脑胶质瘤是目前临床上最常见的中枢神经系统恶性肿瘤之一,全球发病率约为每年7/10万。在我国胶质瘤的发病率占据颅内肿瘤第一位。临床上胶质瘤的治疗手段主要为手术切除,但是术后复发率高、生存期短,通常只有15~19个月。因此对于胶质瘤...脑胶质瘤是目前临床上最常见的中枢神经系统恶性肿瘤之一,全球发病率约为每年7/10万。在我国胶质瘤的发病率占据颅内肿瘤第一位。临床上胶质瘤的治疗手段主要为手术切除,但是术后复发率高、生存期短,通常只有15~19个月。因此对于胶质瘤寻找有效的治疗靶点,在临床上就显得尤为重要。有研究表明胶质瘤患者脑组织中miR-210水平明显高于正常脑组织,且表达越高患者预后越差。空泡膜蛋白1(vacuole membrane protein 1,VMP1)为大分子跨膜蛋白,研究发现VMP1在蛋白分泌、细胞器形成及多细胞发育过程中起重要作用,另外在人体许多肿瘤组织中如乳腺癌、肾癌、肝癌等均有表达,且在原发与转移性肿瘤中表达不一致,被预测其可能是一个肿瘤相关蛋白,但其在胶质瘤中的机制目前仍未涉及到。故本文简要综述当前miR-210/VMP1信号传导通路在胶质瘤中作用机制的研究进展。展开更多
目的分析沉默泡膜蛋白1(vacuole membrane protein 1,VMP1)与结肠癌细胞对药物敏感性的关系及其机制。方法应用MTT法检测结肠癌细胞的药物敏感性;构建沉默VMP1慢病毒载体,感染SW620细胞沉默其VMP1表达;软琼脂克隆形成实验检测沉默VMP1...目的分析沉默泡膜蛋白1(vacuole membrane protein 1,VMP1)与结肠癌细胞对药物敏感性的关系及其机制。方法应用MTT法检测结肠癌细胞的药物敏感性;构建沉默VMP1慢病毒载体,感染SW620细胞沉默其VMP1表达;软琼脂克隆形成实验检测沉默VMP1后细胞在5-氟尿嘧啶作用下的单克隆形成及增殖能力;Western blot检测耐药基因ABCC1蛋白表达水平。结果SW620细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性要显著低于铂类;沉默VMP1后,SW620细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性显著增加,5-氟尿嘧啶作用下的单细胞克隆形成能力被显著抑制,ABCC1表达水平显著降低。结论抑制VMP1表达可能通过降低耐药基因ABCC1的表达提高其对5-氟尿嘧啶的敏感性。展开更多
文摘为了得到效价高、特异性强、能用于检测内源性VMP1蛋白的抗体,采用RT-PCR法,从L929细胞株中克隆鼠VMP1基因,重组入pCMV5载体,用PCR扩增与其氨基酸132-239区域对应的DNA片断,将该片段连接到原核表达载体pGST parallel中,在大肠杆菌BL21菌株中大量表达,经谷胱甘肽-琼脂糖树脂纯化后,得到高纯度的VMP1抗原.免疫新西兰兔,获得抗VMP1蛋白的兔抗血清,将血清纯化后即得到抗VMP1的多克隆抗体.用W estern b lot分析手段检测了该抗体的特异性及效价.在用该抗体检测外源性和内源性VMP1蛋白的试验中,证实该抗体效价高,特异性强,效果很理想.此方法可用于获得大量廉价的抗VMP1蛋白的高滴度和高特异性的抗体,为进一步研究VMP1在细胞内,尤其是在信号转导通路中的功能和作用奠定了基础.
文摘脑胶质瘤是目前临床上最常见的中枢神经系统恶性肿瘤之一,全球发病率约为每年7/10万。在我国胶质瘤的发病率占据颅内肿瘤第一位。临床上胶质瘤的治疗手段主要为手术切除,但是术后复发率高、生存期短,通常只有15~19个月。因此对于胶质瘤寻找有效的治疗靶点,在临床上就显得尤为重要。有研究表明胶质瘤患者脑组织中miR-210水平明显高于正常脑组织,且表达越高患者预后越差。空泡膜蛋白1(vacuole membrane protein 1,VMP1)为大分子跨膜蛋白,研究发现VMP1在蛋白分泌、细胞器形成及多细胞发育过程中起重要作用,另外在人体许多肿瘤组织中如乳腺癌、肾癌、肝癌等均有表达,且在原发与转移性肿瘤中表达不一致,被预测其可能是一个肿瘤相关蛋白,但其在胶质瘤中的机制目前仍未涉及到。故本文简要综述当前miR-210/VMP1信号传导通路在胶质瘤中作用机制的研究进展。
文摘目的分析沉默泡膜蛋白1(vacuole membrane protein 1,VMP1)与结肠癌细胞对药物敏感性的关系及其机制。方法应用MTT法检测结肠癌细胞的药物敏感性;构建沉默VMP1慢病毒载体,感染SW620细胞沉默其VMP1表达;软琼脂克隆形成实验检测沉默VMP1后细胞在5-氟尿嘧啶作用下的单克隆形成及增殖能力;Western blot检测耐药基因ABCC1蛋白表达水平。结果SW620细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性要显著低于铂类;沉默VMP1后,SW620细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性显著增加,5-氟尿嘧啶作用下的单细胞克隆形成能力被显著抑制,ABCC1表达水平显著降低。结论抑制VMP1表达可能通过降低耐药基因ABCC1的表达提高其对5-氟尿嘧啶的敏感性。
