目的观察痰湿型多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠颗粒细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)(AMPK/UCP2)途径与线粒体功能的变化,探讨“痰湿不孕”的机制。方法选取动情周期规律S...目的观察痰湿型多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠颗粒细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)(AMPK/UCP2)途径与线粒体功能的变化,探讨“痰湿不孕”的机制。方法选取动情周期规律SD大鼠22只。运用高脂+来曲唑灌胃法复制痰湿型PCOS大鼠,随机分为对照组和模型组,造模成功后,取卵巢组织提取原代颗粒细胞,比色法检测三磷酸腺苷(ATP)含量;化学发光法检测活性氧(ROS)水平;Western blot法检测AMPKα、p-AMPKα及UCP2蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠颗粒细胞线粒体数量减少,出现肿胀,嵴断裂及空泡化改变;ATP降低、ROS增高(P<0.01);p-AMPKα/AMPKα比值降低(P<0.05);UCP2蛋白表达升高(P>0.05)。结论“痰湿不孕”可能与AMPK/UCP2途径所致的线粒体受损相关。展开更多
探讨温阳振衰颗粒调控微小核糖核酸-132-3p(microribonucleic acid-132-3p,miR-132-3p)/解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)表达对脓毒症大鼠心肌细胞自噬、凋亡的影响。取60只SD大鼠随机分为模型组(50只)和假手术组(10只)。模型...探讨温阳振衰颗粒调控微小核糖核酸-132-3p(microribonucleic acid-132-3p,miR-132-3p)/解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)表达对脓毒症大鼠心肌细胞自噬、凋亡的影响。取60只SD大鼠随机分为模型组(50只)和假手术组(10只)。模型组大鼠通过盲肠结扎穿孔术构建脓毒症大鼠模型,将建模成功的大鼠随机分为温阳振衰颗粒低、中、高剂量组,模型组,阳性对照组。假手术组大鼠仅开腹游离盲肠不进行穿孔结扎。苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察大鼠心肌组织病理学改变;原位末端标记法(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)检测大鼠心肌细胞凋亡;RT-qPCR检测大鼠心肌组织miR-132-3p表达、UCP2、微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ)、Beclin-1、半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)mRNA表达;Western blot检测大鼠心肌组织UCP2、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、caspase-3蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-132-3p与UCP2的调控关系。脓毒症模型大鼠心肌纤维排列紊乱,有明显炎症细胞浸润和心肌细胞水肿、坏死现象。随温阳振衰颗粒剂量的增加,心肌组织病理学改变均得到不同程度的改善。与假手术组比,模型组,阳性对照组,温阳振衰颗粒低、中、高剂量组大鼠生存率及LVEF降低,心肌损伤评分和细胞凋亡率升高;与模型组比,阳性对照组及温阳振衰颗粒低、中、高剂量组大鼠生存率及LVEF升高,心肌损伤评分和细胞凋亡率降低。与假手术组比,模型组,阳性对照组,温阳振衰颗粒低、中、高剂量组大鼠心肌组织miR-132-3p、UCP2 mRNA表达及蛋白表达降低,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、caspase-3 mRNA及蛋白表达升高;与模型组比,阳性对照组及温阳振衰颗粒低、中、高剂量组大鼠心肌组织miR-132-3p表达、UCP2 mRNA及蛋白表达升高,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、caspase-3 mRNA及蛋白表达降低。温阳振衰颗粒可抑制脓毒症大鼠心肌细胞过度自噬和凋亡,改善心肌损伤,可能是通过调控miR-132-3p/UCP2表达发挥上述作用的。展开更多
文摘目的观察痰湿型多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠颗粒细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)(AMPK/UCP2)途径与线粒体功能的变化,探讨“痰湿不孕”的机制。方法选取动情周期规律SD大鼠22只。运用高脂+来曲唑灌胃法复制痰湿型PCOS大鼠,随机分为对照组和模型组,造模成功后,取卵巢组织提取原代颗粒细胞,比色法检测三磷酸腺苷(ATP)含量;化学发光法检测活性氧(ROS)水平;Western blot法检测AMPKα、p-AMPKα及UCP2蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠颗粒细胞线粒体数量减少,出现肿胀,嵴断裂及空泡化改变;ATP降低、ROS增高(P<0.01);p-AMPKα/AMPKα比值降低(P<0.05);UCP2蛋白表达升高(P>0.05)。结论“痰湿不孕”可能与AMPK/UCP2途径所致的线粒体受损相关。
文摘探讨温阳振衰颗粒调控微小核糖核酸-132-3p(microribonucleic acid-132-3p,miR-132-3p)/解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)表达对脓毒症大鼠心肌细胞自噬、凋亡的影响。取60只SD大鼠随机分为模型组(50只)和假手术组(10只)。模型组大鼠通过盲肠结扎穿孔术构建脓毒症大鼠模型,将建模成功的大鼠随机分为温阳振衰颗粒低、中、高剂量组,模型组,阳性对照组。假手术组大鼠仅开腹游离盲肠不进行穿孔结扎。苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察大鼠心肌组织病理学改变;原位末端标记法(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)检测大鼠心肌细胞凋亡;RT-qPCR检测大鼠心肌组织miR-132-3p表达、UCP2、微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ)、Beclin-1、半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)mRNA表达;Western blot检测大鼠心肌组织UCP2、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、caspase-3蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-132-3p与UCP2的调控关系。脓毒症模型大鼠心肌纤维排列紊乱,有明显炎症细胞浸润和心肌细胞水肿、坏死现象。随温阳振衰颗粒剂量的增加,心肌组织病理学改变均得到不同程度的改善。与假手术组比,模型组,阳性对照组,温阳振衰颗粒低、中、高剂量组大鼠生存率及LVEF降低,心肌损伤评分和细胞凋亡率升高;与模型组比,阳性对照组及温阳振衰颗粒低、中、高剂量组大鼠生存率及LVEF升高,心肌损伤评分和细胞凋亡率降低。与假手术组比,模型组,阳性对照组,温阳振衰颗粒低、中、高剂量组大鼠心肌组织miR-132-3p、UCP2 mRNA表达及蛋白表达降低,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、caspase-3 mRNA及蛋白表达升高;与模型组比,阳性对照组及温阳振衰颗粒低、中、高剂量组大鼠心肌组织miR-132-3p表达、UCP2 mRNA及蛋白表达升高,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、caspase-3 mRNA及蛋白表达降低。温阳振衰颗粒可抑制脓毒症大鼠心肌细胞过度自噬和凋亡,改善心肌损伤,可能是通过调控miR-132-3p/UCP2表达发挥上述作用的。
