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Tsc22d3在日本血吸虫感染小鼠肝脏NK细胞中的表达及对NK杀伤功能的影响
1
作者 徐方方 陈权 +1 位作者 胡媛 曹建平 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 北大核心 2025年第2期175-180,共6页
目的 探讨Tsc22结构域家族成员3 (Tsc22domainfamilymember3,Tsc22d3)在日本血吸虫感染小鼠肝脏自然杀伤(naturalkiller,NK)细胞亚群中的表达及其对NK细胞杀伤功能的影响。方法 将42只C57BL/6雌性小鼠经腹部贴片法感染日本血吸虫尾蚴(20... 目的 探讨Tsc22结构域家族成员3 (Tsc22domainfamilymember3,Tsc22d3)在日本血吸虫感染小鼠肝脏自然杀伤(naturalkiller,NK)细胞亚群中的表达及其对NK细胞杀伤功能的影响。方法 将42只C57BL/6雌性小鼠经腹部贴片法感染日本血吸虫尾蚴(20±1条/只),分别在感染前、感染后第4、6周取6只小鼠剖杀,磁珠分选富集肝脏NK细胞,并进行单细胞测序,分析Tsc22d3在NK细胞的表达及活化的信号通路。其余24只小鼠随机均分为感染组和对照组,每组12只,感染后第4、6周各取6只小鼠进行麻醉,分离小鼠肝非实质细胞,流式细胞术检测Tsc22d3在对照组和感染组小鼠肝脏NK细胞中的表达变化。采用脂质体转染法将空载质粒、Tsc22d3表达质粒转染NK92细胞,获得空载质粒对照组(NC组)和Tsc22d3过表达NK92细胞组(Tsc22d3^(+)NK92细胞组);用可溶性虫卵抗原(SEA)刺激Tsc22d3^(+)NK92组和NC组24、48 h,流式细胞术和实时荧光定量PCR (qPCR)检测NK细胞中γ干扰素(IFN-γ)和穿孔素(Prf1)表达的变化。使用GraphPadPrism9软件进行统计学分析,两组比较采用t检验。结果单细胞测序结果提示,与感染前小鼠(2.41)相比,感染后第4周(3.16)、第6周(3.76) Tsc22d3的表达持续增加,Tsc22d3高表达于NK的C3亚群,KEGG结果显示C3亚群中NK细胞介导的细胞毒性通路显著活化;流式细胞术结果显示,感染组第4、第6周小鼠肝脏NK细胞中Tsc22d3^(+)NK的占比分别为(0.24±0.01)%、(1.40±0.14)%,高于对照组的(0.12±0.02)%(t=12.110、22.010,均P <0.01)。SEA刺激24 h后Tsc22d3^(+)NK92组中IFN-γ、Prf1的阳性细胞的占比分别为(1.66±0.15)%、(53.23±0.81)%,高于NC组的(0.88±0.13)%、(29.93±1.85)%(t=6.800、20.010,均P <0.01)。SEA刺激24 h后,Tsc22d3^(+)NK92组中IFN-γ、Prf1的mRNA相对转录水平分别为1.53±0.24、1.41±0.04,均高于NC组的1.00±0.07、1.00±0.14 (t=3.573、4.973,均P <0.05、0.01);SEA刺激48 h后Tsc22d3^(+)NK92组中IFN-γ、Prf1的mRNA相对转录水平分别为2.06±0.39、1.54±0.26,均高于NC组的1.06±0.44、1.00±0.04 (t=2.953、3.588,均P <0.05)。结论 日本血吸虫感染进程中Tsc22d3高表达于肝脏NK的C3亚群,Tsc22d3高表达可增强NK细胞的杀伤功能。 展开更多
关键词 日本血吸虫 Tsc22结构域家族成员3 肝纤维化 自然杀伤细胞
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