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橡胶草乳管特异性高表达基因TkREF的启动子区段鉴定
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作者 刘星 杨雪 +2 位作者 张芳 唐朝荣 刘开业 《分子植物育种》 北大核心 2025年第4期1154-1163,共10页
橡胶草(Taraxacum kok-saghyz Rodin,TKS)根部天然橡胶含量可达干重的20%以上,且橡胶的质量和特性与橡胶树相似,因此被认为是理想的产胶替代植物。橡胶延伸因子(rubber elongation factor,REF)是胶乳中特异高表达且对橡胶生物合成具有... 橡胶草(Taraxacum kok-saghyz Rodin,TKS)根部天然橡胶含量可达干重的20%以上,且橡胶的质量和特性与橡胶树相似,因此被认为是理想的产胶替代植物。橡胶延伸因子(rubber elongation factor,REF)是胶乳中特异高表达且对橡胶生物合成具有重要作用的一类蛋白,然而调控其乳管特异性高表达的启动子区段尚未被鉴定。本研究利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析了TkREF的时空表达特性,结果发现该基因在橡胶草生长的不同阶段均表现为胶乳特异性高表达,且表达水平呈现逐渐增加的趋势。启动子顺式作用元件预测分析发现,TkREF的启动子区主要包含环境响应元件(17%)、功能未知元件(44%)和启动子基本元件(36%)。对TkREF不同长度启动子区段驱动GUS报告基因的转基因橡胶草进行GUS染色和GUS酶活性分析,结果表明在TkREF启动子-1088 bp至-759 bp之间存在调控该基因在胶乳中高表达的顺式作用元件,而在-1980 bp和-1088 bp之间以及-759 bp和-359 bp之间可能存在抑制该基因胶乳表达的顺式作用元件。本研究为阐明TkREF参与产胶调控的机制及其在橡胶草高产分子育种中的应用提供了理论依据。 展开更多
关键词 tkref 乳管特异性 启动子区段鉴定 GUS酶活 GUS染色
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