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T6SS效应蛋白Tae4对金黄色葡萄球菌和产单核细胞李氏杆菌的抑菌作用
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作者 占乐杨 苟婧萱 +6 位作者 张曼琪 傅唯轩 兰守信 涂健 王振宇 邵颖 宋祥军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期4660-4669,共10页
旨在探究Ⅵ型分泌系统(TypeⅥsecretion systems,T6SS)的毒力效应蛋白Tae4酰胺酶对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)及产单核细胞李氏杆菌(Listeria monocytogenes,L.monocytogenes)的抑菌作用。将pET-28a-Tae4重组质粒... 旨在探究Ⅵ型分泌系统(TypeⅥsecretion systems,T6SS)的毒力效应蛋白Tae4酰胺酶对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)及产单核细胞李氏杆菌(Listeria monocytogenes,L.monocytogenes)的抑菌作用。将pET-28a-Tae4重组质粒转化至大肠杆菌表达菌株BL21(Escherichia coli BL21,E.coli BL21)进行目的蛋白诱导表达,优化IPTG的诱导时间、浓度、温度,最后纯化后的Tae4蛋白通过琼脂孔扩散试验、最小抑菌浓度测定、抗生素联用抑菌试验分别作用于S.aureus和L.monocytogenes。SDS-PAGE电泳结果显示,本试验中重组蛋白诱导表达最佳条件为:IPTG终浓度为0.5 mmol·L^(-1),16℃诱导16 h。重组蛋白大小约为21 ku,可溶性表达于培养上清中。琼脂孔扩散试验结果显示,Tae4蛋白浓度500μg·mL^(-1)时S.aureus菌株均出现13mm以上抑菌圈,效果与菌株血清型有关,L.monocytogenes菌株均出现18mm以上抑菌圈;最小抑菌浓度试验结果显示,Tae4蛋白对S.aureus的MIC约为250μg·mL^(-1),对L.monocytogenes的MIC约为125μg·mL^(-1),点板法和微量肉汤稀释法结果一致;抗生素联用抑菌试验结果显示,Tae4蛋白与青霉素(penicillin,PG)联合使用均比单独使用的抑菌效果要好,且对L.monocytogenes的抑菌效果优于S.aureus。综上,Tae4蛋白对金黄色葡萄球菌和产单核细胞李氏杆菌具有抑菌效果,与青霉素联用抑菌效果得到了增强,为后续抗生素替代提供理论依据。 展开更多
关键词 tae4 Ⅵ型分泌系统 金黄色葡萄球菌 产单核细胞李氏杆菌 抗生素替代
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葡萄根癌病病原菌中效应蛋白Tae4与其免疫蛋白Tai4的鉴定与分析 被引量：1
2
作者 王鹏飞 袁丽芳 +5 位作者 张庆田 王海利 慕茜 王钦超 韩金涛 赵红军 《中外葡萄与葡萄酒》 北大核心 2022年第1期1-7,共7页
葡萄根癌病是一种由葡萄根癌病病原菌引起的革兰氏阴性细菌病害。而革兰氏阴性细菌含有非致病相关效应蛋白Tae4,可以杀死其他竞争菌种。有些革兰氏阴性菌本身可表达免疫蛋白Tai4,使自身免受伤害。本研究鉴定了18个Agrobacterium tumefac... 葡萄根癌病是一种由葡萄根癌病病原菌引起的革兰氏阴性细菌病害。而革兰氏阴性细菌含有非致病相关效应蛋白Tae4,可以杀死其他竞争菌种。有些革兰氏阴性菌本身可表达免疫蛋白Tai4,使自身免受伤害。本研究鉴定了18个Agrobacterium tumefaciens和4个Agrobacterium vitis株系的Tae4和Tai4蛋白,结果显示,A.tumefaciens含有14个Tae4蛋白,A.vitis含有1个Tae4蛋白和1个Tai4蛋白。通过蛋白性质分析、进化树分析、蛋白结构分析和编码基因的选择压力分析表明,A.tumefaciens Tae4蛋白和A.vitis Tae4蛋白相似度不高;A.tumefaciens Tae4蛋白可分为2组;A.tumefaciens和A.vitis的Tae4基因间遭受正向选择。对葡萄根癌病病原菌株系Tae4蛋白和Tai4蛋白的鉴定与分析将为借助Tae4蛋白消灭致病菌,进而防治病害奠定基础。 展开更多
关键词 葡萄根癌病病原菌 效应蛋白 tae4蛋白 免疫蛋白 Tai4蛋白
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