdv VP2基因 序列分析 原核表达 Western—blot

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银杏叶多糖对传染性法氏囊超强毒灭活疫苗的免疫调节作用 被引量：8

9

作者 孟秀彦 楚遵锋 +4 位作者 张静静 张浩 王淑娟 魏凯 朱瑞良 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期640-645,共6页

用改进水提醇沉法提取银杏叶多糖。用灭活的传染性法氏囊超强毒(vvIBDV)GX8/99细胞适应株分别制备不同质量浓度(40,20,10 g/L)银杏叶多糖佐剂疫苗、弗氏不完全佐剂疫苗和无佐剂疫苗。360只SPF公雏鸡随机均分为6组,其中5组SPF鸡分别免疫... 用改进水提醇沉法提取银杏叶多糖。用灭活的传染性法氏囊超强毒(vvIBDV)GX8/99细胞适应株分别制备不同质量浓度(40,20,10 g/L)银杏叶多糖佐剂疫苗、弗氏不完全佐剂疫苗和无佐剂疫苗。360只SPF公雏鸡随机均分为6组,其中5组SPF鸡分别免疫上述5种疫苗,另外1组SPF鸡不免疫作为阴性对照。检测IL-2和IFN-γ分泌量、血清抗体、外周血淋巴细胞转化率、外周血CD4^+和CD8^+T淋巴细胞数量等用来评价疫苗的免疫效果。38日龄进行攻毒试验,评价疫苗的保护效果。结果显示,银杏叶多糖佐剂疫苗组各免疫指标均显著高于弗氏佐剂和无佐剂疫苗组(P<0.05);40 g/L银杏叶多糖佐剂疫苗组免疫效果最好,但与20 g/L银杏叶多糖佐剂疫苗组差异不明显,并且2组攻毒保护率无显著性差异。结果表明,银杏叶多糖作为vvIBDV疫苗佐剂具有良好的免疫促进作用,且20 g/L的银杏叶多糖即可达到最佳效果。 展开更多

关键词 银杏叶多糖 vvibdv 免疫佐剂 体液免疫 细胞免疫

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“禽福、亿妙灵”对雏鸡IBD疫苗接种后免疫细胞数量的影响 被引量：3

10

作者 郑世民 贾立军 高雪丽 《动物医学进展》 CSCD 2005年第7期69-73,共5页

分别应用免疫组织化学和组织化学方法对使用免疫增强剂“禽福”和“亿妙灵”的1日龄SPF雏鸡接种IBD疫苗后,对其免疫器官胸腺、法氏囊、脾脏的T细胞和IgG、IgM、IgA抗体生成细胞数量的动态变化进行了较全面系统的研究。结果表明,不论是... 分别应用免疫组织化学和组织化学方法对使用免疫增强剂“禽福”和“亿妙灵”的1日龄SPF雏鸡接种IBD疫苗后,对其免疫器官胸腺、法氏囊、脾脏的T细胞和IgG、IgM、IgA抗体生成细胞数量的动态变化进行了较全面系统的研究。结果表明,不论是使用“禽福”,还是“亿妙灵”的雏鸡,接种IBD疫苗后,其上述各项被检指标均不同程度地高于IBD疫苗单独接种雏鸡。其中,“禽福”IBD疫苗接种雏鸡又较“亿妙灵”IBD疫苗接种雏鸡明显增加。表明免疫增强剂“禽福、亿妙灵”能明显提高雏鸡对IBD疫苗的免疫应答,增强IBD疫苗接种雏鸡对vvIBDV攻击的免疫保护率。 展开更多

关键词 疫苗接种 细胞数量 IBD疫苗 禽 组织化学方法 免疫组织化学 vvibdv 免疫增强 SPF雏鸡 免疫保护率 免疫器官 动态变化 抗体生成 免疫应答 法氏囊 IgG T细胞 IgM IgA 日龄 脾脏

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泰山松花粉多糖对超强毒IBDV克隆化毒株的免疫增强效果

11

作者 李奕芙 赵昌亮 +3 位作者 朱瑞良 黄璇 潘德芹 李兵 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期36-41,共6页

筛选了4株氨基酸序列差异显著的超强毒力传染性法氏囊病毒(vvIBDV)的细胞弱化毒株GXCL1-25、GXCL2-30、GXCL4-25、GXCL5-30制备活疫苗(加入泰山松花粉多糖为免疫佐剂,蜂胶佐剂作为对照),并分别对这些疫苗的免疫效果进行分析。分别测定4... 筛选了4株氨基酸序列差异显著的超强毒力传染性法氏囊病毒(vvIBDV)的细胞弱化毒株GXCL1-25、GXCL2-30、GXCL4-25、GXCL5-30制备活疫苗(加入泰山松花粉多糖为免疫佐剂,蜂胶佐剂作为对照),并分别对这些疫苗的免疫效果进行分析。分别测定4株病毒克隆株的TCID50,并分别制备相应的佐剂活疫苗进行接种试验。对4株病毒克隆分别设置无免疫佐剂疫苗接种组(A1、B1、C1、D1)、松花粉多糖佐剂疫苗接种组(A2、B2、C2、D2)、蜂胶佐剂疫苗接种组(A3、B3、C3、D3)及空白对照组(E)。每组接种SPF鸡50只,于14日龄首免,25日龄二免。分别于一免后0、3、7d和二免后3、10、17、24d采血,用ELISA方法检测血清抗体效价和IL-2分泌水平;28日龄与42日龄测定外周血淋巴细胞比率,28日龄每组剖杀5只测免疫器官指数;35日龄进行攻毒试验。结果显示,各试验组的抗体效价和IL-2水平均在35日龄时(二免后第10天)达到最高峰,但佐剂疫苗组与无佐剂疫苗组相比具有更高的IBDV抗体水平、更长的抗体维持时间长、更轻的法氏囊损伤,并且攻毒保护率均在90%以上;尤其松花粉多糖佐剂疫苗组的抗体效价、IL-2水平和淋巴细胞比率比其他组更高,且松花粉多糖为佐剂的GXCL4-25组免疫效果最好。结果表明,以泰山松花粉多糖为佐剂的IBDV细胞弱化活疫苗表现出良好的免疫原性和保护力。 展开更多

关键词 vvibdv 克隆化毒株 松花粉多糖 SPF鸡 免疫效果

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传染性法氏囊病病毒结构的分子生物学研究进展

12

作者 裴超信 罗薇 柏黎黎 《西南民族大学学报（自然科学版）》 CAS 2005年第S1期78-82,共5页

传染性法氏囊病是一种严重危害雏鸡的免疫抑制性、高度接触性传染病.传染性法氏囊病病毒为双RNA病毒,有A、B两个片断.A片断编码4种蛋白VP2,VP3,VP4和VP5,B片断编码VP1蛋白.其中的VP2和VP3是主要的宿主保护性抗原,在病毒的结构、变异、... 传染性法氏囊病是一种严重危害雏鸡的免疫抑制性、高度接触性传染病.传染性法氏囊病病毒为双RNA病毒,有A、B两个片断.A片断编码4种蛋白VP2,VP3,VP4和VP5,B片断编码VP1蛋白.其中的VP2和VP3是主要的宿主保护性抗原,在病毒的结构、变异、毒力和免疫原性方面有着重要的作用. 展开更多

关键词 传染性法氏囊病病毒 传染性法氏囊病病毒变异株 传染性法氏囊病病毒超强毒株(vvibdv) VP2 VP3

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基于内部核糖体进入位点提高重组NDV表达IBDV VP2基因的研究 被引量：4

13

作者 何金娇 刘雪莹 +6 位作者 吴云舟 郭茉 韩晓辉 尹杰超 安莹 任桂萍 李德山 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期485-489,共5页

为提高重组新城疫病毒(NDV)外源基因表达量,本研究采用内部核糖体进入位点序列(IRES)构建表达鸡传染性法氏囊病病毒超强毒(vvIBDV)H LJ07株V P2双拷贝基因的重组NDV(rClone30-V P2-IRES-V P2),同时构建表达单拷贝V P2基因的重组NDV(rClo... 为提高重组新城疫病毒(NDV)外源基因表达量,本研究采用内部核糖体进入位点序列(IRES)构建表达鸡传染性法氏囊病病毒超强毒(vvIBDV)H LJ07株V P2双拷贝基因的重组NDV(rClone30-V P2-IRES-V P2),同时构建表达单拷贝V P2基因的重组NDV(rClone30-V P2)作为对照。间接免疫荧光试验表明V P2蛋白在感染两种重组病毒的鸡胚成纤维细胞(DF-1)中得到表达。Real-time PCR检测结果表明rClone30-VP2-IRES-V P2中VP2 mRNA转录水平明显高于rClone30-VP2。生长曲线分析表明,两株重组病毒株与亲本NDV LaSota(Clone30)株在细胞培养中可以同样稳定复制。重组病毒株在鸡胚中多次传代之后仍稳定表达VP2蛋白。本研究通过建立NDV的反向遗传操作系统构建了独立表达IBD V双拷贝V P2基因的重组NDV,并证明双拷贝基因的表达水平优于单拷贝基因,为提高重组NDV外源基因的表达量提供了新的思路。 展开更多

关键词 重组新城疫病毒 vvibdv VP2基因 IRES

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浅谈不同免疫程序和方法对IBD疫苗免疫效果的影响

14

作者 朱子洁 《中国动物保健》 2009年第7期63-64,共2页

鸡传染性法氏囊病（Infectious Bursal Disease，IBD）是由传染性法氏囊病病毒（IBDV）引起的一种高度接触性传染病，主要侵害雏鸡和青年鸡的法氏囊等器宫，破坏法氏囊中的B淋巴细胞，导致免疫抑制，使病鸡更易感染其它疾病。80年代末... 鸡传染性法氏囊病（Infectious Bursal Disease，IBD）是由传染性法氏囊病病毒（IBDV）引起的一种高度接触性传染病，主要侵害雏鸡和青年鸡的法氏囊等器宫，破坏法氏囊中的B淋巴细胞，导致免疫抑制，使病鸡更易感染其它疾病。80年代末欧洲、亚洲等国家开始逐渐有超强毒IBDV （vvIBDV）的流行。致使IBD的流行出现发病鸡群的死亡率可达到90％，发病年龄增高的新特点，使IBD成为严重影响养鸡业发展的主要的烈性传染病。 展开更多

关键词 IBD疫苗 免疫效果 免疫程序 鸡传染性法氏囊病 传染性法氏囊病病毒 vvibdv 接触性传染病 发病鸡群

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鸡传染性法氏囊病超强毒致弱株的生物学特性研究 被引量：9

15

作者 王笑梅 王秀荣 +2 位作者 陈冠春 尹训南 邱冬 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第6期436-438,共3页

将vvIBDV国内分离株-G株经SPF鸡胚和鸡胚成纤维细胞连续传代致弱，得到适应细胞的致弱株。暂命名为IBDVGt。其毒价为2.0×108PFU／ml以上，具有较好的抗原性，对鸡无致病性。返祖试验及病理组织学试验证明，致弱株可在鸡体内连续传... 将vvIBDV国内分离株-G株经SPF鸡胚和鸡胚成纤维细胞连续传代致弱，得到适应细胞的致弱株。暂命名为IBDVGt。其毒价为2.0×108PFU／ml以上，具有较好的抗原性，对鸡无致病性。返祖试验及病理组织学试验证明，致弱株可在鸡体内连续传至4代，未有返强现象。 展开更多

关键词 鸡 IBD 致弱 生物学特性

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传染性法氏囊病病毒超强毒GZ株VP2基因的克隆和序列分析 被引量：7

16

作者 王笑梅 许信刚 +2 位作者 宋秀龙 童光志 李健强 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期421-424,共4页

根据已发表的传染性法氏囊病病毒 ( IBDV) 5 2 /70株基因组序列 ,设计并合成了 1对特异扩增 IBDVVP2基因的引物。以 IBDV超强毒 ( vv IBDV) GZ株基因组为模板 ,利用 RT-PCR技术扩增出了 1 .5 kb的c DNA产物 ,将 VP2基因克隆于 p UC1 1 ... 根据已发表的传染性法氏囊病病毒 ( IBDV) 5 2 /70株基因组序列 ,设计并合成了 1对特异扩增 IBDVVP2基因的引物。以 IBDV超强毒 ( vv IBDV) GZ株基因组为模板 ,利用 RT-PCR技术扩增出了 1 .5 kb的c DNA产物 ,将 VP2基因克隆于 p UC1 1 9质粒上 ,得到重组 p UC1 1 9质粒。对 VP2基因全序列进行了测定。序列分析和聚类分析表明 ,GZ株与欧洲超强毒株 UK6 6 1非常相似 ,而与经典强毒株。 展开更多

关键词 传染性氏囊病病毒 超强毒株 VP2 克隆 序列分析

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传染性法氏囊病病毒超强毒株致弱的分子生物学特征 被引量：9

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作者 许信刚 王笑梅 +1 位作者 李健强 童光志 《西北农业学报》 CSCD 2000年第3期12-15,22,共5页

为了探索传染性法氏囊病病毒 ( IBDV)超强毒株致弱的分子特征变化 ,采用 RT-PCR技术 ,从超强毒 ( vv IBDV)及其不同代次细胞传代致弱毒中扩增到编码 VP2蛋白的 c DNA高变区基因 ,并对其序列测定。将 vv IBDV及其致弱毒株 VP2高变区的氨... 为了探索传染性法氏囊病病毒 ( IBDV)超强毒株致弱的分子特征变化 ,采用 RT-PCR技术 ,从超强毒 ( vv IBDV)及其不同代次细胞传代致弱毒中扩增到编码 VP2蛋白的 c DNA高变区基因 ,并对其序列测定。将 vv IBDV及其致弱毒株 VP2高变区的氨基酸与其它血清 I型毒株比较 ,发现 vv IBDV与其致弱毒株在VP2高变区的 2 2 2、2 4 2、2 53、2 56、2 71、2 79、2 84、2 94、2 99和 3 0 0位氨基酸发生了改变 ,而这些氨基酸的变化使亲水区和七肽区发生了改变 。 展开更多

关键词 传染性法氏囊病病毒 超强毒 致弱毒 序列分析

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鸡传染性法氏囊病病毒超强毒上海株SH95基因组B片段的克隆与分子系统进化树分析 被引量：6

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作者 孙建和 陆苹 +1 位作者 蒋静 赵渝 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期138-143,共6页

分离、纯化了鸡传染性法氏囊病病毒超强毒(vvIBDV)上海株(SH95)的病毒核酸dsRNA,应用随机引物将RNA反转录成cDNA,以此为模板一步扩增出全长基因组B片段,将其克隆入pGEM-T载体,并进行序列分析。克隆的B片段全长2827个核苷酸,其编码的氨... 分离、纯化了鸡传染性法氏囊病病毒超强毒(vvIBDV)上海株(SH95)的病毒核酸dsRNA,应用随机引物将RNA反转录成cDNA,以此为模板一步扩增出全长基因组B片段,将其克隆入pGEM-T载体,并进行序列分析。克隆的B片段全长2827个核苷酸,其编码的氨基酸与超强毒株HK46的同源性达98 18%(863/879)。分子系统进化树分析表明,SH95超强毒株与美国变异株E的亲缘关系最近,但与基于基因组A片段的系统进化分析完全不同,表明该毒株在发生过程中基因重配比基因重组发挥了更重要的作用。通过对14株IBDV编码氨基酸序列的分析、比较,推测B片段上11个独特的氨基酸位点可能与毒力相关。 展开更多

关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 基因组 克隆 分子系统进化树 序列分析

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IBD野毒株的培育 被引量：5

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作者 王笑梅 陈冠春 +2 位作者 王秀荣 尹训南 邱冬 《中国畜禽传染病》 CSCD 1998年第5期260-262,共3页

由国内ＩＢＤ高发地区分离到一株ＩＢＤ野毒，使现地鸡群发病率９６％，死亡率６０％以上，为一株超强毒。将该毒株分离，纯化，经鸡胚及鸡胚成纤维细胞传代，得到一株ＩＢＤ超强毒的细胞适应株，毒价高达２．０×１０８ＰＦＵ／ｍ... 由国内ＩＢＤ高发地区分离到一株ＩＢＤ野毒，使现地鸡群发病率９６％，死亡率６０％以上，为一株超强毒。将该毒株分离，纯化，经鸡胚及鸡胚成纤维细胞传代，得到一株ＩＢＤ超强毒的细胞适应株，毒价高达２．０×１０８ＰＦＵ／ｍｌ以上。回归本动物，经免疫原性试验，致病性试验及返祖试验，证明该毒株免疫原性较好而致病力降低。 展开更多

关键词 传染性 法氏囊病 超强毒 培育 鸡 IBD

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IBDV超强毒HZ株VP2基因的克隆和真核表达质粒的构建 被引量：4

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作者 许信刚 李健强 +1 位作者 王笑梅 童光志 《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心 2000年第5期54-60,共7页

利用反转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR) ,扩增克隆传染性法氏囊病病毒超强毒 (vv IBDV) HZ株 VP2基因 ,并对 VP2基因进行全序列测定、序列分析和聚类分析 ,同时将VP2基因与真核表达载体 pc DNA3相连接。结果克隆到 VP2基因全序列长 1 356... 利用反转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR) ,扩增克隆传染性法氏囊病病毒超强毒 (vv IBDV) HZ株 VP2基因 ,并对 VP2基因进行全序列测定、序列分析和聚类分析 ,同时将VP2基因与真核表达载体 pc DNA3相连接。结果克隆到 VP2基因全序列长 1 356bp,分析表明 HZ株与欧洲超强毒株 UK661高度相似 ,同时将 VP2基因正向插入 pc DNA3的 CMV启动子下游 ,得到了 VP2基因的真核表达质粒。为 展开更多

关键词 超强毒株 克隆 序列分析 真核表达质粒 传染性法氏囊病病毒 VP2基因

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