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万寿菊花冠高效瞬时转化体系的建立及TeCYC2c基因启动子活性分析
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作者 窦淋琳 朱钰 +4 位作者 刘翠翠 臧运平 陶正国 包满珠 何燕红 《植物学报》 北大核心 2025年第6期875-887,共13页
为建立万寿菊(Tagetes erecta)花冠高效瞬时转化体系并探究花器官对称性形成关键调控基因TeCYC2c的启动子活性,将CaMV35S启动子与GUS基因的融合表达载体瞬时转化万寿菊花冠,探究菌株类型、菌液浓度、侵染时间和共培养时间对GUS基因瞬时... 为建立万寿菊(Tagetes erecta)花冠高效瞬时转化体系并探究花器官对称性形成关键调控基因TeCYC2c的启动子活性,将CaMV35S启动子与GUS基因的融合表达载体瞬时转化万寿菊花冠,探究菌株类型、菌液浓度、侵染时间和共培养时间对GUS基因瞬时转化效率的影响。结果显示,GV3101菌株的侵染效率最高;菌液浓度OD_(600)=1.0时转化效率最高;侵染时间对瞬时转化效率无显著影响;共培养1天为最佳培养时间。基于建立的万寿菊花冠瞬时转化体系,对TeCYC2c基因的启动子活性进行探究。克隆了TeCYC2c基因上游1735 bp序列,并通过PlantCARE预测的元件分布位置及数量构建了4个启动子缺失表达载体,以GUS基因为报告基因,瞬时转化万寿菊花冠进行不同长度启动子活性研究。结果显示,启动子核心区域位于ATG上游-650--1 bp,推测该区域内的光响应元件正调控下游基因的表达,而pTeCYC2c(-1735)和pTeCYC2c(-1406)所特有的植物激素响应和逆境响应元件可能具有抑制启动子驱动下游基因表达的功能。结合万寿菊花冠瞬时转化体系的建立和TeCYC2c启动子活性分析,可为进一步快速解析花发育相关基因的功能奠定技术基础。 展开更多
关键词 万寿菊 tecyc2c 启动子 瞬时转化 GUS活性
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