脐孢木霉菌Trichoderma brevicompactum 0248 tri5基因片段的克隆及表达分析 被引量：3

1

作者 詹晓奂 申屠旭萍 +2 位作者 刘卫平 马正 俞晓平 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2013年第4期555-560,共6页

脐孢木霉菌Trichoderma brevicompactum能合成木霉素等单端孢霉烯类化合物,而基因tri5编码的单端孢霉二烯合酶是合成途径中的关键酶,它催化反式法呢基焦磷酸(tFPP)合成单端孢霉二烯。为分析基因tri5与木霉素合成的关系,本研究从脐孢木霉... 脐孢木霉菌Trichoderma brevicompactum能合成木霉素等单端孢霉烯类化合物,而基因tri5编码的单端孢霉二烯合酶是合成途径中的关键酶,它催化反式法呢基焦磷酸(tFPP)合成单端孢霉二烯。为分析基因tri5与木霉素合成的关系,本研究从脐孢木霉菌0248中克隆了基因tri5片段,并运用实时荧光定量PCR技术分析了基因tri5在不产木霉素培养基和产木霉素培养基中的差异表达。在相同培养时间下,基因tri5在不同产木霉素状态间的表达量差异显著;在培养96 h时基因tri5在2种培养基中均达到最大值,基因tri5在产木霉素状态下的表达量是不产木霉素状态下的107.18倍。通过检测产木霉素培养基中基因tri5表达量与木霉素含量的变化,结果显示木霉素的含量随着基因tri5表达量的增加而不断增加,在培养96 h时达到最大值118.71 mg L 1,推测基因tri5表达量与木霉素合成相关。该研究为基因tri5功能的进一步研究和对脐孢木霉菌0248进行基因工程菌改造奠定了理论基础。 展开更多

关键词 脐孢木霉菌 基因tri5 木霉素 基因克隆 实时荧光定量PCR

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短密木霉和褐藻寡糖复配施用提高砀山酥梨品质并优化根际土壤细菌群落结构

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作者 李思东 张利生 +4 位作者 佐合热古丽·库尔班 麻艳威 徐阳春 董彩霞 沈其荣 《植物营养与肥料学报》 北大核心 2025年第11期2280-2289,共10页

【目的】短密木霉(Trichoderma brevicompactum TB2)与褐藻寡糖(alginate oligosaccharides,AO)具有改善土壤细菌群落结构的效应,本研究探究了施用复配短密木霉与褐藻寡糖提升栽培55年的砀山酥梨果实产量和品质的效果,旨在为缓解栽培年... 【目的】短密木霉(Trichoderma brevicompactum TB2)与褐藻寡糖(alginate oligosaccharides,AO)具有改善土壤细菌群落结构的效应,本研究探究了施用复配短密木霉与褐藻寡糖提升栽培55年的砀山酥梨果实产量和品质的效果,旨在为缓解栽培年限过长导致的果实品质退化提供技术支撑。【方法】田间试验在安徽宿州砀山酥梨园进行,供试酥梨树龄55年。采用灌根方式每棵树分别施用10 L短密木霉(TB2)、褐藻寡糖(AO)及二者复配(A-TB2)溶液,以施清水为对照(CK),每个处理设5株重复。于果实成熟期,每个处理分别随机采集24个果实测定单果重、纵横径及可溶性固形物含量,同时采集根际土壤提取DNA样本,进行高通量测序(Illumina NovaSeq PE250),对细菌多样性与群落组成进行分析。【结果】TB2、AO及A-TB2处理显著提高了单果重,分别较CK提高15.7%、18.8%和31.0%。A-TB2处理的单果重分别较TB2和AO处理显著提升了10.3%和13.2%。A-TB2处理显著提高了根际土壤细菌香农指数,TB2和AO处理改变了土壤细菌群落结构,且A-TB2处理形成了不同于TB2和AO处理的细菌群落结构。施用褐藻寡糖和木霉TB2分别显著提升绿弯菌门(Chloroflexi)和疣微菌门(Verrucomicrobia)的相对丰度,而A-TB2处理进一步显著提高了变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)的相对丰度。网络分析发现,单果重和可溶性固形物含量分别与两个细菌网络模块(模块8与模块10)丰度呈显著正相关。多元线性回归分析表明,模块中类固醇单胞菌属和Gp16属分别是影响单果重和可溶性固形物的核心功能细菌。核心功能细菌在不同处理中的丰度差异与果实品质差异变化趋势一致。【结论】单施短密木霉TB2或褐藻寡糖均可提升酥梨单果重和可溶性固形物含量,二者复配可更有效地活化根际土壤养分,提升根系吸收能力,富集类固醇单胞菌属、Gp16属等核心功能菌群,因此,木霉-褐藻寡糖复配施用技术兼具提质效果与生态友好特性,为酥梨产业绿色升级提供了科学方案。 展开更多

关键词 短密木霉 褐藻寡糖 砀山酥梨 根际微生物

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短密木霉菌RT-PCR检测体系的建立及其在南瓜根际的动态分析 被引量：3

3

作者 谢学文 程颖超 +5 位作者 王锟 张红杰 杨杰 石延霞 柴阿丽 李宝聚 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期574-581,共8页

根据短密木霉菌31636 ITS基因序列设计特异性引物TB51F/51R,建立其荧光定量PCR(RT-PCR)检测体系。通过盆栽试验明确短密木霉菌31636对南瓜疫病的防治效果,并采用RT-PCR检测技术监测短密木霉菌31636与辣椒疫霉菌LJ12010805在南瓜根际土... 根据短密木霉菌31636 ITS基因序列设计特异性引物TB51F/51R,建立其荧光定量PCR(RT-PCR)检测体系。通过盆栽试验明确短密木霉菌31636对南瓜疫病的防治效果,并采用RT-PCR检测技术监测短密木霉菌31636与辣椒疫霉菌LJ12010805在南瓜根际土中的动态变化。试验结果表明,利用该引物建立的RT-PCR检测体系线性关系良好,灵敏度为0.16 pg/μL,是普通PCR的100倍。采用拌土法接种短密木霉菌31636菌悬液10 m L育苗对南瓜疫病的防效最佳,定植后第15、30 d时防治效果分别为75.63%和46.82%。RT-PCR检测结果显示基质土中短密木霉菌31636呈减-增-减的动态变化规律,15 d时菌量最大,拷贝数为3.44×106 copys/μL;于定植后第3、15 d辣椒疫霉菌LJ12010805菌量分别达到最大、最小值,拷贝数分别为2.42×106 copys/μL和5.76×102 copys/μL。而对照的辣椒疫霉菌LJ12010805菌量持续增加,监测的第30 d拷贝数最大,为8.42×107 copys/μL。 展开更多

关键词 短密木霉菌 南瓜疫病 荧光定量PCR 动态变化 防效

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短密木霉、咪唑乙烟酸和种植大豆对土壤真菌多样性及农药残留的影响 被引量：3

4

作者 李志国 霍璐阳 +2 位作者 刘宇彤 刘晴 董爱荣 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期87-90,共4页

采用平板稀释法分离试验土壤真菌,对土壤真菌数量、种类进行分析,采用高效液相色谱法检测土壤农药含量,对土壤中的农药残留进行分析。结果表明:加入短密木霉(Trichoderma brevicompactum)后,短密木霉对其他真菌具有抑制作用,与对照组相... 采用平板稀释法分离试验土壤真菌,对土壤真菌数量、种类进行分析,采用高效液相色谱法检测土壤农药含量,对土壤中的农药残留进行分析。结果表明:加入短密木霉(Trichoderma brevicompactum)后,短密木霉对其他真菌具有抑制作用,与对照组相比,土壤真菌数量、种类差异显著。单独种植大豆(Glycine max)后,土壤真菌的数量、种类变化不明显。咪唑乙烟酸质量分数对土壤真菌数量、种类有显著的影响。短密木霉、大豆、咪唑乙烟酸三者互作试验组与对照组差异显著。土壤中的咪唑乙烟酸质量分数随着处理时间的增加都逐渐的减少,10~20d降解效率最高。短密木霉、大豆和咪唑乙烟酸都会影响咪唑乙烟酸的降解。 展开更多

关键词 咪唑乙烟酸 短密木霉 大豆 降解率 土壤真菌多样性

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短密木霉新菌株BF06对黄瓜土传病害的防治效果与促生作用（英文） 被引量：12

5

作者 李进一 卢彩鸽 +2 位作者 刘霆 刘伟成 苏海佳 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期449-460,共12页

连作导致枯萎病等土传病害发生日益严重,已成为我国黄瓜生产的重要限制因素。采用化学防治和农业措施防治土传根部病害,操作都较为困难,迫切需要开发环境友好的生物防治技术。本研究从森林土壤分离鉴定一株短密木霉菌株BF06,通过对峙培... 连作导致枯萎病等土传病害发生日益严重,已成为我国黄瓜生产的重要限制因素。采用化学防治和农业措施防治土传根部病害,操作都较为困难,迫切需要开发环境友好的生物防治技术。本研究从森林土壤分离鉴定一株短密木霉菌株BF06,通过对峙培养发现该菌株可以附着和缠绕病原菌的菌丝,对引起黄瓜枯萎病、茎基腐病、菌核病、根腐病和疫病的病原菌Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum,Rhizoctonia solani,Sclerotinia sclerotiorum,F.solani f.sp.cucurbitae,and Phytophthora cryptogea具有较强的拮抗作用。温室盆栽试验发现短密木霉菌株BF06可以迅速附着定殖于黄瓜根部表面,对上述5种黄瓜根部病害的防效达60%以上,对黄瓜枯萎病和茎基腐病的防效分别为90.4和88.8%。此外,利用植物组织培养基培养观察发现BF06显著地促进幼苗黄瓜侧根的形成和生长。本研究的结果表明短密木霉菌株BF06是一种可以有效防治黄瓜根部病害的新生防资源。 展开更多

关键词 trichoderma brevicompactum 拮抗 黄瓜 土传病菌 植物生长调控

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短密木霉、咪唑乙烟酸和种植大豆对土壤脲酶活性的影响 被引量：5

6

作者 霍璐阳 李志国 +2 位作者 刘晴 刘宇彤 董爱荣 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期91-93,共3页

采用苯酚钠-次氯酸钠比色法测定土壤脲酶活性,研究了短密木霉(Trichoderma brevicompactum)、大豆(Glycine max)和咪唑乙烟酸质量分数对土壤脲酶活性的影响。结果表明:添加短密木霉、种植大豆和加入咪唑乙烟酸后,土壤脲酶活性均呈现出... 采用苯酚钠-次氯酸钠比色法测定土壤脲酶活性,研究了短密木霉(Trichoderma brevicompactum)、大豆(Glycine max)和咪唑乙烟酸质量分数对土壤脲酶活性的影响。结果表明:添加短密木霉、种植大豆和加入咪唑乙烟酸后,土壤脲酶活性均呈现出抑制—恢复—激活的趋势。土壤中加入短密木霉后,40 d时脲酶活性的激活率最高,达到31.13%;种植大豆后,5 d时抑制率最高,达到10.35%,20 d后逐渐恢复到对照组水平。当土壤中咪唑乙烟酸质量分数分别为50、100、150 mg·kg-1时,土壤脲酶活性呈现出抑制—激活的趋势,在5~10 d脲酶活性被显著抑制,抑制率最高时达到16.18%,20 d后呈现激活效应。当土壤中咪唑乙烟酸质量分数为100 mg·kg-1时,30 d时激活率最高,达85.23%。 展开更多

关键词 土壤脲酶 咪唑乙烟酸 短密木霉 大豆

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一株防治香蕉枯萎病的短密木霉筛选及代谢物木霉素作用评价 被引量：6

7

作者 姚遐俊 谢津 +4 位作者 祁艳华 汪斌 房文霞 陶刚 蒋细良 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期211-225,共15页

由尖孢镰刀菌古巴专化型热带四号小种(Fusarium oxysporum f.sp.cubense tropical race4,FocTR4)引起的香蕉枯萎病(banana Fusarium wilt,BFW)是全世界范围内难以防治的真菌病害,给香蕉产业造成巨大的经济损失。本研究旨在筛选高效拮抗F... 由尖孢镰刀菌古巴专化型热带四号小种(Fusarium oxysporum f.sp.cubense tropical race4,FocTR4)引起的香蕉枯萎病(banana Fusarium wilt,BFW)是全世界范围内难以防治的真菌病害,给香蕉产业造成巨大的经济损失。本研究旨在筛选高效拮抗FocTR4的木霉生防菌株,并对其发酵代谢产物进行分离、提纯和鉴定,为香蕉枯萎病的高效生物防治提供重要生防菌株和活性化合物资源。从作物根际土壤中分离出木霉菌株,通过平板对峙培养、发酵液对病原菌孢子萌发及菌丝生长抑制,测试筛选出高效抑制FocTR4的生防木霉菌株;通过构建系统发育树明确生防菌株的分类地位;通过柱色谱法分离纯化菌株发酵液中活性成分,通过核磁共振波谱法(nuclear magnetic resonance spectroscopy,NMR)解析活性成分的结构;通过香蕉苗感病盆栽实验检测生防木霉菌株对香蕉枯萎病的防治效果。结果表明,本研究筛选到了1株拮抗FocTR4的菌株JSHA-CD-1003,平板对峙抑制率为60.6%;发酵液在24 h内能完全抑制FocTR4孢子萌发,7 d内对FocTR4菌丝生长的抑制率为52.6%;基于内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)和tef1-α基因串联序列构建系统发育树,该菌株鉴定为短密木霉(Trichoderma brevicompactum),通过柱色谱法分离提纯和NMR鉴定单一活性化合物为木霉素(trichodermin),最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)为25μg/mL;盆栽生防实验表明,菌株JSHA-CD-1003发酵液对香蕉枯萎病的叶片黄化防治率为47.4%,球茎褐化防治率为52.0%。因此,JSHA-CD-1003通过产生木霉素有效抑制FocTR4孢子萌发和菌丝生长,对FocTR4引起的香蕉枯萎病具有良好的生物防治效果,是一株具有生防潜力的菌株。 展开更多

关键词 香蕉枯萎病 生物防治 短密木霉 柱色谱法 木霉素

原文传递

不同处理方式对土壤细菌多样性的影响 被引量：6

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作者 于凯悦 李唯一 +2 位作者 刘宇航 董爱荣 刘薇 《森林工程》 2020年第3期7-11,共5页

本文采用高通量测序法,探究短密木霉(Trichoderma brevicompactum)、大豆和咪唑乙烟酸三者分别处理以及共同作用对土壤细菌多样性和群落结构的影响。试验以不含上述3种物质的土壤为阴性对照。结果表明:5个不同处理样品共含有36 336个细... 本文采用高通量测序法,探究短密木霉(Trichoderma brevicompactum)、大豆和咪唑乙烟酸三者分别处理以及共同作用对土壤细菌多样性和群落结构的影响。试验以不含上述3种物质的土壤为阴性对照。结果表明:5个不同处理样品共含有36 336个细菌OTU(operational taxonomic unit),其中共有的细菌种类有1 031个,仅占样品细菌总数的2.84%;不同处理土壤样品的细菌多样性均发生变化,短密木霉、大豆对土壤细菌多样性的影响小于咪唑乙烟酸;不同处理样品的细菌群落结构组成基本相同,差异较大的是相对丰度。变形菌门(Proteobacteria)是5个样品中的优势细菌,平均丰度为50.82%;在属的水平下,鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)是5个样品中的优势细菌,其次是芽单胞菌属(Gemmatimonas)和微小杆菌属(Exiguobacterium)。结论:土壤中加入短密木霉后,土壤细菌多样性及物种总数略微下降;种植大豆后,土壤细菌多样性及物种总数升高;加入咪唑乙烟酸后,土壤细菌多样性及物种总数显著降低;短密木霉及大豆对土壤细菌多样性及物种总数的影响小于咪唑乙烟酸。 展开更多

关键词 高通量测序法 短密木霉 咪唑乙烟酸 大豆 多样性

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降解菌短密木霉对土壤酶活性的影响 被引量：5

9

作者 刘晴 董爱荣 +2 位作者 邓世林 鲍彤 刘薇 《森林工程》 2019年第3期9-12,19,共5页

为探究短密木霉以及短密木霉、大豆和咪唑乙烟酸相互作用对土壤蔗糖酶和过氧化氢酶活性的影响,本文采用3,5-二硝基水杨酸法、高锰酸钾滴定法分别测定土壤中蔗糖酶和过氧化氢酶的酶活。结果表明:在土壤中加入短密木霉,5~20 d中土壤蔗糖... 为探究短密木霉以及短密木霉、大豆和咪唑乙烟酸相互作用对土壤蔗糖酶和过氧化氢酶活性的影响,本文采用3,5-二硝基水杨酸法、高锰酸钾滴定法分别测定土壤中蔗糖酶和过氧化氢酶的酶活。结果表明:在土壤中加入短密木霉,5~20 d中土壤蔗糖酶活性均呈现激活趋势,10 d时蔗糖酶活性最高为53.85 mg/kg,激活率达到169.94%;过氧化氢酶活性呈现出激活—抑制—恢复的趋势,5 d时土壤过氧化氢酶活性最高,为2.47 mg/g,激活率达5.71%,随后受到抑制,酶活性最低达2.30 mg/g,抑制率最高达到17.86%。种植大豆、加入短密木霉,再加入100 mg/kg的咪唑乙烟酸后,土壤蔗糖酶活性呈现激活—恢复—激活—抑制的趋势,10 d时土壤蔗糖酶活性最高,为60.09 mg/kg,激活率达201.21%,20 d时蔗糖酶活性被抑制,其活性为68.13 mg/kg,抑制率最高达62.43%;土壤过氧化氢酶活性呈现抑制—恢复—激活的趋势,20 d时酶活性最低为2.43 mg/g,抑制率最高达到17.98%,40 d时酶活性最高,为2.70 mg/g,激活率最高达到9.46%。 展开更多

关键词 短密木霉 蔗糖酶 过氧化氢酶

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脐孢木霉菌中tri基因簇的克隆及tri基因在不同产素水平下的表达分析

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作者 袁小枫 申屠旭萍 俞晓平 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2016年第1期93-100,共8页

木霉素(trichodermin)是单端孢霉烯类化合物的一种,其对多种植物病原真菌具有较强的抑制作用。为分析脐孢木霉菌Trichoderma brevicompactum tri基因簇中各基因与木霉素合成的关系,本研究首先克隆得到了脐孢木霉菌0248的tri基因簇,其全... 木霉素(trichodermin)是单端孢霉烯类化合物的一种,其对多种植物病原真菌具有较强的抑制作用。为分析脐孢木霉菌Trichoderma brevicompactum tri基因簇中各基因与木霉素合成的关系,本研究首先克隆得到了脐孢木霉菌0248的tri基因簇,其全长24793 bp且含有7个开放阅读框。利用实时荧光定量PCR分析基因簇中各基因在产木霉素能力不同的培养基中表达,结果表明,高产素培养基中tri基因表达量在培养40 h时较高,随后的时间里表达量大幅降低。在低产或不产素培养基中,tri基因在培养40 h时表达量远低于其在高产素的培养基中基因表达量,在52 h时表达量有所提高,但在随后的时间里呈下降趋势,即tri基因簇表达量与木霉素的产量呈正相关。该研究为进一步阐明木霉素合成途径中相关基因的功能和提高脐孢木霉菌0248的生物防治效果奠定了基础。 展开更多

关键词 脐孢木霉菌 木霉素 tri基因簇 碳源 实时荧光定量PCR

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短密木霉菌株GAS1-1的分离鉴定、拮抗作用及其生物学特性 被引量：11

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作者 郭成 张小杰 +3 位作者 张有富 王春明 周天旺 李敏权 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期305-312,共8页

为了解短密木霉Trichoderma brevicompactum对植物病害的生防作用及其生物学特性,利用稀释平板分离法从甘肃省景泰县马铃薯连作田植株根际土壤中分离获得1株木霉菌株GAS1-1,经形态观察、rDNA-ITS和EF-1α序列分析明确其分类地位;用生物... 为了解短密木霉Trichoderma brevicompactum对植物病害的生防作用及其生物学特性,利用稀释平板分离法从甘肃省景泰县马铃薯连作田植株根际土壤中分离获得1株木霉菌株GAS1-1,经形态观察、rDNA-ITS和EF-1α序列分析明确其分类地位;用生物学方法研究该菌的营养生长和产孢条件;采用对峙培养法测定该菌株对5种植物病原真菌的抑制作用。结果表明,基于形态学特征和基因序列分析结果,菌株GAS1-1被鉴定为短密木霉Trichoderma brevicompactum,为甘肃省木霉新记录种。该菌株对玉米镰孢茎腐病菌Fusarium graminearum、玉米穗腐病菌F. verticillioides、棉花枯萎病菌F. oxysporum、玉米腐霉茎腐病菌Pythium inflatum和灰葡萄孢霉Botrytis cinerea均具有较好的拮抗效果,尤其对玉米腐霉茎腐病菌的抑制作用最好,抑菌率达100.00%。该菌株营养生长和产孢的最适碳源和氮源分别为葡萄糖和酵母膏;其在15～35℃均可生长,菌丝最适生长温度为30℃,最佳产孢温度为25℃;在pH 5～12的培养基上菌丝均可生长,菌丝最适生长和产孢的pH均为5;24 h黑暗条件下菌丝营养生长最快,12 h光暗交替条件有利于产孢;孢子致死温度为69℃,10 min。表明短密木霉菌株GAS1-1具有较好的生防应用潜力。 展开更多

关键词 短密木霉 拮抗作用 生物学特性

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