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枇杷bHLH基因家族特征和EjbHLH104调控三倍体枇杷花期的功能分析 被引量：1
1
作者 夏燕 胡若倩 +7 位作者 易广权 孙洪文 黄树欣 池卓恒 石敏 梁国鲁 景丹龙 郭启高 《园艺学报》 北大核心 2025年第10期2582-2596,共15页
从枇杷(Eriobotrya japonica)基因组中鉴定到169个EjbHLH基因家族成员,这些基因在染色体上呈现不均等分布,划分为22个亚家族。采用RT-PCR技术克隆获得1个在早花三倍体枇杷‘无核早玉’花芽分化期显著高表达的bHLH成员EjbHLH104,其编码... 从枇杷(Eriobotrya japonica)基因组中鉴定到169个EjbHLH基因家族成员,这些基因在染色体上呈现不均等分布,划分为22个亚家族。采用RT-PCR技术克隆获得1个在早花三倍体枇杷‘无核早玉’花芽分化期显著高表达的bHLH成员EjbHLH104,其编码区序列长度为675 bp,编码224个氨基酸。蛋白质序列比对和分子系统发生分析表明,EjbHLH104具有典型且保守的bHLH保守结构域,与苹果MdbHLH104和白梨PbbHLH104等蔷薇科植物bHLH蛋白质的相似性较高,聚在真蔷薇分支Ⅰ。亚细胞定位分析表明,EjbHLH104蛋白质定位在细胞核,具有典型的bHLH转录因子亚细胞定位特性。实时荧光定量PCR分析表明,EjbHLH104基因在三倍体枇杷早花品种的花芽生理分化期和小花分化期表达量较高,在盛花期最高;而在二倍体早花品种的小花分化期表达量最高。EjbHLH104转基因拟南芥植株开花时间比野生型拟南芥显著提前,表明EjbHLH104基因过量表达具有促进拟南芥提前开花的功能。 展开更多
关键词 枇杷 三倍体 bHLH基因家族 功能分析 花期调控
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电导法结合Logistic方程鉴定三倍体枇杷的抗寒性研究 被引量：13
2
作者 王晓辉 郭启高 +6 位作者 何桥 姚丹 李晓林 向素琼 汪卫星 孙海艳 梁国鲁 《西南师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期121-124,共4页
以三倍体枇杷成熟叶片为试材,经低温处理后采用电导法测定质膜相对电导率,然后利用Logistic方程拟合拐点得到单株半致死温度,结果表明:不同低温处理后,叶片组织的相对电导率与处理温度呈负相关,整体变化为典型S形单峰曲线;在-5℃到-15... 以三倍体枇杷成熟叶片为试材,经低温处理后采用电导法测定质膜相对电导率,然后利用Logistic方程拟合拐点得到单株半致死温度,结果表明:不同低温处理后,叶片组织的相对电导率与处理温度呈负相关,整体变化为典型S形单峰曲线;在-5℃到-15℃之间,质膜伤害率随温度下降而急剧升高;单株半致死温度在-1.22℃到-10.47℃之间.单株抗寒力"常白1号Q34"最强,"东湖早"最弱. 展开更多
关键词 三倍体枇杷 抗寒性 电解质外渗率 半致死温度 LOGISTIC方程
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三倍体枇杷茎尖培养与植株再生 被引量：4
3
作者 陶炼 潘翠萍 +8 位作者 谢红江 王永清 杨文渊 杨芩 李靖 陈栋 涂美艳 刘伟 江国良 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2014年第11期2249-2254,共6页
以三倍体枇杷茎尖为外植体,研究了取材时间及茎尖大小、植物生长调节剂对三倍体枇杷茎尖培养与植株再生过程中萌发、伸长、生根及移栽的影响。结果表明:春季取材且茎尖大小为0.7 cm时,茎尖成活率最高,为77.5%;初代培养适宜培养基为MS+6-... 以三倍体枇杷茎尖为外植体,研究了取材时间及茎尖大小、植物生长调节剂对三倍体枇杷茎尖培养与植株再生过程中萌发、伸长、生根及移栽的影响。结果表明:春季取材且茎尖大小为0.7 cm时,茎尖成活率最高,为77.5%;初代培养适宜培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+IBA 1.5 mg/L,在此培养基上,三倍体枇杷茎尖萌发率高达91%;茎尖伸长适宜培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L+GA30.3 mg/L,平均芽苗高度可达4.9 cm;芽苗增殖适宜培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L+Tryptone 750 mg/L,增殖系数为7.7;生根适宜培养基为1/2MS+NAA 0.25 mg/L+IBA 2.0 mg/L,生根率为73.3%;三倍体枇杷组培苗移栽入腐熟有机肥∶园土∶锯末(1∶2∶1)的基质中成活率达到93.67%。 展开更多
关键词 三倍体枇杷 茎尖培养 植株再生
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龙泉1号天然三倍体枇杷的花粉形态及生活力 被引量：14
4
作者 郭启高 季昆 +4 位作者 吴琼 何桥 武宇坤 李晓林 梁国鲁 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期391-396,共6页
以龙泉1号枇杷的二倍体、天然三倍体株系为材料,应用扫描电镜进行了花粉形态的分析,并通过FDA荧光染色法、醋酸洋红染色、TTC法及离体萌发试验对花粉生活力进行测定,利用田间正反交试验,对其花粉在柱头上的自然萌发以及花粉管的生长过... 以龙泉1号枇杷的二倍体、天然三倍体株系为材料,应用扫描电镜进行了花粉形态的分析,并通过FDA荧光染色法、醋酸洋红染色、TTC法及离体萌发试验对花粉生活力进行测定,利用田间正反交试验,对其花粉在柱头上的自然萌发以及花粉管的生长过程进行观察。结果表明,(1)龙泉1号二倍体花粉属于N3P4C5类型,天然三倍体花粉有6种形态;(2)FDA染色表明15个龙泉1号三倍体枇杷株系的花粉生活力具有显著差异,且其测定的花粉生活力最接近实际的离体萌发率;(3)不同倍性植株的花粉在柱头中的生长主要取决于枇杷花粉的生活力,而与母本的倍性关系较小,且花粉管在柱头中为非匀速生长。 展开更多
关键词 枇杷 天然三倍体 花粉形态 花粉活力 花粉管
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三倍体枇杷的茎尖培养及诱导生根
5
作者 邓仁菊 范建新 +8 位作者 王永清 潘翠萍 邓群仙 张继伟 吕玲玉 孙靓 康伟 徐元军 张家志 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期835-840,共6页
以三倍体枇杷为材料, 研究了不同消毒方式、MS培养基浓度、植物生长调节剂及浓度配比对茎尖培养及诱导生根的影响。结果表明, 初代培养时, 选择生长饱满、健壮的顶芽及适宜的消毒方式, 外植体剥离长度0.5-0.8 cm, 能显著提高茎尖培养的... 以三倍体枇杷为材料, 研究了不同消毒方式、MS培养基浓度、植物生长调节剂及浓度配比对茎尖培养及诱导生根的影响。结果表明, 初代培养时, 选择生长饱满、健壮的顶芽及适宜的消毒方式, 外植体剥离长度0.5-0.8 cm, 能显著提高茎尖培养的成活率; MS培养基浓度的变化对外植体的褐化没有明显的影响; 最适茎尖的启动培养基为MS＋1.0 mg·L-1 6-BA＋0.5 mg·L-1 NAA, 成活率高达84.8%; 最适组培苗生根培养基为1/2MS＋0.1 mg·L-1 NAA＋0.01 mg·L-1 IAA＋0.3%活性炭, 生根率达66.7%, 每株平均生根2.83条。该研究结果将为三倍体枇杷再生体系的建立及利用转基因技术对三倍体无籽枇杷进行遗传改良奠定基础。 展开更多
关键词 三倍体枇杷 茎尖培养 诱导生根
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三倍体枇杷叶绿体DNA提取方法的优化 被引量：6
6
作者 孙晓荣 易鼎杰 +1 位作者 何桥 梁国鲁 《西南师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期93-96,共4页
将三倍体枇杷叶片通过液氮研磨、差速离心与蔗糖密度梯度离心相结合的方法得到高纯度的叶绿体,在光学显微镜和荧光显微镜下分别观察到椭圆形颗粒状和自发红色荧光的叶绿体.提取的cpDNA经凝胶电泳检测,完整性好,纯度高,无降解.经紫外分... 将三倍体枇杷叶片通过液氮研磨、差速离心与蔗糖密度梯度离心相结合的方法得到高纯度的叶绿体,在光学显微镜和荧光显微镜下分别观察到椭圆形颗粒状和自发红色荧光的叶绿体.提取的cpDNA经凝胶电泳检测,完整性好,纯度高,无降解.经紫外分光光度仪测定,所得cpDNA浓度为0.761ng/ul. 展开更多
关键词 三倍体枇杷 叶绿体 CPDNA
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三倍体枇杷花期调控基因Ej SPL5的克隆、亚细胞定位及表达分析 被引量：6
7
作者 孙伟雄 石敏 +6 位作者 薛宝贵 夏燕 郭启高 王淑明 吴頔 景丹龙 梁国鲁 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期220-232,共13页
利用同源克隆和c DNA末端快速扩增(RACE)技术从三倍体枇杷‘Q27’中分离得到1个调控花期的SQUMOSA PROMOTER BINDING PROTEIN LIKE(SPL)转录因子家族基因EjSPL5。该基因cDNA序列全长为778 bp,其中5′非翻译区(UTR)序列为24 bp,3′UTR序... 利用同源克隆和c DNA末端快速扩增(RACE)技术从三倍体枇杷‘Q27’中分离得到1个调控花期的SQUMOSA PROMOTER BINDING PROTEIN LIKE(SPL)转录因子家族基因EjSPL5。该基因cDNA序列全长为778 bp,其中5′非翻译区(UTR)序列为24 bp,3′UTR序列为214 bp,包含1个长为549bp的开放阅读框(ORF),编码182个氨基酸。蛋白序列比对分析表明,EjSPL5和苹果、拟南芥及金鱼草的SPL蛋白序列具有较高的相似性,均具有保守的SBP结构域和核定位信号(NLS)。分子系统进化分析表明,EjSPL5与苹果MdSPL5具有较高的同源性,聚为同一分支。EjSPL5的亚细胞定位发现,其行使功能区域定位在细胞核。实时荧光定量PCR分析表明,EjSPL5在枇杷萼片和幼果中的表达量较高;二倍体和三倍体枇杷的早、晚花品种中EjSPL5表达量存在显著差异,其表达主要集中在花发育的前6个时期,在花蕾露白期和盛花期的表达量较低。三倍体枇杷EjSPL5表达量在花芽形态分化期最高,二倍体枇杷在花序侧生支轴快速伸长期的表达量最高。早花枇杷品种的EjSPL5相对表达量高于晚花品种。 展开更多
关键词 枇杷 三倍体 EjSPL5 亚细胞定位 基因表达
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三倍体枇杷花期调控相关的EjbHLH79基因序列和表达特性分析 被引量：5
8
作者 胡若倩 景丹龙 +1 位作者 郭启高 梁国鲁 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1300-1310,共11页
以花蕾露白期的三倍体枇杷(Eriobotrya japonica)‘Q11’为材料,通过同源克隆技术获得bHLH转录因子家族基因EjbHLH79。该基因的编码区序列(CDS)长为867 bp,编码288个氨基酸,蛋白分子质量为31.32 kDa,等电点为8.26。蛋白质序列比对分析表... 以花蕾露白期的三倍体枇杷(Eriobotrya japonica)‘Q11’为材料,通过同源克隆技术获得bHLH转录因子家族基因EjbHLH79。该基因的编码区序列(CDS)长为867 bp,编码288个氨基酸,蛋白分子质量为31.32 kDa,等电点为8.26。蛋白质序列比对分析表明,EjbHLH79与梨(Pyrus ussuriensis×P.communis)、桃(Amygdalus persica)等植物的bHLH79蛋白质序列具有较高的同源性,均具有1个保守的碱性(basic)结构域和1个保守的螺旋-环-螺旋(HLH)结构域。系统进化树分析表明,EjbHLH79与梨、桃等蔷薇科植物bHLH79聚为同一分支。亚细胞定位分析显示,EjbHLH79定位在细胞核中,具有典型的bHLH转录因子亚细胞定位特性。通过实时荧光定量PCR分析进一步发现,二倍体和三倍体枇杷早、晚花材料的EjbHLH79表达量存在明显差异,其中在花发育前5个时期的4个材料中EjbHLH79表达量较低,但在花发育后3个时期(小花分化期、花蕾露白期和盛花期)表达量较高,表明EjbHLH79在花发育后期发挥重要作用。本研究为进一步阐明EjbHLH79基因参与三倍体枇杷花期调控提供理论参考。 展开更多
关键词 三倍体枇杷 EjbHLH79 花期 亚细胞定位 表达分析
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三倍体枇杷与其四倍体和二倍体亲本光系统活性差异 被引量：4
9
作者 刘明秀 王泓丁 +7 位作者 张宇娜 张帮燕 刘松 李韵佳 党江波 何桥 梁国鲁 郭启高 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期37-48,共12页
为探寻三倍体枇杷光合作用效率及光系统活性的特点,于2018—2019年的3、7、12月,连续两年对两个杂交三倍体F_(1)代B431×GZ1和B431×GZ23,及其四倍体母本B431、二倍体父本GZ1、GZ23的叶片净光合速率(Pn)和快速叶绿素荧光诱导动... 为探寻三倍体枇杷光合作用效率及光系统活性的特点,于2018—2019年的3、7、12月,连续两年对两个杂交三倍体F_(1)代B431×GZ1和B431×GZ23,及其四倍体母本B431、二倍体父本GZ1、GZ23的叶片净光合速率(Pn)和快速叶绿素荧光诱导动力学曲线(OJIP曲线)进行了测定及JIP-test分析。结果表明:三倍体枇杷F_(1)代的Pn在3、7、12月均显著高于各自二倍体父本;但与四倍体母本在7月的差异不显著,在3、12月与四倍体母本的差异因杂交组合的不同而异,其光合差异主要与非气孔限制因素有关。同时,三倍体F1代与四倍体母本的大部分荧光参数差异不显著,但与二倍体父本相比,其光能的吸收(ABS/CSm)、捕获(TRo/CSm)能力强、热耗散(DIo/CSm)比例低,从而维持较高的电子传递性能(ETo/CSm)、促进PSⅡ与PSⅠ之间的电子传递(REo/CSm)、维持相对较高的性能指数(PIabs)及最大光化学效率(Fv/Fm)。因此,三倍体枇杷较强的光系统活性及调节能力是其具有较高光合效率的原因之一。 展开更多
关键词 枇杷 三倍体 净光合速率 光系统 快速叶绿素荧光诱导动力学
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三倍体枇杷花期调控基因EjAGL6的表达特性和功能分析 被引量：3
10
作者 蒲籽言 胡若倩 +3 位作者 徐欣羽 郭启高 夏燕 景丹龙 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1263-1272,共10页
以三倍体枇杷(Eriobotrya japonica)‘华玉无核1号’的花芽为材料,采用基因克隆技术获得EjAGL6基因,分析其序列、亚细胞定位特性以及在二倍体和三倍体枇杷早晚花品种中的表达水平。采用花序浸染转化拟南芥,并利用实时荧光定量PCR分析转... 以三倍体枇杷(Eriobotrya japonica)‘华玉无核1号’的花芽为材料,采用基因克隆技术获得EjAGL6基因,分析其序列、亚细胞定位特性以及在二倍体和三倍体枇杷早晚花品种中的表达水平。采用花序浸染转化拟南芥,并利用实时荧光定量PCR分析转基因拟南芥植株的EjAGL6基因表达量,进一步观察野生型与EjAGL6转基因拟南芥的表型差异,分析EjAGL6基因的功能,为解析EjAGL6基因参与三倍体枇杷花期调控机制提供理论依据。结果显示:(1)成功获得MADS-box基因EjAGL6;该基因的编码区序列(CDS)为732 bp,编码243个氨基酸,分子质量为27.88 kD,等电点为9.05,脂溶指数为79.05;系统进化树分析表明,枇杷EjAGL6与苹果MdAGL6蛋白质的相似性较高,聚在同一分支。(2)蛋白序列比对发现,EjAGL6的M区有57个氨基酸,I区有30个氨基酸,K区有82个氨基酸,C区有74个氨基酸,其中C区包含高度保守的AGL6基序Ⅰ和AGL6基序Ⅱ。(3)亚细胞定位分析表明,EjAGL6蛋白定位在细胞核,具有典型的MADS-box转录因子亚细胞定位特性。(4)实时荧光定量PCR分析表明,EjAGL6基因在二倍体和三倍体枇杷早、晚花品种中均有表达,主要集中于小花分化期(S6)、花蕾露白期(S7)和盛花期(S8),且EjAGL6基因在二倍体和三倍体早花品种中的花蕾露白期的表达量均较高。(5)转基因拟南芥株系的EjAGL6基因表达量显著高于野生型拟南芥;转EjAGL6基因植株表型观察显示,EjAGL6基因在拟南芥中过量表达能够使转EjAGL6基因拟南芥的开花时间提前1周左右。研究认为,EjAGL6基因可促使枇杷开花时间提前,推测EjAGL6基因在花蕾露白期发挥调控花期的关键作用。 展开更多
关键词 三倍体枇杷 EjAGL6 亚细胞定位 表达分析 功能分析
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