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大黄素通过调控miR-29a-5p/VEGFB介导的细胞凋亡抑制多柔比星诱导的心脏毒性 被引量：4
1
作者 张肇锋 汤若晗 张良 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2023年第6期2025-2035,共11页
目的研究大黄素(Emodin)对抗多柔比星(Doxorubicin,DOX)诱导的心脏毒性的作用和可能的机制。方法使用低、中、高剂量(5、15、25μmol·L^(-1))的大黄素预孵育H9C2细胞8 h,然后使用2.5μmol·L^(-1) DOX处理心肌细胞16 h建立心... 目的研究大黄素(Emodin)对抗多柔比星(Doxorubicin,DOX)诱导的心脏毒性的作用和可能的机制。方法使用低、中、高剂量(5、15、25μmol·L^(-1))的大黄素预孵育H9C2细胞8 h,然后使用2.5μmol·L^(-1) DOX处理心肌细胞16 h建立心脏毒性损伤模型。采用MTT法检测细胞存活率;试剂盒检测H9C2细胞中心肌肌钙蛋白(cTnT)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平以及Caspase-3和Caspase-9活性;使用TUNEL法检测H9C2细胞凋亡水平;采用RT-qPCR法检测miR-29a-5p和血管内皮生长因子B(Vascular endothelial growth factor-B,VEGFB)表达量;Western blot检测VEGFB蛋白及其他凋亡相关因子表达水平;在转染miR-29a-5p模拟物和抑制剂后,RT-qPCR和Western blot法检测VEGFB对miR-29a-5p的靶向性;H9C2细胞转染miR-29a-5p模拟物,在大黄素15μmol·L^(-1)剂量下,MTT法检测H9C2细胞活力、RT-qPCR和Western Blot法检测VEGFB表达水平。结果与DOX组相比,大黄素低、中、高剂量组均显著提高了H9C2细胞活力(P<0.05,P<0.01),降低了cTnT、LDH、CK水平(P<0.05,P<0.01);RT-qPCR检测结果显示miR-29a-5p表达水平显著降低,VEGFB表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01);细胞内ROS、MDA水平显著降低,GSH和GSH-Px水平显著升高(P<0.05,P<0.01);TUNEL阳性细胞显著减少,Caspase-3和Caspase-9活性显著降低,Western blot结果显示VEGFB表达水平显著升高,凋亡相关因子Bax表达水平显著降低、Bcl-2和Bcl-xl表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01)。在转染miR-29a-5p模拟物和抑制剂后,VEGFB表达水平分别降低和升高(P<0.05,P<0.01)。转染miR-29a-5p模拟物同时给予H9C2细胞大黄素15μmol·L^(-1)治疗后,DOX诱导的H9C2细胞活力明显降低的现象被逆转,并且VEGFB表达水平明显降低的现象也被逆转(P<0.05,P<0.01)。结论大黄素通过调节miR-29a-5p/VEGFB介导的心肌细胞凋亡显著降低了DOX诱导的心脏毒性。 展开更多
关键词 大黄素 多柔比星 H9C2细胞 凋亡 miR-29a-5p vegfb
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hsa-miR-374a-3p与VEGFB在结直肠癌中的相关性和作用
2
作者 朱亚雯 达静 +2 位作者 徐凤霞 姜树中 陆翠华 《解剖科学进展》 CAS 2023年第3期295-298,共4页
目的 探讨hsa-miR-374a-3p与VEGFB在结直肠癌中的相关性和作用。方法 TCGA数据集分析VEGFB在结直肠癌中的表达和对生存曲线的影响;免疫组织化学方法检测59例结直肠癌组织中VEGFB蛋白的表达;ELISA方法检测结直肠正常细胞和结直肠癌细胞中... 目的 探讨hsa-miR-374a-3p与VEGFB在结直肠癌中的相关性和作用。方法 TCGA数据集分析VEGFB在结直肠癌中的表达和对生存曲线的影响;免疫组织化学方法检测59例结直肠癌组织中VEGFB蛋白的表达;ELISA方法检测结直肠正常细胞和结直肠癌细胞中VEGFB的表达。重组人VEGFB蛋白或VEGFB抗体处理后,MTT法检测细胞活力;膜联蛋白V-PE和7-氨基放线菌素D(7-AAD)染色法检测细胞凋亡水平;FASAria细胞分选仪检测细胞周期。miRNA测序检测细胞中miRNA总体表达水平;实时荧光定量PCR检测miRNA-374a-3p与VEGFB mRNA的表达水平;荧光素酶报告实验验证miRNA-374a-3p与VEGFB-3′-UTR的靶向关系。结果 VEGFB在结直肠癌组织中的mRNA和蛋白表达水平显著高于正常组织。VEGFB高表达患者的中位生存期明显低于低表达患者。与结直肠正常细胞相比,结直肠癌细胞VEGFB表达水平明显升高。VEGFB蛋白处理后,结直肠正常细胞NCM460的细胞活力水平上升、细胞凋亡水平下降。结直肠癌组织中miR-374a-3p与VEGFB的表达水平存在负相关。miR-374a-3p靶向VEGFB mRNA的3′端非编码区。敲低miR-374a-3p后,细胞中VEGFB的mRNA和蛋白表达水平均上升,细胞活力上升,细胞凋亡减少。结论 miR-374a-3p与VEGFB的表达水平在结直肠癌中存在负相关,VEGFB/miR-374a-3p轴调控结直肠癌细胞的增殖与凋亡。 展开更多
关键词 miR-374a-3p vegfb 结直肠癌 凋亡 细胞活力
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跑台运动对腹主动脉缩窄诱导的心衰大鼠骨骼肌凋亡和VEGFB及其受体表达的影响 被引量：4
3
作者 李灵杰 张靓 +4 位作者 陈雪飞 李世田 张玉寒 任静 余玥 《中国体育科技》 CSSCI 北大核心 2022年第5期84-93,104,共11页
目的:观察跑台运动对腹主动脉缩窄(abdominal aortic constriction,AAC)诱导的心衰大鼠骨骼肌凋亡和血管内皮生长因子B(vascular endothelial growth factor B,VEGFB)及其受体表达的影响及机制。方法:210 g SD雄性大鼠随机分为对照组和... 目的:观察跑台运动对腹主动脉缩窄(abdominal aortic constriction,AAC)诱导的心衰大鼠骨骼肌凋亡和血管内皮生长因子B(vascular endothelial growth factor B,VEGFB)及其受体表达的影响及机制。方法:210 g SD雄性大鼠随机分为对照组和AAC手术组,手术组在术后四周随机分为AAC组和AAC+E组。AAC+E组大鼠进行跑台训练,持续4周,每周5次,每次40 min,跑速12 m/min。采用超声心动方法检测大鼠心脏功能,H.E.染色方法观察心肌、腓肠肌和比目鱼肌结构变化,TUNEL荧光染色法观察腓肠肌细胞凋亡变化,免疫组化法观察腓肠肌VEGFB及其受体血管内皮生长因子受体1(vascular endothelial growth factor receptor 1,VEGFR1)和神经纤毛蛋白1(neuropilin-1,NRP1)的蛋白表达水平,实时定量PCR法(real-time PCR,RT-PCR)分别测定腓肠肌和比目鱼肌VEGFB、VEGFR1、NRP1、肌肉指盒因子1(muscle ring finger-1,MuRF1)、肌肉萎缩F因子(muscle atrophy F box,MAFbx)、肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)、B细胞淋巴瘤2(B-cell lymphoma 2,Bcl2)、Bcl2相关蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)和caspase3的信使RNA(messenger RNA,mRNA)表达,RT-PCR检测心肌心钠肽(atrial natriuretic peptide,ANP)和脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)mRNA的表达。结果:1)与对照组相比,AAC大鼠心脏左心室质量显著增大(P<0.05),左心室舒张末期前壁厚度(left ventricular diastolic anterior wall thickness,LVAW d)显著增大(P<0.05),左心室舒张末期内径(left ventricular interval diameter at end-diastole,LVID d)显著增大(P<0.01),左心室收缩末期内径(left ventricular interval diameter at end-systole,LVID s)显著增大(P<0.001),左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)显著降低(P<0.001),左心室缩短分数(left ventricular fraction shortening,LVFS)显著降低(P<0.01),ANP(P<0.001)和BNP(P<0.001)mRNA表达显著升高;与AAC组相比,AAC+E组大鼠心脏左室质量显著降低(P<0.05),LVAWd显著降低(P<0.05),左心室舒张末期后壁厚度(left ventricular diastolic posterior wall thickness,LVPW d)显著降低(P<0.05),LVID d显著降低(P<0.05),LVID s显著降低(P<0.05),心肌ANP(P<0.01)和BNP(P<0.01)mRNA表达显著降低。2)与对照组相比,AAC大鼠比目鱼肌质量显著降低(P<0.05),萎缩分子标志MuRF1(P<0.001)、MAFbx(P<0.05)、MSTN(P<0.001)的mRNA表达显著增加;与AAC组相比,AAC+E组比目鱼肌质量显著增加(P<0.05),MuRF1(P<0.001)、MAFbx(P<0.05)、MSTN(P<0.001)的mRNA表达显著降低。与对照组相比,AAC大鼠腓肠肌质量显著降低(P<0.05),MuRF1(P<0.001)和MSTN(P<0.05)的mRNA表达显著增加;与AAC组相比,AAC+E组大鼠腓肠肌质量显著增加(P<0.05),MuRF1 mRNA表达显著降低(P<0.01),MSTN表达显著降低(P<0.05)。3)与对照组相比,腓肠肌Bax(P<0.001)、caspase3(P<0.01)mRNA表达显著增加,Bax/Bcl2比值显著增大(P<0.001),TUNEL染色凋亡细胞增多;与AAC组相比,AAC+E组腓肠肌Bax(P<0.05)、caspase3(P<0.01)mRNA表达显著降低,显著降低Bax/Bcl2的比值(P<0.01)。4)与对照组相比,AAC大鼠腓肠肌VEGFB(P<0.01)和比目鱼肌VEGFB mRNA(P<0.01)表达显著下降,与AAC组相比,AAC+E大鼠腓肠肌VEGFB(P<0.001)和比目鱼肌VEGFB(P<0.001)mRNA显著上调,腓肠肌VEGFB蛋白表达显著上调;与AAC组相比,AAC+E组大鼠腓肠肌VEGFB受体VEGFR1(P<0.01)和比目鱼肌VEGFR1 mRNA(P<0.01)的表达显著上调,腓肠肌VEGFR1蛋白的表达显著上调,NRP1的mRNA表达和蛋白水平在3组间差异不具有显著性。结论:跑台运动改善AAC诱导的心衰大鼠心脏结构重塑,但对射血分数作用不明显;跑台运动明显抑制心衰大鼠骨骼肌萎缩和凋亡,显著上调腓肠肌VEGFB及其受体VEGFR1的mRNA和蛋白表达,提示,VEGFB及其受体VEGFR1可能参与了运动抑制心衰时骨骼肌萎缩和凋亡的过程。 展开更多
关键词 跑台运动 血管内皮生长因子B 骨骼肌 凋亡 心衰
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VEGFB基因敲除对动脉粥样硬化的作用研究
4
作者 王珍珍 许艳薇 +3 位作者 杨帅 童凌琳 陈阳 陈仁金 《徐州医科大学学报》 CAS 2023年第11期795-799,共5页
目的为探究血管内皮生长因子B(VEGFB)基因在动脉粥样硬化中的作用,构建ApoE-/-/VEGFB-/-双敲小鼠模型进行研究。方法实验共分为4组:高脂饮食ApoE-/-/VEGFB-/-组(WD-ApoE-/-/VEGFB-/-)、普通饮食ApoE-/-/VEGFB-/-组(Chow-ApoE-/-/VEGFB-... 目的为探究血管内皮生长因子B(VEGFB)基因在动脉粥样硬化中的作用,构建ApoE-/-/VEGFB-/-双敲小鼠模型进行研究。方法实验共分为4组:高脂饮食ApoE-/-/VEGFB-/-组(WD-ApoE-/-/VEGFB-/-)、普通饮食ApoE-/-/VEGFB-/-组(Chow-ApoE-/-/VEGFB-/-)、高脂饮食ApoE-/-组(WD-ApoE-/-)和普通饮食ApoE-/-组(Chow-ApoE-/-)。每周测定小鼠体重和血脂变化,对主动脉进行油红O染色,取心脏进行冰冻切片油红O及H-E染色,分析小鼠主动脉斑块沉积变化。结果WD-ApoE-/-/VEGFB-/-组体重、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白显著高于WD-ApoE-/-组;主动脉大体油红O染色结果显示:相较于ApoE-/-小鼠,ApoE-/-/VEGFB-/-小鼠主动脉脂质斑块面积显著增加。冰冻切片油红O染色结果显示:相较于ApoE-/-小鼠,ApoE-/-/VEGFB-/-小鼠主动脉根部脂质斑块面积显著增加。冰冻切片H-E染色结果显示:相较于ApoE-/-小鼠,ApoE-/-/VEGFB-/-小鼠主动脉根部斑块坏死面积显著增加。结论VEGFB-/-可以通过增加主动脉脂质斑块沉积,增加斑块坏死面积,促进动脉粥样硬化的进展。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子B 基因敲除 动脉粥样硬化 APOE-/-小鼠 油红O染色
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跑台运动对高脂饮食喂养的肥胖小鼠比目鱼肌脂质沉积和血管内皮生长因子B表达的影响 被引量：4
5
作者 张靓 马谨 +1 位作者 高海宁 李灵杰 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期773-778,共6页
目的:观察跑台运动对高脂饮食诱导的肥胖小鼠骨骼肌脂质沉积和血管内皮生长因子B(VEGFB)及其受体表达的影响。方法:32只5周龄健康雄性C57BL/6小鼠,随机分成对照组(n=8)和高脂喂养组(n=24),分别进行普通饲料和高脂饲料喂养,8周后筛选肥... 目的:观察跑台运动对高脂饮食诱导的肥胖小鼠骨骼肌脂质沉积和血管内皮生长因子B(VEGFB)及其受体表达的影响。方法:32只5周龄健康雄性C57BL/6小鼠,随机分成对照组(n=8)和高脂喂养组(n=24),分别进行普通饲料和高脂饲料喂养,8周后筛选肥胖小鼠16只,随机分为高脂安静组和高脂运动组,每组各8只。高脂运动组跑台训练方案为:跑速25 m/min,每次60 min,每周5次,持续8周,对照组和高脂安静组不进行运动。小鼠处死前测定体重,小鼠比目鱼肌油红O染色观察脂质沉积,免疫组化法观察比目鱼肌血管内皮生长因子受体-1(VEGFR1)和辅受体Neuropilin-1(NRP1)的表达水平,Real-time PCR方法测定比目鱼肌VEGFB和受体VEGFR1、NRP1的mRNA表达,以及VEGFB上游调节因子PGC-1αmRNA表达。结果:与对照组相比,高脂饮食喂养小鼠体重显著增加(P<0.01),比目鱼肌中脂质沉积增加,VEGFB、VEGFR1、NRP1和PGC-1αmRNA表达无显著变化。与高脂安静组小鼠相比,高脂运动组小鼠体重显著降低(P<0.01),比目鱼肌中脂质沉积显著减少,VEGFR1 mRNA表达显著上升(P<0.05),但VEGFB、NRP1和PGC-1αmRNA表达无显著变化。结论:跑台运动对肥胖小鼠比目鱼肌VEG-FB的表达无显著作用,但显著上调其受体VEGFR1的表达,提示运动减轻骨骼肌脂质沉积的作用可能与运动增强比目鱼肌VEGFB/VEGFR1作用相关。 展开更多
关键词 跑台运动 骨骼肌脂质沉积 vegfb 肥胖 比目鱼肌
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