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USF-1差异调节乳腺癌细胞mTOR启动子SNP的分子机制
1
作者 丁香玉 陈秋晨 +2 位作者 王秀芳 孙桐 赵琳 《解剖科学进展》 CAS 2023年第4期427-429,共3页
目的研究USF-1差异调节mTOR启动子区遗传变异的分子机制。方法选择与mTOR启动子rs2295079 C>G差异结合的转录因子USF1为研究对象,构建含有G基因型mTOR启动子的荧光素酶质粒pGL3-Pro-G,构建含有C基因型mTOR启动子的荧光素酶质粒pGL3-P... 目的研究USF-1差异调节mTOR启动子区遗传变异的分子机制。方法选择与mTOR启动子rs2295079 C>G差异结合的转录因子USF1为研究对象,构建含有G基因型mTOR启动子的荧光素酶质粒pGL3-Pro-G,构建含有C基因型mTOR启动子的荧光素酶质粒pGL3-Pro-C和USF-1过表达质粒pcDNA3.1-USF-1;构建含有G基因型mTOR启动子的绿色荧光蛋白质粒GFP-Pro-G和含有C基因型mTOR启动子的绿色荧光蛋白质粒GFP-Pro-C。通过293T工具细胞及MCF-7乳腺癌细胞检测不同基因型mTOR启动子的荧光素酶活性差异,并检测USF-1对不同基因型mTOR启动子的差异调节。结果pGL3-Pro-C活性显著高于pGL3-Pro-G,转录因子USF-1可显著增加pGL3-Pro-C的荧光素酶活性,GFP-Pro-C的绿色荧光蛋白强度显著高于GFP-Pro-G,转录因子USF-1可显著增加GFP-Pro-C的绿色荧光蛋白强度。结论C基因型mTOR启动子活性显著高于G基因型mTOR启动子活性,USF-1选择性增加C基因型mTOR启动子活性,而对G基因型mTOR启动子活性无影响。 展开更多
关键词 usf-1 MTOR 乳腺癌 SNP
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水痘-带状疱疹病毒基因启动子分析 被引量：5
2
作者 王官清 井上直樹 野沢直樹 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期400-404,共5页
目的 从水痘-带状疱疹病毒（VZV）主要基因的启动子中找到最容易被VZV感染激活的启动子及其最短有效序列以构建VZV报告细胞系。方法 构建18个VZV开放读码框架（0RF）启动子的重组报告质粒，用基因转染瞬时表达分析法比较各启动子在VZV... 目的 从水痘-带状疱疹病毒（VZV）主要基因的启动子中找到最容易被VZV感染激活的启动子及其最短有效序列以构建VZV报告细胞系。方法 构建18个VZV开放读码框架（0RF）启动子的重组报告质粒，用基因转染瞬时表达分析法比较各启动子在VZV感染早期启动报告基因产物表达的活性；将最容易被激活的启动子从5′和3′端截短后构建截短启动子的重组报告质粒，比较各截短启动子的活性以找到启动子的最短有效序列；应用点定向突变技术将最短有效序列中细胞转录因子的结合序列进行碱基置换突变后比较突变启动子的启动活性。结果ⅥⅣ感染早期ORF9、ORF61和ORF66的启动子最容易被激活；ORF9启动子的最短有效序列位于-127～-34（93bp），其上游刺激因子（USF）结合序列的碱基置换突变后启动子活性降低50％；ORF61启动子的最短有效序列位于-227～-52（165bp），其Pbx-1结合序列的碱基置换突变后启动子活性增强一倍，但NF-κB结合序列的突变对启动子活性无影响。结论 ORF9启动子的最短有效序列最适合用来构建VZV报告细胞系。 展开更多
关键词 水痘-带状疱疹病毒 启动子 上游刺激因子 Pbx-1 NF-ΚB
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