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根瘤菌TtsI突变体构建及结瘤表型鉴定 被引量：1
1
作者 田博宇 孙志君 +9 位作者 刘函西 文莹楠 王洁琦 吕浩 周红阳 黄修正 刘春燕 王锦辉 辛大伟 陈庆山 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期17-24,共8页
本论文以中华根瘤菌HH103 Ⅲ型分泌系统调控因子TtsI为研究对象,采用三亲杂交的方法获得突变体HH103ΩTtsI,并用PCR鉴定。Ⅲ型效应因子表达分析表明,在染料木苷存在的情况下,TtsI突变能够抑制NopAA、NopD、NopL和NopP等效应因子基因的... 本论文以中华根瘤菌HH103 Ⅲ型分泌系统调控因子TtsI为研究对象,采用三亲杂交的方法获得突变体HH103ΩTtsI,并用PCR鉴定。Ⅲ型效应因子表达分析表明,在染料木苷存在的情况下,TtsI突变能够抑制NopAA、NopD、NopL和NopP等效应因子基因的转录和表达。当TtsI突变情况下,能够显著抑制根瘤菌HH103 Ⅲ型效应因子的合成。用TtsI突变体和野生型根瘤菌HH103对来自不同生态区的10份种质资源进行结瘤鉴定,结果显示,TtsI突变后能够显著减少根瘤平均数和根瘤干重。导入系群体结瘤鉴定结果显示,TtsI突变体显著减少导入系平均瘤数。说明TtsI在大豆-根瘤菌共生体系建立过程中发挥重要的作用,这种作用的发挥有可能是依赖于调控其他Ⅲ型效应因子的表达。 展开更多
关键词 大豆 根瘤菌 Ⅲ型效应因子 ttsi基因
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根瘤菌TtsI突变对大豆根瘤菌固氮酶活性的影响及转录组分析 被引量：1
2
作者 于燕雨 马胜男 +2 位作者 辛大伟 陈庆山 王锦辉 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期413-420,共8页
根瘤菌与大豆建立的共生模式为大豆提供了生长发育所必须的氮素,在共生建立时根瘤菌Ⅲ型效应因子是影响结瘤发生的重要信号分子之一。为了解析根瘤菌Ⅲ型效应因子在结瘤中的作用,进行TtsI突变根瘤菌HH103(Sinorhizobium fredii HH103)... 根瘤菌与大豆建立的共生模式为大豆提供了生长发育所必须的氮素,在共生建立时根瘤菌Ⅲ型效应因子是影响结瘤发生的重要信号分子之一。为了解析根瘤菌Ⅲ型效应因子在结瘤中的作用,进行TtsI突变根瘤菌HH103(Sinorhizobium fredii HH103)结瘤鉴定以及根瘤转录组分析,并对差异基因进行富集分析。结果显示:TtsI突变可以降低绥农14根瘤的固氮酶活性,但不影响野生豆ZYD00006的根瘤固氮酶活性。TtsI突变根瘤菌HH103(HH103ΩTtsI)使绥农14根瘤内部分编码氮转运的相关基因以及NLP7下调表达,并且接种HH103ΩTtsI与接种HH103相比,Glyma.11G235200和NLP7在ZYD00006的根瘤中的相对表达没有显著差异。通过GO富集、KEGG富集以及GSEA富集分析显示,差异基因主要涉及信号传导以及代谢进程等,差异基因主要在植物激素信号传导以及MAPK信号通路上富集。研究结果为后续Ⅲ型效应因子的功能和机制的解析以及大豆高效固氮设计提供了新的思路;同时氮转运相关基因的表达差异可为进一步选育高结瘤、高固氮效率以及高氮利用率的大豆品种提供理论支撑。 展开更多
关键词 大豆 根瘤菌 Sinorhizobium fredii HH103 Ⅲ型效应因子 ttsi 固氮酶活性 RNA-SEQ
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花生根瘤菌Bradyrhizobium sp.MM6 Ⅲ型分泌系统的结构和功能
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作者 赖永秀 胡美娟 +5 位作者 阮华钦 陈静瑜 李雪 李婷 靳欢欢 谷峻 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期476-485,共10页
【目的】探究花生根瘤菌Bradyrhizobium sp.MM6的Ⅲ型分泌系统(T3SS)的结构及其在根瘤菌与不同宿主建立共生关系中的作用。【方法】同源比对分析菌株MM6的T3SS基因簇的结构特征,并采用三亲本接合转移的方法构建T3SS调节基因ttsI突变菌株... 【目的】探究花生根瘤菌Bradyrhizobium sp.MM6的Ⅲ型分泌系统(T3SS)的结构及其在根瘤菌与不同宿主建立共生关系中的作用。【方法】同源比对分析菌株MM6的T3SS基因簇的结构特征,并采用三亲本接合转移的方法构建T3SS调节基因ttsI突变菌株;通过蛭石结瘤和石蜡切片实验,比较突变体与野生型的共生固氮表型差异。【结果】经预测,MM6的T3SS基因簇编码区长约34.1 kb,可分为3个区域,包含10个保守结构基因和8个效应蛋白基因,与B.diazoefficiens USDA110相应基因的序列相似性为83%–93%;成功构建了MM6的ttsI突变株;ttsI突变株与野生型分别与花生(S523和Y45)、野大豆和大豆中黄57结瘤,ttsI突变体在花生中的总瘤数显著增加(P<0.05),根瘤中含菌细胞更多;ttsI突变体在野大豆中平均每株植物增加4个根瘤,根瘤中含菌细胞更多,地上部干重相比野生型MM6显著增加(P<0.05);在大豆中黄57中,野生型MM6能形成红色的有效根瘤,ttsI突变体不结瘤,且植株叶片发黄,地上部干重相比野生型MM6显著降低(P<0.05)。【结论】MM6的T3SS在花生和野大豆共生体系中起着有害的作用,而在大豆中黄57的共生体系中起着有利的作用。 展开更多
关键词 花生根瘤菌 Ⅲ型分泌系统 ttsi 共生固氮
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