期刊文献+
共找到1,909篇文章
< 1 2 96 >
每页显示 20 50 100
Seaweeds as Biomonitoring System for Heavy Metal (HM) Accumulation and Contamination of Our Oceans
1
作者 Vincent van Ginneken Evert de Vries 《American Journal of Plant Sciences》 2018年第7期1514-1530,共17页
This research manuscript reports the heavy metal accumulation in four marine seaweeds sp. 1)?Caulerpa sertlatioides (Cuba);2) Caulerpa cf. brachypus;(Bali, Indonesia);3) Undaria pinnatifida (West-Donegal, Ireland);4) ... This research manuscript reports the heavy metal accumulation in four marine seaweeds sp. 1)?Caulerpa sertlatioides (Cuba);2) Caulerpa cf. brachypus;(Bali, Indonesia);3) Undaria pinnatifida (West-Donegal, Ireland);4) Ulva lactuca (Easters-Scheldt, the Netherlands). Mechanical pressure at 10 bar of fresh seaweed fronds casu quo biomass in the laboratory delivered seaweed moisture which was analyzed by Inductively Coupled Plasma Spectroscopy (ICP)-techniques for heavy-metals = [HM], (Al, As, Cd, Co, Cr, Cu, Fe, Mo, Ni, Pb & Zn). Three important observations were made: 1) The [HM] in the seaweed moisture is higher than in the surrounding seawater which directs to mechanism(s) of bio-accumulation;2) The accumulation factor [AF] is varying per metallic-cation with an overall trend for our four seaweeds and sampling locations for [HM] are: As & Co & Cu: 5000 - 10,000 μg/l;Ni & Zn: 3000 - 5000 μg/l;Cd: 2000 - 3000 μg/l;Cr: 1000 - 2000 μg/l;Al: 200 - 1000 μg/l;Mo & Pb & Fe: 0 - 200 μg/l range. 3) Seaweed moisture detected that [HM]: Pb & Zn & Fe—which all three could not be detected in the seawater—supports the view that seaweeds have a preference in their bio-accumulation mechanism for these three HM. Major conclusion is in general that “overall” for the macro-elements Ca, Fe, K, Mg, Mn, Na, P & S in the moisture of the four seaweed species the concentration is lower in the seaweed species, or equals the concentration, in comparison to the surrounding sea water. For the HM (Al, As, Cd, Co, Cr, Cu, Mo, Ni, Pb & Zn) the opposite is the case species and is the concentration “overall” higher in the seaweed species in comparison to the surrounding sea water. Further topics addressed include strategies of irrigation of the Sahara desert with the moisture out of seaweeds under conditions of low anthropogenic influences. 展开更多
关键词 Seaweeds Heavy Metal ACCUMulATION ulva LACTUCA CAulERPA sertlatioides CAulERPA cf. brachypus & UNDARIA PINNATIFIDA Inductively Coupled Plasma Spectroscopy (ICP)-Techniques Al As Cd Co Cr Cu Fe Mo Ni Pb & Zn BIO-ACCUMulATION Biomonitoring Upper Tolerance Nutrient Intake Levels (uls) Irrigation Water
暂未订购
稳定表达UL54蛋白的PK-15细胞株对UL54基因缺失重组伪狂犬病病毒复制效率的影响
2
作者 李明智 吴红霞 +1 位作者 王异民 孙元 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第6期1117-1125,共9页
UL54蛋白是伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)的非结构蛋白。电镜观察结果显示,多数UL54基因缺失的重组PRV(rPRV-ΔUL54)的病毒粒子仅有核衣壳,缺少完整的囊膜结构。病毒粒子结构的不完整导致病毒的感染效率显著降低,无法用于对UL5... UL54蛋白是伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)的非结构蛋白。电镜观察结果显示,多数UL54基因缺失的重组PRV(rPRV-ΔUL54)的病毒粒子仅有核衣壳,缺少完整的囊膜结构。病毒粒子结构的不完整导致病毒的感染效率显著降低,无法用于对UL54的基因功能及作用机制的研究。本研究将UL54基因克隆至慢病毒载体pLVX-IRES-Puro,经慢病毒转导后,PK-15细胞表达UL54蛋白。通过PCR、间接免疫荧光试验及蛋白质免疫印迹法进行鉴定,成功构建了过表达UL54蛋白的细胞株(PK-15-UL54)。在PK-15-UL54细胞株中接种UL54基因缺失病毒(rPRV-ΔUL54-Re)后,检测其复制情况。电子显微镜观察显示,rPRV-ΔUL54-Re病毒具有完整的病毒粒子结构;荧光显微镜观察结果表明,rPRV-ΔUL54-Re病毒能够正常感染细胞并进行复制;定量PCR检测结果表明,rPRV-ΔUL54-Re病毒的复制效率有所提高。因此,PK-15-UL54细胞株是提高UL54基因缺失重组PRV复制效率的重要工具,可在探究UL54基因调控PRV复制机制的研究中发挥重要作用。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 慢病毒载体 ul54基因 PK-15细胞
原文传递
人类巨细胞病毒UL-136通过circHIPK3调控胃癌上皮-间质转化与化疗耐药
3
作者 郭存果 陈丹 +2 位作者 施晓英 钟定福 施莉 《温州医科大学学报》 2025年第5期361-369,共9页
目的:探讨人类巨细胞病毒(HCMV)组分UL-136通过circHIPK3影响胃癌(GC)细胞的生物学特性的机制,及其对化疗药物顺铂(DDP)耐药性的影响。方法:将稳定表达UL-136的MNK-45和SGC-7901 GC细胞系分别转染circHIPK3 siRNA或miR-124模拟物。采用T... 目的:探讨人类巨细胞病毒(HCMV)组分UL-136通过circHIPK3影响胃癌(GC)细胞的生物学特性的机制,及其对化疗药物顺铂(DDP)耐药性的影响。方法:将稳定表达UL-136的MNK-45和SGC-7901 GC细胞系分别转染circHIPK3 siRNA或miR-124模拟物。采用Transwell-Matrigel侵袭实验评估不同处理下GC细胞的侵袭能力。将表达UL-136的GC细胞系转染circHIPK3 siRNA或miR-124模拟物后,置于含有DDP的培养基中孵育。利用CCK-8实验和流式细胞术分别评估细胞存活率和凋亡情况。计算IC_(50)值以评估GC细胞对DDP的化疗敏感性。利用RT-qPCR技术检测候选circRNAs和上皮标志物[E-钙黏蛋白(E-CAD)、细胞角蛋白-18(CK-18)]、间质标志物[N-钙黏蛋白(N-CAD)和波形蛋白(VIM)]等的表达水平。采用荧光素酶报告基因实验和RNA免疫沉淀法探究miR-124与circHIPK3之间的直接相互作用。结果:在过表达UL-136的MNK-45和SGC-7901细胞中,circHIPK3的mRNA表达水平显著升高(P<0.01)。敲低circHIPK3则显著抑制了UL-136介导的细胞增殖(P<0.01),细胞侵袭(P<0.01)和DDP耐药性(MNK-45细胞的IC_(50)值从11.69μg/mL降到6.26μg/mL,SGC-7901细胞的IC_(50)值从20.21μg/mL降到16.5μg/mL,P<0.01)。与对照组相比,UL-136组上皮标志物E-CAD和CK-18 mRNA的相对表达量减少,而间质标志物N-CAD和VIM mRNA的相对表达量上升(P<0.05)。circHIPK3作为miR-124的海绵,与miR-124结合并抑制其活性。circHIPK3敲低显著提升了UL-136表达细胞中miR-124的基因表达水平(P<0.01)。恢复miR-124表达则显著抑制了UL-136介导的细胞增殖(P<0.01),细胞侵袭(P<0.01)和DDP耐药性(P<0.01)。结论:UL-136可诱导GC细胞表达circHIPK3。circHIPK3可能通过调节miR-124/EMT信号通路促进GC细胞增殖、侵袭和抵抗DDP。 展开更多
关键词 人类巨细胞病毒 ul-136 circHIPK3 miR-124 胃癌 顺铂 上皮-间质转化
暂未订购
伪狂犬病病毒UL4蛋白促进ASC依赖性炎性小体活化和细胞焦亡从而加剧炎症
4
作者 《中国兽医科学》编辑部 黄勇 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第1期141-141,共1页
伪狂犬病病毒(PRV)是一种对猪和其他哺乳动物造成严重危害的病原体,它能够引发宿主的系统性炎症反应和炎症损伤。尽管已知PRV感染与炎性小体的激活和焦亡有关,但PRV促进炎性小体激活的具体分子机制尚不清楚。2024年9月24日,西北农林科... 伪狂犬病病毒(PRV)是一种对猪和其他哺乳动物造成严重危害的病原体,它能够引发宿主的系统性炎症反应和炎症损伤。尽管已知PRV感染与炎性小体的激活和焦亡有关,但PRV促进炎性小体激活的具体分子机制尚不清楚。2024年9月24日,西北农林科技大学研究团队在PLoS Pathogens在线发表了题为“Pseudorabies virus UL4 protein promotes the ASC-dependent inflammasome activation and pyroptosis to exacerbate inflammation”的最新研究成果,鉴定出PRV非结构蛋白UL4的关键功能,揭示其如何增强ASC依赖性的炎性小体激活,促进焦亡,并加剧炎症反应。这一研究成果对于开发新的疫苗和治疗策略具有重要意义。 展开更多
关键词 炎性小体 伪狂犬病病毒 ul4蛋白
在线阅读 下载PDF
鸭瘟病毒北京株UL6和UL7基因的克隆及序列测定 被引量:17
5
作者 郭霄峰 廖明 辛朝安 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期615-618,共4页
依据文献报道的鸭瘟病毒 (DPV)的核苷酸序列 ,设计和合成了二对引物 ,分别为SP1和SP2 ,LP1和LP2。北京株鸭瘟病毒于鸭胚中增殖 ,差速离心和蔗糖密度梯度离心纯化 ,按酚 氯仿法抽提DNA。然后以DPVDNA为模板进行PCR ,分别扩散增出与理论... 依据文献报道的鸭瘟病毒 (DPV)的核苷酸序列 ,设计和合成了二对引物 ,分别为SP1和SP2 ,LP1和LP2。北京株鸭瘟病毒于鸭胚中增殖 ,差速离心和蔗糖密度梯度离心纯化 ,按酚 氯仿法抽提DNA。然后以DPVDNA为模板进行PCR ,分别扩散增出与理论相符的 42 1bp和 1 2 0 9bp的二个DNA片段 ,并将它们克隆于质粒pGEM TEasy中。经酶切和质粒PCR ,筛选含有目的基因的重组质粒。重组质粒以步移法从双方向测序 ,获 1 586bp的核苷酸序列。研究发现这 1 586bp的核苷酸序列与文献报道的UL6和UL7基因序列的同源性为 99% ,仅有一个碱基的差异。进一步作氨基酸分析 ,发现这个碱基所引起的变异为无意义突变 (CCT→CCC)。结果表明 。 展开更多
关键词 鸭瘟 病毒 北京株 ul6 ul7 分子克隆 基因测序
在线阅读 下载PDF
含伪狂犬病毒完整UL49基因及部分UL48基因片段的克隆与序列分析 被引量:2
6
作者 方六荣 牛传双 +3 位作者 肖少波 余晓岚 陈桦 陈焕春 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期306-310,共5页
以地高辛标记的伪狂犬病毒 (PRV)Ea株UL4 9.5基因片段为探针 ,同SalI、KpnI、BamHI消化的PRVEa株基因组DNA进行Southern杂交 ,确定SalI 2 .8kb、KpnI 17.0kb、BamHI 2 5 .0kb片段中含UL4 9基因。将SalI2 .8kb片段克隆到pUC119中 ,利用... 以地高辛标记的伪狂犬病毒 (PRV)Ea株UL4 9.5基因片段为探针 ,同SalI、KpnI、BamHI消化的PRVEa株基因组DNA进行Southern杂交 ,确定SalI 2 .8kb、KpnI 17.0kb、BamHI 2 5 .0kb片段中含UL4 9基因。将SalI2 .8kb片段克隆到pUC119中 ,利用其中的BamHI进行亚克隆 ,获得重组质粒pUC2 .0。测定约 2 .0kb片段的全序列并进行序列分析 ,发现该片段包含UL5 0基因部分编码区 ,UL4 9.5基因和UL4 9基因的完整编码区 ,并且在UL4 9基因下游 ,还存在一段约 36 9个碱基的序列 ,经与人单纯疱疹病毒I型 (HSV 1)、牛单纯疱疹病毒I型 (BHV 1)的UL4 8基因进行比对 ,具有较高的同源性 ,推测为PRVUL4 8基因的部分编码区。 展开更多
关键词 基因克隆 伪狂犬病毒 完整ul49基因 部分ul48基因 序列分析
在线阅读 下载PDF
UL27、UL29基因shRNA表达载体的构建及对HSV-2的干扰效应研究 被引量:2
7
作者 吕延成 潘晓瑜 +1 位作者 黄畅 丁娟 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期202-209,共8页
探讨Ⅱ型单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus type 2,HSV-2)UL27、UL29基因联合靶向siRNA对HSV-2复制的影响。构建UL27、UL29基因的siRNA的重组表达载体并转染293细胞,通过实时荧光定量PCR技术和蛋白质印迹方法检测UL27、UL29基因的表达... 探讨Ⅱ型单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus type 2,HSV-2)UL27、UL29基因联合靶向siRNA对HSV-2复制的影响。构建UL27、UL29基因的siRNA的重组表达载体并转染293细胞,通过实时荧光定量PCR技术和蛋白质印迹方法检测UL27、UL29基因的表达,终点滴定法检测细胞上清液中的各组病毒滴度,MTT法检测细胞的存活率。结果显示:(1)成功构建短发夹RNA(shRNA)重组表达载体。(2)转染后48 h,与空白组(空载体)相比,UL27 shRNA75组对UL27基因mRNA的抑制率为75.17%(P<0.05),UL29 shRNA1461组对UL29基因mRNA抑制率为66.08%,具有显著性差异(P<0.05)。UL27 shRNA75联合UL29 shRNA1461联合干扰组对UL27基因抑制率约为91.28%,UL29基因表达抑制率约为80.40%,与空白组比较具有显著性差异(P<0.05)。(3)终点滴定法结果显示单干扰组和联合干扰组可不同程度降低上清液中的病毒感染滴度,与空白组比较差异性显著(P<0.01)。(4)Western blot检测目的基因蛋白,单干扰组与联合干扰组可不同程度降低目的基因蛋白的表达,其中UL27shRNA75+UL29 shRNA1461联合干扰组能显著抑制相应的蛋白表达水平,蛋白表达量明显减少,与单干扰组相比具有显著差异(P<0.05)。(5)经MTT法检测,UL27 shRNA75、UL29 shRNA1461、UL27 shRNA75+UL29 shRNA1461联合干扰组的细胞存活率明显提高,差异有显著意义(P<0.05)。构建的pGPU6/GFP/Neo-UL27、pGPU6/GFP/Neo-UL29重组表达载体,能在体外细胞水平上不同程度的干扰HSV-2 UL27、UL29基因表达,UL27、UL29联合干扰效率更高,抑制HSV-2在HEK293细胞中复制。 展开更多
关键词 RNA干扰 短发夹RNA Ⅱ型单纯疱疹病毒 ul27基因 ul29基因
暂未订购
血清HSP90α、KIF18B、ULBP2与晚期胃癌患者含PTX方案化疗敏感性及预后的关系
8
作者 宋立业 刘霞 +2 位作者 孙国锋 郑春华 梁华 《分子诊断与治疗杂志》 2025年第6期1036-1040,共5页
目的分析晚期胃癌(AGC)患者血清热休克蛋白90α(HSP90α)、驱动蛋白家族成员18B(KIF18B)、UL16结合蛋白2(ULBP2)与含紫杉醇(PTX)方案化疗敏感性及预后的关系。方法选取2022年5月至2023年5月于康复大学青岛中心医院接受含PTX化疗方案的AG... 目的分析晚期胃癌(AGC)患者血清热休克蛋白90α(HSP90α)、驱动蛋白家族成员18B(KIF18B)、UL16结合蛋白2(ULBP2)与含紫杉醇(PTX)方案化疗敏感性及预后的关系。方法选取2022年5月至2023年5月于康复大学青岛中心医院接受含PTX化疗方案的AGC患者126例为AGC组,同期选取80名进行健康体检的志愿者为对照组。检测两组血清HSP90α、KIF18B、ULBP2表达水平;采用ROC曲线评估血清HSP90α、KIF18B、ULBP2对含PTX方案疗效的预测价值;采用Cox回归分析AGC患者预后的影响因素;采用Kaplan-Meier法分析血清HSP90α、KIF18B、ULBP2与患者预后的关系。结果AGC组患者血清HSP90α、KIF18B、ULBP2表达水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。低分化程度的AGC患者HSP90α、KIF18B、ULBP2高表达率高于中高分化程度的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。无效组患者血清HSP90α、KIF18B、ULBP2表达水平显著高于有效组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清HSP90α、KIF18B、ULBP2联合预测含PTX方案疗效的AUC为0.904,联合检测具有较高的预测价值(Z_(三者联合-HSP90α)=3.151、Z_(三者联合-KIF18B)=3.626、Z_(三者联合-ULBP2)=2.701,P<0.05)。低分化程度和血清HSP90α、KIF18B、ULBP2高表达是影响AGC患者预后的危险因素(P<0.05)。血清HSP90α、KIF18B、ULBP2高表达患者1年生存率显著低于HSP90α、KIF18B、ULBP2低表达患者,差异有统计学意义(Log Rankχ^(2)=17.329、6.522、31.190,P<0.05)。结论AGC患者血清HSP90α、KIF18B、ULBP2均呈高表达,三指标与含PTX方案化疗敏感性及预后有关,联合检测对评估AGC患者预后的预测价值更高。 展开更多
关键词 晚期胃癌 含紫杉醇方案化疗 血清热休克蛋白90α 驱动蛋白家族成员18B ul16结合蛋白2
暂未订购
伪狂犬病病毒变异株UL3、UL46和UL50基因失活株的构建与生物学特性分析
9
作者 殷涵臻 张传健 +2 位作者 曾荣愚 费荣梅 王继春 《畜牧与兽医》 北大核心 2021年第11期67-73,共7页
为探究UL3、UL46和UL50基因对伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)毒力的影响,本研究应用En Passant技术,分别对PRV变异株AH02LA的细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome, BAC)的UL3、UL46和UL50起始密码子进行敲除,获得3... 为探究UL3、UL46和UL50基因对伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)毒力的影响,本研究应用En Passant技术,分别对PRV变异株AH02LA的细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome, BAC)的UL3、UL46和UL50起始密码子进行敲除,获得3株基因失活重组BAC:BAC^(PRV-UL3knock)、BAC^(PRV-UL46knock)和BAC^(PRV-UL50knock)。将BAC DNA与带有同源臂的gE/gI序列片段共转染猪睾丸(swine testis, ST)细胞,获得重组病毒:PRV-UL3^(knock)、PRV-UL46^(knock)和PRV-UL50^(knock)。生长动力学试验结果显示UL3、UL46和UL50突变失活株在感染12和36 h滴度显著低于PRV AH02LA亲本株,表明UL3、UL46和UL50可能介导病毒复制。小鼠的致病性试验显示,PRV-UL3^(knock)、PRV-UL46^(knock)和PRV-UL50^(knock)对小鼠的LD_(50)分别为10^(4.44)TCID_(50)、10^(4.5)TCID_(50)和10^(4.05)TCID_(50),与PRV AH02LA相似(LD_(50)为10^(4.91)TCID_(50)),暗示UL3、UL46和UL50基因可能对PRV毒力无显著影响。本研究分析了UL3、UL46和UL50基因对PRV毒力的影响,为PRV致病机制的研究提供了参考。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 ul3 ul46 ul50 缺失株 生物学特性
在线阅读 下载PDF
UL54和UL29基因干扰对HSV-2复制的影响 被引量:1
10
作者 吕延成 潘晓瑜 +1 位作者 黄畅 丁娟 《合肥医学院学报》 2014年第4期384-386,392,共4页
目的利用RNAi技术同时沉默Ⅱ型单纯疱疹病毒的UL54和UL29基因,探讨双基因干扰对HSV-2复制的影响。方法采用pGPU6/GFP/Neo质粒分别构建UL54、UL29基因的shRNA重组表达质粒,单独或同时转染HEK293细胞,通过实时荧光定量PCR和蛋白质印迹方... 目的利用RNAi技术同时沉默Ⅱ型单纯疱疹病毒的UL54和UL29基因,探讨双基因干扰对HSV-2复制的影响。方法采用pGPU6/GFP/Neo质粒分别构建UL54、UL29基因的shRNA重组表达质粒,单独或同时转染HEK293细胞,通过实时荧光定量PCR和蛋白质印迹方法检测UL54、UL29基因的表达,终点滴定法检测培养细胞上清液中病毒感染滴度;MTT法测定细胞的存活效率。结果转染后48h后,与空白组相比,各干扰组均可不同程度降低上清液中的病毒滴度,提高细胞存活率,降低目的基因mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。与单干扰组相比,双基因干扰组能更有效降低病毒滴度并提高细胞存活率(P<0.01),增加了对UL54和UL29基因mRNA的抑制率,降低了蛋白的表达(P<0.01)。结论 pGPU6/GFP/Neo-UL54、pGPU6/GFP/Neo-UL29重组表达质粒同时转染细胞可抑制HSV-2的复制,采用双基因干扰比单独基因干扰具有更高的效率。 展开更多
关键词 RNA联合干扰 Ⅱ型单纯疱疹病毒 ul54基因 ul29基因 短发夹RNA
在线阅读 下载PDF
鸭肠炎病毒UL51和UL52基因的克隆及序列分析
11
作者 李阳 安瑞 +4 位作者 李慧昕 韩宗玺 邵昱昊 刘胜旺 孔宪刚 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期689-693,共5页
利用靶基因步行PCR方法扩增得到鸭肠炎病毒(DEV Clone-03)5352bp基因片段,并进行克隆和测序。序列分析发现,该片段包含2个ORF。Blast分析表明,这2个ORF分别与单纯疱疹病毒1型(HSV-1)UL51和UL52基因同源,命名为DEV Clone-03UL51和UL52,... 利用靶基因步行PCR方法扩增得到鸭肠炎病毒(DEV Clone-03)5352bp基因片段,并进行克隆和测序。序列分析发现,该片段包含2个ORF。Blast分析表明,这2个ORF分别与单纯疱疹病毒1型(HSV-1)UL51和UL52基因同源,命名为DEV Clone-03UL51和UL52,分别编码252和1124个氨基酸。DEV Clone-03UL51和UL52基因排列方式与HSV-1同源基因相一致,为"头对头"的转录方向,两个ORF间有236bp间隔序列。用DNAStar(Megalign)软件分别对这2个ORF和11株α-疱疹病毒参考毒株进行分析,发现DEV Clone-03UL51与HSV-1的氨基酸序列有相对较高同源性,DEV Clone-03UL52与EHV-4同源性相对较高。并且DEV Clone-03UL51基因在α-疱疹病毒中比较保守。与HSV-1UL52蛋白相似,DEV Clone-03UL52蛋白C末端存在锌指结构。系统发育分析表明,DEV Clone-03与α疱疹病毒亚科成员的关系比较保守,与Mardivirus属的成员具有较近的亲缘关系。 展开更多
关键词 鸭肠炎病毒 靶基因步行PCR ul51 ul52 序列分析
在线阅读 下载PDF
单纯疱疹病毒2型UL27和UL29双基因shRNA慢病毒表达载体的构建及其在HEK293细胞中的表达
12
作者 潘晓瑜 林婧娴 +2 位作者 韩晋辉 朱俊访 罗燕娜 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2020年第12期1381-1385,共5页
目的构建单纯疱疹病毒2型(herpes simplex virus type 2,HSV-2)UL27和UL29双基因shRNA慢病毒表达载体,并检测其在HEK293细胞中的表达。方法针对HSV-2 UL27、UL29基因,各筛选干扰效率最佳的shRNA片段相连接,构建双基因共表达慢病毒载体,... 目的构建单纯疱疹病毒2型(herpes simplex virus type 2,HSV-2)UL27和UL29双基因shRNA慢病毒表达载体,并检测其在HEK293细胞中的表达。方法针对HSV-2 UL27、UL29基因,各筛选干扰效率最佳的shRNA片段相连接,构建双基因共表达慢病毒载体,并转染HEK293细胞作为干扰组,另设空白对照组(不做任何处理)和阴性对照组(转染不针对任何基因的慢病毒载体)。转染48或24 h后接种HSV-2,RT-PCR和Western blot法检测各组细胞中目的基因mRNA和蛋白的表达水平,MTT法检测各组细胞的存活率。结果干扰组UL27和UL29基因mRNA的表达抑制率可达(78.61±2.14)%和(84.86±1.52)%,同时gB和ICP8蛋白的相对表达量明显下降(P均<0.05),细胞的存活明显率提高(P均<0.05)。结论构建的HSV-2 UL27、UL29双基因shRNA重组慢病毒表达载体能在HEK293细胞中表达,为后续HSV-2的基因治疗奠定了实验基础。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒2型 ul27基因 ul29基因 慢病毒载体 短发夹RNA HEK293细胞
原文传递
shRNA靶向干扰UL27、UL54基因对HSV-2复制的影响
13
作者 潘晓瑜 吕延成 +2 位作者 宋其芳 韩晋辉 朱俊访 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期29-32,共4页
为探讨单纯疱疹病毒-2型(Herpes simplex virus type 2,HSV-2)UL 27、UL 54基因的重组表达载体shRNA(small hairpin RNA,shRNA)联合干扰对HSV-2复制的影响,将重组质粒表达载体转染HEK293细胞,利用流式细胞术检测重组质粒转染HEK293的效... 为探讨单纯疱疹病毒-2型(Herpes simplex virus type 2,HSV-2)UL 27、UL 54基因的重组表达载体shRNA(small hairpin RNA,shRNA)联合干扰对HSV-2复制的影响,将重组质粒表达载体转染HEK293细胞,利用流式细胞术检测重组质粒转染HEK293的效率,实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)和蛋白免疫印迹(Western Blot)方法检测UL 27、UL 54基因及其蛋白的表达情况。此外,采用TICD 50(50%tissue culture infective dose,TCID 50)法和噻唑蓝(methyl thiazolyl terazolium,MTT)比色法检测病毒的滴度变化和HEK293细胞的存活率。结果检测显示:UL27 shRNA75+UL54shRNA1081联合干扰组的UL 27、UL 54基因mRNA的表达抑制率分别为(88.10±1.95)%和(85.53±2.28)%,gB蛋白、ICP27蛋白表达及子代病毒滴度均明显降低,HEK293细胞的存活率为(97.30±2.91)%,与单干扰组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。说明UL27shRNA75和UL54 shRNA1081这两个靶点联合干扰能显著抑制HSV-2在HEK293细胞中复制,为今后的HSV-2多基因的治疗提供研究基础。 展开更多
关键词 人疱疹病毒2型 小分子干扰RNA ul27基因 ul54基因
在线阅读 下载PDF
逻辑系统UL的广义H-赋值
14
作者 张小红 何华灿 《计算机科学》 CSCD 北大核心 2005年第11期145-147,共3页
研究了Schweizer-Sklar T-范数(本文讨论 p<0的情况)及其剩余蕴涵的性质。以此为基础,对泛逻辑基本形式系统UL中的H-赋值进行了拓广,引入了广义H-赋值概念,证明了UL在广义H-赋值之下可靠性定理成立。
关键词 逻辑系统ul 广义H-赋值 Schweizer-Sklar T-范数 可靠性 赋值 广义 ul 逻辑系统 可靠性定理
在线阅读 下载PDF
人外周血单个核细胞miR-UL112水平在HCMV感染中的诊断价值研究
15
作者 吴蓉 孔倩倩 +4 位作者 吕志异 许健 倪振华 相芬芬 康向东 《检验医学》 CAS 2014年第6期631-634,共4页
目的探讨单个核细胞中人巨细胞病毒(HCMV)微小RNA(miR)-UL112-3p、miR-UL112-5p水平对HCMV潜伏和激发感染的诊断价值。方法选取非肿瘤患者92例[其中HCMV特异性CD8+T淋巴细胞高水平组(简称CD8+细胞高水平组)57例、HCMV特异性CD8+T淋巴细... 目的探讨单个核细胞中人巨细胞病毒(HCMV)微小RNA(miR)-UL112-3p、miR-UL112-5p水平对HCMV潜伏和激发感染的诊断价值。方法选取非肿瘤患者92例[其中HCMV特异性CD8+T淋巴细胞高水平组(简称CD8+细胞高水平组)57例、HCMV特异性CD8+T淋巴细胞低水平组(简称CD8+细胞低水平组)35例]、肿瘤化疗患者30例,提取外周血单个核细胞,采用实时荧光定量-聚合酶链反应(PCR)检测HCMV DNA、miR-UL112-3p及miR-UL112-5p水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价miR-UL112-3p和miR-UL112-5p水平对HCMV潜伏感染的诊断价值。结果肿瘤化疗组HCMV DNA、miR-UL112-3p及miR-UL112-5p水平明显高于非肿瘤组(P<0.05)。非肿瘤组中CD8+细胞高水平组HCMV DNA、miR-UL112-3p及miR-UL112-5p水平明显高于CD8+细胞低水平组(P均<0.01);以CD8+细胞低水平组miR-UL112-3p、miR-UL112-5p水平为标准,CD8+细胞高水平组miR-UL112-3p、miR-UL112-5p阳性率分别为59.65%、64.91%。分别以1.09、1.52作为miRUL112-3p和miR-UL112-5p诊断HCMV较高水平潜伏感染状态的Cut-off值,敏感性分别为59.65%、64.91%,特异性分别为97.1%、97.1%。以非肿瘤组miR-UL112-3p、miR-UL112-5p水平的x珋+s(即5.24、6.63)作为诊断HCMV激发感染的标准,肿瘤化疗组miR-UL112-3p、miR-UL112-5p阳性率分别为50.00%、73.33%。结论 miRUL112-3p及miR-UL112-5p对HCMV潜伏和激发感染可能有一定的诊断价值。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 微小RNA-ul112—3p 微小RNA—ul112—5p 潜伏感染 激发感染
在线阅读 下载PDF
巨化氟致冷剂通过美国UL认证
16
作者 钟华 《化工新型材料》 CAS CSCD 2002年第8期43-43,共1页
关键词 杭州ul检验点心 浙江巨化氟化公司 F-22 氟致冷剂 ul授权书 美国ul认证
原文传递
ULS-8孤独感量表信效度检验及其应用 被引量:106
17
作者 周亮 黎芝 +1 位作者 胡宓 肖水源 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1124-1128,共5页
目的:探讨ULS-8孤独感量表在农村社区老年人中的信度、效度。方法:通过面对面访谈,在839名农村社区老年人中完成问卷调查,对部分研究对象两周后实施重测。结果:探索性因素分析结果发现ULS-6(剔除条目3和条目6后)符合原文的理论构想;ULS-... 目的:探讨ULS-8孤独感量表在农村社区老年人中的信度、效度。方法:通过面对面访谈,在839名农村社区老年人中完成问卷调查,对部分研究对象两周后实施重测。结果:探索性因素分析结果发现ULS-6(剔除条目3和条目6后)符合原文的理论构想;ULS-6总量表的Cronbach'sα系数为0.831,重测信度为0.715,条目与总分的相关系数均具有统计学意义;经统计学检验,总量表得分与老年人生活质量、社会支持、自杀意念、重性抑郁发作均显著相关,证明ULS-6量表具有较好的实证效度。结论:ULS-6量表信度、效度均较好,符合心理学测量的要求,可以用于我国农村社区老年人中孤独感的调查。 展开更多
关键词 ulS-8孤独感量表 信度 效度
暂未订购
马立克病毒UL36^(USP)蛋白的表达及其抗体制备 被引量:6
18
作者 郑海南 邓晨 +5 位作者 王梦云 金雯 吴山力 吕岩 于子阳 艾永兴 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期712-716,共5页
UL36USP是马立克病毒UL36基因编码的蛋白UL36上具有去泛素化酶活性的N-端部分片段(UL36USP),本试验以提取MDCC-MSB1细胞的基因组为模板通过PCR获得目的基因,将UL36USP基因克隆入pMD18T载体,测序正确并酶切鉴定后,将目的基因亚克隆到pET... UL36USP是马立克病毒UL36基因编码的蛋白UL36上具有去泛素化酶活性的N-端部分片段(UL36USP),本试验以提取MDCC-MSB1细胞的基因组为模板通过PCR获得目的基因,将UL36USP基因克隆入pMD18T载体,测序正确并酶切鉴定后,将目的基因亚克隆到pET28a原核表达载体,构建重组质粒pET28a-UL36USP。将重组质粒转化BL21(DE3)E.coli中,IPTG诱导表达并使用Ni-NTA Agarose亲和层析进行纯化得到目的蛋白。应用纯化后的UL36USP免疫獭兔制备多克隆抗体。使用昆虫细胞表达系统表达的UL36片段检测多克隆抗体的特异性。结果显示成功制备特异性的UL36USP抗体。 展开更多
关键词 ul36基因 马立克病毒 去泛素化 多克隆抗体
原文传递
鸭瘟病毒的分离鉴定及其UL2、TK基因序列分析 被引量:12
19
作者 刘荣昌 黄瑜 +7 位作者 卢荣辉 傅秋玲 江斌 万春和 傅光华 程龙飞 施少华 陈红梅 《福建农业学报》 CAS 北大核心 2016年第12期1257-1261,共5页
2015年,福建省福州地区2个鸭场(M18肉鸭场及蛋鸭场)发生大量鸭死亡,初诊疑似鸭瘟。为明确其病原,分别采集病死鸭肝脏、食道样品进行鸭瘟病毒特异性PCR检测和病毒分离,对获得的2株病毒分离株分别进行鸭已知病原的检测,确定均为鸭瘟病毒... 2015年,福建省福州地区2个鸭场(M18肉鸭场及蛋鸭场)发生大量鸭死亡,初诊疑似鸭瘟。为明确其病原,分别采集病死鸭肝脏、食道样品进行鸭瘟病毒特异性PCR检测和病毒分离,对获得的2株病毒分离株分别进行鸭已知病原的检测,确定均为鸭瘟病毒。对新分离鉴定的2株鸭瘟病毒株的UL2基因进行序列测定及分析发现,均具有强毒株的分子特征;经TK基因序列测定及分析表明,2株新分离的鸭瘟病毒株与强毒代表株、弱毒疫苗株的TK基因核苷酸同源性均高达98.7%。 展开更多
关键词 鸭瘟病毒 分离鉴定 ul2基因 TK基因 序列分析
在线阅读 下载PDF
伪狂犬病毒UL14基因缺失突变株的构建及其生物学特性研究 被引量:10
20
作者 张辉 方六荣 +4 位作者 赵骞 薛念波 江云波 肖少波 陈焕春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期369-375,共7页
UL14在α-疱疹病毒中相当保守,但其在伪狂犬病毒中的功能尚不清楚。本研究以伪狂犬病毒鄂A株(PRV-Ea)为亲本株,通过同源重组,将编码EGFP的真核表达盒插入到伪狂犬病毒基因组的UL14基因中,PCR检测和荧光观察证实获得了能稳定表达EGFP的U... UL14在α-疱疹病毒中相当保守,但其在伪狂犬病毒中的功能尚不清楚。本研究以伪狂犬病毒鄂A株(PRV-Ea)为亲本株,通过同源重组,将编码EGFP的真核表达盒插入到伪狂犬病毒基因组的UL14基因中,PCR检测和荧光观察证实获得了能稳定表达EGFP的UL14插入失活突变株PRV-UL14D。将PRV-UL14D感染IBRS-2细胞,发现该突变株较PRV-Ea野毒株增殖缓慢,而且PRV-UL14D突变株感染细胞后形成的蚀斑也明显小于PRV-Ea野毒株,但在稳定表达UL14的IBRS-2细胞系中,PRV-UL14D与PRV-Ea野毒株的增殖速度、形成的蚀斑大小均无明显差异。进一步将PRV-UL14D感染BALB/c小鼠,发现与相同剂量的PRV-Ea野毒株感染相比,小鼠平均死亡时间明显延缓。上述研究结果表明,UL14并非伪狂犬病毒增殖必需的,但其缺失可延缓病毒增殖,推测UL14可能与病毒粒子在细胞间的扩散有关。 展开更多
关键词 伪狂犬病毒 ul14 突变株 生物学特性
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 96 下一页 到第
使用帮助 返回顶部