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矮牵牛PhUGT74E2基因的克隆及对逆境胁迫的响应
被引量：
2
1
作者
董丽丽
王雪娣
+3 位作者
刘同瑞
高迪
王琦
熊枫
《西北植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第10期1725-1730,共6页
糖基化转移酶(UGTs)能够维持植物体内的激素平衡,广泛参与植物的生长发育及逆境胁迫应答。该研究从矮牵牛(Petunia hybrida var. Mitchel diploid)中克隆了UGT74E2的同源基因PhUGT74E2及其启动子序列,并分析了序列特征和蛋白结构特点,...
糖基化转移酶(UGTs)能够维持植物体内的激素平衡,广泛参与植物的生长发育及逆境胁迫应答。该研究从矮牵牛(Petunia hybrida var. Mitchel diploid)中克隆了UGT74E2的同源基因PhUGT74E2及其启动子序列,并分析了序列特征和蛋白结构特点,同时采用qRT-PCR对该基因在不同组织、不同逆境胁迫下的转录水平进行了检测,以探讨矮牵牛UGT74E2基因的功能,为揭示其调控矮牵牛抗逆性的分子机制奠定基础。结果显示:(1)成功克隆获得矮牵牛UGT74E2基因全长序列,命名为PhUGT74E2。(2)PhUGT74E2基因cDNA全长1 986 bp,包含一个1 347 bp开放阅读框,编码448个氨基酸;其蛋白分子式为C2278H3544N586O676S18,分子量为50.53 kDa,等电点为5.18;PhUGT74E2无信号肽和跨膜域,主要定位于叶绿体;同时克隆了PhUGT74E2基因上游2 083 bp启动子序列,该序列中含有脱落酸、赤霉素、光及逆境等响应元件。(3)系统进化树分析显示,PhUGT74E2与其他物种UGT74E2起源相同,而与烟草NtUGT74E2的亲缘关系最近。(4)荧光定量PCR分析表明,PhUGT74E2基因在叶片、茎、根、叶腋和顶端5个组织中均有表达,其中叶腋中的表达量最高,而茎和根中的表达量最低;PEG6000模拟干旱处理及NaCl处理均引起了PhUGT74E2表达水平的显著上调,且随着时间的延长表达水平相应增加,说明PhUGT74E2能够参与矮牵牛对干旱及盐胁迫的响应。
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关键词
矮牵牛
ugt74
E2
启动子
干旱胁迫
盐胁迫
表达分析
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职称材料
膜荚黄芪黄酮糖基转移酶AmGT90的功能表征
2
作者
彭国情
徐冰艳
+2 位作者
黄建萍
余志银
黄胜雄
《中国中药杂志》
北大核心
2025年第6期1534-1543,共10页
黄芪作为一种传统补益中药,黄酮类化合物是其主要药效成分和质量标准检测成分之一,它们在植物体内经糖基化修饰后多以糖苷的形式存在。目前已报道的膜荚黄芪黄酮糖基转移酶的反应产物多为单糖苷,只有AmUGT28催化木犀草素生成双糖苷。该...
黄芪作为一种传统补益中药,黄酮类化合物是其主要药效成分和质量标准检测成分之一,它们在植物体内经糖基化修饰后多以糖苷的形式存在。目前已报道的膜荚黄芪黄酮糖基转移酶的反应产物多为单糖苷,只有AmUGT28催化木犀草素生成双糖苷。该研究从膜荚黄芪中克隆得到1条糖基转移酶基因AmGT90,其ORF长度为1335 bp,编码444个氨基酸,蛋白相对分子质量50.5 kDa。系统发育树分析表明,AmGT90属于UGT74家族。体外酶促反应发现,AmGT90具有宽泛的底物识别性,可催化异黄酮、黄酮、二氢黄酮和查尔酮等黄酮类化合物的糖基化。AmGT90不仅能催化生成单糖苷,还能催化生成双糖苷。此外,该研究还对AmGT90催化木犀草素生成双糖苷的机制进行了初步探究,结果表明AmGT90优先识别木犀草素的C4′-OH后识别C7-OH生成双糖苷。综上,该研究报道了膜荚黄芪中能催化黄酮类化合物生成单糖苷和双糖苷的糖基转移酶AmGT90,为认识和了解膜荚黄芪中黄酮苷类有效成分的生物合成途径奠定基础,也为利用合成生物学生产糖苷类物质提供了新的生物元件。
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关键词
膜荚黄芪
糖基转移酶
黄酮
ugt74
功能鉴定
原文传递
题名
矮牵牛PhUGT74E2基因的克隆及对逆境胁迫的响应
被引量：
2
1
作者
董丽丽
王雪娣
刘同瑞
高迪
王琦
熊枫
机构
安徽农业大学园艺学院
出处
《西北植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第10期1725-1730,共6页
基金
安徽省自然科学研究面上项目(1808085MC85)
国家自然科学基金(31902042)
文摘
糖基化转移酶(UGTs)能够维持植物体内的激素平衡,广泛参与植物的生长发育及逆境胁迫应答。该研究从矮牵牛(Petunia hybrida var. Mitchel diploid)中克隆了UGT74E2的同源基因PhUGT74E2及其启动子序列,并分析了序列特征和蛋白结构特点,同时采用qRT-PCR对该基因在不同组织、不同逆境胁迫下的转录水平进行了检测,以探讨矮牵牛UGT74E2基因的功能,为揭示其调控矮牵牛抗逆性的分子机制奠定基础。结果显示:(1)成功克隆获得矮牵牛UGT74E2基因全长序列,命名为PhUGT74E2。(2)PhUGT74E2基因cDNA全长1 986 bp,包含一个1 347 bp开放阅读框,编码448个氨基酸;其蛋白分子式为C2278H3544N586O676S18,分子量为50.53 kDa,等电点为5.18;PhUGT74E2无信号肽和跨膜域,主要定位于叶绿体;同时克隆了PhUGT74E2基因上游2 083 bp启动子序列,该序列中含有脱落酸、赤霉素、光及逆境等响应元件。(3)系统进化树分析显示,PhUGT74E2与其他物种UGT74E2起源相同,而与烟草NtUGT74E2的亲缘关系最近。(4)荧光定量PCR分析表明,PhUGT74E2基因在叶片、茎、根、叶腋和顶端5个组织中均有表达,其中叶腋中的表达量最高,而茎和根中的表达量最低;PEG6000模拟干旱处理及NaCl处理均引起了PhUGT74E2表达水平的显著上调,且随着时间的延长表达水平相应增加,说明PhUGT74E2能够参与矮牵牛对干旱及盐胁迫的响应。
关键词
矮牵牛
ugt74
E2
启动子
干旱胁迫
盐胁迫
表达分析
Keywords
Petunia hybrida
ugt74
E2
promoter
drought stress
salt stress
expression analysis
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
膜荚黄芪黄酮糖基转移酶AmGT90的功能表征
2
作者
彭国情
徐冰艳
黄建萍
余志银
黄胜雄
机构
成都中医药大学药学院
成都中医药大学中医药创新研究院
中国科学院昆明植物研究所植物化学与天然药物重点实验室
出处
《中国中药杂志》
北大核心
2025年第6期1534-1543,共10页
基金
国家自然科学基金杰出青年基金项目(82225043)。
文摘
黄芪作为一种传统补益中药,黄酮类化合物是其主要药效成分和质量标准检测成分之一,它们在植物体内经糖基化修饰后多以糖苷的形式存在。目前已报道的膜荚黄芪黄酮糖基转移酶的反应产物多为单糖苷,只有AmUGT28催化木犀草素生成双糖苷。该研究从膜荚黄芪中克隆得到1条糖基转移酶基因AmGT90,其ORF长度为1335 bp,编码444个氨基酸,蛋白相对分子质量50.5 kDa。系统发育树分析表明,AmGT90属于UGT74家族。体外酶促反应发现,AmGT90具有宽泛的底物识别性,可催化异黄酮、黄酮、二氢黄酮和查尔酮等黄酮类化合物的糖基化。AmGT90不仅能催化生成单糖苷,还能催化生成双糖苷。此外,该研究还对AmGT90催化木犀草素生成双糖苷的机制进行了初步探究,结果表明AmGT90优先识别木犀草素的C4′-OH后识别C7-OH生成双糖苷。综上,该研究报道了膜荚黄芪中能催化黄酮类化合物生成单糖苷和双糖苷的糖基转移酶AmGT90,为认识和了解膜荚黄芪中黄酮苷类有效成分的生物合成途径奠定基础,也为利用合成生物学生产糖苷类物质提供了新的生物元件。
关键词
膜荚黄芪
糖基转移酶
黄酮
ugt74
功能鉴定
Keywords
Astragalus membranaceus
glycosyltransferase
flavonoid
ugt74
functional characterization
分类号
R284 [医药卫生—中药学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
矮牵牛PhUGT74E2基因的克隆及对逆境胁迫的响应
董丽丽
王雪娣
刘同瑞
高迪
王琦
熊枫
《西北植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
膜荚黄芪黄酮糖基转移酶AmGT90的功能表征
彭国情
徐冰艳
黄建萍
余志银
黄胜雄
《中国中药杂志》
北大核心
2025
0
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