三氧化二砷通过毛细血管扩张性共济失调突变和RAD3相关激酶通路上调KG1a细胞UL16结合蛋白1的表达 被引量：1

1

作者 姬曼曼 董家行 +3 位作者 崔姗姗 司晓慧 李雅慧 牛新清 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2020年第3期231-235,共5页

目的观察三氧化二砷(ATO)对急性髓系白血病细胞KG1a细胞表面NKG2D配体UL16结合蛋白1(ULBP1)表达的影响,探讨其调节ULBP1表达的分子机制。方法常规体外培养KG1a细胞,采用细胞增殖/毒性检测试剂(CCK8)检测不同浓度ATO对KG1a细胞的增殖抑制... 目的观察三氧化二砷(ATO)对急性髓系白血病细胞KG1a细胞表面NKG2D配体UL16结合蛋白1(ULBP1)表达的影响,探讨其调节ULBP1表达的分子机制。方法常规体外培养KG1a细胞,采用细胞增殖/毒性检测试剂(CCK8)检测不同浓度ATO对KG1a细胞的增殖抑制率;应用实时荧光定量反转录(RT)-PCR方法检测KG1a细胞ULBP1 mRNA表达的影响;流式细胞术检测ATO对KG1a细胞表面ULBP1蛋白表达的影响。加入毛细血管扩张性共济失调突变和RAD3相关激酶(ATM/ATR)抑制剂咖啡因,观察其是否影响ATO对KG1a细胞ULBP1 mRNA及蛋白的表达。采用Western blot法观察ATO对KG1a细胞中CHK1、CHK2蛋白及其磷酸化表达的影响。结果不同浓度(1、2、3、4、5μmol/L)ATO均可抑制KG1a细胞的增殖,呈浓度依赖性,其对KG1a细胞的半数抑制浓度(IC50值)为2.7μmol/L。荧光定量RT-PCR法检测结果示ATO可使KG1a细胞ULBP1 mRNA的相对表达水平升高,ATO在浓度分别为1、2、3、4、5μmol/L时,与未加药组比较,ULBP1 mRNA相对表达水平分别升高至(1.86±0.30)倍、(3.02±0.71)倍、(3.16±0.75)倍、(4.80±0.70)倍、(3.70±0.89)倍,差异均有统计学意义(均P<0.05);与未加药组相比,当ATO浓度分别为1、2、3、4、5μmol/L时,ULBP1蛋白相对表达水平均显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。咖啡因预先处理KG1a细胞2 h再联合ATO共同孵育KG1a细胞24 h,ULBP1 mRNA和蛋白表达水平均显著降低。在咖啡因浓度为8 mmol/L时,ULBP1 mRNA相对表达水平由不用咖啡因处理组的(9.55±0.38)倍降为(6.36±0.93)倍,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞术检测结果发现,当咖啡因浓度分别为2、4、8 mmol/L时,ULBP1蛋白相对表达水平由不用咖啡因处理组的(3.50±0.08)倍分别降为(2.17±0.07)倍、(2.02±0.06)倍、(1.75±0.06)倍,差异均有统计学意义(均P<0.05)。CHK1和CHK2蛋白相对表达水平均随ATO浓度的升高而降低,而CHK1和CHK2磷酸化蛋白的相对表达水平均随ATO浓度的升高而升高。结论ATO诱导上调KG1a细胞ULBP1 mRNA及蛋白的表达,ATM/ATR-CHK1/CHK2通路可能参与这一过程。 展开更多

关键词 三氧化二砷 KG1a细胞 自然杀伤细胞 ul16结合蛋白1 毛细血管扩张性共济失调突变和RAD3相关激酶通路

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UL16结合蛋白1在子痫前期孕妇外周血外泌体中表达的分析

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作者 彭靖斐 李点英 孟涛 《中国实用妇科与产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期930-933,共4页

目的探讨UL16结合蛋白1(ULBP1)在子痫前期(PE)患者外周血外泌体中的表达情况。方法选取2017年6月至2018年7月就诊于中国医科大学附属第一医院产科的PE患者(PE组)20例,正常对照组(NC组)为健康孕产妇20例,均为初产妇、单胎,留取空腹肘正... 目的探讨UL16结合蛋白1(ULBP1)在子痫前期(PE)患者外周血外泌体中的表达情况。方法选取2017年6月至2018年7月就诊于中国医科大学附属第一医院产科的PE患者(PE组)20例,正常对照组(NC组)为健康孕产妇20例,均为初产妇、单胎,留取空腹肘正中静脉血液标本。通过低速离心分离出血清,使用ExoQuick Precipitation kit试剂盒提取血清中的外泌体,采用蛋白免疫印迹实验(Western bolt)检测外泌体的标志蛋白CD63,使用透射电镜鉴定外泌体的形态,通过免疫酶联吸附试验(ELISA)检测外泌体中ULBP1的水平。结果 ULBP1在PE组外周血外泌体中的水平[(1.0500±0.5937)μg/L]高于NC组[(0.4875±0.4346)μg/L],差异具有统计学意义(P=0.0013)。结论 PE患者外周血外泌体中ULBP1的表达升高,其升高可能会为PE的诊治提供一定依据。 展开更多

关键词 子痫前期 外泌体 ul16结合蛋白1

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人ULBP1重组蛋白的克隆表达和多克隆抗体制备

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作者 蒋茜 施良 +1 位作者 牟笑 毛朝明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1300-1302,共3页

目的:表达人UL16结合蛋白1(ULBP1)胞外段重组蛋白,并制备兔抗人ULBP1多克隆抗体。方法:利用RT-PCR技术获得人ULBP1分子胞外段的基因编码序列,并将其亚克隆至原核表达载体pQE30,构建重组表达质粒pQE30-ULBP1。测序鉴定正确后转化入大肠... 目的:表达人UL16结合蛋白1(ULBP1)胞外段重组蛋白,并制备兔抗人ULBP1多克隆抗体。方法:利用RT-PCR技术获得人ULBP1分子胞外段的基因编码序列,并将其亚克隆至原核表达载体pQE30,构建重组表达质粒pQE30-ULBP1。测序鉴定正确后转化入大肠杆菌感受态细胞M15,经IPTG 30℃诱导4 h后,对表达产物进行鉴定。用镍柱对人ULBP1重组蛋白进行纯化,并将纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔,采用流式细胞术(FCM)、Western blot法对制备的多克隆抗体进行生物学鉴定。结果:成功构建了原核表达载体pQE30-ULBP1(aa81～244),并获得了高纯度的人pQE30-ULBP1(aa81～244)重组蛋白。制备的多克隆抗体能够识别肺癌细胞株A549表面表达的天然构象ULBP1分子。结论:成功表达了人ULBP1(aa81～244)重组蛋白并成功制备了兔抗人ULBP1的多克隆抗体。 展开更多

关键词 ul16结合蛋白1 重组蛋白 多克隆抗体

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HSV-1 UL30基因cDNA的克隆及筛选有效siRNA的融合载体构建 被引量：1

4

作者 何秋璟 张春龙 +5 位作者 仁哲 张美英 朱钦昌 刘秋英 张佩琢 王一飞 《生物技术》 CAS CSCD 2008年第3期1-4,共4页

目的:克隆HSV-1 UL30 cDNA并测序,构建pEGFP-N1-Fi融合表达载体,为靶向UL30基因的siRNA的设计和筛选奠定基础。方法:从感染HSV-1F株的病变VERO细胞提取总RNA,二次PCR扩增出UL30 cDNA并克隆至pEGFP-N1质粒,测序鉴定序列;将UL30 cDNA4个... 目的:克隆HSV-1 UL30 cDNA并测序,构建pEGFP-N1-Fi融合表达载体,为靶向UL30基因的siRNA的设计和筛选奠定基础。方法:从感染HSV-1F株的病变VERO细胞提取总RNA,二次PCR扩增出UL30 cDNA并克隆至pEGFP-N1质粒,测序鉴定序列;将UL30 cDNA4个小片段亚克隆至pEGFP-N1形成pEGFP-N1-Fi融合表达质粒,转染VERO细胞,荧光显微镜观察融合蛋白表达情况。结果:成功克隆出UL30 cDNA,序列对比显示与基因库中的HSV-1F株UL30序列同源性为99.4%;成功构建pEGFP-N1-Fi融合表达载体并实现Fi-EGFP融合蛋白的表达。结论:成功克隆出UL30 cDNA,成功构建pEGFP-N1-Fi融合表达载体,为靶向UL30基因的siRNA的设计和筛选奠定基础。 展开更多

关键词 UL30基因/警纯疱疹病毒1型 分子克隆 EGFP 融合表达载体

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siRNA干扰HSV-1 UL30 DNA聚合酶基因的研究

5

作者 张春龙 何秋璟 +5 位作者 仁哲 朱钦昌 张美英 刘秋英 张佩琢 王一飞 《生物技术》 CAS CSCD 2008年第5期11-16,共6页

目的:筛选高效沉默HSV-1UL30基因的siRNA,研究siRNA沉默UL30基因后对HSV-1繁殖的影响。方法:设计并化学合成12对靶向UL30基因的siRNA,与pEGFP-N1-Fi融合表达质粒共转染VERO细胞,流式细胞术筛选高效抑制Fi-EGFP融合蛋白的siRNA,实时荧光... 目的:筛选高效沉默HSV-1UL30基因的siRNA,研究siRNA沉默UL30基因后对HSV-1繁殖的影响。方法:设计并化学合成12对靶向UL30基因的siRNA,与pEGFP-N1-Fi融合表达质粒共转染VERO细胞,流式细胞术筛选高效抑制Fi-EGFP融合蛋白的siRNA,实时荧光定量PCR检测siRNA对感染细胞内UL30mRNA表达的抑制效果,CPE法和空斑减数实验评价siRNA对HSV-1繁殖的抑制效果。结果:共转染实验筛选出高效抑制Fi-EGFP融合蛋白的siRNA4、siRNA10及siRNA8,这3对siRNA均能显著降低感染细胞内UL30mRNA的表达水平及病变细胞释放到培养上清的子代病毒滴度,siRNA4和siRNA10在感染后36h对HSV-1的繁殖有明显的抑制效果,其病斑分别比对照组减少61.17%、51.46%(P<0.05),siRNA4、siRNA10及siRNA8组最终形成的空斑直径分别比对照组减小29.94%、23.49%、21.69%(P<0.01)。结论:筛选到高效抑制UL30的3对siRNAs,siRNA4及siRNA10在病斑形成早期对HSV-1的繁殖有明显的抑制效果,说明siRNA4、siRNA10及siRNA8均能延缓病斑的扩大和病斑数目的增长,对病毒的繁殖有一定的抑制效果。 展开更多

关键词 SIRNA RNA干扰 UL30基因/DNA聚合酶/HSV-1

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压缩机停机原因分析及故障处理

6

作者 丁纪伟 《自动化应用》 2016年第6期9-9,12,共2页

从指导保障压缩机组正常运行的角度出发,分析西二线西段霍尔果斯压气站2#压缩机停机故障原因,并给出合理处理此类故障的方法和建议,为电驱压缩机组运行管理提供指导。

关键词 DC UNDERVOLT E 02 ul1 UL2 UL3

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严格遵循测试安全标准

7

作者 金卫 《国外电子测量技术》 1996年第4期35-36,共2页

凡是推向市场的产品均不能让用户触电。运用安全标准可以确保产品——包括任何暴露的金属部分——能够安全地触摸。UL3111—1标准是用于电器测量和测试设备的安全标准。当产品尚处在试样阶段时,就应按UL3111—1标准进行测试。 必须注意,... 凡是推向市场的产品均不能让用户触电。运用安全标准可以确保产品——包括任何暴露的金属部分——能够安全地触摸。UL3111—1标准是用于电器测量和测试设备的安全标准。当产品尚处在试样阶段时,就应按UL3111—1标准进行测试。 必须注意,按UL3111—1安全标准规定,首先应测试可能潜在的危险电压,而不是仅仅测试漏电流。如果被测单元(UUT)在电压限制范围内,就可略去电流测量。 展开更多

关键词 过电压保护 测试安全标准 UL311-1

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美国最新电器安全通用要求—UL60335-1

8

作者 谢晋雄 鹿文军 徐蓓蓓 《中国检验检疫》 2001年第5期40-40,共1页

关键词 美国 UL60335-1 电器安全通用要求 IEC标准 内容编排 试验方法

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受限制电源与非危险能量电源的比较

9

作者 王卫波 李巍 《安全与电磁兼容》 2009年第2期86-88,共3页

信息技术设备标准(UL 60950-1)中,对产品能量等级有很细致的要求。受限制电源与非危险能量电源是在标准中涉及的关于能量等级的两个概念。介绍了受限制电源与非危险能量电源的定义、优势以及判别方法,以帮助大家更好地理解、区分两者。

关键词 UL60950—1 信息技术设备 防火 受限制电源 危险能量 安全特低电压

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美国/加拿大新版信息技术设备安全标准

10

作者 时米生 《安全与电磁兼容》 2003年第6期24-25,共2页

2003年4月1日,UL公司公布信息技术设备(Information Technology Equipment(ITE))安全标准:CSA C22.2 No.60950-1/UL 60950-1,第一版.并立即采用此标准审查信息技术设备(ITE)产品的安全认证.

关键词 美国 加拿大 信息技术设备 安全标准 CSA/UL60950—1第一版

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UL745-1与IEC745-1:1982(GB3883.1-1991)差异分析(续)

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作者 吴恺民 《电动工具》 2003年第4期13-16,共4页

19机械强度19.1取消弹簧冲击器的冲击试验代之以工具下落冲击或钢球冲击.

关键词 手持式电动工具 UL745-1 IEC745-1 GB3883.1-1991 标准 机械强度

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UL实施新标准电动工具进入北美市场门槛提高

12

《中国检验检疫》 2005年第2期58-58,共1页

美国安全检测实验室公司手持式电动工具标准UL60745-1已于2004年3月26日正式实施，从2007年6月1日后，老标准Ur745作废，正式执行UL60745-1标准。新标准UL60745-1与现行标准UL745的区别，主要有：

关键词 美国安全检测实验室公司 电动工具标准 UL60745-1 书写格式 检测项目

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UL60745-1∶2004与IEC60745-1∶2003之间的差异

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作者 施军晓 李建 《安全与电磁兼容》 2005年第2期34-38,共5页

UL60745-1∶2004是在IEC60745-1∶2003基础上编写的,它等效采用了IEC标准的内容并做了适当的增减。文章就两者之间的总体差异作了对比,概括了它们之间的主要差异,并列表说明了其具体差异内容。

关键词 UL60745-1 IEC60745-1 电动工具 差异分析 TIEC标准 手持式电动工具

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如何按照UL2601-1标准设计R型变压器

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作者 张艳 《电子变压器技术》 2003年第2期9-10,共2页

关键词 UL2601-1标准 R型变压器 绝缘材料 短路测试 耐压试验

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