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TIF3转基因CHO和COS7细胞株的构建与鉴定 被引量:1
1
作者 雷毅雄 Pius Joseph +1 位作者 刘玉清 Tong-manOng 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期55-57,共3页
目的 构建 TIF3转基因 CHO和 COS7细胞株并对其构建的细胞株进行鉴定。方法 采用磷酸钙介导转染技术和 G4 18细胞筛选法 ,以 pc DNA3.1/ V5 - His- TOPO为表达载体 ,构建 TIF3转基因 CHO和 COS7细胞株 ;并应用 Western Blot技术对转... 目的 构建 TIF3转基因 CHO和 COS7细胞株并对其构建的细胞株进行鉴定。方法 采用磷酸钙介导转染技术和 G4 18细胞筛选法 ,以 pc DNA3.1/ V5 - His- TOPO为表达载体 ,构建 TIF3转基因 CHO和 COS7细胞株 ;并应用 Western Blot技术对转基因表达产物进行分析与鉴定。实验设计分无转染组、载体转染组和目的基因转染组。结果 在 7株转染的 CHO细胞株中 ,有 3株具有高效稳定表达的 TIF3编码蛋白质 ;在 4株转染的 COS7细胞株中有 2株同样具有高效稳定的 TIF3编码蛋白质表达。结论 本研究成功地构建了 3株 TIF3转基因 CHO细胞株和 2株 TIF3转基因 COS7细胞株 。 展开更多
关键词 tif3cDNA 稳定转染 CHO细胞 COS7细胞 WESTERN BLOT
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TIF3转基因CHO和COS7细胞株的构建与鉴定
2
作者 雷毅雄 刘玉清 +2 位作者 徐培渝 Pius Joseph Tong-man Ong 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2002年第3期183-183,共1页
[目的 ]TIF3(MouseTranslationInitiationFacfor 3)是从镉转化BALB/c 3T3细胞中克隆出来的新基因 ,其在基因文库 (Gen Bank)的新添编号为AF2 710 72。为了对该基因的生物学功能进行研究 ,构建了TIF3转基因CHO和COS7细胞株并作了鉴定。[... [目的 ]TIF3(MouseTranslationInitiationFacfor 3)是从镉转化BALB/c 3T3细胞中克隆出来的新基因 ,其在基因文库 (Gen Bank)的新添编号为AF2 710 72。为了对该基因的生物学功能进行研究 ,构建了TIF3转基因CHO和COS7细胞株并作了鉴定。[方法 ]采用磷酸钙介导转染技术和G418细胞筛选法 ,以pcD NA3 1/V5 His TOPO为表达载体 ,构建TIF3转基因CHO和COS7细胞株 ;应用WesternBlot技术对转基因表达产物进行分析与鉴定。实验设计分无转染组 (空白对照 )、载体转染组 (载体对照 )和目的基因转染组 (载体 +TIF3cDNA )。 [结果 ]结果显示 ,无论在CHO细胞还是COS7细胞 ,经转染和G418筛选后 ,无转染组的细胞 10 0 %死亡 ,而载体转染组和TIF3cDNA转染组的细胞形成较多的细胞集落。提示克隆化基因的细胞转染及G418筛选效果良好。经WesternBlot分析与鉴定 ,在 7株转染和经G418反复筛选的CHO细胞株中 ,有 3株具有高效稳定表达约 36kDa的TIF3编码蛋白质 ;在 4株转染和经G418反复筛选的COS7细胞株中有 2株也具有高效稳定的TIF3编码蛋白质表达 ,而无转染组和载体对照组的CHO和COS7细胞均缺乏此蛋白质表达。 [结论 ]本研究成功地构建了 3株TIF3转基因CHO细胞株和 2株TIF3转基因COS7细胞株。这两类TIF3转基因哺乳动物细胞稳定? 展开更多
关键词 tif3cDNA 转染 CHO细胞 COS7细胞 WESTERN BLOT 编码蛋白质表述
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TIF3镉应答基因的致癌性
3
作者 雷毅雄 Pius Joseph +1 位作者 陈家堃 Tong-man Ong 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2002年第4期216-218,共3页
[目的 ]前期研究发现 ,镉相关新基因TIF3 (基因文库添码 :AF2 710 72 )转染NIH3T3细胞可致其编码蛋白质表达升高而引起细胞转化。本研究的目的是对TIF3基因转化NIH3T3细胞的致癌能力和致瘤性进行鉴定。 [方法 ]软琼脂集落形成试验和裸... [目的 ]前期研究发现 ,镉相关新基因TIF3 (基因文库添码 :AF2 710 72 )转染NIH3T3细胞可致其编码蛋白质表达升高而引起细胞转化。本研究的目的是对TIF3基因转化NIH3T3细胞的致癌能力和致瘤性进行鉴定。 [方法 ]软琼脂集落形成试验和裸鼠成瘤试验。 [结果 ]所有 4株不同的TIF3转染的NIH3T3细胞在软琼脂培养中均显示锚非依赖性生长能力 ,形成明显的细胞集落。而非转化对照细胞在软琼脂上则无生长能力。转化细胞和对照细胞分别给裸鼠皮下注射 (每组 4只 ) ,4周后所有接种转化细胞的裸鼠全部长出大小不等的肿瘤 ,但非转化的对照细胞于第 5周后仍无 1只裸鼠出现肿瘤。提示TIF3转基因转化细胞属恶性转化细胞 ,具有一定的致癌能力和致瘤作用。 [结论 ]根据本研究结果及前期发现 。 展开更多
关键词 tif3基因 原癌基因 细胞转化 裸鼠 NIH3T3细胞 软琼脂集落形成
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反义TIF3逆转镉转化BALB/c-3T3细胞的致癌性
4
作者 雷毅雄 Pius Joseph +1 位作者 吴中亮 Tong-man Ong 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期255-257,共3页
为探讨反义TIF3能否逆转镉转化细胞的致癌性 ,用磷酸钙介导转染法和G418细胞筛选技术 ,建立CdCl2 转化BALB c 3T3细胞反义TIF3稳定表达系统 ,再用软琼脂检测和裸鼠致瘤试验对这些转基因细胞的致癌性逆转情况进行鉴定。结果显示CdCl2 转... 为探讨反义TIF3能否逆转镉转化细胞的致癌性 ,用磷酸钙介导转染法和G418细胞筛选技术 ,建立CdCl2 转化BALB c 3T3细胞反义TIF3稳定表达系统 ,再用软琼脂检测和裸鼠致瘤试验对这些转基因细胞的致癌性逆转情况进行鉴定。结果显示CdCl2 转化BALB c 3T3细胞中反义TIF3表达可逆转这些细胞的转化表型 ,与非转染细胞和载体转染对照细胞比较 ,转染反义TIF3的镉转化细胞在软琼脂上所形成的锚非依赖性生长集落减少 2 5 %~ 70 %。转染反义TIF3基因的镉转化细胞可延迟裸鼠出现肿瘤的时间 ,而且这些肿瘤的大小显著变小 ,肿瘤重量平均下降 5 0 8%~ 5 5 1%。提示反义TIF3mRNA表达可逆转镉转化细胞的致癌性 ; 展开更多
关键词 反义tif3 逆转 致癌性
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镉相关新基因TIF3的蛋白表达与细胞转化功能研究
5
作者 雷毅雄 陈家堃 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期315-316,共2页
目的 探讨TIF3基因在镉细胞转化和致癌过程中的重要作用。方法 用细胞转染 ,Westernblot,以及细胞转化等技术与方法 ,对克隆化基因TIF3的生物学功能进行研究。结果 TIF3cDNA以 pcDNA3 1/V5 -His -TOPO为表达载体所转染的CHO细胞和猴... 目的 探讨TIF3基因在镉细胞转化和致癌过程中的重要作用。方法 用细胞转染 ,Westernblot,以及细胞转化等技术与方法 ,对克隆化基因TIF3的生物学功能进行研究。结果 TIF3cDNA以 pcDNA3 1/V5 -His -TOPO为表达载体所转染的CHO细胞和猴肾COS1细胞均可表达分子量为 3 60 0 0的TIF3编码蛋白质 ,而非转染和单纯载体转染的对照细胞则无此蛋白质表达 ;此外 ,TIF3cDNA转染NIH3T3细胞可导致TIF3蛋白质超额表达 ,并与细胞转化密切相关。 展开更多
关键词 tif3基因 蛋白质 转染 细胞转化 肿瘤
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LiAlH4/LiNH2+Ti/TiF3复合物的储氢性能 被引量:1
6
作者 杨敬葵 王新华 +5 位作者 贝雅耀 潘洪革 陈立新 李寿权 葛红卫 陈长聘 《稀有金属材料与工程》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1561-1564,共4页
为改善LiAlH4和LiNH2的储氢性能,将两者混合球磨制备LiAlH4/LiNH2复合体系,并添加TiF3和Ti作为复合体系催化剂。采用DSC、TG、XRD和储氢特性测定等手段研究催化剂TiF3和Ti对LiAlH4/LiNH2复合体系储氢性能的影响。结果表明:添加Ti和TiF3... 为改善LiAlH4和LiNH2的储氢性能,将两者混合球磨制备LiAlH4/LiNH2复合体系,并添加TiF3和Ti作为复合体系催化剂。采用DSC、TG、XRD和储氢特性测定等手段研究催化剂TiF3和Ti对LiAlH4/LiNH2复合体系储氢性能的影响。结果表明:添加Ti和TiF3可显著改善Li-Al-N-H储氢体系的放氢动力学性能、提高放氢总量和降低体系的放氢温度。添加5%(摩尔分数,下同)TiF3催化剂后,LiAlH4/LiNH2复合体系球磨过程放氢量由1.27%(质量分数,下同)增加到1.69%,总放氢量由5.95%增加到6.85%。起始放氢温度由150℃降低到75℃。 展开更多
关键词 复合物 储氢性能 复合体系 放氢 催化剂 动力学性能 质量分数 温度 特性测定 球磨制备 球磨过程 摩尔分数 总量 结果 混合 XRD DSC
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氯化镉诱发16HBE细胞系恶性转化过程中TIF3 p36的变化 被引量:5
7
作者 魏莲 雷毅雄 +1 位作者 王敏 胡兵 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期578-581,共4页
目的探讨氯化镉诱发人支气管上皮细胞(16HBE)恶性转化过程中不同阶段蛋白翻译起始因子(TIF3)p36mRNA表达水平的变化,为进一步阐明氯化镉的分子致癌机制提供线索。方法应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,以及敏感先进的Taqman荧光定... 目的探讨氯化镉诱发人支气管上皮细胞(16HBE)恶性转化过程中不同阶段蛋白翻译起始因子(TIF3)p36mRNA表达水平的变化,为进一步阐明氯化镉的分子致癌机制提供线索。方法应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,以及敏感先进的Taqman荧光定量PCR方法,检测并分析氯化镉诱发16HBE恶性转化不同阶段即转化期间细胞、转化细胞和成瘤细胞的TIF3 p36 mRNA表达量的变化。结果相对于非转化对照细胞(16HBE),氯化镉诱发恶性转化不同阶段细胞(转化期间细胞、转化细胞和成瘤细胞)的TIF3 p36 mRNA基因表达水平均明显升高(P<0.01或P<0.05),其中低剂量组(5μmol/L)所转化的各阶段细胞的eIF3 p36 mRNA平均表达量分别是对照细胞的3.1、5.9和9.9倍,中剂量组(10μmol/L)的各阶段转化细胞的TIF3平均表达量分别是对照细胞的7.1、6.8和14.8倍,高剂量组(15μmol/L)的各阶段转化细胞的TIF3 p36平均表达量分别是对照细胞的3.6、3.0和9.1倍。这些不同剂量组的研究结果提示,eIF3 p36的异常表达量与氯化镉诱发16HBE细胞恶变程度之间有正相关关系,但与镉的剂量无关。结论氯化镉在诱发16HBE细胞恶变过程中,存在明显的蛋白翻译启动因子eIF3 p36异常表达现象,其表达水平与细胞的恶变程度密切相关,这可能是氯化镉诱发人细胞肿瘤的重要分子致癌机制之一。 展开更多
关键词 氯化镉 人支气管上皮细胞 恶性转化 翻译起始因子tif3 P36 Taqman荧光定量PCR
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TiF_3对氢化燃烧合成Mg_(95)Ni_5放氢性能的影响 被引量:3
8
作者 蔡浩 顾昊 +1 位作者 朱云峰 李李泉 《稀有金属材料与工程》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第1期50-54,共5页
研究了TiF3的添加对氢化燃烧合成Mg95Ni5放氢性能的影响。添加1%(摩尔分数,下同)TiF3机械球磨10h可使Mg95Ni5的放氢性能达到最佳,在523K时,1800s内的放氢量可达到5.20%(质量分数,下同),并使放氢反应的表观活化能从Mg95Ni5的124kJ/mol降... 研究了TiF3的添加对氢化燃烧合成Mg95Ni5放氢性能的影响。添加1%(摩尔分数,下同)TiF3机械球磨10h可使Mg95Ni5的放氢性能达到最佳,在523K时,1800s内的放氢量可达到5.20%(质量分数,下同),并使放氢反应的表观活化能从Mg95Ni5的124kJ/mol降低到86kJ/mol。研究表明,TiF3的催化作用可归因于生成的MgF2和Tix+的氢化物减弱了Mg-H鍵。 展开更多
关键词 放氢性能 tif3 催化作用
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硫化镍转化人细胞翻译启动因子的异常表达 被引量:3
9
作者 吴根容 雷毅雄 乔颖飒 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期1283-1285,共3页
目的 探讨结晶型硫化镍 (NiS)在诱发人支气管上皮细胞 ( 16HBE)恶变过程中蛋白质翻译启动因子(TIF3)的异常表达 ,以阐明不容性硫化镍的人类分子致癌机制。方法 应用逆转录 -聚合酶链式反应 (RT -PCR)技术 ,以及敏感先进的荧光定量PCR... 目的 探讨结晶型硫化镍 (NiS)在诱发人支气管上皮细胞 ( 16HBE)恶变过程中蛋白质翻译启动因子(TIF3)的异常表达 ,以阐明不容性硫化镍的人类分子致癌机制。方法 应用逆转录 -聚合酶链式反应 (RT -PCR)技术 ,以及敏感先进的荧光定量PCR方法 ,对异常表达的蛋白质翻译启动因子TIF进行检测。结果 相对于非转化对照细胞 ,RT -PCR实验初步显示 ,这些镍转化细胞和成瘤细胞的TIF3基因表达水平显著升高 ,平均分别是对照细胞的 2和 4倍 ,表明TIF3的异常表达水平与硫化镍诱发人支气管上皮细胞的恶变程度有关。结论 不容性结晶型硫化镍在诱发人支气管上皮细胞恶变过程中 ,存在明显的蛋白质翻译启动因子TIF3异常表达现象 ,其表达水平与细胞的恶变程度密切相关 。 展开更多
关键词 硫化镍(NiS) 人支气管上皮细胞 转化 翻译启动因子(tif3) 荧光定量PCR
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TiF_3对MgH_2体系解氢热力学影响的第一性原理研究 被引量:2
10
作者 袁江 周惦武 魏红伟 《中国有色金属学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1480-1486,共7页
基于TiF_3作为催化剂提高MgH_2解氢性能的实验结果,采用基于密度泛函理论的Dmol3程序包,计算从MgH_2体系中移走H原子所需能量及几何、电子结构的改变,探讨TiF_3对MgH_2体系解氢热力学影响及提高其解氢性能的机理。结果表明:Ti替代Mg,体... 基于TiF_3作为催化剂提高MgH_2解氢性能的实验结果,采用基于密度泛函理论的Dmol3程序包,计算从MgH_2体系中移走H原子所需能量及几何、电子结构的改变,探讨TiF_3对MgH_2体系解氢热力学影响及提高其解氢性能的机理。结果表明:Ti替代Mg,体系中Ti—H的成键作用比Mg-H强,Ti将MgH_2中的H吸附到其周围,导致MgH_2中Mg周围的H减少;创造Mg空位,随着温度的提高,体系中H—H之间的键长变短,两者情形均利于提高MgH_2体系的热力学行为。创造Mg空位所需能量(6.65 eV)高于Ti替代Mg的能量(2.34 eV),表明低温下,Ti替代Mg对MgH_2体系解氢更为有利,至此TiF_3中的Ti替代MgH_2中的Mg,利于加快化学反应的进行,使结构稳定的MgH_2发生转变,生成结构不稳定的Ti H2,这样体系解氢过程不是通过MgH_2,而是转化为Ti H2进行,因此TiF_3可提高MgH_2体系的解氢性能。 展开更多
关键词 MgH2 tif3 密度泛函理论 解氢性能
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TiF_3掺杂Li-Mg-B-H体系储氢性能研究 被引量:1
11
作者 方占召 王佩君 王平 《中国材料进展》 CAS CSCD 2009年第5期22-27,共6页
以2LiH+MgB2为起始原料,采用机械球磨法制备了TiF3掺杂的Li-Mg-B-H催化体系,并系统研究了TiF3对体系储氢性能的影响。结果表明,掺杂TiF3可显著改善Li-Mg-B-H体系的可逆吸/放氢性能。例如,与纯2LiH+MgB2相比,掺杂1%(摩尔分数)TiF3样品的... 以2LiH+MgB2为起始原料,采用机械球磨法制备了TiF3掺杂的Li-Mg-B-H催化体系,并系统研究了TiF3对体系储氢性能的影响。结果表明,掺杂TiF3可显著改善Li-Mg-B-H体系的可逆吸/放氢性能。例如,与纯2LiH+MgB2相比,掺杂1%(摩尔分数)TiF3样品的第一步(MgH2/Mg)和第二步(2LiBH4+Mg/2LiH+MgB2)放氢反应温度分别降低56℃和106℃。此外,TiF3掺杂样品在吸/放氢循环中具有良好的动力学和氢容量稳定性。物相、化学态分析及一系列设计实验表明,掺杂TiF3所带来的显著性能改善应被归结为Ti阳离子和F阴离子的共同作用。 展开更多
关键词 储氢材料 Li-Mg-B-H体系 tif3 放氢性能 机械球磨
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Fe_2O_3与TiF_3添加剂对LiBH_4-MgH_2复合氢化物体系的协同催化作用 被引量:4
12
作者 张慧 周奕汐 +11 位作者 孙立贤 曹忠 徐芬 刘淑生 张箭 宋莉芳 司晓亮 焦成丽 王爽 李志宝 刘双 李芬 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2012年第4期781-785,共5页
通过球磨方法制备出2LiBH4-MgH2,2LiBH4-MgH2-10%Fe2O3,2LiBH4-MgH2-10%TiF3,2LiBH4-MgH2-5%Fe2O3-5%TiF3和2LiBH4-MgH2-10%Fe2O3-10%TiF35个复合氢化物体系,用热重(TG)、差示扫描量热(DSC)、X射线衍射(XRD)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)... 通过球磨方法制备出2LiBH4-MgH2,2LiBH4-MgH2-10%Fe2O3,2LiBH4-MgH2-10%TiF3,2LiBH4-MgH2-5%Fe2O3-5%TiF3和2LiBH4-MgH2-10%Fe2O3-10%TiF35个复合氢化物体系,用热重(TG)、差示扫描量热(DSC)、X射线衍射(XRD)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)和压力-组成-温度仪(PCT)等对所制备体系进行表征.结果表明,Fe2O3和TiF3的掺杂均能够有效地改善2LiBH4-MgH2复合体系的放氢性能,尤其是两者共掺杂的2LiBH4-MgH2-10%Fe2O3-10%TiF3体系,初始放氢温度为110℃,总放氢量达到约9.6%.对2LiBH4-MgH2-5%Fe2O3-5%TiF3体系的PCT表征结果表明,在400℃时,10 min内放氢量达到了8.6%,放氢热力学和放氢动力学均优于单一相的掺杂,体现了两相掺杂的协同催化作用. 展开更多
关键词 LiBH4 MgH2 FE2O3 tif3 协同催化
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催化剂对LiAlH_4+MgH_2体系放氢性能的影响及催化机理 被引量:3
13
作者 丁向前 朱云峰 +2 位作者 卫灵君 宦清清 李李泉 《中国有色金属学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第5期1356-1361,共6页
采用机械球磨法在LiAlH4+MgH2体系中添加不同种类催化剂,以提高复合体系的放氢性能。运用XRD、SEM、EDS、XPS以及Sieverts法研究复合体系的结构以及放氢性能,并探讨TiF3的催化机理。结果表明:TiF3催化剂的添加显著降低了复合体系的起始... 采用机械球磨法在LiAlH4+MgH2体系中添加不同种类催化剂,以提高复合体系的放氢性能。运用XRD、SEM、EDS、XPS以及Sieverts法研究复合体系的结构以及放氢性能,并探讨TiF3的催化机理。结果表明:TiF3催化剂的添加显著降低了复合体系的起始放氢温度,提高了放氢动力学性能,该体系在84.1℃开始脱氢,放氢量(质量分数)达8.0%。热脱附过程中TiF3参与了反应,并生成含Tix+的未知化合物,有效地促进了LiAlH4和MgH2之间的协同放氢。复合体系掺杂TiF3后,其热脱附反应的活化能Ea为79.1 kJ/mol,与未添加TiF3的复合体系的活化能(91.3 kJ/mol)相比,TiF3的添加极大地降低了放氢反应动力学势垒。 展开更多
关键词 LiAlH4 MgH2 tif3 催化机理
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Hydrogen storage behaviors and microstructure of MF_3(M=Ti,Fe)-doped magnesium hydride 被引量:3
14
作者 彭书科 肖学章 +5 位作者 许瑞娟 李骆 吴凡 李寿权 王启东 陈立新 《Transactions of Nonferrous Metals Society of China》 SCIE EI CAS CSCD 2010年第10期1879-1884,共6页
MgH2+10%MF3(M=Ti,Fe)(mass fraction) composites were prepared by ball-milling in hydrogen atmosphere,and their hydrogen storage behaviors and microstructure were investigated systematically.The results show that the hy... MgH2+10%MF3(M=Ti,Fe)(mass fraction) composites were prepared by ball-milling in hydrogen atmosphere,and their hydrogen storage behaviors and microstructure were investigated systematically.The results show that the hydriding and dehydriding kinetics of MgH2 are markedly improved by doping TiF3 and FeF3 fluorides.At 573 K,the two composites can absorb 5.67%-6.07%(mass fraction) hydrogen within 5 min under an initial hydrogen pressure of 3.5 MPa,and desorb 5.34%-6.02% hydrogen within 6 min.Furthermore,the composites can absorb hydrogen rapidly in moderate temperature range of 313-473 K.In comparison,TiF3-doped sample has a better hydriding-dehydriding kinetics than FeF3-doped sample.The microstructure analysis shows that some active particles including MgF2,TiH2 and Fe could be formed in the hydriding-dehydriding processes of the MF3-doped composites.From the Kissinger's plot,the apparent activation energies for the hydrogen desorption of the composites are estimated to be 74.1 kJ/mol for TiF3-doped composite and 77.6 kJ/mol for FeF3-doped composite,indicating MgH2 is significantly activated due to the catalytic effect of the doping of MF3. 展开更多
关键词 Mg-based composites tif3 FeF3 hydrogen storage properties MICROSTRUCTURE
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