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小鼠泛素结合酶UBE2W的抗体制备及组织表达谱分析
被引量：
6
1
作者
张莹莹
朱恒奇
+2 位作者
赵莉霞
周晓巍
黄培堂
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期547-552,共6页
泛素结合酶(E2)是蛋白泛素化修饰所需的第二个连接酶,在泛素转移和底物特异性识别过程中发挥着重要作用。UBE2W是一种新发现的E2酶,其果蝇属同源蛋白可能在光转导或视网膜变性过程中发挥作用,鼠和人同源蛋白功能未见报道。生物信息学分...
泛素结合酶(E2)是蛋白泛素化修饰所需的第二个连接酶,在泛素转移和底物特异性识别过程中发挥着重要作用。UBE2W是一种新发现的E2酶,其果蝇属同源蛋白可能在光转导或视网膜变性过程中发挥作用,鼠和人同源蛋白功能未见报道。生物信息学分析UBE2W鼠源氨基酸序列,发现UBE2W具有典型的UBC结构域并在多种物种高度保守。通过构建UBE2W原核表达质粒,在大肠杆菌中表达并纯化了GST-UBE2W融合蛋白。以此纯化蛋白作为抗原免疫新西兰白兔制备抗UBE2W多抗血清,并利用制备的UBE2W抗原柱亲和纯化UBE2W多抗。为了检测纯化抗体特异性,在真核细胞中瞬时表达了myc-UBE2W融合蛋白,分别用myc单抗和UBE2W多抗进行Western blotting分析,结果表明获得了特异性的UBE2W抗体。利用此特异性抗体在小鼠脑、心脏、肾脏、肝脏、肺、肌肉、脾脏和睾丸等组织中均检测到了UBE2W的表达,且在小鼠睾丸中成年期表达最高。
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关键词
泛素结合酶
ube2w
抗体
组织表达谱
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职称材料
UBE2W抑制TNFα诱导的NF-κB转录活性
被引量：
4
2
作者
王少鑫
巩伟丽
+1 位作者
陈媛
靳宝锋
《科学技术与工程》
北大核心
2012年第35期9457-9460,共4页
UBE2W(ubiquitin-conjugating enzyme E2W)是一新的泛素结合酶,关于其功能研究甚少。采用双荧光报告系统和Western blot等方法,分别干涉和过表达UBE2W,分析UBE2W对TNF(刺激下NF-(B转录活性的影响。结果显示UBE2W能够显著抑制TNFα诱导的...
UBE2W(ubiquitin-conjugating enzyme E2W)是一新的泛素结合酶,关于其功能研究甚少。采用双荧光报告系统和Western blot等方法,分别干涉和过表达UBE2W,分析UBE2W对TNF(刺激下NF-(B转录活性的影响。结果显示UBE2W能够显著抑制TNFα诱导的NF-κB的转录活性,提示该基因可能参与NF-κB相关功能的调控。
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关键词
ube2w
NF-ΚB
TNFΑ
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职称材料
题名
小鼠泛素结合酶UBE2W的抗体制备及组织表达谱分析
被引量：
6
1
作者
张莹莹
朱恒奇
赵莉霞
周晓巍
黄培堂
机构
军事医学科学院生物工程研究所
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期547-552,共6页
基金
国家自然科学基金项目(No.30470379)资助~~
文摘
泛素结合酶(E2)是蛋白泛素化修饰所需的第二个连接酶,在泛素转移和底物特异性识别过程中发挥着重要作用。UBE2W是一种新发现的E2酶,其果蝇属同源蛋白可能在光转导或视网膜变性过程中发挥作用,鼠和人同源蛋白功能未见报道。生物信息学分析UBE2W鼠源氨基酸序列,发现UBE2W具有典型的UBC结构域并在多种物种高度保守。通过构建UBE2W原核表达质粒,在大肠杆菌中表达并纯化了GST-UBE2W融合蛋白。以此纯化蛋白作为抗原免疫新西兰白兔制备抗UBE2W多抗血清,并利用制备的UBE2W抗原柱亲和纯化UBE2W多抗。为了检测纯化抗体特异性,在真核细胞中瞬时表达了myc-UBE2W融合蛋白,分别用myc单抗和UBE2W多抗进行Western blotting分析,结果表明获得了特异性的UBE2W抗体。利用此特异性抗体在小鼠脑、心脏、肾脏、肝脏、肺、肌肉、脾脏和睾丸等组织中均检测到了UBE2W的表达,且在小鼠睾丸中成年期表达最高。
关键词
泛素结合酶
ube2w
抗体
组织表达谱
Keywords
ubiquitin conjugating enzyme,
ube2w
, antibody, tissue expression profile
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
UBE2W抑制TNFα诱导的NF-κB转录活性
被引量：
4
2
作者
王少鑫
巩伟丽
陈媛
靳宝锋
机构
国家生物医学分析中心
出处
《科学技术与工程》
北大核心
2012年第35期9457-9460,共4页
基金
国家自然科学基金项目(31071234)资助
文摘
UBE2W(ubiquitin-conjugating enzyme E2W)是一新的泛素结合酶,关于其功能研究甚少。采用双荧光报告系统和Western blot等方法,分别干涉和过表达UBE2W,分析UBE2W对TNF(刺激下NF-(B转录活性的影响。结果显示UBE2W能够显著抑制TNFα诱导的NF-κB的转录活性,提示该基因可能参与NF-κB相关功能的调控。
关键词
ube2w
NF-ΚB
TNFΑ
Keywords
ube2w
NF-KB TNFα
分类号
Q559 [生物学—生物化学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
小鼠泛素结合酶UBE2W的抗体制备及组织表达谱分析
张莹莹
朱恒奇
赵莉霞
周晓巍
黄培堂
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
6
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职称材料
2
UBE2W抑制TNFα诱导的NF-κB转录活性
王少鑫
巩伟丽
陈媛
靳宝锋
《科学技术与工程》
北大核心
2012
4
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