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Tyrobp基因参与抽动障碍模型小鼠神经炎性反应及相关机制 被引量：3
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作者 肖向荣 孙冉 +2 位作者 杨欣雨 李若林 郝延磊 《中华行为医学与脑科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1066-1072,共7页
目的探讨Tyrobp基因参与抽动障碍模型小鼠神经炎性反应及相关作用机制。方法6周龄C57BL/6J和Tyrobp^(-/-)雄性小鼠各20只,按照随机数字表法分为4组:野生型对照组(WT+NS组)、Tyrobp基因敲除对照组(Tyrobp^(-/-)+NS组)、野生型模型组(WT+I... 目的探讨Tyrobp基因参与抽动障碍模型小鼠神经炎性反应及相关作用机制。方法6周龄C57BL/6J和Tyrobp^(-/-)雄性小鼠各20只,按照随机数字表法分为4组:野生型对照组(WT+NS组)、Tyrobp基因敲除对照组(Tyrobp^(-/-)+NS组)、野生型模型组(WT+IDPN组)和Tyrobp基因敲除模型组(Tyrobp^(-/-)+IDPN组)。WT+IDPN组和Tyrobp^(-/-)+IDPN组小鼠连续7 d按150 mg/(kg·d)的剂量腹腔注射亚氨基二丙腈(3,3-iminodipropionitrile,IDPN)以建立抽动障碍小鼠模型,WT+NS组和Tyrobp^(-/-)+NS组小鼠腹腔注射等量生理盐水。造模结束后,对小鼠的刻板行为进行评估。采用Western blot检测大脑纹状体组织的酪氨酸激酶结合蛋白(tyrosine kinase binding protein,Tyrobp)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、Toll样受体4(Toll-like receptor,TLR4)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、磷酸化的核转录因子-κB(phospho-nuclear factor kappa B,p-NF-κB)p65、磷酸化的核因子-κB抑制蛋白α(phospho-inhibitor of NF-κB alpha,p-IκBα)的蛋白表达情况。采用免疫荧光染色观察脑组织小胶质细胞激活情况。采用GraphPad Prism 8.0软件对所得数据进行统计分析,两组数据比较采用t检验;多个样本均数比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD检验。结果刻板行为评估显示,四组小鼠的运动刻板行为和分类刻板行为评分均差异有统计学意义(F=270.9,379.7,均P<0.01)。WT+IDPN组小鼠的运动刻板行为和分类刻板行为评分均高于Tyrobp^(-/-)+IDPN组[运动刻板行为:(3.23±0.26)分,(2.13±0.21)分,t=9.02,P<0.05;分类刻板行为:(45.80±4.29)分,(26.60±3.48)分,t=12.00,P<0.05]。Western blot结果显示,各组小鼠纹状体TNF-α、IL-6、IL-1β、TLR4、Myd88、p-NF-κB p65、p-IκBα蛋白表达水平差异有统计学意义(F=29.07,23.09,39.36,57.6,52.55,15.50,40.48,均P<0.05)。WT+IDPN组蛋白水平高于WT+NS组(t=8.31,7.37,8.13,11.43,10.47,6.05,9.96,均P<0.05),Tyrobp^(-/-)+IDPN组蛋白水平高于Tyrobp^(-/-)+NS组(t=3.60,3.00,5.84,4.81,3.59,2.26,4.68,均P<0.05),WT+IDPN组蛋白水平高于Tyrobp^(-/-)+IDPN组(t=3.97,3.93,4.14,6.40,7.63,3.45,3.03,均P<0.05)。免疫荧光显示,WT+IDPN组和Tyrobp^(-/-)+IDPN组小鼠纹状体区小胶质细胞胞体增大,小胶质细胞呈激活状态,WT+IDPN组较Tyrobp^(-/-)+IDPN组小鼠小胶质细胞激活形态更明显。结论Tyrobp可能通过TLR4/Myd88/NF-κB信号通路参与神经炎性反应介导的抽动秽语综合征的发病机制。 展开更多
关键词 抽动秽语综合征 神经炎性反应 tyrobp基因 TOLL样受体4 小鼠
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有氧跑台运动对自然衰老模型小鼠血液单细胞类型与差异基因表达的影响
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作者 谭孟铨 王思诺 +8 位作者 李睿 王文举 江涛 谢希 陈凤 夏思佳 杨敏光 柳维林 吴铁成 《福建中医药》 2025年第10期16-24,共9页
目的探讨有氧跑台运动对自然衰老模型小鼠血液单细胞类型与差异基因表达的影响。方法将12只16月龄C57BL/6J雄性小鼠按照随机数字表法分为老年组和运动组各6只,取6只6月龄同品系小鼠作为成年组。运动组进行为期7周的有氢跑台运动:第1周... 目的探讨有氧跑台运动对自然衰老模型小鼠血液单细胞类型与差异基因表达的影响。方法将12只16月龄C57BL/6J雄性小鼠按照随机数字表法分为老年组和运动组各6只,取6只6月龄同品系小鼠作为成年组。运动组进行为期7周的有氢跑台运动:第1周进行适应性训练,初始运动速度为4 m/min,按每天2 m/min逐步递增至12 m/min,30 min/d,共5 d;第2周开始系统性训练,以5 m/min低强度进行热身5 min,随后以12 m/min速度完成50 min主训练,再以5 m/min低速运动5 min进行放松,每周7 d,持续6周。成年组、老年组放置于同规格静止水平跑台30 min/d,每周5 d,持续1周,第2周更改为1 h/d,每周7 d,持续6周。干预后采用巴恩斯迷宫系统定量评估3组小鼠运动功能(平均速度、运动距离);利用血液单细胞RNA测序分别检测3组血液单细胞类型和基因表达情况,比较老年组和成年组(2组合记为A组)与运动组和老年组(2组合记为B组)不同细胞类型的表达情况以及差异基因筛选情况,再分别从A组和B组的差异基因中筛选出组间差异倍数排名前5的标记(Marker)基因,分析其在不同细胞中的表达水平,最后将A组和B组的Marker基因取并集并进行KEGG通路富集分析。结果与成年组比较,老年组平均速度、运动距离均下降(P<0.05)。与老年组比较,运动组平均速度、运动距离均升高(P<0.05)。血液单细胞测序结果显示:在A组的血液中检测到45779个细胞,共9种细胞类型,分为24个细胞簇;在B组的血液中检测到45353个细胞,共7种细胞类型,分为21个细胞簇;与A组比较,B组中B细胞、造血干细胞增加,而自然杀伤细胞、刷细胞、T细胞、中性粒细胞减少;筛选出A组差异基因共49个,其中老年组较成年组表达上升的基因4个,表达下降的基因45个;筛选出B组表达差异基因共11个,其中运动组较老年组表达上升的基因7个,表达下降的基因4个;将A组表达差异基因和B组表达差异基因取交集,得到2个交集基因,分别是颗粒酶A基因(Gzma)和酪氨酸激酶结合蛋白基因(Tyrobp);将老年组较成年组表达下降的差异基因和运动组较老年组表达上升的差异基因取交集,得到Tyrobp基因;A组中排名前5的Marker基因分别是:S100钙结合蛋白A9(S100a9)、S100钙结合蛋白A8(S100a8)、趋化因子配体3(Ccl3)、趋化因子配体4(Ccl4)及Gzma。其中S100a9、S100a8基因在中性粒细胞、B细胞、自然杀伤细胞、造血干细胞、粒细胞、T细胞、巨噬细胞、刷细胞、间充质干细胞中表达;Ccl3、Ccl4基因在自然杀伤细胞和刷细胞中表达;Gzma基因在自然杀伤细胞中表达。B组中排名前5的Marker基因分别是:溶菌酶2(Lyz2)、干扰素诱导跨膜蛋白1(Ifitm1)、Ccl3、Ccl4、Gzma,其中Lyz2基因在中性粒细胞、B细胞、造血干细胞、自然杀伤细胞、单核细胞、T细胞、刷细胞中表达;Ifitm1基因在B细胞和刷细胞中表达;Ccl3、Ccl4基因在自然杀伤细胞和刷细胞中表达;Gzma基因在自然杀伤细胞中表达;KEGG通路富集分析共获得到13条信号通路,包括沙门氏菌感染通路、趋化因子信号通路、NF-κB信号通路、B细胞受体信号通路、Toll样受体信号通路、神经活性配体-受体相互作用通路等。结论有氧跑台训练可能通过调控血液中Tyrobp、Gzma表达,并调节B细胞、造血干细胞、自然杀伤细胞、T细胞、中性粒细胞的增殖分化,改善衰老导致的运动功能减退。 展开更多
关键词 衰老 运动功能衰退 有氧运动 血液单细胞RNA测序 tyrobp Gzma
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