卡他莫拉菌UspA1蛋白多克隆抗体的制备及鉴定 被引量：9

1

作者 王辉 杨波 +8 位作者 赵可胜 李家吉 李新 孔萌萌 宫春杰 王毅 陶冶 张秋 胡征 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期102-109,共8页

为制备抗卡他莫拉菌(Moraxella catarrhalis,Mc)表面蛋白UspA1胞外结构域的多克隆抗体(PcAb),对UspA1蛋白进行生物信息学分析,获取胞外结构域中抗原表位最为丰富的肽段,找到其对应的基因序列并引入大肠杆菌偏好性密码子,对其优化后化学... 为制备抗卡他莫拉菌(Moraxella catarrhalis,Mc)表面蛋白UspA1胞外结构域的多克隆抗体(PcAb),对UspA1蛋白进行生物信息学分析,获取胞外结构域中抗原表位最为丰富的肽段,找到其对应的基因序列并引入大肠杆菌偏好性密码子,对其优化后化学合成全基因序列。将该基因序列按常规方法克隆入表达载体p ET-28a(+)后表达重组UspA1-His融合蛋白并纯化。以该纯化抗原免疫新西兰大白兔,经4次免疫后,用Protein A亲和层析柱从抗血清中纯化出抗UspA1-His融合蛋白PcAbIgG。经免疫荧光法、酶联免疫吸附法及Western blotting鉴定,抗UspA1-His融合蛋白PcAb能特异性识别UspA1蛋白的表面暴露区。该多抗的制备为下一步建立卡他莫拉菌快速检测技术奠定了基础。 展开更多

关键词 卡他莫拉菌 uspa1蛋白 原核表达 多克隆抗体

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HLA-B_(27)阳性的强弱对血清阴性脊柱关节病的影响评估 被引量：3

2

作者 陈睿 宋恒平 +2 位作者 倪凤民 邵先安 张皓 《颈腰痛杂志》 2013年第4期333-335,共3页

目的探讨HLA-B27的阳性强弱对血清阴性脊柱关节病(SPA)诸病种的诊治影响评估。方法 78例SPA(血清阴性脊柱关节病)中AS(强直性脊柱炎)32例,USPA(未分化脊柱关节病)42例,PSA 3例,ReA1例,计HLA-B27强阳性4例,阳性30例,弱阳性40例,阴性4例... 目的探讨HLA-B27的阳性强弱对血清阴性脊柱关节病(SPA)诸病种的诊治影响评估。方法 78例SPA(血清阴性脊柱关节病)中AS(强直性脊柱炎)32例,USPA(未分化脊柱关节病)42例,PSA 3例,ReA1例,计HLA-B27强阳性4例,阳性30例,弱阳性40例,阴性4例。结果随访2～20年,1例HLA-B27强阳性AS患者不遵医嘱治疗,6年后两髋关节损害致残,其他3例HLA-B27强阳性患者急性发作多次,但病情控制较好,30例HLA-B27阳性患者中3例失访,其他按正规抗AS治疗,病情平稳其中男性28例。40例HLA-B27弱阳性患者中有2例在1～4年后被确诊为AS,1例被诊断反应性关节炎,且女性有29例,其他病情平稳,HLA-B27阴性4例,行抗AS治疗,骶髂关节炎在Ⅰ～Ⅱ级之间未进一步发展。结论 HLA-B27强阳性及阳性SPA多见于男性,病情发展快,难以控制病情,HLA-B27强阳性SPA患者致残率高,HLA-B27弱阳性的SPA、USPA患者多见于女性,症状一般较轻,易于控制。HLA-B27阴性SPA患者更较少见,病情发展慢,且易于控制发展。 展开更多

关键词 HLA-B27 SPA ASuspa

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未分化脊柱关节病76例临床分析 被引量：2

3

作者 殷松楼 凌宏威 +2 位作者 殷寒秋 张锦 李伟 《徐州医学院学报》 CAS 2002年第2期162-163,共2页

目的　分析未分化脊柱关节病 (USPA)的临床特点 ,以提高对USPA的认识。方法　收集本院门诊和病房一年中诊治的USPA患者 76例 ,强直性脊柱炎 (AS)患者 2 4例 ,分析比较其临床特点。结果　USPA常为下肢单关节发病 ,多表现附着点炎 ,症状... 目的　分析未分化脊柱关节病 (USPA)的临床特点 ,以提高对USPA的认识。方法　收集本院门诊和病房一年中诊治的USPA患者 76例 ,强直性脊柱炎 (AS)患者 2 4例 ,分析比较其临床特点。结果　USPA常为下肢单关节发病 ,多表现附着点炎 ,症状轻 ,脊柱功能受限不明显 ;USPA女性比例 (男∶女 =2 .2∶1)高于AS(男∶女 =2 3∶1) ,人类白细胞抗原B2 7(HLA -B2 7)阳性率 (4 7%)明显低于AS(86 %) ;USPA骶髂关节X线有改变者为 14%,38例无X线改变者行CT检查 17例有骶髂关节炎。结论　USPA是常见的血清阴性脊柱关节病 ,症状轻 ,临床表现不典型 ,应引起重视 ,建议诊断USPA时使用Amor或ESSG标准。 展开更多

关键词 未分化脊柱关节病 强直性脊柱炎 uspa的临床分析

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基于角色块的工作流模型挖掘 被引量：1

4

作者 赵卫东 戴伟辉 《系统工程与电子技术》 EI CSCD 北大核心 2008年第5期956-959,共4页

工作流挖掘可以从工作流日志中提取信息以获取工作流模型,但以往的研究得到的工作流模型基本上是基于活动的。首先对URPA模型进行了扩展,得到基于角色块的USPA模型。在此基础上,提出了一种基于角色活动图RAD的工作流模型挖掘算法。该算... 工作流挖掘可以从工作流日志中提取信息以获取工作流模型,但以往的研究得到的工作流模型基本上是基于活动的。首先对URPA模型进行了扩展,得到基于角色块的USPA模型。在此基础上,提出了一种基于角色活动图RAD的工作流模型挖掘算法。该算法利用管理者角色,以角色块结构表示工作流模型,满足US-PA模型。 展开更多

关键词 工作流挖掘 角色 URPA模型 uspa模型 工作流模型

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未分化脊柱关节病临床特点及转归 被引量：1

5

作者 康春来 常胜男 魏瑞华 《中国冶金工业医学杂志》 2007年第1期57-58,共2页

关键词 未分化脊柱关节病 临床特点 转归 血清阴性脊柱关节病 反应性关节炎 诊断分类标准 uspa 强直性脊柱炎

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80例未分化脊柱关节病病人抑郁情况调查

6

作者 连芬萍 孙树萍 潘瑞 《护理研究（中旬版）》 2009年第8期2090-2091,共2页

关键词 未分化脊柱关节病 抑郁情况 Zung抑郁量表 强直性脊柱炎 银屑病关节炎 uspa 功能受限 放射学表现

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大豆Usp1基因的克隆和表达分析 被引量：7

7

作者 黄姗 王伟旗 侯文胜 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期546-551,共6页

在对大豆根系盐胁迫抑制差减杂交文库EST序列分析的基础上,利用RT-PCR技术克隆得到了一个大豆Us-pA基因,命名为GmUsp1,其编码一个包含164个氨基酸残基的多肽链。多序列比对和编码蛋白结构分析表明,GmUsp1属于泛应激蛋白(Universal Stres... 在对大豆根系盐胁迫抑制差减杂交文库EST序列分析的基础上,利用RT-PCR技术克隆得到了一个大豆Us-pA基因,命名为GmUsp1,其编码一个包含164个氨基酸残基的多肽链。多序列比对和编码蛋白结构分析表明,GmUsp1属于泛应激蛋白(Universal Stress Protein)家族成员之一。其氨基酸序列与蚕豆Vf_enod18序列相似度最高,属于MJ-0577类中含有ATP结合位点的UspA亚族,与MJ-0577有相似的蛋白二级结构。分别采用250 mmol.L-1NaCl、100μmol.L-1ABA和30%PEG 6000进行胁迫处理,耐盐品种文丰7号和盐敏感品种Union的GmUsp1均被诱导表达,二者对胁迫诱导响应时间和表达量存在差异,说明GmUsp1可能参与大豆对非生物逆境胁迫的应答调控。 展开更多

关键词 大豆 uspa 序列分析 基因表达

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人呼吸道卡他莫拉菌快速检测胶体金试纸的研制 被引量：5

8

作者 黄莹琪 张秋 +3 位作者 陶冶 胡征 张改平 张华山 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期184-189,共6页

旨在研制一种快速、简便检测呼吸道感染病人呼吸道中卡他莫拉菌的试纸,并建立其检测方法。经生物信息学分析找到UspA1胞外结构域单一线性表位UspA1Line,偶联血蓝蛋白KLH形成复合蛋白UspA1Line-KLH,并利用已构建的表达UspA1抗原的工程菌... 旨在研制一种快速、简便检测呼吸道感染病人呼吸道中卡他莫拉菌的试纸,并建立其检测方法。经生物信息学分析找到UspA1胞外结构域单一线性表位UspA1Line,偶联血蓝蛋白KLH形成复合蛋白UspA1Line-KLH,并利用已构建的表达UspA1抗原的工程菌,表达纯化重组蛋白UspA1-His,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,取血清后利用Protein A亲和层析和多肽亲和层析两步纯化抗体,得到纯度高,特异性强的多克隆抗体。采用柠檬酸三钠还原法制备40 nm胶体金颗粒,与多克隆抗体结合,形成双抗体夹心,达到快速检测卡他莫拉菌的目的。结果显示,建立的检测方法可在10 min内完成对样本的检测,特异性检出样本中卡他莫拉菌,与其他常见的呼吸道病原菌无交叉反应,试纸条在24℃保存具有良好的重复性和稳定性。成功研制了可快速检测卡他莫拉菌的胶体金试纸条。 展开更多

关键词 卡他莫拉菌 单一线性表位 uspa1 免疫层析法

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卡他莫拉菌实时荧光PCR检测方法的建立 被引量：1

9

作者 侯昊 程雨洁 +4 位作者 朱辉煌 孔萌萌 王毅 杨波 胡征 《生物技术》 CAS 2022年第6期693-698,共6页

[目的]建立基于SYBR GreenⅠ染料法的卡他莫拉菌实时荧光PCR检测方法。[方法]选取卡他莫拉菌两个的基因(uspA1和copB)设计特异性引物;提取卡他莫拉菌、嗜肺军团菌等11种呼吸道病原体的DNA,通过常规PCR和实时荧光PCR对引物的特异性进行验... [目的]建立基于SYBR GreenⅠ染料法的卡他莫拉菌实时荧光PCR检测方法。[方法]选取卡他莫拉菌两个的基因(uspA1和copB)设计特异性引物;提取卡他莫拉菌、嗜肺军团菌等11种呼吸道病原体的DNA,通过常规PCR和实时荧光PCR对引物的特异性进行验证;以卡他莫拉菌DNA为模板进行实时荧光PCR,获取扩增曲线、标准曲线、熔解曲线和熔解峰图,并判断检测方法的灵敏度;进行重复性试验,评估检测方法的组内和组间重复性;通过模拟临床样本,对检测方法的灵敏度进行验证。[结果]共设计出3对引物,对嗜肺军团菌等10种呼吸道病原体具有特异性;对卡他莫拉菌的最低检出浓度为1.0×10^(3)cfu/mL;组内和组间最大变异系数分别为1.78%、1.89%;模拟的临床试验结果与预期相符。[结论]成功建立了卡他莫拉菌的实时荧光PCR检测方法,与10种常见的呼吸道病原体无交叉反应,且重复性变异系数小于2%,模拟临床试验灵敏度结果达到1.0×10^(3)cfu/mL。 展开更多

关键词 卡他莫拉菌 实时荧光PCR uspa1 copB 呼吸道病原体

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SPECT、CT对脊柱关节病的诊断价值 被引量：4

10

作者 李俊雄 黄旭璇 +1 位作者 欧阳亮 林琛 《同位素》 CAS 2002年第3期185-187,共3页

为探讨CT、SPECT对脊柱关节病(SpA)的诊断价值,将临床诊断为SpA的102例患者,包括强直性脊柱炎(AS)63例,未分化脊柱关节病(uSpA)39例,分别进行CT骶髂关节扫描及SPECT全身及骶髂关节局部骨显像。结果显示,SPECT对AS的诊断总阳性率为50.8%(... 为探讨CT、SPECT对脊柱关节病(SpA)的诊断价值,将临床诊断为SpA的102例患者,包括强直性脊柱炎(AS)63例,未分化脊柱关节病(uSpA)39例,分别进行CT骶髂关节扫描及SPECT全身及骶髂关节局部骨显像。结果显示,SPECT对AS的诊断总阳性率为50.8%(32/63),而且随着病情的发展而下降。CT对检查uSpA的阳性率仅为15.4%(6/39),远低于SPECT的阳性率82.1%(32/39)。因此,SPECT作为早期诊断SpA尤其是uSpA较CT敏感,并可作为AS治疗监测的重要手段,对临床SpA诊治具有重要意义。 展开更多

关键词 诊断 脊柱关节病 未分化脊柱关节病 强直性脊柱炎 SPECT CT 放射性核素 X射线

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人卡他莫拉单克隆抗体胶体金试纸的制备及初步应用 被引量：2

11

作者 郝惠文 任萌 +4 位作者 宋慧茹 程雨洁 杨波 王毅 胡征 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第6期634-637,641,共5页

目的制备抗UspA1蛋白单克隆抗体,研制能快速、灵敏、准确检测卡他莫拉菌的胶体金免疫层析试纸,以期用于人卡他莫拉菌的临床检测。方法将重组UspA1-His蛋白作为抗原,免疫小鼠,并制备单克隆抗体;通过Western blot技术以及免疫荧光技术鉴... 目的制备抗UspA1蛋白单克隆抗体,研制能快速、灵敏、准确检测卡他莫拉菌的胶体金免疫层析试纸,以期用于人卡他莫拉菌的临床检测。方法将重组UspA1-His蛋白作为抗原,免疫小鼠,并制备单克隆抗体;通过Western blot技术以及免疫荧光技术鉴定抗体的特异性;以双抗体夹心的原理研制胶体金免疫层析检测试纸条,并对其特异性、敏感性及稳定性进行评价分析。结果筛选出两株分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,经腹水制备纯化得到单克隆抗体,并验证了两种抗体均能特异性识别天然UspA1蛋白;利用双抗夹心原理制备的胶体金试纸能在10 min内快速检测卡他莫拉菌,检测灵敏度高(1×10~5 CFU/ml)、特异性强,与其他常见9种的呼吸道病原菌诸如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、肺炎支原体、嗜肺军团菌等无交叉反应;试纸条在37℃保存有良好的重复性和稳定性;200份临床样品检测结果与平板培养法的阳性符合率为93.3%。结论本研究制备了特异性强的抗UspA1蛋白单克隆抗体;以此研制的胶体金免疫层析试纸可快速、简便、灵敏的检测卡他莫拉菌,适用于呼吸道感染的临床快速检测。 展开更多

关键词 卡他莫拉菌 单克隆抗体 uspa1蛋白 胶体金免疫层析法

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CT检查在未分化脊柱关节病中的诊断价值

12

作者 牛丽萍 吴江 陈大奇 《中国药物与临床》 CAS 2005年第5期377-378,共2页

关键词 CT检查 未分化脊柱关节病 uspa 放射学 骶髂关节

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未分化脊柱关节病15年随访分析 被引量：18

13

作者 肖征宇 曾庆馀 +2 位作者 黄少弼 许杰洲 林玲 《风湿病学杂志》 CAS CSCD 2000年第2期120-121,共2页

关键词 脊柱关节病 未分化 uspa 诊断 治疗

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HLA-B27检测的进展及其临床意义 被引量：9

14

作者 张江林 黄烽 《中国实用内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期313-315,共3页

关键词 HLA-B27 检测 临床意义 脊柱关节病 uspa

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未分化脊柱关节病83例临床分析 被引量：19

15

作者 张文 孙维生 +1 位作者 张帆 张乃峥 《风湿病学杂志》 CSCD 2000年第4期218-221,共4页

目的　了解未分化脊柱关节病 (uSpA)的发病情况及临床特点。方法　收集半年内就诊于门诊的 10 2例血清阴性脊柱关节病患者 ,其中 83例属uSpA ,均不符合国际上通用的强直性脊柱炎 (AS)或其他肯定的血清阴性脊柱关节病 (如银屑病性关节炎... 目的　了解未分化脊柱关节病 (uSpA)的发病情况及临床特点。方法　收集半年内就诊于门诊的 10 2例血清阴性脊柱关节病患者 ,其中 83例属uSpA ,均不符合国际上通用的强直性脊柱炎 (AS)或其他肯定的血清阴性脊柱关节病 (如银屑病性关节炎、瑞特综合征、肠病性关节炎等 )的诊断标准 (如修订的纽约标准、美国风湿病学学会分类标准 ) ,对此 83例进行了临床分析。结果　uS pA患者男女比例为 1 6∶1,女性比例较AS组明显高 ,平均年龄 2 8 8岁 ,平均病程 3 1年。临床症状较AS轻 ,均无腰椎活动受限 ;uSpA组患者HLA B2 7阳性率低于AS组 ;有 4例晚起病的 (5 0岁以后 )AS患者 ;不一定有骶髂关节炎 ;普通X线及CT诊断骶髂关节炎者分别占 34 %和 73%。 89 1%符合Amor标准 ,85 6 %符合欧洲脊柱关节病研究组 (ESSG)标准。结论　uSpA在血清阴性脊柱关节病中占很大比重 ,临床工作中应给予足够的重视。推荐用Amor和ESSG标准进行诊断。该病的治疗和转归还有待于长期的随诊观察。 展开更多

关键词 未分化血清阴性脊柱关切病 诊断 uspa Amor ESSG

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强直性脊柱炎和未分化脊柱关节病患者血清转化生长因子β1水平及依那西普对其的影响 被引量：4

16

作者 林曲 古洁若 +1 位作者 魏秋静 廖泽涛 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期852-853,共2页

强直性脊柱炎（As）与未分化脊柱关节病（USpA）是脊柱关节病（SpA）较常见的临床类型。转化生长因子β1（TGFβ1）在调节细胞生长、分化，促进细胞外基质堆积、骨重建、创伤修复等方面发挥重要作用，但TGFβ1在SpA的炎症、纤维化及骨... 强直性脊柱炎（As）与未分化脊柱关节病（USpA）是脊柱关节病（SpA）较常见的临床类型。转化生长因子β1（TGFβ1）在调节细胞生长、分化，促进细胞外基质堆积、骨重建、创伤修复等方面发挥重要作用，但TGFβ1在SpA的炎症、纤维化及骨化等发病过程中的作用目前尚不十分清楚。依那西普是重组人Ⅱ型TNFα受体一抗体融合蛋白，本研究通过检测依那西普治疗前后AS、USpA患者血清TGFβ1水平，探讨TGFβ1在AS、USpA发病中的意义。 展开更多

关键词 血清转化生长因子Β1 未分化脊柱关节病 强直性脊柱炎 依那西普 TGFΒ1 病患 抗体融合蛋白 uspa

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未分化脊柱关节病伴发臭鼻克雷伯杆菌感染性关节炎—例

17

作者 庄世民 林星 +2 位作者 李珠华 郑巧文 何飞 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期22-22,共1页

关键词 未分化脊柱关节病 感染性关节炎 臭鼻克雷伯杆菌 伴发 类风湿关节炎 文献报道 uspa

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风湿性疾病中高同型半胱氨酸血症的临床研究 被引量：12

18

作者 徐晓 周卫华 +2 位作者 肖传实 李小峰 王来远 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期111-114,共4页

　目的　分析多种风湿性疾病患者血浆中同型半胱氨酸(Hcy)水平及其相关因素。方法脊柱关节病(uSpA)患者和 62例正常对照的Hcy、VitB12、叶酸的水平和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因 677位的多态性。结果　(1)各疾病组Hcy水平分别为:SL... 　目的　分析多种风湿性疾病患者血浆中同型半胱氨酸(Hcy)水平及其相关因素。方法脊柱关节病(uSpA)患者和 62例正常对照的Hcy、VitB12、叶酸的水平和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因 677位的多态性。结果　(1)各疾病组Hcy水平分别为:SLE组 (19 04±6 86)μmol/L,RA组(19 07±7 43)μmol/L,AS组(16 47±6 50)μmol/L,uSpA组(16 59±6 72)μmol/L,对照组(12 24±3 58)μmol/L,各疾病组Hcy水平明显较对照组高,其差异有统计学意义 (P<0 01 ); ( 2 )Hcy与VitB12、叶酸呈负相关,相关系数分别为-0 701和-0 443,P<0 01; (3)MTHFR基因 677位C→T的突变使Hcy水平升高, CC型 ( 13 41±5 78 )μmol/L,CT型 ( 16 81±4 22 )μmol/L,TT型(20 88±6 60)μmol/L,P<0 01;TT基因型是高Hcy血症的易感基因 (OR=84 46,P<0 05);TT基因型还是SLE的易感基因(OR=7 56,P<0 05)。结论　(1)SLE、RA、AS、uSpA4种疾病患者普遍存在高Hcy血症。(2)导致高Hcy血症的原因可能有叶酸、VitB12的水平降低和MTHFR基因的突变。(3)TT型基因是Hcy异常升高的易感基因,也是SLE的易感基因。 展开更多

关键词 高同型半胱氨酸血症 风湿性疾病 临床研究 亚甲基四氢叶酸还原酶 MTHFR基因 VITB12 高HCY血症 mol/L 未分化脊柱关节病 系统性红斑狼疮 易感基因 类风湿关节炎 强直性脊柱炎 SLE 患者血浆 正常对照 uspa 相关系数 疾病患者

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