UbcH10在肝细胞癌中的表达及临床病理意义 被引量：7

1

作者 韩少山 刘青光 +5 位作者 姚英民 孙昊 昝献峰 宋涛 杨雪 郑鑫 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期280-284,共5页

目的研究UbcH10在肝细胞癌中的表达及其与临床病理特征的联系,初步探讨UbcH10在人肝细胞癌中的生物学意义。方法利用RT-PCR法检测正常肝脏细胞系及肝癌细胞系,和肝癌组织及对应的癌旁组织中UbcH10 mRNA的表达水平。分析UbcH10 mRNA的表... 目的研究UbcH10在肝细胞癌中的表达及其与临床病理特征的联系,初步探讨UbcH10在人肝细胞癌中的生物学意义。方法利用RT-PCR法检测正常肝脏细胞系及肝癌细胞系,和肝癌组织及对应的癌旁组织中UbcH10 mRNA的表达水平。分析UbcH10 mRNA的表达水平与肝癌临床病理特征之间的关系。利用免疫组化方法检测UbcH10蛋白在肝癌组织及其癌旁组织和正常肝脏组织中的表达。结果正常肝脏细胞系L02中UbcH10 mRNA表达水平显著低于肝癌细胞细胞系BEL-7402、Hep3B、HepG2、SMMC-7721中UbcH10 mRNA的表达水平(P<0.05)。肝癌组织中UbcH10 mRNA的表达水平显著高于其癌旁组织(P<0.05)。UbcH10 mRNA表达水平与肿瘤直径、组织病理分化程度、TNM分期、门静脉侵犯特临床病理特征显著相关(P<0.05)。肝癌组织中广泛表达UbcH10蛋白,总体阳性率为68.6%(48/70),癌旁组织和正常肝组织中较少见UbcH10蛋白阳性表达,其染色阳性率分别28.6%(20/70)和26.7%(8/30)。结论 UbcH10在肝癌细胞系及肝癌组织中高表达。UbcH10的高表达与肝癌的恶性临床病理特征相关,UbcH10可能成为潜在的分子标志物或治疗靶点。 展开更多

关键词 ubch10 肝细胞癌 RT-PCR 免疫组化 临床病理特征

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UbcH10在脑膜瘤组织中的表达及其临床意义 被引量：2

2

作者 王涛 王国喜 +4 位作者 鲁维山 顾伏平 王奇章 卢亦成 胡国汉 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期323-329,共7页

目的:探讨泛素结合酶UbcH10(ubiquitin-conjugating enzyme H10)蛋白在不同病理级别脑膜瘤组织中的表达及其临床意义。方法:选择2002年4月至2009年9月在长征医院神经外科手术治疗并经病理确诊、且临床随访资料完整的脑膜瘤患者47例,所... 目的:探讨泛素结合酶UbcH10(ubiquitin-conjugating enzyme H10)蛋白在不同病理级别脑膜瘤组织中的表达及其临床意义。方法:选择2002年4月至2009年9月在长征医院神经外科手术治疗并经病理确诊、且临床随访资料完整的脑膜瘤患者47例,所有经诊断的颅内脑膜瘤病例均按2007年WHO分类标准分级,应用免疫组织化学方法研究UbcH10及Ki-67蛋白在不同病理级别脑膜瘤组织中的表达水平,并采用Spearman方法分析UbcH10与Ki-67蛋白表达的相关性。采用Kaplan-Meier法分析UbcH10表达与脑膜瘤无复发生存间的关系,以单因素和多因素回归模型分析UbcH10表达与脑膜瘤患者预后的关系,筛选影响预后的独立因素。结果:UbcH10蛋白主要表达于脑膜瘤细胞核中,在脑膜瘤组织中阳性表达率显著高于正常脑组织[(5.57±1.72)%vs 0,P=0.00]。定量分析证实其在非典型性及间变型脑膜瘤中的表达水平明显高于典型性脑膜瘤[(10.53±5.79)%vs(4.23±2.85)%,P<0.01],提示UbcH10蛋白的表达与脑膜瘤病理分级有关。UbcH10表达与Ki-67蛋白的表达呈正相关(r=0.77,P<0.01)。Kaplan-Meier生存曲线结果显示,高UbcH10、Ki-67表达及高级别病理分级脑膜瘤患者相对于低UbcH10(P=0.007)、Ki-67表达(P=0.018)及低级别脑膜瘤病理分级患者无复发生存期显著缩短。Cox多因素分析显示,肿瘤病理分级(P=0.029)及UbcH10表达水平(P=0.044)为影响脑膜瘤患者预后的独立因素,风险比(hazardratio,HR)分别为2.918和4.756。UbcH10过表达与脑膜瘤的复发明显相关,并且成为独立的预后因素,但还不能确定性别、年龄、Ki-67表达水平、肿瘤大小以及肿瘤位置对预后有影响。结论:UbcH10可能参与了脑膜瘤的发生、发展过程,其表达情况可作为一个独立的风险评估指标预测脑膜瘤的预后。 展开更多

关键词 脑膜瘤 ubch10 KI-67 预后 生存分析

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UbcH10基因沉默对肺癌NCI-H226细胞增殖及细胞周期的影响 被引量：2

3

作者 赵黎明 孙光远 +3 位作者 娄丽蓉 王良哲 方正 修清玉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期608-612,共5页

目的通过脂质体转染siRNA方法沉默人肺鳞癌细胞NCI-H226中UbcH10基因,观察基因沉默后细胞增殖活性的变化及其对细胞周期的影响。方法设计3条针对UbcH10基因CDS区不同位点的siRNA序列并构建shRNA重组质粒,脂质体法转染重组质粒至NCI-H22... 目的通过脂质体转染siRNA方法沉默人肺鳞癌细胞NCI-H226中UbcH10基因,观察基因沉默后细胞增殖活性的变化及其对细胞周期的影响。方法设计3条针对UbcH10基因CDS区不同位点的siRNA序列并构建shRNA重组质粒,脂质体法转染重组质粒至NCI-H226细胞。转染后48 h,RT-PCR和蛋白质免疫印迹法检测细胞内UbcH10 mRNA及蛋白含量。使用有效siRNA序列转染细胞,转染后24、48 h CCK-8检测细胞活性。使用有效siRNA序列转染细胞,转染后48 h收集细胞,流式细胞术检测细胞周期。结果成功构建shRNA重组质粒并转染NCI-H226细胞。转染siRNA 48 h后,3组NCI-H226细胞中UbcH10基因的mRNA及蛋白含量均明显下降;其中2号siRNA序列(pshRNA2)的沉默效果最好,UbcH10基因剩余表达量为对照组的14%。使用pshRNA2转染NCI-H226细胞24、48 h,细胞增殖活性降低,与基因未干预组比较差异有统计学意义(P<0.05)。使用pshRNA2转染NCI-H226细胞48 h,细胞明显阻滞于G2期,与基因未干预组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 UbcH10基因沉默可显著抑制NCI-H226细胞增殖活性,并使肺癌细胞阻滞于细胞G2期。 展开更多

关键词 ubch10基因 肺肿瘤 小分子干扰RNA 细胞增殖 细胞周期

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miR-934、UbcH10、外周血T淋巴细胞亚群在原发性肝癌早期诊断及预后评估中的应用价值 被引量：9

4

作者 鲁建锋 蔡莹 徐佳灵 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2023年第11期976-980,共5页

目的:探讨微小核糖核酸-934(miR-934)、泛素结合酶UbcH10、外周血T淋巴细胞亚群在原发性肝癌(PHC)早期诊断及预后评估中的应用价值。方法:回顾性分析2019年1月至2022年1月200例肝肿瘤患者的临床资料,其中肝良性肿瘤患者106例(良性组),... 目的:探讨微小核糖核酸-934(miR-934)、泛素结合酶UbcH10、外周血T淋巴细胞亚群在原发性肝癌(PHC)早期诊断及预后评估中的应用价值。方法:回顾性分析2019年1月至2022年1月200例肝肿瘤患者的临床资料,其中肝良性肿瘤患者106例(良性组),恶性肿瘤患者94例(PHC组),所有患者均接受miR-934、UbcH10、外周血T淋巴细胞亚群检查。比较两组患者及不同临床分期PHC患者的miR-934、UbcH10、CD3+、CD4+、CD8+表达情况,建立接受者操作特征(ROC)曲线,分析miR-934、UbcH10、外周血T淋巴细胞亚群诊断PHC的效能。结果:PHC组的miR-934、UbcH10高于良性组(P<0.05),CD3+、CD4+、CD8+低于良性组(P<0.05)。PHCⅢ~Ⅳ期患者的miR-934、UbcH10高于PHCⅠ期、Ⅱ期患者,CD3+、CD4+、CD8+低于PHCⅠ期、Ⅱ期患者(P<0.05)。miR-934+UbcH10+外周血T淋巴细胞亚群联合诊断PHC的符合率、灵敏度、阳性预测值、阴性预测值分别为89.50%、90.43%、87.63%、91.26%,均高于miR-934、UbcH10、外周血T淋巴细胞亚群的单独诊断(P<0.05)。结论:miR-934、UbcH10、外周血T淋巴细胞亚群与PHC发生、发展、预后关系密切,联合检测miR-934、UbcH10、外周血T淋巴细胞亚群对于PHC的早期诊断与预后评估具有较高价值。 展开更多

关键词 原发性肝癌 T淋巴细胞亚群 微小核糖核酸-934 泛素结合酶ubch10

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UbcH10与肿瘤关系研究进展 被引量：5

5

作者 韩少山 孙昊 刘青光 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第14期867-869,共3页

泛素-蛋白酶体系统(UPS)是蛋白质选择性降解的最重要机制之一。蛋白质的泛素化是一个非常复杂而缜密的级联酶促反应过程,参与调节细胞内多种蛋白的表达水平和功能活性。泛素-蛋白酶体系统的异常与恶性肿瘤的发生和进展有着密切的关系。... 泛素-蛋白酶体系统(UPS)是蛋白质选择性降解的最重要机制之一。蛋白质的泛素化是一个非常复杂而缜密的级联酶促反应过程,参与调节细胞内多种蛋白的表达水平和功能活性。泛素-蛋白酶体系统的异常与恶性肿瘤的发生和进展有着密切的关系。泛素偶联酶UbcH10属于泛素偶联酶E2家族,其与特定的E3酶相互作用引起底物蛋白的降解,是一种参与细胞有丝分裂调控的细胞周期蛋白。UbcH10可激活Cdc20/APC,与细胞周期进展、细胞分裂、染色体分离密切相关。UbcH10表达异常可导致细胞的染色体不稳定,细胞分裂异常。目前已有研究证明UbcH10是一种具有癌基因性质的泛素偶联酶。UbcH10在乳腺癌、结肠癌、胃癌、卵巢癌、肝癌、脑胶质瘤、淋巴瘤等多种肿瘤中高表达并且与肿瘤分期呈正相关,提示不良预后,可能成为新的肿瘤标志物或治疗靶点。本文就近年来关于UbcH10在肿瘤中作用的研究进展加以综述。 展开更多

关键词 ubch10 泛素蛋白酶体系 统肿瘤

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UbcH10基因沉默联合紫杉醇干预对NCI-H226细胞增殖活性和凋亡的影响 被引量：2

6

作者 赵黎明 王良哲 +3 位作者 娄丽蓉 孙光远 方正 修清玉 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期891-895,共5页

目的观察小干扰RNA(siRNA)介导的UbcH10基因沉默联合紫杉醇处理对人肺鳞癌细胞株NCI-H226细胞增殖活性和凋亡的影响。方法化学合成针对UbcH10基因的siRNA-UbcH10序列,脂质体转染siRNA至NCI-H226细胞(siRNA转染组),转染后24 h,采用Real-T... 目的观察小干扰RNA(siRNA)介导的UbcH10基因沉默联合紫杉醇处理对人肺鳞癌细胞株NCI-H226细胞增殖活性和凋亡的影响。方法化学合成针对UbcH10基因的siRNA-UbcH10序列,脂质体转染siRNA至NCI-H226细胞(siRNA转染组),转染后24 h,采用Real-Time PCR和Western blotting分别检测UbcH10 mRNA和蛋白的表达水平,以未予任何转染细胞作为空白对照,以阴性序列转染细胞作为阴性对照。以紫杉醇(1μmol/L)处理siRNA转染及未转染NCI-H226细胞(siRNA+紫杉醇组和紫杉醇组),分别于转染后24、48 h收集细胞,MTT比色法检测细胞增殖;转染后24 h收集细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡;以未经紫杉醇处理的siRNA转染、阴性序列转染和未予转染的NCI-H226细胞作为siRNA转染组、阴性对照组和空白对照组。结果Real-Time PCR和Western blotting检测结果显示:转染后24 h,siRNA转染组UbcH10 mRNA和蛋白的表达较空白对照组和阴性对照组显著下调(P<0.01)。MTT比色法检测结果显示,siRNA转染组细胞增殖抑制率显著高于紫杉醇组和对照组(P<0.05),而siRNA+紫杉醇组细胞增殖抑制率显著高于siRNA转染组(P<0.05)。siRNA转染组细胞凋亡率显著高于紫杉醇组和对照组(P<0.05),而siRNA+紫杉醇组细胞凋亡率显著高于siRNA转染组(P<0.05),紫杉醇组与对照组细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 UbcH10基因沉默可显著增强NCI-H226细胞对于化疗药物紫杉醇的敏感性。 展开更多

关键词 ubch10基因沉默 小干扰RNA 紫杉醇 NCI-H226细胞 细胞增殖 细胞凋亡

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UbcH10在乳腺癌中的表达及意义 被引量：5

7

作者 王银平 殷志强 +3 位作者 陈雪华 季福 刘炳亚 孙婧璟 《外科理论与实践》 2008年第2期149-152,共4页

目的:探讨UbcH10在乳腺癌中的表达情况及意义。方法:分别运用Western Blot法和免疫组化染色在乳腺癌细胞系和乳腺癌组织芯片中检测UbcH10的表达;统计学分析UbcH10与乳腺癌组织学类型、分化程度、雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕... 目的:探讨UbcH10在乳腺癌中的表达情况及意义。方法:分别运用Western Blot法和免疫组化染色在乳腺癌细胞系和乳腺癌组织芯片中检测UbcH10的表达;统计学分析UbcH10与乳腺癌组织学类型、分化程度、雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progeste ronereceptor,PR)等之间的相关性。结果:UbcH10在MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435s等乳腺癌细胞株中均呈阳性表达。在正常乳腺组织中,UbcH10的表达阳性率为0.00%(0/8);而在乳腺癌组织中,总体阳性率为61.25%(49/80,P<0.05),其中浸润性导管癌的阳性表达率为60.42%(29/48,P<0.05)。人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor-type2,HER2)阴性和阳性组织中UbcH10的表达阳性率分别为46.67%和91.67%(P<0.05),HER2的表达水平与UbcH10表达呈正相关。UbcH10表达与组织级别、年龄、淋巴结转移、ER、PR、BCL2(B-cell CLL/lymphoma2)、P53等无明显相关性。结论:UbcH10表达在正常乳腺组织和乳腺癌组织中存在明显差别,且其表达与HER2表达呈现正相关关系,可作为判断乳腺癌的潜在标记物,并有望成为乳腺癌靶向治疗中新的靶点。 展开更多

关键词 乳腺癌 ubch10 组织芯片

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hTERT mRNA、UbcH10和Ki-67在乳腺大汗腺病变中的鉴别诊断价值 被引量：1

8

作者 徐明 许杰莉 +1 位作者 周英姿 许伟青 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1239-1243,共5页

目的探讨UbcH10、Ki-67和hTERT mRNA在乳腺大汗腺病变中的鉴别诊断价值。方法免疫组织化学EnVision法检测标记物UbcH10和Ki-67,显色原位杂交检测hTERT mRNA在20例大汗腺化生(APM)、26例大汗腺腺病(AA)、32例非典型性大汗腺增生(AAH)、2... 目的探讨UbcH10、Ki-67和hTERT mRNA在乳腺大汗腺病变中的鉴别诊断价值。方法免疫组织化学EnVision法检测标记物UbcH10和Ki-67,显色原位杂交检测hTERT mRNA在20例大汗腺化生(APM)、26例大汗腺腺病(AA)、32例非典型性大汗腺增生(AAH)、22例大汗腺导管内癌(ADCIS)和35浸润性大汗腺癌(IAC)的表达。结果 UbcH10、Ki-67和hTERT mRNA在APM、AA、AAH、ADCIS和IAC表达的阳性率分别为(10.0%、5.0%和45.0%)、(50.0%、50.0%和84.6%)、(62.5%、62.5%和81.3%)、(81.8%、81.8%和81.8%)和(94.3%、94.3%和85.7%),呈正相关。Ki-67在APM、AA、AAH、ADCIS和IAC中表达的平均增殖指数分别为1.01%、5.35%、7.53%、16.05%和31.12%。hTERT mRNA、Ki-67和UbcH10表达的阳性率在APM与AA、AAH、ADCIS和IAC相比较差异具有统计学意义(P<0.05),在AA、AAH、ADCIS和IAC相邻两组比较中差异均无统计学意义(P>0.05);Ki-67平均增殖指数在AA、AAH与ADCIS相比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论苏木精-伊红染色观察组织病理学特征,辅以免疫组织化学方法检测Ki-67,能够在一定程度上提高乳腺大汗腺谱系中良、恶性病变鉴别诊断的准确性。 展开更多

关键词 乳腺 大汗腺病变 ubch10 KI-67 hTERTm RNA 免疫组织化学 显色原位杂交

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结直肠癌淋巴结转移与泛素结合酶UbcH10的表达 被引量：3

9

作者 陈世敏 陈英剑 胡成进 《检验医学与临床》 CAS 2015年第20期3035-3037,共3页

目的检测结直肠癌中泛素结合酶UbcH10的表达,并探讨其与结直肠癌患者临床病理特征和淋巴结转移的相关性。方法采用免疫组织化学法检测结直肠癌组织及正常组织中UbcH10蛋白的表达量,分析其与结直肠癌患者临床病理特征的关系。采用Matrige... 目的检测结直肠癌中泛素结合酶UbcH10的表达,并探讨其与结直肠癌患者临床病理特征和淋巴结转移的相关性。方法采用免疫组织化学法检测结直肠癌组织及正常组织中UbcH10蛋白的表达量,分析其与结直肠癌患者临床病理特征的关系。采用Matrigel侵袭实验分析UbcH10对结直肠癌HT-29细胞株侵袭能力的影响。结果 UbcH10蛋白在正常组织细胞中几乎不表达,在结直肠癌组织的细胞核中高表达,并且表达水平与肿瘤的分化程度、淋巴结转移相关(P<0.05)。Matrigel侵袭实验结果显示UbcH10过表达可显著增加HT-29细胞的体外侵袭能力。结论 UbcH10基因在结直肠癌患者肿瘤组织中过度表达,并与结直肠癌的疾病进展密切相关,可作为结直肠癌诊断和淋巴结转移的潜在肿瘤标志物及结直肠癌基因治疗的新靶点。 展开更多

关键词 结直肠癌 泛素结合酶ubch10 免疫组织化学 淋巴结转移

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UbcH10基因沉默对多发性骨髓瘤U-1996细胞增殖和凋亡的作用研究 被引量：1

10

作者 奚昊 赵黎明 +2 位作者 姜华 李璐 侯健 《检验医学与临床》 CAS 2016年第12期1603-1605,共3页

目的采用脂质体法转染siRNA的方法沉默多发性骨髓瘤U-1996细胞中的UbcH10基因,研究基因沉默后U-1996细胞增殖活性及凋亡等生物学特性的变化情况。方法根据UbcH10基因信息,设计针对UbcH10基因编码序列(CDS)区的siRNA序列。通过脂质体法... 目的采用脂质体法转染siRNA的方法沉默多发性骨髓瘤U-1996细胞中的UbcH10基因,研究基因沉默后U-1996细胞增殖活性及凋亡等生物学特性的变化情况。方法根据UbcH10基因信息,设计针对UbcH10基因编码序列(CDS)区的siRNA序列。通过脂质体法转染相关siRNA序列至多发性骨髓瘤U-1996细胞。在转染siRNA后48h,采用实时定量聚合酶链反应及蛋白免疫印迹法检测U-1996细胞中UbcH10基因的mRNA和其蛋白水平。选取未转染siRNA序列的空白组和转染阴性siRNA序列组作为试验对照,采用CCK-8法检测转染siRNA序列后24、48、72hU-1996细胞的增殖情况,采用流式细胞术检测48h后U-1996细胞的凋亡情况。结果通过脂质体法成功转染构建siRNA序列至U-1996细胞。转染后的U-1996细胞中UbcH10基因的mRNA及蛋白表达情况较转染前均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。和对照组相比,沉默UbcH10基因后U-1996细胞的增殖活性下降,差异有统计学意义(P<0.05),细胞凋亡率上升,差异也有统计学意义(P<0.05)。结论干扰UbcH10基因表达可显著抑制多发性骨髓瘤细胞的增殖活性并增加细胞凋亡。 展开更多

关键词 ubch10 多发性骨髓瘤 SIRNA 细胞增殖 细胞凋亡

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泛素偶联酶UBE2C/UbcH10荧光蛋白表达载体的构建及肝癌细胞中的表达 被引量：1

11

作者 杜红延 马慧娟 +3 位作者 杨学习 姚小艳 吴英松 李明 《热带医学杂志》 CAS 2009年第8期845-848,共4页

目的构建人泛素偶联酶UBE2C/UbcH10荧光蛋白真核表达载体,并转染肝癌细胞,筛选建立稳定转染细胞株。方法从构建好的pMD19-T/UbcH10载体中PCR扩增UbcH10基因,PCR产物双酶切后克隆入pEGFP-N1真核表达载体中,构建真核表达载体pEGFP-N1/UbcH... 目的构建人泛素偶联酶UBE2C/UbcH10荧光蛋白真核表达载体,并转染肝癌细胞,筛选建立稳定转染细胞株。方法从构建好的pMD19-T/UbcH10载体中PCR扩增UbcH10基因,PCR产物双酶切后克隆入pEGFP-N1真核表达载体中,构建真核表达载体pEGFP-N1/UbcH10,进行双酶切和测序鉴定。将构建好的真核表达载体pEGFP-N1/UbcH10和空载体pEGFP-N1利用脂质体Lip2000TM分别转染进入肝癌细胞SMMC7721中,建立肝癌细胞SMMC7721的G418细胞死亡曲线,选择G418的筛选浓度,经G418结合荧光显微镜观察筛选稳定转染细胞。将筛选获得的肝癌细胞进行有限稀释法单克隆化,收集单个细胞克隆扩大培养备用。结果经双酶切和测序鉴定,带有荧光蛋白标记的真核表达载体pEGFP-N1/UbcH10构建成功,经脂质体介导真核表达载体pEGFP-N1/UbcH10和空载体pEGFP-N1成功转入肝癌细胞SMMC7721中,经800μg/mL G418筛选并进行单克隆化获得稳定转染的细胞株SMMC7721-pEGFP-N1和SMMC7721-pEGFP-N1/UbcH10,阳性转化率达到94%以上。结论人泛素偶联酶UBE2C/UbcH10稳定高表达肝癌细胞株的建立,为该蛋白在肝癌发生发展过程中的具体作用机制的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 泛素偶联酶UBE2C/ubch10 真核表达载体 构建 转染 肝癌细胞

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siRNA干扰UBCH10表达对乳腺癌细胞的影响 被引量：2

12

作者 王银平 孙婧璟 +2 位作者 陈雪华 俞佩琴 刘炳亚 《外科理论与实践》 2009年第6期652-655,共4页

目的:探讨UbcH10在乳腺癌细胞系MCF-7中的作用及机制。方法:使用UbcH10 siRNA干扰乳腺癌细胞系MCF-7中UbcH10的表达,并采用MTT法检测干扰后细胞的增殖变化,同时用流式细胞仪比较干扰后细胞周期的变化。结果:与正常空白对照组及siRNA阴... 目的:探讨UbcH10在乳腺癌细胞系MCF-7中的作用及机制。方法:使用UbcH10 siRNA干扰乳腺癌细胞系MCF-7中UbcH10的表达,并采用MTT法检测干扰后细胞的增殖变化,同时用流式细胞仪比较干扰后细胞周期的变化。结果:与正常空白对照组及siRNA阴性对照组比较,siUbcH10干扰组细胞增殖明显受抑制,转染后48h,细胞周期中G2/M期细胞比例明显增加(空白对照组9.98%,阴性对照组8.32%,干扰组18.18%)。结论:UbcH10在乳腺癌细胞周期G2/M期中发挥重要作用,抑制MCF-7中UbcH10的表达可明显抑制乳腺癌细胞增殖,UbcH10有望成为乳腺癌靶向治疗中新的潜在靶点。 展开更多

关键词 乳腺癌 ubch10 SIRNA 细胞周期

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人UbcH10及其siRNA真核表达载体的构建与表达 被引量：1

13

作者 陈世敏 徐春晓 +2 位作者 刘斌 辛家璇 刘贤锡 《放射免疫学杂志》 CAS 2009年第4期397-399,共3页

目的:构建以人泛素结合酶UbcH10基因为基础的真核表达质粒pcDNA3.1(UbcH10)及其siRNA表达载体pGPU6/GFP/Neo(siRNA-UbcH10),并在结肠癌细胞LOVO中表达与鉴定。方法:提取组织总RNA,通过RT-PCR扩增出UbcH10基因,克隆到真核表达载体pcDNA3.... 目的:构建以人泛素结合酶UbcH10基因为基础的真核表达质粒pcDNA3.1(UbcH10)及其siRNA表达载体pGPU6/GFP/Neo(siRNA-UbcH10),并在结肠癌细胞LOVO中表达与鉴定。方法:提取组织总RNA,通过RT-PCR扩增出UbcH10基因,克隆到真核表达载体pcDNA3.1的多克隆位点中,构建UbcH10的真核表达载体。通过siRNA设计软件选取UbcH10基因的siRNA片段合成构建表达载体pGPU6/GFP/Neo(siRNA-UbcH10)。然后采用脂质体转染法将其分别转染LOVO细胞,用RT-PCR在RNA水平和Western Blot在蛋白水平检测其在真核细胞中的表达。结果:测序结果显示克隆UbcH10基因片段序列完全正确;重组质粒转染LO-VO细胞后,检测到pcDNA3.1(UbcH10)转染组UbcH10表达增强,而pGPU6/GFP/Neo(siRNA-UbcH10)转染组UbcH10表达减弱。结论:成功构建真核表达质粒pcDNA3.1(UbcH10)及其siRNA表达载体pGPU6/GFP/Neo(siRNA-UbcH10),并在真核细胞中能有效表达,为今后进一步研究UbcH10的功能和作用机制奠定了基础。 展开更多

关键词 ubch10 真核表达 SIRNA

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UbcH10基因沉默联合多柔比星抑制耐药乳腺癌细胞体内成瘤实验

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作者 汪成 余燕民 +3 位作者 陆永伟 单鸣 徐明 包家林 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期418-422,共5页

目的观察UbcH10基因沉默对多柔比星抑制耐药乳腺癌细胞株MCF-7/ADR体内成瘤作用的影响。方法采用慢病毒系统在MCF-7/ADR细胞中进行UbcH10基因沉默。将基因沉默后的肿瘤细胞及对照肿瘤细胞接种至裸鼠皮下,通过裸鼠尾静脉连续给予多柔比... 目的观察UbcH10基因沉默对多柔比星抑制耐药乳腺癌细胞株MCF-7/ADR体内成瘤作用的影响。方法采用慢病毒系统在MCF-7/ADR细胞中进行UbcH10基因沉默。将基因沉默后的肿瘤细胞及对照肿瘤细胞接种至裸鼠皮下,通过裸鼠尾静脉连续给予多柔比星或生理盐水2周并停药1周,测量肿瘤体积,分析UbcH10沉默对多柔比星抑制MCF-7/ADR体内成瘤作用的影响。采用蛋白质印迹分析检测瘤体中的UbcH10及BCL-2蛋白含量,分析UbcH10与肿瘤细胞化疗敏感性之间的调控关系。结果通过慢病毒实验系统成功建立UbcH10基因沉默细胞株MCF-7/ADR UbcH10-RNAi。经过3周给药处理,多柔比星组肿瘤体积与对照组比较差异无统计学意义,肿瘤抑制率为4.16%;基因沉默+多柔比星组肿瘤体积与对照组差异有统计学意义(P<0.05),肿瘤抑制率为41.8%。瘤体内蛋白含量检测结果显示,对照组、多柔比星组、基因沉默+多柔比星组UbcH10蛋白表达量分别为0.81±0.16、0.78±0.12、0.18±0.04,基因沉默+多柔比星组其余两组比较差异均有统计学意义(P<0.05);BCL-2蛋白表达量组间差异与UbcH10一致,二者之间具有正相关性。结论UbcH10基因沉默可以显著增强多柔比星抑制耐药乳腺癌细胞MCF-7/ADR的体内成瘤作用。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 MCF-7/ADR 基因沉默 ubch10 肿瘤抗药性 体内成瘤

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UbcH10基因沉默对耐药乳腺癌细胞MCF-7/TXT药物敏感性影响

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作者 汪成 单鸣 +2 位作者 潘贇昊 徐明 包家林 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1448-1453,共6页

目的观察UbcH10基因沉默对MCF-7/TXT细胞耐药的影响。方法设计针对UbcH10的siRNA序列,构建shRNA表达载体并进行重组慢病毒包装,重组病毒感染MCF-7/TXT细胞,转染后72 h通过荧光标记物确认细胞感染效率,收集转染后细胞,Real-Time PCR和Wes... 目的观察UbcH10基因沉默对MCF-7/TXT细胞耐药的影响。方法设计针对UbcH10的siRNA序列,构建shRNA表达载体并进行重组慢病毒包装,重组病毒感染MCF-7/TXT细胞,转染后72 h通过荧光标记物确认细胞感染效率,收集转染后细胞,Real-Time PCR和Western blotting分别检测转染后细胞内UbcH10mRNA及蛋白含量变化;CCK-8检测基因沉默对MCF-7/TXT化疗药物敏感性的影响。结果在MCF-7/TXT细胞中成功进行了UbcH10基因沉默实验,病毒感染后72 h细胞的感染效率达到约90%,细胞内UbcH10mRNA和蛋白相对含量明显降低,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);UbcH10基因沉默可以明显增强MCF-7/TXT对多西他赛的药物敏感性,多西他赛对基因干预组和对照组细胞的不同时间点IC50值明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 UbcH10沉默可显著增强乳腺癌耐药细胞MCF-7/TXT对多西他赛的化疗敏感性。 展开更多

关键词 MCF-7/TXT siRNA 慢病毒 ubch10 耐药性

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实时荧光定量PCR检测结直肠癌UbcH10基因的表达

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作者 陈世敏 陈英剑 +2 位作者 孙晓明 胡成进 刘贤锡 《放射免疫学杂志》 CAS 2010年第2期178-181,共4页

目的:通过检测UbcH10 mRNA在结直肠癌中的表达,探讨UbcH10作为结直肠癌诊断标志物的可能性。方法:采用Trizol提取组织总RNA,RT-PCR获得UbcH10 cDNA,实时荧光定量PCR检测45例结直肠癌患者肿瘤组织与相应癌旁正常组织中UbcH10 mRNA的丰度... 目的:通过检测UbcH10 mRNA在结直肠癌中的表达,探讨UbcH10作为结直肠癌诊断标志物的可能性。方法:采用Trizol提取组织总RNA,RT-PCR获得UbcH10 cDNA,实时荧光定量PCR检测45例结直肠癌患者肿瘤组织与相应癌旁正常组织中UbcH10 mRNA的丰度。结果:在所有肿瘤组织样本中UbcH10 mRNA的相对表达量与其自身的癌旁正常组织样本中的相对表达量相比明显升高,平均表达水平是正常组织的10倍以上(0.0802±0.0907vs0.0079±0.0088,P<0.01),其中超过20倍的占37.78%(17/45)。结论:UbcH10基因在结直肠癌患者肿瘤组织中过度表达,可作为结直肠癌诊断的潜在肿瘤标志物及结直肠癌基因治疗的新靶点。 展开更多

关键词 结直肠癌 泛素结合酶(ubch10) 实时定量PCR

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UbcH10在乳腺浸润性导管癌中的表达及预后分析 被引量：3

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作者 潘贇昊 郭善禹 +2 位作者 汪成 顾岩 包家林 《外科理论与实践》 2014年第1期47-52,共6页

目的:探讨UbcH10在乳腺浸润性导管癌中的表达及其与预后的关系。方法:采用免疫组化检测100例乳腺浸润性导管癌组织中UbcH10、ER、PR、Ki-67、p53和HER-2的表达差异,分析UbcH10表达与年龄、TNM分期、分化程度、ER、PR、Ki-67、p53表达及H... 目的:探讨UbcH10在乳腺浸润性导管癌中的表达及其与预后的关系。方法:采用免疫组化检测100例乳腺浸润性导管癌组织中UbcH10、ER、PR、Ki-67、p53和HER-2的表达差异,分析UbcH10表达与年龄、TNM分期、分化程度、ER、PR、Ki-67、p53表达及HER-2等特征及预后的相关性。结果:UbcH10在乳腺浸润性导管癌中高表达,在乳腺癌组织与癌旁组织及乳腺良性肿瘤中的表达存在显著差异;UbcH10的表达在不同分化程度之间和乳腺癌各分子分型之间有统计学差异;UbcH10的表达与Ki-67、HER-2表达有相关性;UbcH10的表达与病人年龄、肿块大小、区域淋巴结转移、肿瘤TNM分期、ER、PR、p53表达状态无相关性;UbcH10高表达组预后差,阳性表达的生存时间低于阴性表达。结论:UbcH10在乳腺浸润性导管癌中高表达,预后较差。 展开更多

关键词 乳腺癌 ubch10 预后 KI-67 HER-2

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泛素结合酶UBCH10在泌尿系肿瘤中的研究进展 被引量：3

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作者 王朝 李学东 《医学综述》 2020年第20期4049-4053,共5页

泛素结合酶也称泛素偶联酶,泛素结合酶UBCH10是泛素结合酶体系中重要的部分。UBCH10表达异常与人类泌尿系肿瘤的发生、发展密切相关,其不仅参与了肿瘤细胞的增殖、分化等调控过程,还与乳腺癌、甲状腺癌、直肠癌等多种肿瘤进展具有高度... 泛素结合酶也称泛素偶联酶,泛素结合酶UBCH10是泛素结合酶体系中重要的部分。UBCH10表达异常与人类泌尿系肿瘤的发生、发展密切相关,其不仅参与了肿瘤细胞的增殖、分化等调控过程,还与乳腺癌、甲状腺癌、直肠癌等多种肿瘤进展具有高度相关性。UBCH10为泌尿系肿瘤的诊断、检查提供了新方式,为患者较低不舒适性以及早发现、早治疗提供了可能。泛素化进程中UBCH10在泌尿系肿瘤的发生、发展及预后中发挥致瘤作用,但UBCH10很有可能成为泌尿系肿瘤患者的新诊疗手段,其在泌尿系肿瘤的作用机制还需要进一步研究。 展开更多

关键词 泌尿系肿瘤 泛素-蛋白酶体通路 ubch10

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肝癌组织中miR-7-5p、UbcH10表达水平与患者临床预后的相关性研究 被引量：2

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作者 檀喜玲 冯喆 高芳 《国际检验医学杂志》 CAS 2022年第17期2146-2151,共6页

目的探讨原发性肝癌(简称肝癌)组织中微小RNA(miR)-7-5p、UbcH10表达水平与患者临床预后的相关性。方法回顾性分析2017年12月至2018年12月间在邯郸市人民医院行肝癌切除手术治疗的57例肝癌患者临床资料,术中分别采集肝癌组织和癌旁组织5... 目的探讨原发性肝癌(简称肝癌)组织中微小RNA(miR)-7-5p、UbcH10表达水平与患者临床预后的相关性。方法回顾性分析2017年12月至2018年12月间在邯郸市人民医院行肝癌切除手术治疗的57例肝癌患者临床资料,术中分别采集肝癌组织和癌旁组织57份,采用荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)测定肝癌组织和癌旁组织中miR-7-5p及UbcH10的表达水平,分析癌组织中miR-7-5p及UbcH10表达水平与临床病理特征及预后的相关性。结果肝癌组织中miR-7-5p表达水平则明显低于癌旁组织,UbcH10表达水平显著高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.05);肝癌组织中miR-7-5p表达水平与分化程度、包膜形成、门静脉侵犯等特征相关(P<0.05);UbcH10相对表达与肿瘤最大径、分化程度、TNM分期、门静脉侵犯相关(P<0.05)。肝癌随访期无进展生存率为38.60%,miR-7-5p高表达患者无进展生存率为88.89%,miR-7-5p低表达患者无进展生存率为29.17%,差异有统计学意义(χ^(2)=12.390,P<0.001);UbcH10高表达患者无复发生存率(RFS)为52.50%,UbcH10低表达患者RFS为82.35%(χ^(2)=4.196,P=0.041)。结论肝癌组织中的miR-7-5p表达水平降低,而UbcH10表达水平升高,且均与肝癌病理特征及术后复发率密切相关,miR-7-5p及UbcH10可作为肝癌早期诊断和靶向治疗的生物分子标志物。 展开更多

关键词 原发性肝癌 微小RNA-7-5p ubch10 病理特征 预后

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泛素偶联酶UBE2C/UbcH10在消化道肿瘤中的研究进展

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作者 邓双萍 王雯 《肿瘤学杂志》 CAS 2014年第9期758-761,共4页

素偶联酶UBE2C是泛素—蛋白酶体通路(UPP)中重要的成员之一,UBE2C/UbcH10的过表达不仅与恶性肿瘤的病因学有直接关系,并且与恶性肿瘤的发展和预后有着密切的关系,该文就泛素偶联酶的结构功能、作用机制及其在消化道肿瘤中的研究进展作... 素偶联酶UBE2C是泛素—蛋白酶体通路(UPP)中重要的成员之一,UBE2C/UbcH10的过表达不仅与恶性肿瘤的病因学有直接关系,并且与恶性肿瘤的发展和预后有着密切的关系,该文就泛素偶联酶的结构功能、作用机制及其在消化道肿瘤中的研究进展作一综述,为其用于消化道肿瘤病因学研究提供理论基础。 展开更多

关键词 泛素—蛋白酶体通路 UBE2C ubch10 消化道肿瘤

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