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Tspan8过表达与肝癌转移潜能及预后的关系 被引量：3
1
作者 王春玲 陈良 +7 位作者 周开伦 张震生 唐荣 陈平平 许达峰 陈骋 李灼日 武金才 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期998-1004,共7页
目的：探讨Tspan8表达与肝癌侵袭转移及预后之间关系。方法：用qRT-PCR和Westernblot检测不同肝癌细胞系及80例肝癌患者手术标本中Tspan8的mRNA与蛋白表达；应用组织芯片检测352例肝癌组织样本中Tspan8的表达，分析Tspan8表达与肝癌临... 目的：探讨Tspan8表达与肝癌侵袭转移及预后之间关系。方法：用qRT-PCR和Westernblot检测不同肝癌细胞系及80例肝癌患者手术标本中Tspan8的mRNA与蛋白表达；应用组织芯片检测352例肝癌组织样本中Tspan8的表达，分析Tspan8表达与肝癌临床病理因素及复发与预后的关系。结果：Tspan8的mRNA与蛋白表达在高转移潜能肝癌细胞系（MHCC97-H、MHCC97-L）中的表达明显高于低转移潜能的肝癌细胞系（PLC/PRF/5、SMMC7721、HepG2），在肝癌组织中的表达明显高于癌旁与正常肝组织，且在有肝内转移或血管侵犯患者癌组织中的表达明显高于无肝内转移及血管侵犯患者的癌组织（均P〈0.05）。Tspan8高表达是肝癌术后复发转移（HR=1.64，95%CI=1.21~2.23， P=0.002）和术后生存（HR=1.66，95%CI=1.23~2.25，P=0.001）的独立危险因素，Tspan8高表达患者术后5年总生存率明显低于Tspan8低表达组，术后复发时间明显短于低表达患者（均P〈0.05）。结论：Tspan8促进肝癌侵袭转移，Tspan8高表达患者预后不良。 展开更多
关键词 癌 肝细胞 tspan8 肿瘤与转移 预后
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Tspan8在结肠癌细胞中的表达及小干扰RNA干扰后对SW620细胞功能的影响 被引量：2
2
作者 任宇鹏 宋纯 孟庆凯 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期34-37,共4页
目的检测Tspan8在结肠癌细胞中的表达,采用siTspan8下调Tspan8的表达,观察其对SW620细胞转移、浸润及增殖功能的影响。方法采用Westernblot和实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测4种结肠癌细胞系中Tspan8蛋白和mRNA表达水平,以siTspan8对... 目的检测Tspan8在结肠癌细胞中的表达,采用siTspan8下调Tspan8的表达,观察其对SW620细胞转移、浸润及增殖功能的影响。方法采用Westernblot和实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测4种结肠癌细胞系中Tspan8蛋白和mRNA表达水平,以siTspan8对SW620细胞中Tspan8进行干扰,干扰后采用MTT及Transwell对增殖、转移及浸润进行检测。结果4种结肠癌细胞系中Tspan8在蛋白水平及mRNA水平均有表达,Westernblot显示来自转移灶的人结肠癌细胞系SW620中Tspa8表达水平高于来自原发灶的Colo-205、HCT-116及HT-29,差异有统计学意义(均P<0.05),qRT-PCR显示SW620中Tspan8mRNA表达高于Colo-205、HCT-116及HT-29,差异有统计学意义(均P<0.05)。MTT及Transwell显示siTspan8对SW620中Tspan8进行干扰后,结肠癌细胞增殖没有改变,转移及浸润能力减弱。结论Tspan8在结肠癌细胞中有表达,下调Tspan8表达对结肠癌细胞的转移及浸润有抑制作用。 展开更多
关键词 结肠癌 tspan8 小干扰RNA 四跨膜蛋白
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Tspan8基因敲除联合安罗替尼对结肠癌SW480细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响 被引量：3
3
作者 谢转红 许云鹏 +1 位作者 马珲敏 王祥 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2022年第10期1028-1036,共9页
目的探讨Tspan8基因敲除联合安罗替尼对结肠癌SW480细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法采用CRISPR/Cas9技术构建质粒并敲除SW480细胞的Tspan8基因,Western blot法检测敲除效果。采用MTT法计算安罗替尼的半数抑制浓度(IC_(50))。实... 目的探讨Tspan8基因敲除联合安罗替尼对结肠癌SW480细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法采用CRISPR/Cas9技术构建质粒并敲除SW480细胞的Tspan8基因,Western blot法检测敲除效果。采用MTT法计算安罗替尼的半数抑制浓度(IC_(50))。实验分为对照组、安罗替尼组、Tspan8敲除组和联合组。采用细胞增殖实验、克隆形成实验、划痕实验、Transwell小室法和流式细胞术检测各组细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡情况;Western blot法检测安罗替尼对SW480细胞中Tspan8表达水平的影响。结果在Tspan8敲除组中,SW480-KO-Ⅲ细胞的敲除效率最高,用于后续实验。不同浓度的安罗替尼在不同作用时间均能抑制SW480细胞的增殖(P<0.01),且呈浓度依赖性和时间依赖性(P<0.01),根据IC_(50)选择14μmol/L为后续实验浓度。与对照组相比,安罗替尼组、Tspan8敲除组和联合组的细胞增殖、迁移及侵袭能力显著降低,细胞凋亡水平明显提高(P<0.05),且联合组的上述变化较安罗替尼组或Tspan8敲除组更为显著(P<0.05)。与对照组相比,安罗替尼组SW480细胞的Tspan8表达水平明显下降(P<0.01)。结论Tspan8基因敲除联合安罗替尼能协同抑制SW480细胞增殖、迁移、侵袭,并促进其凋亡。 展开更多
关键词 结肠癌 安罗替尼 tspan8 细胞增殖 细胞侵袭
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TSPAN8对肺癌A549细胞体外增殖的影响及机制 被引量：3
4
作者 高辉 殷玉敬 +1 位作者 巴雅尔 吕艺华 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第6期864-867,共4页
目的:研究TSPAN8基因对A549肺癌细胞增殖的促进作用及其机制。方法:选取A549为研究对象,MTT法检测转染TSPAN8质粒对细胞增殖的作用;采用流式细胞仪技术检测转染TSPAN8质粒对细胞周期的影响;Real-time PCR和免疫印迹法检测TSPAN8基因对Rb... 目的:研究TSPAN8基因对A549肺癌细胞增殖的促进作用及其机制。方法:选取A549为研究对象,MTT法检测转染TSPAN8质粒对细胞增殖的作用;采用流式细胞仪技术检测转染TSPAN8质粒对细胞周期的影响;Real-time PCR和免疫印迹法检测TSPAN8基因对Rb1、E2F1、C-myc、CDK4、Cyclin D1以及ERK信号分子蛋白活性的影响。结果:TSPAN8基因能明显促进A549肺癌细胞的体外增殖能力;Real-time PCR和Western blot显示,转染TSPAN8基因后,E2F1、C-myc、CDK4、Cyclin D1的mRNA和蛋白表达上调,而Rb1的表达明显下调,而且p-ERK磷酸化水平亦明显上升。结论:TSPAN8基因能促进A549肺癌细胞的增殖,其作用可能与调控E2F1、C-myc、CDK4、Cyclin D1基因的表达,以及活化ERK相关信号通路相关。 展开更多
关键词 tspan8 肺癌 增殖
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TSPAN8基因多态性与广西扶绥县肝癌家系遗传易感性关系研究
5
作者 韦柳君 谢裕安 +1 位作者 任爱华 赵瑞强 《内科》 2017年第1期1-4,23,共5页
目的探讨广西扶绥县肝癌高发家系TSPAN8基因单核苷酸多态性(SNP)与肝癌遗传易感性的关系。方法收集广西扶绥县肝癌高发区20个肝癌高发家系(肝癌患者20例及直系亲属59例)及10个正常对照家系(共40例)作为研究对象,运用飞行时间质谱分析技... 目的探讨广西扶绥县肝癌高发家系TSPAN8基因单核苷酸多态性(SNP)与肝癌遗传易感性的关系。方法收集广西扶绥县肝癌高发区20个肝癌高发家系(肝癌患者20例及直系亲属59例)及10个正常对照家系(共40例)作为研究对象,运用飞行时间质谱分析技术(MALDI-TOF)检测TSPAN8基因rs2270587位点基因型,分析该基因位点多态性与肝癌家系遗传易感性的关系。结果 (1)TSPAN8基因rs2270587位点存在C、T两种等位基因型及CC、CT和TT三种基因型。(2)正常家系组及肝癌家系非患者组CT基因型个体罹患HCC的风险分别是CC基因型个体的0.34倍(95%CI=0.07~1.59,P>0.05)和0.42倍(95%CI=0.11~1.66,P>0.05);正常家系组中T等位基因个体罹患HCC的风险是C等位基因个体的0.29倍(95%CI=0.09~0.92,P=0.028),肝癌家系非患者组中T等位基因个体罹患HCC的风险是C等位基因个体的0.46倍(95%CI=0.15~1.42,P>0.05)。结论 TSPAN8基因rs2270587位点多态性与广西肝癌遗传易感性有相关性,T等位基因型可能是广西扶绥县HCC发生的保护因素。 展开更多
关键词 肝细胞癌 tspan8基因 单核苷酸多态性 遗传易感性 家系
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Tspan8过表达与肝癌上皮间变及转移的关系 被引量：4
6
作者 武金才 周开伦 +7 位作者 陈家诚 陈良 唐荣 陈骋 许达峰 郑进方 张震生 李灼日 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期775-780,共6页
目的探讨四跨膜蛋白Tspan8表达与肝癌转移、上皮间变的关系及其机制。方法利用前期构建的TSPAN8shRNAs慢病毒质粒并筛选稳转细胞株MHCC97．H．LV．GFP．shRNA．Tspan8，沉默Tspan8基因表达。WST法检测细胞增殖变化；蛋白印迹法检测基质... 目的探讨四跨膜蛋白Tspan8表达与肝癌转移、上皮间变的关系及其机制。方法利用前期构建的TSPAN8shRNAs慢病毒质粒并筛选稳转细胞株MHCC97．H．LV．GFP．shRNA．Tspan8，沉默Tspan8基因表达。WST法检测细胞增殖变化；蛋白印迹法检测基质金属蛋白酶12表达改变；应用Transwell检测细胞侵袭能力变化；5．0×10^6肝癌细胞肝内注射行体内实验，检测肿瘤生长及肺转移情况。在层黏蛋白-5（1aminin-5）作用于肝癌细胞株MHCC97-H—Mock和MHCC97-H—shRNA-Tspan8两天后，观察2组细胞形态差异，是否发生EMT改变并检测上皮及间质分子标志物。进一步应用免疫共沉淀和荧光分析Tspan8可否与整合素“形成复合物。结果体内外实验显示，与Tspan8-RNA干扰的MHCC-97H细胞（MHCC97-H-shRNA—Tspan8）比较，Tspan8高表达的肝癌细胞MHCC-97H和对照组MHCC97-H—Mock（LV-GFP）增殖侵袭能力、成瘤生长及肝癌肺转移等方面明显增强（P〈0．05）。MHCC97-H—shRNA-Tspan8细胞中MMP-12表达抑制明显，细胞侵袭能力明显下降。进一步的研究显示：在层黏蛋白_5的诱导下四跨膜蛋白Tspan8可与拍结合并诱导高表达肝癌细胞MHCC97一H发生上皮间质转化，而在RNA干扰组肝癌细胞中（MHCC97-H—shRNA-Tspan8）未见发生；免疫共沉淀显示Tspan8可与面结合形成复合物，提示Tspan8偶联饯6后形成复合物并可促进肝癌侵袭转移。结论四跨膜蛋白Tspan8表达与肝癌侵袭转移正相关，并可能与整合素α6结合而诱导肝癌细胞发生上皮间质转化有关，是肝癌复发转移及预后干预的潜在靶点和分子靶向治疗指标。 展开更多
关键词 肝细胞癌 四跨膜蛋白 tspan8 上皮间质转变 转移
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沉默Tspan8对人结肠癌HT-29细胞移植瘤和转移灶中的Rap1、Rap1 GAP的影响
7
作者 向莉 马敏星 +2 位作者 喻军 赵秋 李瑾 《临床消化病杂志》 2017年第2期85-90,共6页
[目的]观察沉默四次跨膜超家族蛋白3(Tspan8)对人结肠癌HT-29细胞移植瘤和转移灶中Rap1和Rap1GAP蛋白的影响。[方法]通过生物信息学方法,结合R2平台中的1个基因芯片数据集,以Dukes分期筛选出自身表达与Tspan8表达显著相关的基因,利用KEG... [目的]观察沉默四次跨膜超家族蛋白3(Tspan8)对人结肠癌HT-29细胞移植瘤和转移灶中Rap1和Rap1GAP蛋白的影响。[方法]通过生物信息学方法,结合R2平台中的1个基因芯片数据集,以Dukes分期筛选出自身表达与Tspan8表达显著相关的基因,利用KEGG工具对Tspan8相关的基因进行KEGG通路分析。利用慢病毒沉默技术沉默Tspan8在人结肠癌细胞株HT-29中的表达,RT-PCR及免疫组化技术检测HT-29细胞干扰后Tspan8沉默效果,构建结肠癌HT-29细胞转移动物模型。慢病毒沉默HT-29细胞中的Tspan8基因(shRNA+Tspan8+HT-29细胞)为实验组、空载体组为对照组,观察2组移植瘤生长情况。Western blot技术检测裸鼠肝脏转移灶中Rap1、Rap1 GAP的表达情况。[结果]与Tspan8相关的KEGG通路中,Rap1通路在DukeC期及DukeD期中与Tspan8表达存在相关性(P<0.05)。RT-PCR结果表明Tspan8mRNA表达水平在实验组中较对照组明显下调(P<0.05)。沉默Tspan8后,裸鼠肝转移瘤的数目减少、体积和重量变小,免疫组化结果提示实验组肝脏转移瘤组织Tspan8表达均较对照组小鼠明显减少(P<0.05),Western Blot示Rap1、Rap1GAP在实验组肝脏肿瘤组织表达较对照组改变具有统计学意义(P<0.05)。[结论]沉默Tspan8通过Rap1GAP影响Rap1蛋白活性抑制HT-29细胞肝脏转移。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 四次跨膜超家族蛋白3 生物信息学 tspan8
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四跨膜蛋白在肝癌中的作用 被引量：8
8
作者 何磊 柯爱武 郭传勇 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第18期1175-1178,共4页
四跨膜蛋白是一组具有四个高度疏水的跨膜结构域的低分子量细胞膜表面蛋白,可广泛参与细胞生长、粘附、迁移等多种生命活动。四跨膜蛋白超家族(TM4SF)可与包括四跨膜蛋白、整合素、生长因子及其受体、HLA家族、主要组织相容复合物(MHC)... 四跨膜蛋白是一组具有四个高度疏水的跨膜结构域的低分子量细胞膜表面蛋白,可广泛参与细胞生长、粘附、迁移等多种生命活动。四跨膜蛋白超家族(TM4SF)可与包括四跨膜蛋白、整合素、生长因子及其受体、HLA家族、主要组织相容复合物(MHC)等在内的多种细胞表面分子相连接,形成以TM4SF为核心的四跨膜蛋白网络。四跨膜蛋白网络可通过直接或间接作用于细胞信号通道从而影响肿瘤细胞的粘附、分化、迁移及侵袭。目前研究表明四跨膜蛋白CD151、CD82、Tspan8及Tspan1与肝癌密切相关,可参与调控肝癌细胞的粘附、增殖、分化、迁移及侵袭等过程来影响肝癌的发生发展。KAI1/CD82为肝癌的抑制基因,上调其表达可以抑制肝癌细胞的迁移和侵袭;CD151在肝癌组织中大量表达,提示CD151或联合CD151/c-Met是可能预测肝癌的进展新指标,并且CD151可能用于肝癌的靶向治疗;而Tspan8(CO-029)及Tspan1(NET-1)则可用于预测肝癌的进展及预后。 展开更多
关键词 四跨膜蛋白 肝癌CD151 CD82 tspan8(CO-029)Tspan1(NET-1)
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下调Tetraspanin 8抑制三阴乳腺癌细胞PD-L1表达增强抗肿瘤免疫反应 被引量：5
9
作者 郝毅 《中国实验诊断学》 2021年第7期1061-1065,共5页
目的探讨TSPAN8表达对抗肿瘤免疫应答的影响及其可能机制。方法通过CCLE(Cancer Cell Line Encyclopedia)数据库找到Tetraspanin 8(TSPAN8)高表达的人三阴乳腺癌细胞MDA-MB 231。构建siR-TSPAN8质粒并转染MDA-MB 231细胞,以空载体转染... 目的探讨TSPAN8表达对抗肿瘤免疫应答的影响及其可能机制。方法通过CCLE(Cancer Cell Line Encyclopedia)数据库找到Tetraspanin 8(TSPAN8)高表达的人三阴乳腺癌细胞MDA-MB 231。构建siR-TSPAN8质粒并转染MDA-MB 231细胞,以空载体转染组作为对照组,首先使用qRT-PCR(Quantitative Real-Time Polymerase Chain Reaction)及Western blotting方法比较对照组及siR-TSPAN8组TSPAN8的表达水平。从健康志愿者外周血提取单个核细胞(PBMC)并分别与对照组及siR-TSPAN8组细胞进行共培养。使用CCK-8法比较24h,48h,72h在不同效靶比(E/T)的条件下PBMC对肿瘤细胞的杀伤水平。流式细胞仪检测PBMC中CD3^(+)T细胞、NK细胞及NKT细胞百分比;检测肿瘤细胞表面程序性死亡配体1(PD-L1)的表达水平。结果通过CCLE数据库发现多株人乳腺癌细胞高表达TSPAN8,选用人三阴乳腺癌细胞MDA-MB 231细胞进行后续转染实验。与对照组相比,转染siR-TSPAN8的细胞TSPAN8的mRNA及蛋白表达均下调。与PBMC共培养实验结果显示下调TSPAN8后免疫细胞杀伤水平显著增加。流式细胞仪检测结果显示,下调TSPAN8增加共培养PBMC细胞中CD8^(+)T细胞比例,同时抑制肿瘤细胞PD-L1表达水平。结论Tetraspanin 8通过调控三阴乳腺癌细胞PD-L1的表达,影响抗肿瘤免疫反应。 展开更多
关键词 tspan8 乳腺癌 抗肿瘤免疫反应 PD-L1
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