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小麦m^(6)A结合蛋白编码基因TaECT3的克隆与功能分析
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作者 王嘉宽 石婷瑞 +3 位作者 马宇航 马羽彤 周芮西 李增林 《麦类作物学报》 北大核心 2025年第10期1316-1323,共8页
N^(6)-甲基腺苷(m^(6)A)作为真核生物RNA中最丰富的表观转录修饰类型,通过动态的“写入-擦除-阅读”机制调控植物生长发育及逆境响应。ECT家族蛋白作为m^(6)A阅读结合蛋白,通过识别m^(6)A修饰位点参与RNA代谢调控。为明晰小麦TaECT3作为... N^(6)-甲基腺苷(m^(6)A)作为真核生物RNA中最丰富的表观转录修饰类型,通过动态的“写入-擦除-阅读”机制调控植物生长发育及逆境响应。ECT家族蛋白作为m^(6)A阅读结合蛋白,通过识别m^(6)A修饰位点参与RNA代谢调控。为明晰小麦TaECT3作为m^(6)A结合蛋白响应逆境胁迫的机理,从小麦材料Fielder中克隆到TaECT3基因CDS全长,对其进行生物信息学分析。结果表明,TaECT3基因的编码区(CDS)长度为1854 bp,编码617个氨基酸,其编码蛋白含有一个ECT家族蛋白典型的YTH保守结构域。TaECT3蛋白分子量为66.93 kDa,等电点为6.48,是亲水性稳定蛋白。其二级结构以无规则卷曲(79.74%)和α-螺旋(13.45%)为主,三级结构模拟显示该蛋白具有m^(6)A结合口袋。经系统进化分析,小麦TaECT3与大麦HvECT3、高粱SbECT3和短柄草BdDF3A之间有较近的亲缘关系,暗示它们之间可能功能保守。EMSA试验显示TaECT3重组蛋白特异性结合m^(6)A修饰RNA;亚细胞定位其可能位于细胞膜;qRT-PCR分析表明,高温(37℃,6 h)和PEG8000模拟干旱(15%,6 h)处理后,小麦Fielder中TaECT3的表达显著上调和下调。以上结果说明小麦TaECT3作为m^(6)A结合蛋白可能参与高温与干旱胁迫响应。 展开更多
关键词 小麦 taect3 m^(6)A结合蛋白 基因克隆 亚细胞定位 EMSA
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