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血清-βCTX和Total-P1NP联检在前列腺癌骨转移监测中的价值 被引量:4
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作者 王亚萍 黄璇 卢志贤 《放射免疫学杂志》 CAS 2011年第4期435-437,共3页
目的:为探讨血清Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(-βCTX)和总Ⅰ型胶原氨基端延长肽(Total-P1NP)在前列腺癌骨转移监测中的意义。方法:用电化学发光免疫分析检测血清β-CTX和Total-P1NP水平。结果:发现前列腺癌骨转移组的血清β-CTX明显高... 目的:为探讨血清Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(-βCTX)和总Ⅰ型胶原氨基端延长肽(Total-P1NP)在前列腺癌骨转移监测中的意义。方法:用电化学发光免疫分析检测血清β-CTX和Total-P1NP水平。结果:发现前列腺癌骨转移组的血清β-CTX明显高于无骨转移组及正常对照组(P均<0.05),而血清Total-P1NP明显低于无骨转移组及正常对照组(P均<0.05)。结论:检测血清β-CTX和Total-P1NP对前列腺癌患者骨转移的及时诊断有重要的参考意义。 展开更多
关键词 Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列 总Ⅰ型胶原氨基端延长肽 前列腺癌骨转移
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血清N-MID、β-CrossLaps与TP1NP对骨折术后愈合状态的评估价值
2
作者 褚晴 王科学 陆建红 《浙江实用医学》 2025年第3期242-244,247,共4页
目的探讨血清N-MID(骨钙素N端中分子片段)、β-CrossLaps(β-胶原特殊序列)、TP1NP(总Ⅰ型胶原氨基端延长肽)对骨折术后愈合状态的评估价值。方法回顾性分析中国人民武装警察部队海警总队医院2023年12月~2024年11月收治的骨折手术患者21... 目的探讨血清N-MID(骨钙素N端中分子片段)、β-CrossLaps(β-胶原特殊序列)、TP1NP(总Ⅰ型胶原氨基端延长肽)对骨折术后愈合状态的评估价值。方法回顾性分析中国人民武装警察部队海警总队医院2023年12月~2024年11月收治的骨折手术患者210例的临床资料,按照“延迟愈合”标准、根据术后第12周的骨折愈合状态将210例分为正常愈合组172例和延迟愈合组38例。比较两组不同时间节点的血清N-MID、β-CrossLaps与TP1NP差异,分析三个指标对骨折术后愈合状态的评估价值。结果骨折术后第4周、第8周、第12周时,延迟愈合组血清N-MID与TP1NP水平均低于正常愈合组,且同一时间节点延迟愈合组血清N-MID与TP1NP增长幅度低于对照组(P<0.05);术后1周至4周,两组β-CrossLaps水平均呈上升趋势(P<0.05),术后4周至12周,两组β-CrossLaps水平均开始下降,延迟愈合组血清β-CrossLaps水平均高于正常愈合组(P<0.05),且从术后4周起,降低幅度延迟愈合组小于正常愈合组(P<0.05)。结论联合检测血清N-MID、β-CrossLaps和TP1NP三个指标有助于更全面地了解骨折愈合过程中骨代谢的动态变化,为临床制定个性化治疗方案提供依据。 展开更多
关键词 骨折愈合 N-MID β-CrossLaps TP1np 骨代谢 诊断价值
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Netrin-1在消化道肿瘤中的作用及其单克隆抗体NP137应用的研究进展
3
作者 崔鲁邹 黄勇 《临床医学研究与实践》 2025年第32期187-190,共4页
Netrin-1是一种依赖性受体配体,其在恶性肿瘤细胞中可促进肿瘤细胞的增殖、迁徙和侵袭。目前,Netrin-1已被证实参与多种消化道肿瘤的发生、发展过程,与预后不良密切相关。NP137是Netrin-1的单克隆抗体,现已完成Ⅰ期临床试验(NCT0297719... Netrin-1是一种依赖性受体配体,其在恶性肿瘤细胞中可促进肿瘤细胞的增殖、迁徙和侵袭。目前,Netrin-1已被证实参与多种消化道肿瘤的发生、发展过程,与预后不良密切相关。NP137是Netrin-1的单克隆抗体,现已完成Ⅰ期临床试验(NCT02977195),且已证明其对多种肿瘤细胞有抑制作用。本文就Netrin-1在消化道肿瘤发展中的作用机制及其单克隆抗体NP137的应用进展作一综述,以期为消化道肿瘤的临床诊疗提供新思路。 展开更多
关键词 NETRIN-1 消化道肿瘤 np137 作用机制
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雷沃M3004-7NP1荣获2024“年度最佳拖拉机”
4
作者 姚彬 《农机质量与监督》 2025年第4期41-41,共1页
3月21日,2025全国农业机械展览会携手“农机媒体联盟”举办的第四届“年度拖拉机推荐活动”获奖结果正式揭晓,雷沃M3004-7NP1拖拉机荣获2024“年度最佳拖拉机”行业大奖。“年度拖拉机”采取专业、独立的推荐方式,为鼓励中国拖拉机行业... 3月21日,2025全国农业机械展览会携手“农机媒体联盟”举办的第四届“年度拖拉机推荐活动”获奖结果正式揭晓,雷沃M3004-7NP1拖拉机荣获2024“年度最佳拖拉机”行业大奖。“年度拖拉机”采取专业、独立的推荐方式,为鼓励中国拖拉机行业具有技术创新和引领性的产品而设立。此次获奖的雷沃M3004-7NP1拖拉机将成熟的动力换挡技术与极具科技感的第四代车身设计完美融合。 展开更多
关键词 动力换挡技术 年度最佳拖拉机 雷沃M3004-7np1
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非小细胞肺癌NP方案化疗敏感性与DNA修复基因XRCC1多态性的关系 被引量:11
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作者 洪成雨 徐倩 +2 位作者 岳峥 张晔 袁媛 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1291-1297,共7页
背景与目的:基因多态预测肿瘤化疗药物敏感性对肿瘤个体化治疗具有重要意义。本研究旨在探讨DNA修复基因XRCC1 codon194及399位点基因多态性与非小细胞肺癌长春瑞滨加顺铂(vinorelbine and cisplatin,NVB and DDP,NP)方案化疗敏感性的... 背景与目的:基因多态预测肿瘤化疗药物敏感性对肿瘤个体化治疗具有重要意义。本研究旨在探讨DNA修复基因XRCC1 codon194及399位点基因多态性与非小细胞肺癌长春瑞滨加顺铂(vinorelbine and cisplatin,NVB and DDP,NP)方案化疗敏感性的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测164例非小细胞肺癌患者外周血DNAXRCC1194和399位点的多态性。选择NP方案化疗,化疗两周期后评价疗效,并分析化疗敏感性与基因多态性的关系。结果:携带XRCC1基因Codon194C/T+T/T基因型者化疗有效率(41.8%)是C/C基因型者(26.0%)的2.038倍(P=0.036,95%CI=1.044-3.976)。携带XRCC1基因Codon399G/G、A/G、A/A型的患者化疗有效率(37.1%,34.6%,14.3%)之间的差异无统计学意义(P>0.05)。 展开更多
关键词 DNA修复基因 XRCC1 多态性 肺肿瘤 非小细胞 np方案 化疗敏感性
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猪博卡病毒NP1基因的克隆与原核表达 被引量:17
6
作者 李彬 毛立 +9 位作者 何孔旺 温立斌 茅爱华 张雪寒 倪艳秀 郭容利 马俊杰 周俊明 吕立新 俞正玉 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2011年第3期28-31,共4页
猪博卡病毒是近年来新发现的一种细小病毒。本研究根据其部分基因组序列(GenBank登录号GU902967-GU902971)设计了一对引物,采用PCR方法扩增出了猪博卡病毒的NP1基因,将其克隆到表达载体pET32a(+)中,构建了重组质粒pET32a-NP1,经测序鉴... 猪博卡病毒是近年来新发现的一种细小病毒。本研究根据其部分基因组序列(GenBank登录号GU902967-GU902971)设计了一对引物,采用PCR方法扩增出了猪博卡病毒的NP1基因,将其克隆到表达载体pET32a(+)中,构建了重组质粒pET32a-NP1,经测序鉴定正确后,将其转化感受态细胞BL21(DE3)中,并进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌可表达分子量为46 kDa的融合蛋白,蛋白表达量较高,而且蛋白以可溶性形式存在于菌体中。表达产物经纯化后,目的蛋白纯度较好。Western Blot结果显示,表达的NP1蛋白能与His抗体发生特异性的免疫反应,表明原核表达的NP1蛋白具有良好的反应原性。 展开更多
关键词 猪博卡病毒 np1基因 克隆 原核表达
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血清P1NP、β-CTX检测在老年乳腺癌骨转移诊断中的价值 被引量:9
7
作者 孙献甫 崔树德 +3 位作者 孙淼淼 贺亚宁 邵营波 刘慧 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第14期3827-3828,共2页
目的探讨血清Ⅰ型胶原氨基端延长肽(P1NP)和β-I型胶原羧基端肽(β-CTX)在乳腺癌骨转移监测中的意义。方法 88例乳腺癌患者分为乳腺癌骨转移组48例,无骨转移组40例,健康体检者40例为正常对照组,用电化学发光免疫分析检测血清P1NP和β-CT... 目的探讨血清Ⅰ型胶原氨基端延长肽(P1NP)和β-I型胶原羧基端肽(β-CTX)在乳腺癌骨转移监测中的意义。方法 88例乳腺癌患者分为乳腺癌骨转移组48例,无骨转移组40例,健康体检者40例为正常对照组,用电化学发光免疫分析检测血清P1NP和β-CTX水平。结果乳腺癌骨转移组的血清P1NP明显低于无骨转移组及正常对照组(均P<0.05),而血清β-CTX明显高于无骨转移组及正常对照组(均P<0.05);乳腺癌骨转移患者P1NP与β-CTX呈负相关(r=-0.677,P<0.05)。结论血清P1NP和β-CTX对乳腺癌患者骨转移的早期诊断有一定的价值。 展开更多
关键词 乳腺癌骨转移 CTX P1np
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NP9基因的克隆及对细胞周期素D1转录活性的影响 被引量:9
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作者 刘启才 方嬿 +2 位作者 李晓艳 梁卫江 曾益新 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第7期725-728,共4页
背景与目的:NP9基因是我们在鼻咽癌中克隆到的一个新的表达下调的基因(GenBank登录号:BF718797),为了进一步研究该基因的功能,我们构建了人NP9基因编码区序列的真核表达质粒,并研究其表达对细胞周期素D1(cyclinD1)的影响。方法:通过核... 背景与目的:NP9基因是我们在鼻咽癌中克隆到的一个新的表达下调的基因(GenBank登录号:BF718797),为了进一步研究该基因的功能,我们构建了人NP9基因编码区序列的真核表达质粒,并研究其表达对细胞周期素D1(cyclinD1)的影响。方法:通过核苷酸同源序列比较(BlastN)得到NP9EST的同源cDNA,RT-PCR扩增其编码区序列并构建真核表达重组质粒pRc/CMV2-NP9,脂质体转染后G418筛选出稳定、高效转录NP9基因的细胞克隆;再通过脂质体转染cyclinD1promoterLuc和NF-κB-Luc质粒到稳定表达NP9基因的细胞克隆,测定荧光素酶的活性以确定NP9基因对cyclinD1和NF-κB转录活性的影响;同时亚克隆NP9基因编码序列到载体pEGFP-C1中,脂质体转染细胞以确定NP9蛋白在细胞中的定位。结果:融合的绿色荧光蛋白出现于细胞核。G418抗性克隆中,RT-PCR扩增证实部分克隆表达NP9基因,且强弱不同。表达NP9基因的细胞克隆在瞬间转染cyclinD1promoterLuc和NF-κB-Luc48h后,荧光素酶的活性较其对照组分别下降46%和63%。结论:NP9蛋白在细胞核内表达;NP9基因通过抑制核转录因子NF-κB的转录活性下调cyclinD1的表达。 展开更多
关键词 np9基因 克隆 细胞周期素D1 转录活性 影响 鼻咽肿瘤
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β-CTX、t-P1NP及N-MID-OT在绝经后女性骨质疏松性骨折风险评估中的应用 被引量:14
9
作者 王津 张云 +2 位作者 陈实 李晓艳 张静 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期176-180,共5页
目的探讨β胶原特殊序列(β-crosslaps,β-CTX)、总1型胶原氨基端延长肽(t-P1NP)及N端中段骨钙素(N-MID-OT)在绝经后女性骨质疏松性骨折风险评估中的应用价值。方法回顾性分析2020年2月至2022年12月解放军总医院第六医学中心收治的102... 目的探讨β胶原特殊序列(β-crosslaps,β-CTX)、总1型胶原氨基端延长肽(t-P1NP)及N端中段骨钙素(N-MID-OT)在绝经后女性骨质疏松性骨折风险评估中的应用价值。方法回顾性分析2020年2月至2022年12月解放军总医院第六医学中心收治的102例绝经后骨质疏松(postmenopausal osteoporosis,PMOP)患者的临床资料,将其作为研究组,并根据是否发生骨折将其分为PMOP骨折组(39例)与PMOP未骨折组(63例),另选100名健康体检者作为对照组。记录所有研究对象的β-CTX、t-P1NP及N-MID-OT水平并进行比较,用ROC曲线评价β-CTX、t-P1NP及N-MID-OT在绝经后女性骨质疏松性骨折风险评估中的应用价值。结果研究组的平均体重、体质量指数、股骨颈骨密度(bone mineral density,BMD)、左髋总和BMD及L 1~4总和BMD均明显低于对照组(P<0.05);而两组研究对象的平均年龄、平均身高及绝经年龄等比较差异均无统计学意义(P>0.05)。研究组的β-CTX、t-P1NP及N-MID-OT均明显高于对照组(t值依次为12.688、37.430、26.599,P<0.05)。β-CTX+t-P1NP+N-MID-OT联合检测用于预测PMOP的AUC值为0.978,敏感度为98.04%,特异度为97.00%,表明β-CTX+t-P1NP+N-MID-OT三指标联合检测用于预测PMOP的效能更高。PMOP骨折组的β-CTX、t-P1NP及N-MID-OT均明显高于PMOP未骨折组(t值依次为6.078、16.363、12.227,P<0.05)。β-CTX+t-P1NP+N-MID-OT联合检测用于评估PMOP骨折风险的AUC值为0.939,敏感度为94.87%,特异度为95.24%,表明β-CTX+t-P1NP+N-MID-OT联合检测用于评估PMOP骨折风险的效能更高。结论PMOP患者β-CTX、t-P1NP及N-MID-OT水平均明显升高,而PMOP骨折患者β-CTX、t-P1NP及N-MID-OT水平升高更为明显,且β-CTX+t-P1NP+N-MID-OT联合检测可显著提高对PMOP预测及骨折风险评估效能,值得借鉴。 展开更多
关键词 β-CTX t-P1np N-MID-OT 绝经后女性 骨质疏松性骨折 风险评估
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小麦中外源基因瞬间表达调控研究及兔防御素(NP-1)基因的转化 被引量:21
10
作者 郭殿京 傅荣昭 +4 位作者 李文彬 陈颖 张晓东 张利明 孙勇如 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1999年第2期168-173,共6页
将不同5’上游调控序列驱动下的GUS基因用基因枪法导入小麦幼胚和胚性愈伤组织,通过组织化学分析法和荧光分析法对GUS基因的表达进行定量检测,比较了几种启动子和烟草花叶病毒(TMV)增强子序列对小麦中外源基因瞬间表达的... 将不同5’上游调控序列驱动下的GUS基因用基因枪法导入小麦幼胚和胚性愈伤组织,通过组织化学分析法和荧光分析法对GUS基因的表达进行定量检测,比较了几种启动子和烟草花叶病毒(TMV)增强子序列对小麦中外源基因瞬间表达的调控作用;然后将其中效率最高的玉米Ubil启动子与兔防御素(NP-1)基因连接起来,并加上Nos终止子,构建成NP-1基因小麦表达载体,并转化小麦幼胚。经PCR-Southernblot分析,初步确定NP-1基因已整合到小麦基因组中。转基因植株的抑菌试验正在进行中。 展开更多
关键词 小麦 外源基因 防御素基因 表达调控
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利用花粉管通道法将兔防御素NP-1基因导入小麦的研究 被引量:13
11
作者 周春江 葛荣朝 +3 位作者 赵宝存 黄占景 沈银柱 何聪芬 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2007年第2期26-28,共3页
兔防御素NP-1是抗性谱最广的防御素之一。为提高小麦的抗病虫能力,培育优质高抗的小麦品种,采用花粉管通道法将兔防御素NP-1基因导入优质小麦品种G8901。对得到的193株T0植株进行抗除草剂筛选,获得4株抗性植株。通过PCR及PCR-Southern杂... 兔防御素NP-1是抗性谱最广的防御素之一。为提高小麦的抗病虫能力,培育优质高抗的小麦品种,采用花粉管通道法将兔防御素NP-1基因导入优质小麦品种G8901。对得到的193株T0植株进行抗除草剂筛选,获得4株抗性植株。通过PCR及PCR-Southern杂交,证实了NP-1基因已经整合到转基因植株的基因组中,并稳定遗传到T1。田间抗病虫鉴定结果表明,这些植株对于白粉病、叶锈和条锈病有较强的免疫力和抗性,但对于蚜虫的抗性没有明显提高。 展开更多
关键词 小麦 兔防御素np-1基因 转化 花粉管通道
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NP9对鼻咽癌细胞系CNE1基因表达谱的影响 被引量:3
12
作者 刘启才 李晓艳 +2 位作者 彭燕 李晓岩 李冰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期982-985,共4页
目的:确定NP9表达对鼻咽癌CNE1细胞基因表达谱的影响。方法:稳定表达NP9基因和稳定转染空载体的CNE1细胞分别作为基因芯片分析的实验组和对照组,用高通量的基因芯片筛选实验组细胞的差异表达基因,荧光定量逆转录PCR验证部分基因表达差... 目的:确定NP9表达对鼻咽癌CNE1细胞基因表达谱的影响。方法:稳定表达NP9基因和稳定转染空载体的CNE1细胞分别作为基因芯片分析的实验组和对照组,用高通量的基因芯片筛选实验组细胞的差异表达基因,荧光定量逆转录PCR验证部分基因表达差异。结果:所分析的14500个基因中,266个检测出有表达差异,其中82个基因呈现表达上调(RA>1),184个基因显示表达下调(RA<1)。显著上调和下调的基因分别为34个(RA>1.5)和75个(RA<1.5)。结论:NP9基因的表达导致了CNE1细胞中与细胞周期调控、细胞增殖和分化、细胞信号转导、细胞黏附相关基因表达的改变,为NP9的功能及分子机制研究提供了新的线索。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 基因 np9 基因表达 CNE1细胞
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犬博卡病毒非结构基因NP1多克隆抗体的制备与鉴定 被引量:2
13
作者 闫琰 张茜 +3 位作者 马婧 李建宁 张薇 孙玉宁 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期864-869,I0006,共7页
目的:制备犬博卡病毒(MVC)的非结构基因NP1的兔多克隆抗体,并进行特异性鉴定。方法:以MVC的感染性克隆pI-MVC为模板,构建NP1基因的原核表达质粒pGEX-4T-3-NP1,转化大肠杆菌BL21后,在异巯基-1-硫代-β呋喃半乳糖(IPTG)诱导下,表达谷胱甘... 目的:制备犬博卡病毒(MVC)的非结构基因NP1的兔多克隆抗体,并进行特异性鉴定。方法:以MVC的感染性克隆pI-MVC为模板,构建NP1基因的原核表达质粒pGEX-4T-3-NP1,转化大肠杆菌BL21后,在异巯基-1-硫代-β呋喃半乳糖(IPTG)诱导下,表达谷胱甘肽S-转移酶(GST)-NP1蛋白。用亲和层析纯化的融合蛋白免疫大白兔,制备NP1抗血清并用ELISA法测定抗血清效价。采用Western blotting和免疫荧光法检测NP1抗血清的特性。结果:成功构建MVC NP1基因的原核表达质粒pGEX-4T-3-NP1,在大肠杆菌中获得高效表达。表达产物经亲和层析纯化后得到高纯度的NP1融合蛋白,以其免疫大白兔获得NP1多抗血清,ELISA法检测效价达到1∶400 000。Western blotting法及免疫荧光检测,所得抗血清具有较高的效价及特异性。结论:本研究利用原核表达的MVC GST-NP1融合蛋白制备的NP1抗血清效价高、特异性高,为进一步深入研究NP1在MVC感染及致病分子机制中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 犬博卡病毒 np1基因 多克隆抗体
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H1N2亚型猪流感病毒HA、NP、NA、M和NS基因的克隆与序列分析 被引量:3
14
作者 蒙雪琼 陈义祥 +3 位作者 刘棋 郑敏 施开创 胡杰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期221-227,共7页
对3株H1N2亚型猪流感病毒(SIV):Sw/GX/17/05、Sw/HN/I/05和Sw/GX/13/06的血凝素(HA)、核蛋白(NP)、神经氨酸酶(NA)、基质蛋白(M)和非结构蛋白(NS)基因进行克隆和序列分析。结果显示:3株分离毒株HA、NP、NA、M和N... 对3株H1N2亚型猪流感病毒(SIV):Sw/GX/17/05、Sw/HN/I/05和Sw/GX/13/06的血凝素(HA)、核蛋白(NP)、神经氨酸酶(NA)、基质蛋白(M)和非结构蛋白(NS)基因进行克隆和序列分析。结果显示:3株分离毒株HA、NP、NA、M和NS基因之间核苷酸同源性分别为91.3%~98.0%、98.4%~98.8%、97.4%~98.3%、98.8%~99.8%和98.1%~98.4%。遗传进化分析显示:分离毒株与美国分离的三源基因重排HIN2sIV具有较近的亲缘关系;在HA、NP、M和NS基因进化树中,3株分离毒株均位于古典H1N1亚型SIV群,在NA基因进化树中,3株分离毒株则位于人流感病毒群。HA和NA基因推导氨基酸序列分别与代表毒株古典H1N1SIVA/swine/Maryland/23239/1991(H1N1)和人H3N2流感病毒A/BuenosAires/4459/96(H3N2)比较分析显示:HA(95.4%~96.1%)和NA(96.6%~97.2%)具有较高的氨基酸同源性;糖基化位点、抗原位点和受体结合位点(HA)处氨基酸存在一定的差异,这些氨基酸差异对病毒生物学特性的影响有待于进一步研究。 展开更多
关键词 H1N2亚型SIV HA基因 np基因 NA基因 M基因 NS基因 克隆 序列分析
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谓词隐含、物性角色和“NP1+的+NP2”结构 被引量:9
15
作者 李强 《语言研究》 CSSCI 北大核心 2015年第4期9-20,共12页
在生成词库理论的框架下,"谓词隐含"(袁毓林1995)实质上就是"事件强迫"。在此基础上,文章探讨了汉语的"NP1+的+NP2"结构,根据该结构的语义关系,对该结构能否隐含谓词以及隐含什么样谓词的现象进行了归纳... 在生成词库理论的框架下,"谓词隐含"(袁毓林1995)实质上就是"事件强迫"。在此基础上,文章探讨了汉语的"NP1+的+NP2"结构,根据该结构的语义关系,对该结构能否隐含谓词以及隐含什么样谓词的现象进行了归纳和描写;同时解释了为什么有的结构可以隐含谓词,有的结构不能隐含谓词,并将这种现象产生的原因归结为NP1和NP2所代表概念或事物之间关系的紧密程度差异。此外,文章还涉及"NP1+的+NP2"结构的歧义性问题,歧义性源于"NP1+的+NP2"结构隐含谓词的多样性,而谓词的多样性又是因为NP(包括NP1和NP2)有多种物性角色。 展开更多
关键词 谓词隐含 事件强迫 物性角色 np1+的+np2”结构 歧义
原文传递
彩色棉再生体系影响因子及抗病基因NP-1转化的研究 被引量:6
16
作者 张红艳 李冠 李仁敬 《新疆大学学报(自然科学版)》 CAS 2004年第1期94-98,共5页
选用彩色棉优良品种(棕色):新彩1号、新彩2号.以下胚轴和子叶作为外植体,确立了5~6日苗龄的彩色棉下胚轴是较好的愈伤组织诱导外植体.不同激素组合及浓度对愈伤组织的诱导有重要作用,2,4-D是愈伤组织诱导中重要的激素,在附加有0.1mol/L... 选用彩色棉优良品种(棕色):新彩1号、新彩2号.以下胚轴和子叶作为外植体,确立了5~6日苗龄的彩色棉下胚轴是较好的愈伤组织诱导外植体.不同激素组合及浓度对愈伤组织的诱导有重要作用,2,4-D是愈伤组织诱导中重要的激素,在附加有0.1mol/L2,4-D+0.1mol/LKT的MSB培养基上,诱导形成的愈伤组织质地疏松、生长旺盛,有利于分化为胚性愈伤.比较了不同糖源在愈伤组织诱导中的效应,在蔗糖和葡萄糖为糖源的培养基中,愈伤组织诱导率均为100%,但葡萄糖更有利于愈伤组织的形成和生长,蔗糖的诱导效果次之;麦芽糖和乳糖对愈伤组织的诱导效应不及蔗糖和葡萄糖;甘露醇作为糖源则抑制了愈伤组织的诱导和生长.在胚性愈伤组织的诱导培养中,KNO3加倍和NH4NO3减半的组合利于胚性愈伤组织的发生.在根癌农杆菌介导的抗病基因兔防御素NP-1转化过程中,外植体经农杆菌浸染10min,共培养48h较为合适,在添加头孢霉素500mg/L、卡那霉素50mg/L的培养基中筛选抗性愈伤组织. 展开更多
关键词 彩色棉 影响因子 愈伤组织 兔防御素np-1 外植体确定 根癌农杆菌 遗传转化 糖源诱导效应
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输入性甲型H1N1流感病毒M、NP、PB1基因进化特征 被引量:2
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作者 师永霞 刘丽珊 +7 位作者 黄吉城 洪烨 丁国允 李小波 郑夔 苏锦坤 幸芦琴 钟玉清 《中华疾病控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期488-491,共4页
目的分析口岸输入性甲型H1N1流感病毒的M、NP和PB1基因进化特征,及时发现变异株。方法对广东口岸2009-2011年检测的甲型H1N1流感阳性病例进行M、NP和PB1基因的RT-PCR扩增和核苷酸序列测定。以2009年甲型H1N1流感代表株A/California/04/2... 目的分析口岸输入性甲型H1N1流感病毒的M、NP和PB1基因进化特征,及时发现变异株。方法对广东口岸2009-2011年检测的甲型H1N1流感阳性病例进行M、NP和PB1基因的RT-PCR扩增和核苷酸序列测定。以2009年甲型H1N1流感代表株A/California/04/2009/H1N1的M、NP和PB1基因作为参考序列,分析输入性病例的系统进化树、核苷酸及氨基酸序列同源性和变异位点。结果 M基因系统进化树分为4个分支,2009年病毒与2010年病毒主要分布在第Ⅰ分支,2011年检出的多数病毒聚集于第Ⅳ分支。同源性结果显示M基因高度保守,仅有5个核苷酸位点发生显著变异,对应的蛋白序列仅在氨基酸V80I位点出现突变。所有病毒NP蛋白均出现V100I突变,同时零星出现K452R突变。PB1蛋白氨基酸序列在G154D、I397M和I435T等位点发生较明显突变。结论 2009-2011年输入性甲型H1N1流感病毒M、NP、PB1基因已发生一定程度的变异,对口岸和国内流感防控提供了重要的理论依据。 展开更多
关键词 流感病毒A型 H1N1亚型 M基因 np基因
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猪博卡病毒非结构蛋白NP1基因的克隆及基因分型研究 被引量:2
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作者 陈如敬 吴学敏 +5 位作者 车勇良 王隆柏 严山 魏宏 刘玉涛 周伦江 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第2期292-297,共6页
为明确猪博卡病毒福建株非结构蛋白NP1的特征,本研究根据GenBank中登录的非结构蛋白NP1的基因特征,设计特异性引物从一份患有断奶仔猪多系统衰竭综合征的仔猪肺脏和淋巴结基因组DNA中扩增到猪博卡病毒非结构蛋白NP1的全长基因序列。测... 为明确猪博卡病毒福建株非结构蛋白NP1的特征,本研究根据GenBank中登录的非结构蛋白NP1的基因特征,设计特异性引物从一份患有断奶仔猪多系统衰竭综合征的仔猪肺脏和淋巴结基因组DNA中扩增到猪博卡病毒非结构蛋白NP1的全长基因序列。测序结果显示,本试验克隆的猪博卡病毒非结构蛋白NP1的基因全长为675bp,编码有224个氨基酸,其与美国株猪博卡病毒(OH110株)核苷酸同源性最高,达97.3%,但与美国株猪博卡病毒(IN109-1株)核苷酸同源性仅为81.8%;与英国北爱尔兰野猪博卡病毒(F41株和64-1株)同源性均不高,分别为82.5%和80.9%;与猪博卡病毒(H18株)核苷酸同源性最低,仅为43.8%。通过对猪博卡病毒代表株进行核苷酸同源性比对分析发现,猪博卡病毒存在3个主要的基因群,不同基因群非结构蛋白NP1的核苷酸同源性均低于50.0%。结果提示需对猪博卡病毒进行明确的划分,不同来源的猪博卡病毒可细分为3个明显的代表种。 展开更多
关键词 猪博卡病毒 非结构蛋白np1 克隆 序列分析 基因分型
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猪流感H1N1亚型NP基因杆状病毒表达载体构建及其在昆虫细胞中的表达 被引量:1
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作者 段博芳 张利仙 +5 位作者 段纲 董俊 叶玲玲 周晓黎 徐志斌 艾军 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1118-1122,共5页
目的获得研发A型猪流感病毒ELISA检测试剂盒和制备NP蛋白单克隆抗体的抗原物质。方法根据已报道的猪流感病毒H1N1亚型NP基因序列(GenBank登录号:GQ422386)人工合成NP基因,通过XbaⅠ和EcoRⅠ特异性酶切,将NP基因克隆于昆虫杆状病毒表达载... 目的获得研发A型猪流感病毒ELISA检测试剂盒和制备NP蛋白单克隆抗体的抗原物质。方法根据已报道的猪流感病毒H1N1亚型NP基因序列(GenBank登录号:GQ422386)人工合成NP基因,通过XbaⅠ和EcoRⅠ特异性酶切,将NP基因克隆于昆虫杆状病毒表达载体pFastBacHTB,经PCR、酶切、测序鉴定后,获得携带NP基因的重组质粒pFast-BacHTB-NP。该重组质粒转化含有杆状病毒穿梭载体的DH10Bac感受态细胞,经抗生素、PCR筛选,获得转座的杆粒Bac-mid-NP。在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒,再感染细胞,收获目的蛋白。结果通过SDS-PAGE和Westernblotting分析表明该蛋白得到表达,且具有良好的生物活性,大小约为57KD。结论实验结果表明已成功构建了携带NP基因的重组质粒pFastBacHTB-NP和转座的杆粒Bacmid-NP,转染后在sf9昆虫细胞上成功的表达。 展开更多
关键词 H1N1 np基因 杆状病毒表达载体 昆虫细胞
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兔防御素NP-1基因在小麦抗病育种中应用的初步研究 被引量:7
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作者 周春江 黄占景 +2 位作者 沈银柱 赵世民 何聪芬 《麦类作物学报》 CAS CSCD 2003年第2期7-10,共4页
兔防御素NP-1是抗性谱最广的防御素之一。为了得到转NP-1基因的小麦植株,采用电激法、基因枪法和花粉管通道法将兔防御素NP-1基因导入普通小麦品种G9501和G8901中,经过抗生素和除草剂初步筛选得到8株G9501和4株G8901的转化植株。田间抗... 兔防御素NP-1是抗性谱最广的防御素之一。为了得到转NP-1基因的小麦植株,采用电激法、基因枪法和花粉管通道法将兔防御素NP-1基因导入普通小麦品种G9501和G8901中,经过抗生素和除草剂初步筛选得到8株G9501和4株G8901的转化植株。田间抗病虫鉴定结果表明,这些植株对于白粉病、叶锈和条锈病的抗性有较大的提高,但对于蚜虫的抗性没有提高,初步认为兔防御素NP-1基因已经导入小麦,并已经在小麦中得到了表达。转基因植株的进一步检测工作正在进行中。 展开更多
关键词 兔防御素np-l基因 小麦 抗病育种 转基因 基因枪法
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