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不同产地与制法的茶叶提取物中酪氨酸酶抑制剂活性的超高效液相色谱-生物化学检测在线评价
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作者 姚寒俊 刘军锋 +3 位作者 昝俊峰 宋学攀 董海莉 丁晓萍 《中国医院药学杂志》 北大核心 2025年第17期1987-1993,共7页
目的:建立茶叶中酪氨酸酶抑制剂快速筛选的超高效液相色谱(UHPLC)-生物化学检测(biochemical detection,BCD)在线联用分析方法,探讨主要活性成分的酶抑制类型及活性差异。方法:运用UHPLC-BCD方法快速筛选14批不同产地和制法茶叶中的酪... 目的:建立茶叶中酪氨酸酶抑制剂快速筛选的超高效液相色谱(UHPLC)-生物化学检测(biochemical detection,BCD)在线联用分析方法,探讨主要活性成分的酶抑制类型及活性差异。方法:运用UHPLC-BCD方法快速筛选14批不同产地和制法茶叶中的酪氨酸酶抑制剂,并运用超高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱鉴定主要活性成分,采用量-效关系评价不同茶叶提取物中酪氨酸酶抑制剂活性,通过酶动力学考察主要活性成分的酪氨酸酶抑制类型。结果:14批茶叶样品中抑制酪氨酸酶的主要活性成分是表没食子儿茶素(epigallocatechin,EGC)和表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG),并且2个成分的活性强度差异较大(EGC效价为0.138~1.580 mg·mL^(-1),EGCG为2.143~5.900mg·mL^(-1)),EGC和EGCG抑制酪氨酸酶的作用类型均为混合型抑制。结论:UHPLC-BCD方法可快速筛选复杂基质中酪氨酸酶抑制剂,客观评价大样本量提取物的活性差异,为天然活性物质的发现和复杂基质质量评价提供新的研究思路和方法。 展开更多
关键词 超高效液相色谱-生物化学检测在线联用分析方法 超高效液相-线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱 酪氨酸酶 茶叶 量-效关系 酶抑制活性 酶动力学
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运用超高效液相色谱-生物化学检测在线联用分析方法筛选中药中的丁酰胆碱酯酶抑制剂 被引量：4
2
作者 代磊 朱瑶 +4 位作者 代君怡 谭静玲 昝俊峰 丁晓萍 刘军锋 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2021年第15期1485-1490,共6页
目的:建立超高效液相色谱(UPLC)-生物化学检测(BCD)在线联用技术快速筛选中药中的丁酰胆碱酯酯酶(BChE)抑制剂的方法。方法:运用UPLC-DAD-BCD方法快速筛选吴茱萸、钩藤、苦参、山豆根提取物中的BChE抑制剂。以莲心碱为阳性对照,考察UPLC... 目的:建立超高效液相色谱(UPLC)-生物化学检测(BCD)在线联用技术快速筛选中药中的丁酰胆碱酯酯酶(BChE)抑制剂的方法。方法:运用UPLC-DAD-BCD方法快速筛选吴茱萸、钩藤、苦参、山豆根提取物中的BChE抑制剂。以莲心碱为阳性对照,考察UPLC-DAD-BCD方法用于BChE抑制剂筛选的可行性。运用超高效液相-线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-LTQ/Orbitrap MS)方法鉴定4种中药的70%甲醇提取物中的主要活性成分。结果:UPLC-DAD-BCD方法快速筛选出12个BChE抑制剂,其中吴茱萸4个、钩藤3个、苦参5个、山豆根2个,山豆根中的2个活性成分与苦参共有,通过UHPLC-LTQ/Orbitrap MS鉴定出其中的8个BChE抑制剂,分别为去氢吴茱萸碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、1-甲基-2-[(6Z,9Z)-6,9-十五二烯基]-4(1H)-喹诺酮、去氢毛钩藤碱、毛钩藤碱、苦参碱和氧化苦参碱。结论:建立的UPLC-DAD-BCD在线分析方法灵敏度高、重现性好,能快速筛选中药中的BChE抑制剂,为中药中新的生物活性成分的快速筛选提供了一种高效、便捷的分析策略。 展开更多
关键词 超高效液相色谱-生物化学检测在线联用技术 丁酰胆碱酯酶 超高效液相-线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱 吴茱萸 钩藤 苦参 山豆根
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运用UPLC-BCD方法快速筛选中草药中凝血酶抑制剂 被引量：2
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作者 陆娟 曹军华 +2 位作者 吕志刚 何婧 张俊卓 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2021年第22期2311-2314,共4页
目的:建立超高相液相色谱-生物化学检测(UPLC-BCD)分析方法快速筛选丹参、远志、蕲艾药材中凝血酶抑制剂,为中草药中生物活性成分的辨识提供一种便捷的技术手段。方法:运用UPLC分析技术,采用Xtimate UHPLC C;色谱柱(2.1 mm×100 mm,... 目的:建立超高相液相色谱-生物化学检测(UPLC-BCD)分析方法快速筛选丹参、远志、蕲艾药材中凝血酶抑制剂,为中草药中生物活性成分的辨识提供一种便捷的技术手段。方法:运用UPLC分析技术,采用Xtimate UHPLC C;色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.8μm),柱温30℃,流动相为甲醇(B)-0.1%甲酸水溶液(A),梯度洗脱,检测波长256 nm,体积流量0.2 mL·min^(-1)。以比伐卢定作为阳性对照,考察酶反应条件,建立UPLC-BCD分析方法检测3种药材提取物与凝血酶反应前后色谱特征图谱及酶反应产物的差异,评价3种药材凝血酶抑制作用、快速筛选所含酶抑制剂,采用超高效液相色谱-离子阱-静电场轨道阱质谱(UHPLC-LTQ/Orbitrap MS)方法鉴定酶抑成分。结果:丹参、远志和蕲艾均具有较好的凝血酶抑制作用,检出丹参和远志中7种酶抑制剂,初步鉴定为丹酚酸A、迷迭香酸、丹酚酸B、西伯利亚远志呫吨酮B、远志山酮Ⅲ、3,6’-二芥子酰基蔗糖、细叶远志苷A。蕲艾色谱峰在反应前后无明显变化,其酶抑制活性可能来源于色谱图未显示的其他成分。结论:建立的UPLC-BCD方法能够快速辨别复杂基质的酶抑制作用及酶抑制剂,为中草药中生物活性成分的快速筛选提供了快速、便捷的分析手段。 展开更多
关键词 超高效液相色谱-生物化学检测 凝血酶 酶抑制剂 超高效液相色谱-离子阱-静电场轨道阱质谱 丹参 远志 蕲艾
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